4,5-二取代苯基-3h-1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物及其用途的制作方法

专利名称：：4,5-二取代苯基-3h-1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物及其用途的制作方法
技术领域：
：本发明属于医药
技术领域：
，涉及一种4，5-二取代苯基-3#-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮膀类衍生物及其用途，确切地说，涉及该类化合物及其作为肿瘤细胞增殖抑制剂在制备抗肿瘤的药物方面的应用。
背景技术：
：恶性肿瘤是威胁人类健康与生命的严重疾病，在中国为第一致死病因。寻找和发现治疗与预防肿瘤的新药是当前面临的重大课题。Oltipraz是存在于十字花科蔬菜等绿色植物中的3^1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮类天然产物，其化学名称为4-甲基-5-(吡嗪-2-基)-3H，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮。Oltipmz对肝癌、胃癌、结肠癌等多种肿瘤具有良好的预防作用，现已作为一种肿瘤的化学预防药物在美国进入一期临床研究阶段。此外，Oltipraz还具有抑制肿瘤新生血管生成等活性。相关报道参见Cla卯erM.L.P&rT^cW.7Xer"1998,7《，17;AnsherS.S.，etal.尸oodC力e瓜7bu'co7.，1986，2《405;BruceA.R，etal.C/i几Cs仏，2002，《267。C。mbretastatinA-4(CA-4)是从南非柳树中分离得到的顺式二苯乙烯类天然产物，其化学名称为(》-2-甲氧基-5-(3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)苯酚。CA-4为微管蛋白聚合抑制剂，呈现很强的抑制肿瘤细胞增殖活性，其前药CA-4磷酸盐(CA-4P)已在美国进入三期临床研究阶段。以CA-4为先导化合物设计、合成新的抗肿瘤活性化合物的研究已有大量报道，但多数CA-^类似物存在或活性不够高、或毒性较大、或合成比较复杂等缺点。相关报道参见PettitG.R.,etal.^17^We/7〃s,1989，W，209;NamN.H.CwiT.抓WOe瓜，2003,M，1697;Tr。nG.C.,etal./.#ed，2006,化3033。基于Oltipraz和Combre、astatinA-4的结构特征，发明人设计并合成了4，5-二取代苯基-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物/用于抗肿瘤活性研究。
发明内容本发明的目的在于设计、合成具有良好抗肿瘤活性的Oltipraz与CombretastatinA-4的结构类似物，即4,5-二取代苯基-2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物。所制备的化合物在体外抗肿瘤活性测试中显现'良好的结果。—'本发明的目标产物可用以下结构式来表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>上面结构式(1)中，X为S、0、N-OR,其中，R为氢、C,C6烷基；R「Rs各自独立地为氢、甲氧基、羟基、卤素原子、硝基、氨基或硅氧基，或者相邻的两个取代基可以为-0CH20-从而构成五元环，或者相邻的两个取代基可以为-CH-CH-CH-CH-从而构成六元环；其前提条件是R「Il8不同时为氢；假如'X为S，Id、Rs同为甲氧基，贝URi、R3Rs不代表氢；假如X为S,R2、R4同为申氧基，则K、R3、R5Rs不代表氢；假如X为S,R2为甲氧基，R5、R6同为氟原子，贝'J&、R3、R4、R7、R8不代表氢；假如X为S，112为羟基，则R]、R3R8不代表氢；假如X为S,R6为羟基，则RR5、R7、Rs不代表氢；-假如X为O，R2、R6同为羟基，则Ri、R3~R5、R7、118不代表氢；假如X为O,R2、R6同为氯原子，则lR3~R5、R7、Rs不代表氢。本发明的化合物还包括上述结构式所示衍生物所形成的在药学上可接受的无毒盐及其水合物，这些药学上可接受的无毒盐包括该衍生物与酸所形成的盐。所述的酸可以为盐酸、硫酸、氢溴酸、磷酸的无机酸或选自乙酸、柠檬酸、草酸、酒石酸、苯甲酸、苹果酸的有机酸。所述水合物的结晶水数目为0~16中的任意实数。本发明的化合物其代表性的例子可以为如下化合物化合物1-1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>化合物l-2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>化合物l-7化合物l-8化合物1-9化合物2-1化合物2-2化合物2-3化合物2-4化合物2-5化合物2-6化合物2-7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>化合物3-6<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>化合物3-7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>化合物3-8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>化合物3-9本发明还提供了该类化合物的制备方法，本发明的4，5-二取代苯基-3f1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮类衍生物(1)可以按照以下两条反应路线合成得到路线A:'<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>将3-氧代-2，3-二取代苯基丙酸乙酯原料a(0.1-0.2亳摩尔，制备方法参考文献BranaM.F.,etal.A/oo/^.