专利名称：抑制hcv的大环苯基氨基甲酸酯的制作方法
技术领域：
本发明涉及HCV复制的抑制剂，在现有技术化合物看来，其显示了至少一种改进性能。尤其是，本发明的抑制剂在一个或多个下列药理学相关性能方面是优越的即，效能，降低的细胞毒性，改善的药物动力学，改善的抗性特性，可接受的剂量和丸剂负荷。
本发明的简要说明 本发明涉及HCV复制的抑制剂，其可以由式(I)表示
包括其立体异构体，其中 A是-C(＝O)OR1，-C(＝O)-NH-SO2-R2，-C(＝O)C(＝O)NR3aR3b，-C(＝O)-NH-SO2-NR3aR3b，-C(＝O)NH-P(＝O)(OR4b)(R4b)或-P(＝O)(OR4b)(R4b)其中 R1是氢；芳基；Het；任选被C1-6烷基取代的C3-7环烷基；或任选被C3-7环烷基、芳基或Het取代的C1-6烷基； R2是芳基；Het；任选被C1-6烷基取代的C3-7环烷基；或任选被C3-7环烷基、芳基或Het取代的C1-6烷基； R3a和R3b各自独立地是氢；任选被C1-6烷氧基、羟基、卤素、C3-7环烷基、芳基或Het取代的C1-6烷基；芳基；C2-6烯基；Het；任选被C1-6烷基取代的C3-7环烷基；或R3a和R3b与它们相连接的氮原子一起形成基团Het1；R3a还可以是C1-6烷氧基； R4b是氢，C1-6烷基，C2-6烯基，C3-7环烷基，芳基，或任选被C3-7环烷基或芳基取代的C1-6烷基； R4b是R4b′、OR4b′或NHR4b′； R4b′是C1-6烷基，C2-6烯基，C3-7环烷基，芳基，或任选被C3-7环烷基或芳基取代的C1-6烷基； X是N、CH，当X携带双键时，它是C； E是NR5，或当X是N时，则E是NR5或CR6aR6b； R5是氢，C1-6烷基，C1-6烷氧基C1-6烷基或C3-7环烷基； R6a和R6b独立地是氢或C1-6烷基，或R6a和R6b与它们相连接的碳原子一起形成C3-7环烷基； n是3、4、5或6； 每个虚线-----独立地表示任选的双键； R7是氢，或如果X是C或CH，R7还可以是C1-6烷基； R8是下式的基团
R8a和R9a各自独立地是氢，C1-6烷基，C2-6烯基，C1-6烷氧基，羟基，卤素，多卤代C1-6烷基，氰基，氨基，单或C1-6二烷基氨基； 每个R9独立地是任选被C1-6烷氧基、羟基或卤素取代的C1-6烷基；C3-7环烷基；C2-6烯基；C1-6烷氧基；C3-7环烷基氧基；芳氧基；Het-O-；羟基；氰基；多卤代C1-6烷基；单或C1-6二烷基氨基； 每个R10独立地是氢，C1-6烷基，C2-6烯基，C1-6烷氧基，羟基，卤素，多卤代C1-6烷基，氰基，氨基，单或C1-6二烷基氨基； 每个芳基独立地是任选被一个、两个或三个选自下列的取代基取代的苯基卤素，羟基，硝基，氰基，羧基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷氧基C1-6烷基，C1-6烷基羰基，氨基，单或二C1-6烷基氨基，叠氮基，巯基，C1-6烷硫基，多卤代C1-6烷基，多卤代C1-6烷氧基，C3-7环烷基和Het1； 每个Het独立地是含有1、2、3或4个杂原子的5或6元饱和、部分不饱和或完全不饱和的杂环，杂原子各自独立地选自氮、氧和硫，所述杂环任选被一个、两个或三个取代基取代，该取代基各自独立地选自卤素，羟基，硝基，氰基，羧基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷氧基C1-6烷基，C1-6烷基羰基，氨基，单或二C1-6烷基氨基，叠氮基，巯基，多卤代C1-6烷基，多卤代C1-6烷氧基，C3-7环烷基，Het1； 每个Het1独立地是吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，4-C1-6烷基-哌嗪基，4-C1-6烷基羰基-哌嗪基和吗啉基，和其中吗啉基和哌啶基可以任选被一或两个C1-6烷基取代； 或其N-氧化物、可药用加成盐或可药用溶剂化物。
本发明涉及用作药物的式(I)化合物本身和其N-氧化物、可药用加成盐和立体化学异构形式。本发明进一步涉及包含上述化合物的药物组合物，用于给予患有HCV感染的患者。药物组合物可以包括上述化合物与其它抗HCV药剂的组合。
本发明还涉及式(I)化合物、其N-氧化物、可药用加成盐或立体化学异构形式用于制备药物的用途，该药物用于抑制HCV复制。或本发明涉及抑制温血动物中的HCV复制的方法，所述方法包括给予有效量的式(I)化合物、其N-氧化物、可药用加成盐或立体化学异构形式。
本发明的详细说明 上文和下文中使用下列定义，除非另作说明。
本文作为基团或基团的一部分使用的“C1-4烷基”定义了具有1至4个碳原子的直链或支链饱和烃基团，例如甲基，乙基，1-丙基，2-丙基，1-丁基，2-丁基，2-甲基-1-丙基；“C1-6烷基”包括C1-4烷基和具有5或6个碳原子的其高级同系物，例如，1-戊基，2-戊基，3-戊基，1-己基，2-己基，2-甲基-1-丁基，2-甲基-1-戊基，2-乙基-1-丁基，3-甲基-2-戊基，等等。在C1-6烷基之中，使人感兴趣的是C1-4烷基。
作为基团或基团的一部分，术语“C2-6烯基”定义了具有饱和碳-碳键和至少一个双键和具有2至6个碳原子的直链和支链烃基团，例如，乙烯基(ethenyl)(或乙烯基(vinyl))，1-丙烯基，2-丙烯基(或烯丙基)，1-丁烯基，2-丁烯基，3-丁烯基，2-甲基-2-丙烯基，2-戊烯基，3-戊烯基，2-己烯基，3-己烯基，4-己烯基，2-甲基-2-丁烯基，2-甲基-2-戊烯基等等。在C2-6烯基之中，使人感兴趣的是C2-4烯基。
C3-7环烷基是下列的通称环丙基，环丁基，环戊基，环己基和环庚基。
C1-6烷氧基是指C1-6烷基氧基，其中C1-6烷基如上所述并且与一个氧原子键合，即-O-C1-6烷基。在C1-6烷氧基之中，使人感兴趣的是甲氧基、乙氧基和丙氧基。
术语卤素是氟、氯、溴和碘的通称，尤其是氟或氯。
作为基团或基团的一部分，例如在多卤代C1-6烷氧基中，将术语“多卤代C1-6烷基”定义为单或多卤代取代的C1-6烷基，尤其是被高达一个、两个、三个、四个、五个、六个或更多个卤素原子取代的C1-6烷基，例如被一个或多个氟原子取代的甲基或乙基，例如二氟甲基，三氟甲基，三氟乙基。优选三氟甲基。还包括的是全氟代C1-6烷基，其是其中所有氢原子被氟原子取代的C1-6烷基，例如五氟乙基。在多卤代C1-6烷基的定义内，在一个以上卤素原子与烷基相连接的情况下，卤素原子可以相同或不同。
本文使用的术语(＝O)或氧代，当与碳原子连接时，形成羰基部分，当与硫原子连接时，形成亚砜部分，当两个所述术语与硫原子相连接时，形成磺酰基部分。只要环或环系被一个氧代取代，氧代连接的碳原子是饱和碳。
如在本说明书和权利要求中明确说明的，基团Het是杂环。Het的例子包括例如吡咯烷基，哌啶基，吗啉基，硫吗啉基，哌嗪基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，噁唑基，异噁唑基，噻嗪基(thiazinolyl)，异噻嗪基(isothiazinolyl)，噻唑基，异噻唑基，噁二唑基，噻二唑基，三唑基(包括1，2，3-三唑基，1，2，4-三唑基)，四唑基，呋喃基，噻吩基，吡啶基，嘧啶基，哒嗪基，三嗪基，等等。在Het基团之中，使人感兴趣的是非饱和的那些Het基团，尤其是具有芳香性的那些Het基团。进一步感兴趣的是具有一或两个氮的那些Het基团。
在该段落及下面段落中提到的每一Het基团可以任选被式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组定义中提到的该数目和种类的取代基所取代。在该段落及下面段落中提到的一些Het基团可以被一个、两个或三个羟基取代基取代。这种羟基取代的环可以以其携带酮基团的互变异构形式存在。例如，3-羟基哒嗪部分可以以其互变异构形式2H-哒嗪-3-酮的形式存在。如果Het是哌嗪基，优选其在它的4-位被通过碳原子连接4-氮的取代基取代，例如4-C1-6烷基，4-多卤代C1-6烷基，C1-6烷氧基C1-6烷基，C1-6烷基羰基，C3-7环烷基。
感兴趣的Het基团包括，例如吡咯烷基，哌啶基，吗啉基，硫吗啉基，哌嗪基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，噁唑基，异噁唑基，噻唑基，异噻唑基，噁二唑基，噻二唑基，三唑基(包括1，2，3-三唑基，1，2，4-三唑基)，四唑基，呋喃基，噻吩基，吡啶基，嘧啶基，哒嗪基，吡唑基，三嗪基，或与苯环缩合的任何这种杂环，例如吲哚基，吲唑基(尤其是1H-吲唑基)，二氢吲哚基，喹啉基，四氢喹啉基(尤其是1，2，3，4-四氢喹啉基)，异喹啉基，四氢异喹啉基(尤其是1，2，3，4-四氢异喹啉基)，喹唑啉基，酞嗪基，苯并咪唑基，苯并噁唑基，苯并异噁唑基，苯并噻唑基，苯并噁二唑基，苯并噻二唑基，苯并呋喃基，苯并噻吩基。