#edffle瓜，2006，7《9)溶解于甲苯中，加入五硫化二磷(4-6当量)，在110'C回流反应4小时左右。反应完毕后，冷却至室温，减压蒸除甲苯后加入水，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，分出有机层并用无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂后，得到粗品。经柱层析分离得到产物l，收率40-70%。本方法的相关文献参见TesteJ.，etal.C力/瓜尸r.,1955，"，437。路线B:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>将1，2-取代苯基-l-丙烯原料b(0.2-0.3亳摩尔，制备方法参考文献HadfieldJ.A.，etal.ikr./.#edC力e瓜，2005，4《529)和硫粉(4-6当量)加入反应瓶中，在160-200。C下反应40分钟左右。反应完毕后，冷却至室温，加入水，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，分出有机层并用无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂后，得到粗品。经柱层析分离得到产物l,收率20-40。/。。本方法的相关文献参见FieldsE.K./.j瓜紋1955，77,4255。其中，RrRs为氨基的4，5-二取代苯基-3^1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮类衍生物可由相应的R「Rs为硝基的化合物经还原反应制备，还原剂为连二亚硫酸钠等。其中，RrRs为羟基的4，5-二取代苯基-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮类衍生物可由相应的RrRs为三异丙基硅氧基等的化合物经去保护基反应制备，去保护基的试剂为四丁基氟化铵等。本发明的4，5-二取代苯基-3Fl，2-二硫杂环戊烯-3-酮类衍生物(2)可以按照以下反应路线合成得到<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>将4，5-二取代苯基-3^"1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮类衍生物1(0.06-0.08毫摩尔)溶于四氢吹喃(10mL)中，加入高锰酸钾(1-2当量)，室温搅拌反应24小时左右。反应完毕后，过滤，滤液减压蒸除溶剂，得到粗品。经柱层析分离得到产物2，收率70-90%。此外，也可使用乙酸汞作为氧化剂完成此反应。本方法的相关文献参见LozachN.，etal.A〃//.C力/瓜尸二，1949，72，840。本发明的4,5-二取代苯基-3^1,2-二硫杂环戊烯-3-酮膀类衍生物可以按照以下反应路线合成得到<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>将4，5-二取代苯基-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮类衍生物1(0.08-0.12毫摩尔)溶于乙醇(8mL)中，加入羟胺盐酸盐或^甲基羟胺盐U-3当量)和乙酸钠(2-6当量)，搅拌回流反应12小时左右。反应完毕后，冷却至室温，蒸除溶剂后，加水溶解，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，分出有机层并用无水硫酸钠(镁)干燥。减压蒸除溶剂后，得到粗品。经柱层析分离得到产物3，收率65-85%。本方法的相关文献参见BauerF.，etal.C力e瓜，1951，Z5"，623。本发明所提供的4，5-二取代苯基-3^1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物制备方法简单可行，收率较高。本发明进一步提供了上述化合物在制备治疗肿瘤疾病的药物中的应用。4,5-二取代苯基-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮膀类衍生物具有较好的治疗肿瘤疾病的作用，在制备抗肿瘤药物中具有较好的发展前景。具体实施例方式通过下述实例将有助于理解本发明，但本发明的内容并不限于所举实例。本发明所用试剂均为巿售，核磁共振谱由AVANCE-400、BrukerARX-300傅立叶变换核磁共振ii会仪测定，质谱由BrukeeEsqure2000、ShimadzuGCMS-QP5050A型质谱仪测定，熔点仪采用北京泰充X-4型显微熔点仪，溫度未校正。实施例1:5-(4-甲氧基苯基)-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-3f1，2-二硫杂环戊烯-3_硫酮(化合物1-1)的制备将五硫化二磷(0.68g,3.lmmol)溶解于甲苯(lOmL)中，加入原料3-(4-甲氧基苯基)-3-氧代-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙酸乙酯(0.30g，0.77mmo1)，在ll(TC回流反应4小时。反应完毕后，冷却至室温，减压蒸除甲苯后加入水，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，分出有机层并用无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂后，得到粗品。经柱层析分离得到产物1-1，收率为56.2%。实施例2:5-(4-溴代苯基)-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-3^1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮(化合物1-2)的制备除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物1-2,收率为66.8%;化合物l-2的结构式、熔点以及'H-NMR和MS数据列于下表1中。实施例3:5-(4-硝基苯基)_4-(3,4，5-三甲氧基苯基)-3fl，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮(化合物1-3)的制备除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物1-3,收率为59.3%;化合物l-3的结构式、熔点以及'H-NMR和MS数据列于下表1中。实施例4:5-(4-甲氧基-3-硝基苯基)-4-a4，5-三甲氧基苯基)-3^■l，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮(化合物1-4)的制备除了使用相应的原料外，以实施例l相同的方法制备化合物1-4,收率为47.7%;化合物l-4的结构式、熔点以及^-NMR和MS数据列于下表1中。实施例5:5-(3-氨基-4-甲氧基苯基)-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-3fl，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮(化合物1-5)的制备将原料5-(4-甲氧基-3-硝基苯基)-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-3fl,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮(0.02g,0.044mmo1)溶于丙酮/水(v/"3:l)混合液(4mL)中,于5(TC搅拌加热，加入Na2S204(0.06g，0.35mmo1)，反应液在5(TC搅拌加热发应2小时。减压蒸除丙酮，水层用乙酸乙酯萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，得到粗品。经柱层析分离得到产物1-5,收率为89.7%。实施例6:5-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-3fl，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮(化合物1-6)的制备将五硫化二磷U.49g，6.7mmol)溶解于甲苯(30inL)中，加入原料3-[4-甲氧基-3-(三异丙基硅氧基)苯基]-3-氧代-2-(3,4，5-三甲氧基苯基)丙酸乙酯(0.94g，1.68mmo1)，在110。C回流反应4小时。反应完毕后，冷却至室温，减压蒸除甲苯后加入水，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，分出有机层并用无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂后，加19入四氢呋喃(20mL)和四丁基氟化铵(0.46g，1.85mmol),室温搅拌反应1小时，减压蒸除四氢呋喃后加入水，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，分出有机层并用无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂后，得到粗品。经柱层析分离得到产物1-6，收率为46.7%。实施例7:4-(4-甲氧基苯基)-5-(3，4,5-三甲氧基苯基)-3fl,2-二硫杂环戊烯-3-琉酮(化合物1-7)的制备将原.料05)-1,2，3-三甲氧基-5-(1-(4-甲氧基苯基)丙-1-烯-2-基)苯(0.085g,0.26mmol)和硫粉(0.04g,1,27mmol)加入反应瓶中，在180'C下反应40分钟。反应完毕后，冷却至室温，加入水，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，分出有机层并用无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂后，得到粗品。经柱层析分离得到产物1-7,收率36.7%。实施例8:4-(7-甲氧基苯并[d][1,3]二氧戊环-4-基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-3^1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮(化合物1-8)的制备除了使用相应的原料外，以实施例7相同的方法制备化合物1-8,收率为28.