优选，Het基团吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、硫吗啉基、哌嗪基、4-取代的哌嗪基通过它们的氮原子连接(即1-吡咯烷基，1-哌啶基，4-硫吗啉基，4-吗啉基，1-哌嗪基，4-取代的1-哌嗪基)。
应注意，在该定义中使用的任何分子部分上的基团位置可以在这种部分上的任何地方，只要它是化学上稳定的即可。
在变量的定义中使用的基团包括所有可能的异构体，除非另有陈述。例如吡啶基包括2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基；戊基包括1-戊基、2-戊基和3-戊基。
在任何部分中，当任何变量出现一次以上时，每个定义是独立的。
在下文中不论何时使用，术语“式(I)的化合物”或“本化合物”或类似的术语，意味着包括式(I)的化合物、其N-氧化物、可药用加成盐和立体化学异构形式。一个实施方案包括式(I)化合物或本文明确说明的式(I)化合物的任何子组、和其可药用加成盐和可能的立体异构形式。
式(I)的化合物具有几个手性中心，并且以立体化学异构形式存在。本文使用的术语“立体化学异构形式”定义了由相同原子(由相同顺序的键来键合)组成的、但具有不同三维结构(其不可互换，式(I)的化合物可以拥有该结构)的所有可能的化合物。
对于(R)或(S)用于标明取代基内的手性原子的绝对构型的情况，该符号是把整个化合物纳入考虑中做出的，而不是仅考虑孤立的取代基。
除非另作说明或表明，化合物的化学符号包括所述化合物可以拥有的所有可能的立体化学异构形式的混合物。所述混合物可以包含所述化合物的基础分子结构的所有非对映体和/或对映体。本发明化合物的所有立体化学异构形式(纯式或相互混合形式)意在包括在本发明范围内。
本文提及的化合物和中间体的纯立体异构形式定义为基本上不含所述化合物或中间体的相同基础分子结构的其它对映体或非对映体形式的异构体。尤其是，术语“立体异构纯度”涉及具有至少80％的立体异构过量(即最小90％的一种异构体和最大10％的其它可能异构体)直至100％的立体异构过量(即100％的一种异构体，没有其它异构体)的化合物或中间体，更尤其是，具有90％至100％立体异构过量的化合物或中间体，更加尤其是，具有94％至100％立体异构过量，最尤其是，具有97％至100％的立体异构过量。应该以类似方法理解术语“对映体纯”和“非对映体纯”，然而应分别考虑所述混合物的对映体过量和非对映体过量。
本发明化合物和中间体的纯立体异构形式可以通过使用本领域已知的方法获得。例如，通过选择性结晶与光学活性酸或碱成的它们的非对映体的盐，可以相互分离对映体。其实例是酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二甲苯酰酒石酸和樟脑磺酸。或者，对映体可以利用色谱技术(使用手性固定相)分离。所述纯立体化学异构形式还可以源自于合适起始原料的纯立体化学异构形式，条件是，反应存在立体化学专一性。优选，如果需要特定立体异构体，所述化合物可以通过立体特异性制备方法来合成。这些方法优选使用对映体纯的起始原料。
式(I)化合物的非对映体外消旋物可以利用常规方法分别获得。可以优选使用的合适的物理分离方法是例如选择结晶和色谱，例如柱色谱。
对于一些式(I)化合物、其N-氧化物、可药用加成盐和溶剂化物和在其制备中使用的中间体，不用试验性地测定绝对立体化学构型。使用本领域已知的方法，例如X射线衍射，本领域技术人员能够测定这种化合物的绝对构型。
本发明还包括本化合物上所出现原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序数但具有不同质量数的那些原子。作为常规实例(但不限于)，氢的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括C-13和C-14。
可药用加成盐包括式(I)化合物的治疗活性的无毒酸和碱加成盐形式。通过用这种合适的酸处理碱，可以方便地获得可药用酸加成盐。合适的酸包括例如无机酸，例如氢卤酸例如盐酸或氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸等等酸；或有机酸例如乙酸，丙酸，羟基乙酸，乳酸，焦葡萄酸，草酸(即乙二酸)，丙二酸，琥珀酸(即丁二酸)，马来酸，富马酸，苹果酸(即羟基丁二酸)，酒石酸，柠檬酸，甲磺酸，乙磺酸，苯磺酸，对甲苯磺酸，环己烷氨基磺酸，水杨酸，对氨基水杨酸，双羟萘酸等等酸。反之，通过用合适的碱处理，所述盐形式可以转化为游离碱形式。
通过用合适的有机和无机碱处理，包含酸性质子的式(I)化合物还可以转变为它们的无毒金属或胺加成盐形式。合适的碱盐形式包括例如铵盐，碱金属和碱土金属盐，例如锂、钠、钾、镁、钙盐等等，与有机碱成的盐，例如苯乍生、N-甲基-D-葡糖胺、哈胺(hydrabamine)盐，和与氨基酸例如精氨酸、赖氨酸等等成的盐。
术语加成盐还包括式(I)化合物以及其盐能够形成的溶剂化物。这种溶剂化物是例如水合物、醇化物，例如乙醇化物、丙醇化物，等等。
本化合物的N-氧化物形式包括其中一个或几个氮原子被氧化为所谓的N-氧化物的式(I)化合物。
式(I)的一些化合物还可以存在互变异构形式。在上述式中虽然没有明确地表明这种形式，但它们包括在本发明范围内。
如上所述，式(I)的化合物具有几个不对称中心。为了更有效地指出这些不对称中心中的每一个，使用下面结构式中表明的编号系统。
不对称中心存在于大环的位置1、4和6，以及5-元环中的碳原子3′，当R7取代基是C1-6烷基时，存在于碳原子2′，当X是CH时，存在于碳原子1′。这些不对称中心中的每一个可以存在它们的R或S构型。
当X是N时，优选位置1的立体化学相当于L-氨基酸构型的立体化学，即L-脯氨酸的立体化学，如下所示。
当X是CH时，在环戊烷环的位置1′和5′取代的2个羰基优选是反式构型。优选，位置5′的羰基取代基的构型相当于L-脯氨酸构型。优选，在位置1′和5′取代的羰基如下式结构中所描绘的
式(I)的化合物包含环丙基，如在下面结构片段中所表示的
其中C7表示位置7的碳，位置4和6的碳是环丙烷环的不对称碳原子。这两个不对称中心的存在意味着化合物可以以非对映体的混合物形式存在，例如以如下所示的其中位置7的碳以相对于羰基的顺式或相对于酰胺的顺式构型存在的式(I)化合物的非对映体形式存在。
一个实施方案涉及式I的化合物，其中位置7的碳以相对于羰基的顺式构型存在。另一个实施方案涉及式(I)的化合物，其中位置4的碳的构型是R。式(I)化合物的特定子组是其中位置7的碳以相对于羰基的顺式构型存在的化合物，且其中位置4的碳的构型是R。
按照一个实施方案，环丙基(C4-C5-C6)与基团A连接，基团A是膦酸酯基团-P(＝O)(OR4b)(R4b)。按照该实施方案，位置7的碳以相对于膦酸酯或相对于酰胺的顺式构型进行配置，如下面结构片段中所提供的
一个实施方案涉及式(I)的化合物，其中位置7的碳以相对于膦酸酯的顺式构型进行配置。另一个实施方案涉及式(I)的化合物，其中位置4的碳的构型是R。式(I)化合物的特定子组是其中位置7的碳以相对于膦酸酯的顺式构型进行配置的化合物，和其中位置4的碳的构型是S。
式(I)的化合物可以包含脯氨酸基团(即X是N)或环戊基或环戊烯基基团(即X分别是CH或C)。按照本发明的一个实施方案，化合物包含下列部分结构
本发明的进一步实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中R7是甲基，E是NR5，X是C，其与携带R7的碳原子通过双键连接。
优选的是其中在1(或5′)位置的取代基和在3′位置的醚连接的嘧啶取代基是反式构型的式(I)化合物。具体感兴趣的是其中1位置具有与L-脯氨酸相当的构型、并且3′位置的醚连接的嘧啶取代基相对于1位置是反式构型的式(I)化合物。
优选，式(I)化合物具有下面式(I-a)和(I-b)的结构中所表明的立体化学
本发明的一个实施方案涉及式(I)或式(I-a)、(I-b)的化合物或式(I)化合物的任何子组，其中适合一个或多个下列条件 (a)R7是氢； (b)X是氮； (c)E是NR5； (d)双键存在于碳原子7和8之间。
本发明的进一步的实施方案涉及式(I)或式(I-a)、(I-b)的化合物或式(I)化合物的任何子组，其中适合一个或多个下列条件 (a)R7是氢； (b)X是氮； (c)E是CR6aR6b； (d)双键存在于碳原子7和8之间。