()%;化合物1-8的结构式、熔点以及/H-應R和MS数据列于下表1中。实施例9:5-(4-甲氧基苯基)-4-(萘-l-基)-3^1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮(化合物l-9)的制备除了使用相应的原料外，以实施例1相同的方法制备化合物1-9,收率为48.6%;化合物l-9的结构式、熔点以及屮-N證和MS数据列于下表1中。实施例10:5-(4-甲氧基苯基)-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-3H，2-二硫杂环戊烯-3-酮(化合物2-1)的制备.将5-(4-甲氧基苯基)——(3,4，5-三甲氧基苯基)H,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮(化合物1-1)(0.03g,0.07ramo1)溶于四氢吹喃UOmL)中，加入高锰酸钾(0.14g，0.09mmo1)，室温搅拌反应24小时左右。反应完毕后，-.过滤，滤液减压蒸除溶剂，得到粗品。经柱层析分离得到产物2-1，收率为84.4%。实施例11:5-(4-甲氧基-3-硝基苯基)-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-3fl,2-二硫杂环:戊烯-3-酮(化合物2-2)的制备除了使用相应的原料外，以实施例IO相同的方法制备化合物2-2,收率为86.9%;化合物2-2的结构式、熔点以及^-應R和MS数据列于下表1中。实施例U:5-(3-氨基-4-甲氧基苯基)-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-l，2-二硫杂环戏烯-3-酮(化合物2-3)的制备除了使用相应的原料外，以实施例5相同的方法制备化合物2-3,收率为87.3%;化合物2-3的结构式、熔点以及^-丽R和MS数据列于下表1中。实施例13:5-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-3Fl,2-二硫杂环'戊烯-3-酮(化合物2-4)的制备除了使用相应的原料外，以实施例IO相同的方法制备化合物2-4,收率为78.化合物2-4的结构式、熔点以及屮-丽R和MS数据列于下表1中。实施例14:4-(4-甲氧基苯基)-5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，2-二硫杂环戊烯-3-酮(化合物2-5)的制备除了使用相应的原料外，以实施例IO相同的方法制备化合物2-5，收率为80.2%;化合物2-5的结构式、熔点以及'H-NMR和MS数据列于下表1中。实施例15:4-(7-甲氧基苯并[d][1,3]二氧戊环-4-基)-5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-3f1,2-二硫杂环戊烯-3-酮(化合物2-6)的制备除了使用相应的原料外，、以实施例IO相同的方法制备化合物2-6，收率为Sl.5%;化合物2-6的结构式、熔点以及^-NMR和MS数据列于下表1中。实施例5-(4-甲氧基苯基)-4-(萘-1_基)-_3^1，2-二硫杂环戊烯-3-酮(化合物2_7)的制备li了使用相应的原料外，以实施例IO相同的方法制备化合物2-7,收率为77.6%;化合物2-7的结构式、熔点以及4-丽R和MS数据列于下表1中。实施例17:5-(4-甲氧基苯基)-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,2-二硫杂环戊烯-3-酮肟(化合物3-1)的制备将5-(4-甲氧基苯基)-4-(3,4，5-三甲氧基苯基)-3f1,2-二硫杂环戊烯-3-硫,(化合物1-1)(0.04g,0.l醒ol)溶于乙醇(8raL)中，加入羟胺盐酸盐:(Q.Olg，0.145隱o1)和乙酸钠(0.02g,0.145mmo1)，搅拌回流反应12小时。反应完毕后，冷却至室温，蒸除溶剂后，加水溶解，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，分出有机层并用无水硫酸镁干燥。减压蒸除溶剂后，得到耝品。经柱层析分离得到产物3-1,收率78.3%。实施例5-(3-氨基-4-甲氧基苯基)-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-3^1,2-二硫杂环'戊烯-3-酮肟(化合物3-2)的制备夂除了使用相应的原料外，以实施例17相同的方法制备化合物3-2，收率为73.1.%;化合物3-2的结构式、熔点以及^-NMR和MS数据列于下表1中。实施例19:5-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-3fl，2:-二硫杂环戊烯-3-酮膀(化合物3-3)的制备除了使用相应的原料外，以实施例17相同的方法制备化合物3-3,收率为72.^%;化合物3-3的结构式、熔点以及屮-NMR和MS数据列于下表1中。实施例20:4-(4-甲氧基苯基)-5-(3，4,5-三甲氧基苯基)-1,2-二硫杂环戊烯-3-酮肟(化合物3-4)的制备除了使用相应的原料外，以实施例17相同的方法制备化合物3-4,收率为76.5%;化合物3-4的结构式、熔点以及'H-腿R和MS数据列于下表1中。实施例21:4-(7-曱氧基苯并[d][1，3]二氧戊环-4-基)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-3F1，2-二硫杂环戊烯-3-酮膀(化合物3-5)的制备除了使用相应的原料外，以实施例17相同的方法制备化合物3-5，收率为81.2%;化合物3-5的结构式、熔点以及^-丽R和MS数据列于下表1中。实施例22:5-(4-甲氧基苯基)-4-(萘-1-基)-3,1，2-二硫杂环戊烯-3-酮(化合物'3-6)的制备除了使用相应的原料外，以实施例17相同的方法制备化合物3-6,收率为71.3%;化合物3-6的结构式、熔点以及'H-NMR和MS数据列于下表1中。实施例23:5-(3-氨基-4-甲氧基苯基)-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-3#-l,2-二硫杂环戊烯-3-酮-^甲基膀(化合物3-7)的制备除了使用相应的原料外，以实施例17相同的方法制备化合物3-6,收率为70.化合物3-6的结构式、熔点以及^-NMR和MS数据列于下表1中。实施例24:5-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-l,2-二硫杂环戊烯-3-酮-屮甲基肟(化合物3-8)的制备—除了使用相应的原料外，以实施例17相同的方法制备化合物3-8,收率为66.3%;化合物3-8的结构式、熔点以及111-NMR和MS数据列于下表1中。实施例25:5-(4-甲氧基苯基)-4-(萘-l-基)-3f1，2-二硫杂环戊烯-3-酮-^甲基肟(化合物3-9)的制备除了使用相应的原料外，以实施例23相同的方法制备化合物3-9,收率为67.5%;化合物3-9的结构式、熔点以及4-丽R和MS数据列于下表1中。表1'H-NMR(溶剂为CDC13)MS3.70(6H,s),3.80(3H,s),3.83406(3H，s),6.38(2H,s)，6.82(2H,d,J=8.4),7.20(2H，d，J=8.4)3.69(6H，s),3.86(3H,s),6.35456(2H,s),7.14(2H,d，J=8.7)，7.47(2H,d,J=8.7)22<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>3.71(6H,s),3.89(3H，s),3.96(3H,s),6.36(2H,s),6.93(1H,d,J=8.9)，7.33(1H,dd,J=8.9,1.7)，7.96(IH,d,J=1.7)3.69(6H,s),3.83(3H，s),3.85(3H,s),6.41(2H,s),6.60(IH,brs),6.68(2H，brs)3.69C6H,s),3.83(3H,s),3.90(3H,s),5.62(IH，brs),6.39(2H,s),6.77(2H,brs),6.92(IH,brs)3.66(6H,s),3.78(3H,s),3.85(3H,s)，6.48(2H,s),6.86(2H，d,J=8.5),7.11(2H，d,J=8.5)3.69(6H,s),3.85(3H，s),3.88(3H,s),5.72(2H，s),6.54(2H,s),6.56(IH,d，J=5.9),6.71(IH,d,J=5.9)3.69(6H,s),6.65(2H,d,J=8.9),7.12(2H,d,J=8.9),7.19(IH,d,J=6.5),7.40-7.47(3H,m),7.65(IH,d,J=8.0),7.82-7.86(2H,m)3.70(6H，s),3.78(3H,s),3.84(3H,s),6.42C2H,s)，6.77(2H,brs),7'12(2H,br)435405406390434350405208-2113'72(6H,s)'3'80(3H,s)'3'83(3H,s),6.46(2H,s)，6.59-6.66(3H,m)实施例2纟本发明的化合物的药理活性测试1.体外活性测试方法和结果如下其中，临床常用的抗肿瘤药物顺钼MeOMeO3-4MeO3-5MeO3-63-7MeO.WleO'128-132丄/1,s),，s),丄》/421(3H,s),6.43(2H,s)，6.69(2H，brs),6.82(〗H,brs)195-1983.63(6H,s)'3'78(3H,s)'3'82(3H，s),6.40(2H,s)，6.86(2H，d，J=7.9),7.15(2H,d，J=7.9)405178-1813.67(6H，s)，3'83(3H,s)'3.88(3H,s)，5.75(2H,brs),6.49(2H,s),6.54(1H,d,J=9.0),6.71(1H,d,J=9.0)449209-2123.68(6H,s),6.60(2H,d，J=8.9),7.05(2H，d,J=9.0),7.10()H,d,J=7.0),7.44-7.49(3H,m),7.52(1H,d,3=8.0)，7.82-7.88(2H,m)365165-1683.68(6H,s),3.82(3H，s),3.84434(3H,s),3.99(3H，s)，6.50(2H，s),6.56-6.62(3H,m)168-1713.68(6H,s),3.86(3H,s),3.89(3H,s),3.99(3H,s),6.48(2H，s)，6.66(1H，dd,j=8.4,1.8),6.71(1H,d,J=8.4),6.81(1H,d,J=1.8)435121—1253.66(3H,s),3.80(3H，s),6.57(2H,d，J=8.7),7.00(2H,d，J=8.7),7.26-7.32(1H,m),7.40-7.46(3H，m),7.80-7.84(3H,m)3793-83-9HOMeOMe。MeOMeH、OMeOMe9-o99-o9为阳性对照实验组。