本发明的进一步的实施方案涉及式(I)或式(I-a)、(I-b)的化合物或式(I)化合物的任何子组，其中适合一个或多个下列条件 (a)R7是氢； (b)X是CH； (c)E是NR5，其中R5如上所述，具体地说，R5是氢或C1-6烷基； (d)双键存在于碳原子7和8之间。
式(I)化合物的具体子组是由下面结构式(I-c)、(I-d)和(I-e)代表的那些化合物
在式(I-c)、(I-d)和(I-e)的化合物之中，分别具有式(I-a)和(I-b)所示立体化学构型的那些是具体感兴趣的化合物 在式(I)化合物或在式(I)化合物的任何子组中，碳原子7和8之间的双键可以是顺式或反式构型。优选，碳原子7和8之间的双键是顺式构型，如式(I-c)、(I-d)和(I-e)中所描绘。
式(I)化合物的其它具体子组是由下列结构式代表的那些化合物
在式(I-f)、(I-g)和(I-h)的化合物之中，具体感兴趣的是具有式(I-a)和(I-b)化合物的立体化学构型的那些化合物。
在(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)或(I-h)中，如果合适的话，A、E、X、n、R5、R7、R8和R9如本文明确说明的式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组的定义中所明确说明的。
应该理解，以上定义的式(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)或(I-e)化合物的子组以及本文定义的任何其它子组还包括这种化合物的任何N-氧化物、加成盐和立体化学异构形式。
当n是2时，由“n”括起来的-CH2-部分相当于式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组中的乙二基。当n是3时，由“n”括起来的-CH2-部分相当于式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组中的丙二基。当n是4时，由“n”括起来的-CH2-部分相当于式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组中的丁二基。当n是5时，由“n”括起来的-CH2-部分相当于式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组中的戊二基。当n是6时，由“n”括起来的-CH2-部分相当于式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组中的己二基。式(I)化合物的具体子组是其中n是4或5的那些化合物。
本发明的实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中A是-C(＝O)OR1，尤其是，其中R1是C1-6烷基，例如甲基，乙基或叔丁基，且最优选，其中R1是氢。
本发明的进一步实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中A是-C(＝O)-NH-SO2-R2，尤其是，其中R2是C3-7环烷基，苯基或基团Het，例如噻唑基或吡啶基，两个都任选被一个或多个例如一或两个选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基和卤素的取代基取代，或尤其是被一或两个选自甲基、氟和氯的取代基取代。例如，R2可以是1-甲基环丙基。
本发明的进一步的实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中A是-C(＝O)C(＝O)NR3aR3b，尤其是，其中R3a和R3b独立地选自氢、任选被芳基取代的C1-6烷基、和C2-6烯基。在一个实施方案中，R3a和R3b中的一个是氢，另一个是3-丙烯基、环丙基甲基或环丙基。在进一步的实施方案中，R3a和R3b两个都是氢。
本发明的进一步实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中A是-C(＝O)-NH-P(＝O)(OR4a)(R4b)，尤其是，其中R4a是C1-6烷基，特别是乙基或异丙基，而且R4b是OR4b′，R4b′是C1-6烷基，例如乙基或异丙基。
本发明的进一步实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中A是-P(＝O)(OR4a)(R4b)，尤其是，其中R4a是C1-6烷基，特别是乙基或异丙基，且R4b是OR4b′，R4b′是C1-6烷基，例如乙基或异丙基。
本发明的进一步的实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中 (a)R5是氢；C1-6烷基；C1-6烷氧基C1-6烷基；或C3-7环烷基 (b)R5是氢或C1-6烷基； (c)R5是氢。
本发明的优选实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中R5是氢或C1-6烷基，更优选氢或甲基。
还进一步实施方案涉及式(I)、(I-e)的化合物或式(I)化合物的任何子组，其中R6a和R6b独立地是氢或C1-6烷基，例如甲基。优选，R6a是氢，而R6b是甲基，或更优选R6a和R6b两个都是氢。
本发明的实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中 (a)R8是下式的基团
(b)R8是下式的基团
(c)R8是下式的基团
本发明的实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中 (d)R8是下式的基团
(e)R8是下式的基团
(f)R8是下式的基团
本发明的实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中R9和R10，或R9和R10之一是 R9是C1-6烷基(例如甲基，乙基或异丙基)；C1-6烷氧基(例如甲氧基，乙氧基或异丙氧基)；芳氧基；Het-O-；氰基；或R9是C1-6烷氧基(例如甲氧基，乙氧基或异丙氧基)或芳氧基(例如苯氧基或4-甲氧基-苯氧基)； R10是氢；C1-6烷基(例如甲基，乙基或异丙基)；C1-6烷氧基(例如甲氧基，乙氧基或异丙氧基)；氰基。
在前一段落中，芳基和Het如上面或本文后面所明确说明，尤其是，芳基是任选被C1-6烷氧基(例如甲氧基、乙氧基或异丙氧基)取代的苯基，更尤其是，4-取代的苯基；Het尤其是吡啶基或嘧啶基。
本发明的优选实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中一个R9是氢、甲氧基或氰基。
本发明的优选实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中R9是氰基，C1-6烷氧羰基，单和二(C1-6烷基氨基)，卤素，氨基，C1-6烷氧基，芳氧基，C1-6烷基，Het；或其中R9是氰基，C1-6烷氧羰基(例如甲氧羰基)，单(C1-6烷基氨基)(例如甲基氨基)，卤素(例如氯)，C1-6烷氧基(例如甲氧基)，苯氧基，C1-6烷基(例如甲基)，任选被C1-6烷基取代的噻唑基(例如2-甲基-4-噻唑基)。
本发明的优选实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中R10是氢，C1-6烷氧基(例如甲氧基)或卤素。
本发明的优选实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中R9和R10之一是卤素(尤其是氟)或三氟甲基。另一个优选实施方案是其中一个R9是卤素(尤其是氟)或三氟甲基、R10是氢的那些。
本发明的优选实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中R8是下式的基团
其中R9是氰基或甲基，R10是氢或甲氧基；或其中R9是氰基或甲氧基，R10是氢。
本发明的另一个优选实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中R8是下式的基团
或下式
或下式
其中符合下列(a)或(b)中的一个或两个 (a)R9是氰基，C1-6烷氧羰基，单和二(C1-6烷基氨基)，卤素，氨基，C1-6烷氧基，芳氧基，C1-6烷基，Het；或其中R9是氰基，C1-6烷氧羰基(例如甲氧羰基)，单(C1-6烷基氨基)(例如甲基氨基)，卤素(例如氯)，C1-6烷氧基(例如甲氧基)，苯氧基，C1-6烷基(例如甲基)，任选被C1-6烷基取代的噻唑基(例如2-甲基-4-噻唑基)； (b)R10是氢，C1-6烷氧基(例如甲氧基)或卤素。
本发明的实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中 基团
是基团
其具有下列结构
本发明的实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中 基团
如前一段落所述，且R8a、R9a和R10，或R8a、R9和R10中的一个具体是 R8a、R9a独立地是氢，C1-6烷基(例如甲基，乙基或异丙基)；C1-6烷氧基(例如甲氧基，乙氧基或异丙氧基)；芳氧基；Het-O-；氰基；或R10是氢，C1-6烷氧基(例如甲氧基，乙氧基或异丙氧基)或芳氧基(例如苯氧基或4-甲氧基-苯氧基)； R8a、R9a独立地是氢；C1-6烷基(例如甲基，乙基或异丙基)；C1-6烷氧基(例如甲氧基，乙氧基或异丙氧基)；氰基；或R10是氢，C1-6烷氧基(例如甲氧基，乙氧基或异丙氧基)。
本发明的实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中R8是氢。
在前面段落中，芳基和Het如上面或本文后面所明确说明，尤其是，芳基是任选被C1-6烷氧基(例如甲氧基、乙氧基或异丙氧基)取代的苯基，更尤其是，4-取代的苯基；Het尤其是吡啶基或嘧啶基。
本发明的优选实施方案是式(I)化合物或式(I)化合物的任何子组，其中一个R9是氢、甲氧基或氰基。
式(I)的化合物由三个结构单元P1、P2、P3组成。结构单元P1进一步包含P1′尾部。在下面的化合物(I-i)中，用星号标明的羰基可以是结构单元P2或结构单元P3的一部分。由于化学原因，式(I)化合物(其中X是C)的结构单元P2引入与位置1′连接的羰基。
结构单元P1与P2、P2与P3和P1与P1′(当R1是-NH-SO2R2时)的连接包括形成酰胺键。单元P1和P3的连接包括形成双键。结构单元P1、P2和P3连接制备化合物(I-i)或(I-j)可以以任何给定顺序进行。步骤之一包括环化，由此形成大环。
下面表示的是化合物(I-i)，其是式(I)的化合物，其中碳原子C7和C8由双键连接，和化合物(I-j)，其是式(I)的化合物，其中碳原子C7和C8由单键连接。通过还原大环中的双键，式(I-j)的化合物可以由相应的式(I-i)化合物制备。
下文描述的合成方法也适用于外消旋体、立体化学纯的中间体或最终产物或任何立体异构混合物。外消旋体或立体化学混合物可以在合成方法的任何阶段分离成立体异构形式。在一个实施方案中，中间体和最终产物具有上面式(I-a)和(I-b)中明确说明的立体化学。
下面的说明中，R11表示基团
在一个实施方案中，化合物(I-i)是如下制备的首先形成酰胺键，随后在P3和P1之间形成双键连接基，同时伴有环化成大环。
在一个实施方案中，其中C7和C8之间的键是双键的化合物(I)，其是式(I-i)的化合物，如上所述限定，可以按照下面列出的反应路线制备
大环的形成可以在合适金属催化剂例如由下面报道的钌基催化剂的存在下、通过烯烃易位反应来进行Miller，S.J.，Blackwell，H.E.，Grubbs，R.H.J.Am.Chem.Soc.118，(1996)，9606-9614；Kingsbury，J.S.，Harrity，J.P.A.，Bonitatebus，P.J.，Hoveyda，A.H.，J.Am.Chem.Soc.121，(1999)，791-799；和Huang等人，J.Am.Chem.Soc.121，(1999)，2674-2678；例如Hoveyda-Grubbs催化剂。
可以使用空气稳定性钌催化剂例如二(三环己基膦)-3-苯基-1H-茚-1-亚基氯化钌(Neolyst
)或二(三环己基膦)-[(苯硫基)亚甲基]二氯化钌(IV)。可以使用的其它催化剂是Grubbs第一和第二代催化剂，即分别是亚苄基-二(三环己基膦)二氯钌和(1，3-二-(2，4，6-三甲基苯基)-2-咪唑烷亚基)二氯(苯基亚甲基)-(三环己基膦)钌。具体感兴趣的是Hoveyda-Grubbs第一和第二代催化剂，其分别是二氯(o-异丙氧基苯基亚甲基)(三环己基膦)-钌(II)和1，3-二-(2，4，6-三甲基苯基)-2-咪唑烷亚基)二氯(o-异丙氧基苯基亚甲基)钌。此外，该反应可以使用包含其它过渡金属例如Mo的其它催化剂。
易位反应可以在合适溶剂中进行，例如醚，例如THF，二噁烷；卤代烃，例如二氯甲烷，CHCl3，1，2-二氯乙烷等等，烃，例如甲苯。在优选实施方案中，易位反应在甲苯中进行。这些反应是在高温下、在氮气氛中进行的。
式(I)的化合物(其中大环中的C7和C8之间的连接是单键，即式(I-j)的化合物)可以通过式(I-i)化合物中的C7-C8双键的还原、由式(I-i)的化合物来制备。这种还原可以在贵金属催化剂例如Pt、Pd、Rh、Ru或兰尼镍的存在下、通过用氢气催化氢化来进行。感兴趣的是Rh(在矾土上)。氢化反应优选在溶剂中进行，例如醇，例如甲醇、乙醇，或醚，例如THF，或其混合物。此外，还可以将水加入到这种溶剂或溶剂混合物中。
A基团可以在合成的任何阶段与P1结构单元连接，即在环化之前或之后，或在环化和还原之前或之后，如本文上面所描述。式(I)的化合物(其中A表示-CO-NHSO2R2，所述化合物由式(I-k-1)代表)可以如下制备通过在A基团和P1两个部分之间形成酰胺键，将两个部分连接。类似地，式(I)的化合物(其中R1表示-C(＝O)OR1，即化合物(I-k-2))可以通过将R1基团与P1连接(形成酯键)来制备。在一个实施方案中，在化合物(I)的合成的最后步骤引入-C(＝O)OR1基团，如下面反应路线所列出的，其中G表示下列基团
通过酰胺形成反应，例如，下文所描述的酰胺形成的任何方法，中间体(2a)可以与磺酰胺(2b)偶合。尤其是，在溶剂例如醚例如THF或卤代烃例如二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷中，用偶合剂例如N，N′-羰二咪唑(CDI)、EEDQ、IIDQ、EDCI或苯并三唑-1-基-氧基-三-吡咯烷基磷鎓六氟磷酸盐(可商购，
)处理(2a)，并且与所需要的磺酰胺(2b)反应，优选在(2a)与偶合剂反应之后。优选，(2a)与(2b)的反应是在碱的存在下进行的，例如三烷基胺，例如三乙胺或二异丙基乙胺，或1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)。中间体(2a)还可以转变为活化形式，例如通式G-CO-Z的活化形式，其中Z表示卤素，或活性酯的其余部分，例如Z是芳氧基例如苯氧基、对硝基苯氧基、五氟苯氧基、三氯-苯氧基、五氯苯氧基等等；或Z可以是混合酸酐的其余部分。在一个实施方案中，G-CO-Z是酰基氯(G-CO-Cl)或混合酸酐(G-CO-O-CO-R或G-CO-O-CO-OR，R在后者中是例如C1-4烷基，例如甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，叔丁基，异丁基，或苄基)。使活化形式G-CO-Z与磺酰胺(2b)反应。
式(I)的化合物(其中A表示-C(＝O)-NH-P(＝O)(OR4a)(R4b)，所述化合物由式(I-k-3)代表)可以如下制备按照下文所描述的酰胺键的形成方法，在中间体(2a)和氨基磷酸酯(2d)之间形成酰胺键。尤其是，可以在合适的溶剂中用偶合剂处理(2a)，而后与氨基磷酸酯(2d)反应，优选在碱例如氢化钠的存在下，优选在(2a)与偶合剂的反应之后。中间体(2a)还可以转变为活化形式，例如通式G-CO-Z的活化形式，其中Z表示卤素，或活性酯的其余部分，例如Z是芳氧基例如苯氧基、对硝基苯氧基、五氟苯氧基、三氯-苯氧基、五氯苯氧基等等；或Z可以是混合酸酐的其余部分。在一个实施方案中，G-CO-Z是酰基氯(G-CO-Cl)或混合酸酐(G-CO-O-CO-R或G-CO-O-CO-OR，R在后者中是例如C1-4烷基，例如甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，叔丁基，异丁基，或苄基)。使活化形式G-CO-Z与所需要的(2b)反应。偶合剂、溶剂和碱可以如下文酰胺键制备的概述中所描述。
在以上反应中所描述(2a)中的羧酸的活化，可以导致内部环化反应，形成下式的氮杂内酯中间体
其中X、E、R7、R11和n按照上面的说明，其中立构中心可以具有按照上面说明的立体化学构型，例如在(I-a)或(I-b)中的立体化学构型。可以使用常规方法，从反应混合物中分离中间体(2a-1)，然后使分离的中间体(2a-1)与(2b)反应，或可以使包含(2a-1)的反应混合物进一步与(2b)或(2d)反应，不用分离(2a-1)。在一个实施方案中，其中与偶合剂的反应是在不溶于水的溶剂中进行的，可以用水或淡碱性水洗涤包含(2a-1)的反应混合物，以便除去所有的水溶性副产物。然后，可以使由此获得的被洗过的溶液与(2b)或(2d)反应，不用额外的纯化步骤。另一方面，中间体(2a-1)的分离可以提供某些优点，因为在任选的进一步纯化之后的分离产物可以与(2b)或(2d)反应，得到较少副产物，并且容易后处理反应。