抗肿瘤活性体外筛选试验1筛选方法四氮唑盐(micoculturetetrozolium,细胞*:人T淋巴细胞白血病细胞株JurkatTce作用时间72h各化合物对肿瘤生长的半数抑制浓度UC5。，nM)抗肿瘤活性体外筛选试验2筛选方法四氮唑盐(micoculturetetrozolium，细胞棘人口腔癌细胞株KBcellline作用时间72h各化合物对肿瘤生长的半数抑制浓度(IC5。，yM)抗肿瘤活性体外筛选试验3筛选方法四氮哇盐(micoculturetetrozolium，细胞株人胃腺癌细胞株SGC-7901cellline作用时间72h各化合物对肿瘤生长的半数抑制浓度UC5。，mM)__表2<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>_Cisplatin_^__^_2.体内活性测试方法和结果如下:选择休外活性较好的化会物2-3和3-3进行了动物体内抗肿瘤活性测试，所用模型为小鼠S-180肉瘤模型，阳性对照药物为临床常用的抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶。实验方法选用18-22克雌性昆明小鼠及生长良好的7-11天的S-180瘤种，将瘤组织制成细胞悬液，接种至小鼠右侧腋部皮下，约1.0-2.Ox106细胞/只，接种24小时后随机分笼，腹腔注射给药连续7天。停药后24小时处死动物，称体重、瘤重，计算各组平均瘤重，按如下公式求出肿瘤抑制率并进行t检验。肿瘤抑制率=[(空白对照组平均瘤重-治疗组平均瘤重)/(空白对照组平均瘤重)]x100%实验结果见表3。表3化合剂量给药动物数体重瘤重抑制率物mg/Kg途径开始最后开始最后x士SD0/0NS'101017.425.91.71±0.482-3'20i.p10817.219.50.63±0.2963.22-310i.p10'1017.323.61.21±0.4329.33-320i.p101017.320.30.58±0.4666.13-310i.P101017.123.01.13±0.4733.95-Fu50i.v10]017.322.60.40±0.1876.6急毒试验按200毫克/每公斤剂量小白鼠未见死亡权利要求1、4，5-二取代苯基-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物，其特征在于其结构式如下X为S、O、N-OR，其中，R为氢、C1～C6烷基；R1～R8各自独立地为氢、甲氧基、羟基、卤素原子、硝基、氨基，或者相邻的两个取代基可以为-OCH2O-从而构成五元环，或者相邻的两个取代基可以为-CH＝CH-CH＝CH-从而构成六元环；其前提条件是R1～R8不同时为氢；假如X为S，R2、R6同为甲氧基，则R1、R3～R5、R7、R8不代表氢；假如X为S，R2、R4同为甲氧基，则R1、R3、R5～R8不代表氢；假如X为S，R2为甲氧基，R5、R6同为氟原子，则R1、R3、R4、R7、R8不代表氢；假如X为S，R2为羟基，则R1、R3～R8不代表氢；假如X为S，R6为羟基，则R1～R5、R7、R8不代表氢；假如X为O，R2、R6同为羟基，则R1、R3～R5、R7、R8不代表氢；假如X为O，R2、R6同为氯原子，则R1、R3～R5、R7、R8不代表氢。2、根据权利要求1所述的4，5-二取代苯基-3f1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物，其特征在于该化合物还包括4，5-二取代苯基-(3f1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物所形成的在药学上可接受的无毒盐及其水合物。3、根据权利要求2所述的4，5-二取代苯基-3Fl，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物，其特征在于所形成的在药学上可接受的无毒盐为该衍生物与酸所形成的盐；所述水合物的结晶水数目为0~16中的任意实数。4.根^权利要求3所述的4,5-二取代苯基-3f1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物，其特征在于其中所述的酸选自盐酸、硫酸、氢溴酸、磷酸的无机酸或选自乙酸、柠檬酸、草酸、酒石酸、苯甲酸、苹果酸的有机酸5、根据权^要求1所述的4，5-二取代苯基-3^1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物，其特征在于其中该化合物为以下化合物化合物l-化合物1-2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>化合物l-3<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>化合物l-4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>化合物l-5<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>化合物l-6<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>化合物1-7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>化合物l-8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>化合物l-9<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>化合物2-1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>化合物2-2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>化合物3-7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>化合物3-8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>6.