通过酯形成反应，中间体(2a)可以与醇(2c)偶合。例如，(2a)和(2c)反应，同时除去水，水可以用物理方法除去，例如，共沸脱水，或使用脱水剂的化学方法除去。中间体(2a)还可以转变为活化形式G-CO-Z，例如上述的活化形式，随后与醇(2c)反应。
优选，在碱例如碱金属碳酸盐或碳酸氢盐例如碳酸氢钠或碳酸氢钾的存在下、或在叔胺例如本文酰胺形成反应中提及的胺尤其是三烷基胺例如三乙胺的存在下进行酯形成反应。可以在酯形成反应中使用的溶剂包括醚，例如THF；卤代烃，例如二氯甲烷，CH2Cl2；烃，例如甲苯；极性非质子溶剂，例如DMF，DMSO，DMA；等等溶剂。
式(I)的化合物(其中E是NH，所述化合物由(I-l)代表)还可以如下制备从相应的氮保护的中间体(3a)中除去保护基PG，如下面的反应路线所描述。保护基PG(尤其是)是下文提及的任何氮保护基，并且也可以使用下文提及的方法除去
上述反应中，起始原料(3a)可以按照制备式(I)化合物的方法来制备，但使用其中基团R5是本文所定义的N-保护基PG的中间体。
式(I)的化合物还可以如下制备在下面反应路线中列出的氨基甲酸酯形成试剂的存在下，中间体(4a)与胺(4b-1)、(4b-2)或(4b-3)反应，其中各个基团具有上面明确说明的含义
中间体(4a)与氨基甲酸酯形成试剂的反应是在与下文所描述的酰胺键形成中所使用的相同溶剂和碱中进行的。
氨基甲酸酯形成反应可以使用各种方法进行，尤其是胺与氯甲酸烷基酯的反应；醇与氨基甲酰基氯或异氰酸酯的反应；通过包括金属复合物或酰基转移剂的反应。参见例如，Greene，T.W.and Wuts，P.G.M.，″Protective Groups in Organic Synthesis″；1999；Wiley and Sons，p.309-348。一氧化碳和某些金属催化剂可用于由一些原料化合物(包括胺)合成氨基甲酸酯。金属例如钯、铱、铀和铂可以用作催化剂。还报道了使用二氧化碳合成氨基甲酸酯的方法，并且可以使用(参见例如，Yoshida，Y.，等人，Bull.Chem.Soc.Japan 1989，62，1534；and Aresta，M.，等人，Tetrahedron，1991，47，9489)。
制备氨基甲酸酯的一个方法包括使用中间体
其中Q是离去基团，例如卤素，尤其是氯和溴，或用于酰胺键形成的活性酯中使用的基团，例如上述那些，例如苯氧基或取代的苯氧基，例如对氯和对硝基苯氧基，三氯苯氧基，五氯苯氧基，N-羟基-琥珀酰亚胺基，等等。中间体(4d)可以源自于醇(4a)和光气，由此形成氯甲酸酯，或通过将后者中的氯转移给中间体(5a)(其是式(4d)的中间体，其中Q是Q1)。在这种及下面反应方法中，Q1表示任何活性酯部分，例如上述那些。使中间体(4d)与胺(4b-1)、(4b-2)或(4b-3)反应，由此获得化合物(I)。
中间体(4e)(其是其中Q是Q1的中间体(4d))还可以如下制备醇(4a)与碳酸盐或酯Q1-CO-Q1例如双酚、二-(取代酚)或二N-羟基-琥珀酰亚胺基碳酸酯进行反应
上述制备中间体(4d)的反应可以在碱和溶剂的存在下进行，在下文酰胺键的合成中提及该碱和溶剂，尤其是三乙胺作为碱、二氯甲烷作为溶剂。
或者，为了制备式(I)的化合物，首先在结构单元P2和P1之间形成酰胺键，而后P3结构单元与P1-P2中的P1部分进行偶合，随后在P2-P1-P3中的P3和P2部分之间形成氨基甲酸酯或酯键，同时伴有闭环。
又一个替代性的合成方法是在结构单元P2和P3之间形成酰胺键，而后结构单元P1与P3-P2中的P3部分进行偶合，最后在P1-P3-P2中的P1和P2之间形成酰胺键，同时伴有闭环。
结构单元P1和P3可以连接为P1-P3序列。如果需要的话，可以将连接P1和P3的双键还原。由此形成的P1-P3序列(还原或非还原)可以与结构单元P2偶合，并且随后通过形成酰胺键，将由此形成的序列P1-P3-P2环化。
在任何先前的方法中，结构单元P1和P3可以通过形成双键来连接，例如，通过下文所描述的烯烃易位反应，或Wittig类型反应。如果需要的话，可以将由此形成的双键还原，与如上所述的(I-i)至(I-j)的转化类似。还可以在后面的阶段中将双键还原，即在加入第三个结构单元之后，或在形成大环之后。结构单元P2和P1通过酰胺键形成来连接，和P3和P2通过氨基甲酸酯或酯的形成来连接。
尾部P1可以在式(I)化合物合成的任何阶段与P1结构单元连接，例如，结构单元P2和P1偶合之前或之后；P3结构单元与P1偶合之前或之后；或闭环之前或之后。
可以首先制备各别的结构单元，随后偶合在一起，或者，结构单元的前体可以偶合在一起，并且在后面阶段修饰为所需要的分子组成。
可以保护每一结构单元中的官能团，以避免副反应。
可以使用标准方法，例如在肽合成中用于偶合氨基酸的那些方法，进行酰胺键的形成。后者包括一个反应物的羧基与其它反应物的氨基的脱水偶合，形成连接的酰胺键。酰胺键形成可以如下进行起始原料在偶合剂的存在下进行反应，或将羧基官能团转化为活性形式，例如活性酯、混合酸酐或酰氯或溴。这种偶合反应和在其中所使用的试剂的一般说明可以在肽化学的普通教科书中找到，例如M.Bodanszky，“PeptideChemistry”，2nd rev.ed.，Springer-Verlag，Berlin，Germany，(1993)。
与酰胺键形成的偶合反应的例子包括叠氮化物方法，混合的由碳得到的-羧酸酐(氯甲酸异丁酯)方法，碳二亚胺(二环己基碳二亚胺，二异丙基碳二亚胺或水溶性的碳二亚胺例如N-乙基-N′-[(3-二甲基氨基)丙基]碳二亚胺)方法，活性酯方法(例如对硝基苯基，对氯苯基，三氯苯基，五氯苯基，五氟苯基，N-羟基丁二酸酰亚氨基等等酯)，Woodward试剂K-方法，1，1-羰二咪唑(CDI或N，N′-羰二咪唑)方法，磷试剂或氧化还原法。可以通过加入合适催化剂来提高一些方法，例如在碳二亚胺方法中加入1-羟基苯并三唑，DBU(1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯)，或4-DMAP。进一步的偶合剂是(苯并三唑-1-基氧基)三-(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐，单独或在1-羟基苯并三唑或4-DMAP的存在下；或2-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四-甲基脲四氟硼酸盐，或O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸盐。这些偶合反应可以在溶液(液相)或固相中进行。
优选，使用N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1，2-二氢喹啉(EEDQ)或N-异丁氧基-羰基-2-异丁氧基-1，2-二氢喹啉(IIDQ)进行酰胺键形成。不同于传统的酸酐方法，EEDQ和IIDQ既不需要碱也不需要低反应温度。一般地，该方法包括在有机溶剂(可以使用多种溶剂)中，等摩尔数量的羧基和胺组分进行反应。然后加入过量EEDQ或IIDQ，在室温下搅拌混合物。
优选，偶合反应在惰性溶剂中进行，例如卤代烃，例如二氯甲烷、氯仿，偶极非质子溶剂，例如乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、DMSO、HMPT，醚，例如四氢呋喃(THF)。
在许多情况下，偶合反应是在合适碱的存在下进行的，例如叔胺，例如三乙胺，二异丙基乙胺(DIPEA)，N-甲基-吗啉，N-甲基吡咯烷，4-DMAP或1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)。反应温度可以介于0℃和50℃范围中间，反应时间可以介于15分钟和24小时范围中间。
可以保护连接在一起的结构单元中的官能团，以避免形成非所要求的键。可以使用的合适保护基列在例如下列中Greene，“ProtectiveGroups in Organic Chemistry”，John Wiley & Sons，New York(1999)和“The PeptidesAnalysis，Synthesis，Biology”，Vol.3，Academic Press，New York(1987)。