化合物3-9<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>6、4,5-二取代苯基-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物的制备方法以及在制备抗肿瘤药物中的应用。7、一种如权利要求1所述的4，5-二取代苯基-3^1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、一酮、一酮胫类衍生物的制备方法，其特征在于本发明的4，5-二取代苯基-3f1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮类衍生物(1)可以按照以下两条反应路线合成得到路线A:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>将3-氧代-2，3-二取代苯基丙酸乙酯原料a溶解于甲苯中，加入4-6当量五硫化二磷，在110'C回流反应4小时左右，反应完毕后，冷却至室温，减压蒸除甲苯后加入水，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤,分出有机层并用无水硫酸钠或无水硫酸镁干燥,减压蒸除溶剂后，经柱层析分离得到产物1，收率40-70%;路线B:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>将1，2-取代苯基-1-丙烯原料b和4-6当量硫粉加入反应瓶中，在160-20(TC下反应40分钟左右，反应完毕后，冷却至室温，加入水，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，分出有机层并用无水硫酸钠或无水硫酸镁干燥。减压蒸除溶剂后，得到粗品，经柱层析分离得到产物1,收率20-40%，其中，I-Rs为氨基的4,5-二取代苯基-3f1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮类衍生物可由相应的Rr!U为硝基的化合物经还原反应制备，还原剂为连二亚硫酸钠；其中，RrRs为羟基的4，5-二取代苯基-3^1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮类衍生物可由相应的RrRs为三异丙基硅氧基等的化合物经去保护基反应制备，去保护基的试剂为四丁基氟化铵；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>本发明的4，5-二取代苯基-3f1,2-二硫杂环戊烯-3-酮类衍生物(2)可以按照以下反应路线合成得到<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>将4，5-二取代苯基-3^1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮类衍生物1(0.06-0.08毫摩尔)溶于四氢吹喃(lOmL)中，加入高锰酸钾(1-2当量)，室温搅拌反应24小时左右。反应完毕后，过滤，滤液减压蒸除溶剂，得到粗品。经柱层析分离得到产物2，收率70-90%,此外，也可使用乙酸汞作为氧化剂完成此反应；本发明的4，5-二取代苯基-3^1，2-二硫杂环戊烯-3-酮膀类衍生物可以按照以下反应路线合成得到<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>将0.08-0.l2亳摩尔4，5-二取代苯基-1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮类衍生物1溶于乙醇8mL中，加入1-3当量羟胺盐酸盐或^"甲基羟胺盐和2-6当量乙酸钠，搅拌回流反应12小时左右，反应完毕后，冷却至室温，蒸除溶剂后，加水溶解，用乙酸乙酯萃取，有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，分出有机层并用无水硫酸钠(镁)干燥。减压蒸除溶剂后，得到粗品，经柱层析分离得到产物3，收率65-85%。全文摘要本发明属于医药
技术领域：
，涉及一种4，5-二取代苯基-3H-1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮、-酮、-酮肟类衍生物，其结构如右，X为S、O、N-OR，其中，R为氢、C₁～C₆烷基；本发明还提供了上述结构式所示衍生物所形成的在药学上可接受的无毒盐及其水合物，这些药学上可接受的无毒盐包括该衍生物与酸所形成的盐。药理活性试验结果表明，该类衍生物具有较好的抑瘤活性。可用于肿瘤细胞增殖抑制剂在制备肿瘤的药物方面的应用。文档编号C07D409/04GK101429190SQ20081021242公开日2009年5月13日申请日期2008年8月20日优先权日2007年8月24日发明者卢国栋,岚吴,吴英良,张为革,锐赵申请人:沈阳药科大学