羧基可以以酯形式保护，酯可以裂解掉，得到羧酸。可以使用的保护基包括1)烷基酯，例如甲基、三甲基甲硅烷基和叔丁基酯；2)芳烷基酯，例如苄基和取代的苄基酯；或3)可以通过弱碱或温和的还原方法裂解的酯，例如三氯乙基和苯酰基酯。
可以利用各种N-保护基来保护氨基，例如 1)酰基，例如甲酰基，三氟乙酰基，邻苯二甲酰和对甲苯磺酰； 2)芳族氨基甲酸酯基团，例如苄氧羰基(Cbz或Z)和取代的苄氧羰基，和9-芴甲氧羰基(Fmoc)； 3)脂肪族氨基甲酸酯基团，例如叔丁氧羰基(Boc)，乙氧羰基，二异丙基甲氧基-羰基，和烯丙氧基羰基； 4)环状氨基甲酸烷基酯基团，例如环戊氧基羰基和金刚烷基氧基羰基； 5)烷基，例如三苯甲基，苄基或取代的苄基，例如4-甲氧苯甲基； 6)三烷基甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基或t.Bu二甲基甲硅烷基；和 7)包含硫醇的基团，例如苯基硫代羰基和二硫杂琥珀酰基。感兴趣的氨基保护基是Boc和Fmoc。
优选，在下一个偶合之前裂解掉氨基保护基。N-保护基的除去可以按照本领域已知的方法进行。当使用Boc基团时，选择的方法是三氟乙酸，纯的或在二氯甲烷中，或HCl在二噁烷或在乙酸乙酯中。然后，在偶合之前或在原位用碱性溶液将得到的铵盐中和，碱性溶液例如含水缓冲液，或叔胺/二氯甲烷或乙腈或二甲基-甲酰胺。当使用Fmoc基团时，选择的试剂是哌啶或取代的哌啶(在二甲基甲酰胺中)，但可以使用任何仲胺。脱保护是在0℃和室温之间的温度下进行的，通常大约为15-25℃，或20-22℃。
还可以保护可妨碍结构单元的偶合反应的其它官能团。例如，可以以苄基或取代的苄基醚形式保护羟基，例如4-甲氧苯甲基醚，苯甲酰基或取代的苯甲酰基酯，例如4-硝基苯甲酰基酯，或用三烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基)。
其它氨基可以利用可选择性裂解掉的保护基来保护。例如，当Boc用作α-氨基保护基时，下列侧链保护基是合适的对甲苯磺酰(甲苯磺酰)部分可用于保护其它氨基；苄基(Bn)醚可用于保护羟基；苄基酯可用于保护其它羧基。或当选择Fmoc用于α-氨基保护时，通常，基于叔丁基的保护基是可接受的。例如，Boc可以用于其它氨基；叔丁基醚用于羟基；叔丁基酯用于其它羧基。
可以在合成方法的任何阶段除去任何保护基，但优选，在大环的构成完毕之后，将不参与反应步骤的任何官能团的保护基除去。保护基的除去可以用选择保护基所规定的任何方式进行，这些方式对本领域技术人员是众所周知的。
式(1a)的中间体(其中X是N，所述中间体由式(1a-1)代表)可以如下制备在羰基引入试剂的存在下，从中间体(5a)起始，使其与烯胺(5b)反应，如下面反应路线所列出的。
羰基(CO)引入试剂包括光气或光气衍生物，例如羰基二咪唑(CDI)，等等。在一个实施方案中，在合适碱和溶剂(其可以是在如上所述的酰胺形成反应中使用的碱和溶剂)的存在下，使(5a)与CO引入试剂反应。在具体实施方案中，碱是碳酸氢盐，例如NaHCO3，或叔胺例如三乙胺等等，溶剂是醚或卤代烃，例如THF，CH2Cl2，CHCl3，等等。而后，加入胺(5b)，由此获得中间体(1a-1)，如上述反应路线。使用类似反应条件的可供选择的路径包括首先，CO引入试剂与烯胺(5b)反应，而后，使由此形成的中间体与(5a)反应。
或者，中间体(1a-1)可以制备如下
PG1是O-保护基，其可以是本文提及的任何基团，尤其是苯甲酰基或取代的苯甲酰基，例如4-硝基苯甲酰基。在后者情况下，可以通过与碱金属氢氧化物(LiOH，NaOH，KOH)反应将该基团除去，尤其在PG1是4-硝基苯甲酰基的情况下，用LiOH，在包含水和水溶性有机溶剂例如烷醇(甲醇，乙醇)和THF的水介质中反应。
与上面描述的类似，在羰基引入试剂的存在下，使中间体(6a)与烯胺(5b)反应，该反应得到中间体(6c)。尤其使用上述的反应条件将这些脱保护。按照上述(4a)与(4b-1)、(4b-2)或(4b-3)的反应，使得到的醇(6d)与中间体(4b-1)、(4b-2)或(4b-3)反应，该反应产生中间体(1a-1)。
式(1a)的中间体(其中X是C，所述中间体由式(1a-2)代表)可以如下制备使用制备酰胺的反应条件(例如上面描述的那些)，从中间体(7a)起始进行酰胺形成反应，使中间体(7a)与烯胺(5b)反应，如下列反应路线所示。
或者，中间体(1a-2)可以制备如下
PG1是O-保护基，如上所述.可以使用如上所述的相同反应条件如上所述的酰胺形成，在保护基的说明中的PG1的除去，和在(4a)与胺(4b-1)、(4b-2)或(4b-3)的反应中的-OR11的引入。
式(2a)的中间体可以如下制备首先，将开口酰胺(9a)环化为大环酯(9b)，随后将其转变为(2a)，如同下述
PG2是羧基保护基，例如上述的羧基保护基之一，尤其是C1-4烷基或苄基酯，例如甲基、乙基或叔丁基酯。(9a)至(9b)的反应是易位反应，并且如上所述进行。按照上面描述的方法除去基团PG2。如果PG2是C1-4烷基酯，通过碱水解将其除去，例如用NaOH或优选用LiOH，在含水溶剂中，例如C1-4烷醇/水混合物。可以通过催化氢化除去苄基。
在替代性合成中，可以如下制备中间体(2a)
选择PG1基团，以使它相对于PG2是可选择性裂解的。PG2可以是例如甲基或乙基酯，其可以通过在水介质中用碱金属氢氧化物处理来除去，在这样的情况下，PG1例如是叔丁基或苄基。PG2可以是在弱酸性条件下可除去的叔丁基酯，或PG1可以是可用强酸或通过催化氢化除去的苄基醚，在后面的两种情况下，PG1例如是苯甲酸酯，例如4-硝基苯甲酸酯。
首先，将中间体(10a)环化为大环酯(10b)，通过除去PG1基团而将后者脱保护，得到(10c)，使其在如上所述的氨基甲酸酯形成反应中与中间体(4b)反应，而后除去羧基保护基PG2。环化、PG1和PG2的脱保护以及与(4b-1)、(4b-2)或(4b-3)的氨基甲酸酯形成反应如上所述。
可以在合成的任何阶段引入A基团，可以在大环形成之前的上述最后步骤或更早。在下面的反应路线中，引入的基团A是-CO-NH-SO2R2或-CO-OR5(如上面所说明)
在上述反应路线中，PG2如上所述，L1是P3基团
其中n和R5如上所述，且如果X是N，L1还可以是氮-保护基(PG，如上所述)，如果X是C，L1还可以是基团-COOPG2a，其中基团PG2a是与PG2类似的羧基保护基，但其中PG2a相对于PG2是可选择性裂解的。在一个实施方案中，PG2a是叔丁基，和PG2是甲基或乙基。
中间体(11c)和(11d)(其中L1表示基团(b))相当于中间体(1a)，并且可以按照上面说明进一步加工。
P1和P2结构单元的偶合 按照上面描述的方法，使用酰胺形成反应，连接P1和P2结构单元。P1结构单元可以具有羧基保护基PG2(如在(12b)中)或可能已经与P1′基团连接(如在(12c)中)。L2是N-保护基(PG)或基团(b)，如上面的明确说明。L3是羟基、-OPG1或基团-O-R11，如上面的明确说明。在下列任何反应路线中，如果L3是羟基，那么在每个反应步骤之前，可以将其以基团-OPG1的形式保护，且如果需要的话，随后脱保护，回到游离羟基官能团。与上述类似，羟基官能团可以转变为基团-O-R11。
在上述反应路线的方法中，按照上面描述的方法，环丙基氨基酸(12b)或(12c)与P2结构单元(12a)的酸官能团偶合，形成酰胺连接基。获得中间体(12d)或(12e)。在后者情况下，如果L2是基团(b)，得到的产物是P3-P2-P1序列(包含在先前的反应路线中的一些中间体(11c)或(11d))。对于所使用的保护基，使用合适的条件，除去(12d)中的酸保护基，而后与磺酰胺H2N-SO2R2(2b)、磷酰胺(2d)或与HOR1(2c)偶合，如上所述，再次得到中间体(12e)，其中-A是酰胺或酯基。如果L2是N-保护基，可以将其除去，得到中间体(5a)或(6a)。在一个实施方案中，该反应中的PG是BOC基团，且PG2是甲基或乙基。如果另外地L3是羟基，起始原料(12a)是Boc-L-羟脯氨酸。在一个具体实施方案中，PG是BOC，PG2是甲基或乙基，且L3是-O-R11。
在一个实施方案中，L2是基团(b)，这些反应包括P1与P2-P3偶合，产生上述的中间体(1a-1)或(1a)。在另一个实施方案中，L2是N-保护基PG(按照上面的说明)，偶合反应产生中间体(12d-1)或(12e-1)，使用上述的反应条件可以从其上除去基团PG，分别获得中间体(12-f)或(12g)，其包含上面明确说明的中间体(5a)和(6a)
在一个实施方案中，上述反应路线中的基团L3表示基团-O-PG1，其可以在起始原料(12a)上引入，其中L3是羟基。在这种情况下，选择PG1，以使它相对于基团L2(是PG)可选择性的裂解。
以类似方法中，P2结构单元(其中X是C，其是环戊烷或环戊烯衍生物)可以与P1结构单元连接，如下面反应路线所列出的，其中A、R7、L3如上面所明确说明，且PG2和PG2a是羧基保护基。一般选择PG2a，以使它相对于基团PG2是可选择性裂解的。除去(13c)中的PG2a基团，得到中间体(7a)或(8a)，其可以与(5b)反应，如上所述。
在具体实施方案中，如果X是C，那么R7是H，和如果X和携带R7的碳通过单键连接(P2是环戊烷部分)，那么PG2a和L3结合在一起形成键，P2结构单元由下式代表
双环酸(14a)分别与(12b)或(12c)反应(与上面描述的(14b)和(14c)类似)，其中内酯是开口的，得到中间体(14c)和(14e)。可以使用酯水解方法将内酯打开，例如使用上面描述的用碱除去(9b)中PG1基团的反应条件，尤其是使用碱性条件，例如碱金属氢氧化物，例如NaOH、KOH，尤其是LiOH。
可以进一步加工中间体(14c)和(14e)，如下文所描述。
P3和P2结构单元的偶合 对于具有吡咯烷部分的P2结构单元，按照上面描述的(5a)与(5b)的偶合方法，使用氨基甲酸酯形成反应，P3和P2或P3和P2-P1结构单元连接。偶合具有吡咯烷部分的P2单元的一般方法表示为下列反应路线，其中L3如上面所明确说明，L4是基团-O-PG2，其为下式的基团
在一个实施方案中，(15a)中的L4是基团-OPG2，可以除去PG2基团，得到的酸与环丙基氨基酸(12a)或(12b)偶合，得到中间体(12d)或(12e)，其中L2是基团(d)或(e)。
P3单元与P2单元或与P2-P1单元偶合的一般方法示于下列反应路线中，其中P2是环戊烷或环戊烯。L3和L4如上面所详细说明。
在具体实施方案中，L3和L4结合在一起可以形成内酯桥，如在(14a)中，和P3单元与P2单元偶合如下
在酰胺形成反应中，双环内酯(14a)与(5b)反应，得到酰胺(16c)，其中内酯桥打开，得到(16d)。酰胺形成和内酯打开反应的反应条件如上文或下文所述。随后中间体(16d)可以与如上所述的P1基团偶合。
使用与上面描述的(5a)、(7a)或(8a)与(5b)反应的相同方法，进行上述反应路线的反应，尤其是，其中L4是基团(d)或(e)的上述反应相当于上面描述的(5a)、(7a)或(8a)与(5b)的反应。
用于制备式(I)化合物的结构单元P1、P1′、P2和P3可以由本领域已知的中间体起始来制备。下文更详细地描述许多这种合成方法。
可以首先制备各自结构单元，随后偶合在一起，或者，结构单元的前体可以偶合在一起，并且在后面阶段修饰为所需要的分子组成。
可以保护每一结构单元中的官能团，以避免副反应。
P2结构单元的合成 P2结构单元包含被基团-O-R11取代的吡咯烷、环戊烷或环戊烯部分。
包含吡咯烷部分的P2结构单元可以源自于可商购的羟基脯氨酸。
包含环戊烷环的P2结构单元的制备可以如下面反应路线所示进行。
双环酸(17b)可以例如由3，4-二(甲氧羰基)环戊酮(17a)制备，如下列所描述Rosenquist等人Acta Chem.Scand.46(1992)1127-1129。在该方法中，第一步包括在溶剂例如甲醇中，用还原剂例如硼氢化钠将酮基团还原，而后将酯水解，最后使用内酯形成方法进行闭环，得到双环内酯(17b)，尤其是在弱碱例如吡啶的存在下使用乙酸酐。然后通过引入合适的羧基保护基，例如上面详细说明的基团PG2，保护(17b)中的羧酸官能团，由此提供双环酯(17c)。基团PG2特别是酸不稳定的基团，例如叔丁基，并且例如在路易斯酸的存在下用异丁烯处理来引入，或在碱例如叔胺例如二甲基氨基吡啶或三乙胺的存在下，在溶剂例如二氯甲烷中用二碳酸二叔丁基酯处理。使用上面描述的反应条件，特别是使用氢氧化锂，将(17c)的内酯环打开，得到酸(17d)，其可以在与P1结构单元的偶合反应中进一步使用。还可以保护(17d)中的游离酸，优选用酸保护基PG2a(其相对于PG2可选择性的裂解)，羟基官能团可以转变为基团-OPG1或基团-O-R11。除去基团PG2，获得的产物是中间体(17g)和(17i)，其相当于上面详细说明的中间体(13a)或(16a)。
具有特定立体化学的中间体可以通过在上述反应序列中拆分中间体来制备。例如，可以按照本领域已知的方法拆分(17b)，例如与光学活性的碱形成盐，或利用手性色谱，并且可以进一步加工得到的立体异构体，如上所述。(17d)中的OH和COOH基团是顺位。反式的类似物可以通过在携带-OH官能团的碳处使立体化学翻转来制备，在引入-OPG1或-O-R11的反应中使用可使立体化学翻转的特定试剂，例如应用Mitsunobu反应。
在一个实施方案中，中间体(17d)与P1单元(12b)或(12c)偶合，该偶合反应相当于使用相同条件的(13a)或(16a)与相同P1单元的偶合。随后引入如上所述的-O-R11取代基，而后除去酸保护基PG2，得到中间体(8a-1)，其是中间体(7a)的亚类，或中间体(16a)的一部分。除去PG2的反应产物可以进一步与P3结构单元偶合。在一个实施方案中，(17d)中的PG2是叔丁基，其可以在酸性条件下除去，例如用三氟乙酸。
不饱和P2结构单元(即环戊烯环)可以如下面反应路线所举例说明的方法来制备。
3，4-二(甲氧羰基)环戊酮(17a)的溴化-消除反应如下列所描述Dolby等人J.Org.Chem.36(1971)1277-1285，而后用还原试剂例如硼氢化钠将酮官能团还原，提供环戊烯醇(19a)。在溶剂例如二噁烷和水的混合物中，使用例如氢氧化锂进行选择性的酯水解，提供羟基取代的单酯环戊烯醇(19b)。
不饱和P2结构单元(其中R7还可以不是氢)可以如下面反应路线所示来制备。
可商购的3-甲基-3-丁烯-1-醇(20a)的氧化，特别是用氧化剂例如氯铬酸吡啶，得到(20b)，其转变为相应的甲基酯，例如在甲醇中用乙酰氯处理，而后与溴进行溴化反应，得到α-溴酯(20c)。然后，后者与烯基酯(20e)缩合，烯基酯(20e)是通过酯形成反应、由(20d)获得的。优选，(20e)中的酯是叔丁基酯，其可以由相应的可商购酸(20d)制备，例如在碱例如二甲基氨基吡啶的存在下用二碳酸二叔丁基酯处理。在溶剂例如四氢呋喃中，用碱例如二异丙基胺基锂处理中间体(20e)，并且与(20c)反应，得到烯基二酯(20f)。通过烯烃易位反应，(20f)进行环化，如上所述进行，提供环戊烯衍生物(20g)。使用Jacobsen非对称环氧化方法，可以进行(20g)的立体选择性环氧化，获得环氧化物(20h)。最后，在碱性条件下进行环氧化物开环反应，例如通过加入碱，特别是DBN(1，5-二氮杂双环-[4.3.0]壬-5-烯)，得到醇(20i)。任选地，可以将中间体(20i)中的双键还原，例如使用催化剂例如钯/碳进行催化氢化，得到相应的环戊烷化合物。可以除去叔丁基酯，得到相应的酸，其随后与P1结构单元偶合。
在按照本发明化合物的合成的任何方便阶段，可以在吡咯烷、环戊烷或环戊烯环上引入-O-R11基团。一个方法是首先将-O-R11基团引入所述环中，随后加入其它所需要的结构单元，即P1(任选带有P1′尾部)和P3，而后形成大环。另一个方法是将没有携带-O-R11取代基的结构单元P2与每个P1和P3偶合，并且在大环形成之前或之后加入-O-R11基团。在后面的方法中，P2部分具有羟基，其可以用羟基保护基PG1来保护。
按照上述由(4a)起始来合成(I)的类似方法，通过羟基取代的中间体(21a)或(21b)与中间体(4b)的反应，可以在结构单元P2上引入R11基团。这些反应在下面反应路线中进行了表示，其中L2如上面所详细说明，和L5和L5a互相独立地表示羟基、羧基保护基-OPG2或-OPG2a，或L5还可以表示P1基团，例如上面所详细说明的基团(d)或(e)，或L5a还可以表示P3基团，例如上面详细说明的基团(b)。基团PG2和PG2a如上面所详细说明。如果基团L5和L5a是PG2或PG2a，对它们进行选择时，应使每个基团相对于另一个可选择性的裂解。例如，L5和L5a之一可以是甲基或乙基，而另一个是苄基或叔丁基。
在一个实施方案中，在(21a)中，L2是PG，和L5是-OPG2，或在(21d)中，L5a是-OPG2，和L5是-OPG2，并且按照上述方法除去PG2基团。
在另一个实施方案中，基团L2是BOC，L5是羟基，起始原料(21a)是可商购的BOC-羟脯氨酸，或其任何其它立体异构形式，例如BOC-L-羟脯氨酸，特别是后者的反式异构体。如果(21b)中的L5是羧基-保护基，可以按照上面描述的方法将其除去，得到(21c)。在还另一个实施方案中，(21b-1)中的PG是Boc，和PG2是低级烷基酯，特别是甲基酯或乙基酯。可以通过标准方法将后面的酯水解为酸，例如在甲醇中用盐酸进行酸水解，或用碱金属氢氧化物，例如NaOH，特别是LiOH。在另一个实施方案中，羟基取代的环戊烷或环戊烯类似物(21d)转变为(21e)，如果L5和L5a是-OPG2或-OPG2a，可以通过除去基团PG2而将其转变为相应的酸(21f)。除去(21e-1)中的PG2a，产生类似的中间体。
P1结构单元的合成 用于制备P1片段的环丙烷氨基酸是可商购的，或可以使用本领域已知的方法制备。
特别是，氨基-乙烯基-环丙基乙酯(12b)可以按照WO 00/09543中所描述的或下面反应路线所举例说明的方法来获得，其中PG2是上面详细说明的羧基保护基
在碱的存在下，用1，4-二卤代丁烯处理可商购或容易得到的亚胺(31a)，产生(31b)，其水解之后，得到环丙基氨基酸(12b)，其具有相对于羧基为顺式的烯丙基取代基。对映体混合物(12b)的拆分，产生(12b-1)。使用本领域已知的方法进行拆分，例如酶催分离；用手性酸结晶；或化学衍生化；或用手性柱色谱。中间体(12b)或(12b-1)可以与上述合适的P2衍生物偶合。
用于制备按照通式(I)化合物(其中A是-COOR1，-CO-NH-SO2R2或-CO-NH-PO(OR4a)(OR4b))的P1结构单元，可以在酯或酰胺形成的标准条件下、分别通过氨基酸(32a)与合适的醇、磺酰胺或磷酰胺反应来制备。通过引入N-保护基PG并且除去PG2，制备环丙基氨基酸(32a)，将得到的PG保护的氨基酸(32a)转变为酰胺(12c-1)或酯(12c-2)，其是中间体(12c)的子组，如下面的反应路线所列出，其中PG如上面所详细说明。
(32a)与胺(2b)或与(2d)的反应是酰胺形成方法。与(2c)的类似反应是酯形成反应。可以按照上面描述的方法进行该两个类型的反应。这种反应得到中间体(32b)、(32b-1)或(32c)，通过标准方法例如上面描述的那些方法从其中除去氨基保护基。随后产生所需要的中间体(12c-1)、(12c-1a)或(12c-2)。通过首先引入N-保护基PG、并随后除去基团PG2，可以由以上所述中间体(12b)制备起始原料(32a)。
在一个实施方案中，(32a)与(2b)或与(2d)的反应是如下进行的在溶剂例如THF中，用偶合剂例如N，N’-羰基-二咪唑(CDI)等等处理氨基酸，而后在碱例如1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)的存在下，与(2b)或与(2b-1)反应。或者，可以在碱例如二异丙基乙胺的存在下用(2b)或(2d)处理氨基酸，或在(2d)的情况下用氢化钠，而后用偶合剂例如苯并三唑-1-基-氧基-三-吡咯烷基-磷鎓六氟磷酸盐(可商购，
)处理，实现磺酰胺基团的引入。
用于制备按照通式(I)化合物(其中A是-C(＝O)C(＝O)NR3aR3b)的P1结构单元，可以方便地按照下面列出的反应路线制备。
起始原料(32d)中的PG2a是烷基，特别是C1-6烷基，例如甲基或乙基。可以通过(32a)与合适烷醇的酯形成反应来获得(32d)，或通过在(12b)上引入氮保护基PG来获得，如上所述。氨基酸衍生物(32d)中的酯基还原为相应的羟基亚甲基中间体(32e)，例如可以如下进行用硼氢化锂处理，而后使用温和的氧化剂例如Dess-Martin高碘烷(Periodinane)将得到的羟基亚甲基基团氧化，提供醛(32f)。后者醛(32f)与合适异腈衍生物进行反应，并且在羧酸例如三氟乙酸(TFA)的存在下，在碱例如吡啶的存在下，在Passerini反应(如Org.Lett.，Vol.2，No 18，2000中所描述)中，得到所产生的α-羟基酰胺的羧酸酯，例如在TFA、三氟乙酸盐的情况下。然后使用标准方法将由此所获得的α-羟基酰胺中的羧酸酯除去，例如使用碱性条件例如LiOH，由此得到α-羟基酰胺(32g)。除去基团PG，产生中间体(32h)，其可以与P2基团偶合。可以将(32g)中的羟基官能团氧化为相应的α-酮酰胺，但为了避免副反应，α-羟基酰胺或其前体羧酸酯用于进一步的反应中(例如除去N-保护基，与P2部分偶合，等等)。然后在合成的任何方便阶段，进行P1部分的α-羟基的氧化，例如在与P2部分偶合之后，或在合成的后期，例如最后步骤，使用温和的氧化剂例如Dess-Martin高碘烷，由此得到式I的化合物，或中间体，其中A是-C(＝O)C(＝O)NR3aR3b。
上述方法中，即酯的还原、氧化为醛，与异腈的反应还可以在合成方法的后期进行，例如在构成大环之后。
用于制备按照通式(I)化合物(其中A是-C(＝O)NH-P(＝O)(OR4a)(R4b)或-P(＝O)(OR4a)(R4b)膦酸酯)的P1结构单元，可以按照WO 2006/020276所描述的方法制备。尤其是，其中A是-P(＝O)(OR4a)(R4b)的式(I)化合物可以制备如下
使起始原料32i与碱(特别是CsOH)反应，优选在相转移催化剂例如三乙基苄基氯化铵的存在下，并加入32j，形成带有乙烯基侧链的环丙基环，即环丙基膦酸酯32k。在酸性条件(例如HCl/二氯甲烷)下除去苯基-CH＝保护基，得到32l。可以使用本领域已知的方法将后者拆分为它的立体异构体，例如，通过与光学活性的酸形成盐，例如与二苯甲酰基-L-酒石酸，除去酒石酸衍生物之后，得到32m。非膦酸乙基酯的类似物可以由具有除乙基以外的酯基的起始原料32i制备。起始原料32i是已知的物质，或可以使用本领域已知的方法容易制备。
随后中间体(12c-1)或(12c-2)可以与如上所述的合适脯氨酸、环戊烷或环戊烯衍生物偶合。
P3结构单元的合成 P3结构单元可商业上获得，或可以按照本领域已知的方法制备。这些方法之一示于下面反应路线中，并且使用单酰取代的胺，例如三氟乙酰胺，或Boc保护的胺。
在上述反应路线中，R与CO基团一起形成N-保护基，尤其是，R是叔丁氧基、三氟甲基；R5和n如上所述，LG是离去基团，尤其是卤素，例如氯或溴。
用强碱例如氢化钠处理单酰取代的胺(33a)，随后使其与试剂LG-C5-8烯基(33b)反应，尤其是卤代C5-8烯基，形成相应保护的胺(33c)。(33c)的脱保护得到(5b)，其是结构单元P3。脱保护取决于官能团R，如果R是叔丁氧基，相应Boc保护的胺的脱保护可以用酸例如三氟乙酸处理来实现。或者，当R是例如三氟甲基时，R基团的除去是用碱例如氢氧化钠实现的。
下列反应路线举例说明了制备P3结构单元的又一个方法，即C5-8烯基伯胺的Gabriel合成，其可以如下进行用碱例如NaOH或KOH和用(33b)处理苯邻二甲酰亚胺(34a)，如上面所详细说明，而后中间体N-烯基酰亚胺水解，产生C5-8烯基伯胺(5b-1)。
在上述反应路线中，n如上所述。
按照本领域已知的官能团转变反应，式(I)的化合物可以互相转变。例如，氨基可以被N-烷基化，硝基还原成氨基，卤素原子可以转换为另外的卤素原子。
用于制备式(I)化合物的许多中间体是已知的化合物，或是已知化合物的类似物，其可以按照技术人员易得的本领域已知方法的改型来制备。
按照本领域已知的三价氮转化为其N-氧化物形式的方法，式(I)的化合物可以转变为相应的N-氧化物形式。所述N-氧化反应通常可以通过式(I)的起始原料与合适有机或无机过氧化物的反应来进行。合适的无机过氧化物包括例如过氧化氢，碱金属或碱土金属过氧化物，例如过氧化钠、过氧化钾；合适的有机过氧化物可以包括过氧酸，例如过氧苯甲酸或卤素取代的过氧苯甲酸，例如3-氯过氧苯甲酸，过氧烷酸，例如过氧乙酸，烷基过氧化氢，例如叔丁基过氧化氢。合适溶剂是例如水，低级醇例如乙醇等等，烃例如甲苯，酮例如2-丁酮，卤代烃例如二氯甲烷，和这些溶剂的混合物。
式(I)化合物的纯立体化学异构形式可以通过使用本领域已知的方法获得。可以利用物理方法例如选择结晶和色谱技术例如逆流分配、液相色谱等等来分离非对映体。
式(I)化合物可以以对映体的外消旋混合物形式获得，其可以按照本领域已知的拆分方法互相分离。通过分别与合适手性酸、手性碱反应，充分碱性或酸性的式(I)的消旋化合物可以转变为相应的非对映体盐形式。随后分离所述非对映体的盐形式，例如，通过选择性或分级结晶，用碱或酸将对映体从其中释放出。分离式(I)化合物的对映体形式的替代性方法包括液相色谱，尤其是使用手性固定相的液相色谱。所述纯立体化学异构形式还可以源自于合适起始原料的纯立体化学异构形式，条件是，反应存在立体化学专一性。优选，如果需要特定立体异构体，所述化合物可以通过立体特异性制备方法来合成。这些方法优选使用对映体纯的起始原料。
在进一步方面，本发明涉及药物组合物，其包含治疗有效量的本文详细说明的式(I)化合物或本文详细说明的式(I)化合物的任何子组的化合物和可药用载体。在这里，治疗有效量是在感染患者或处于感染危险的患者中足以起到预防作用的数量，以稳定或降低病毒感染，尤其是HCV病毒感染。在进一步方面，本发明涉及制备本文详细说明的药物组合物的方法，该方法包括将可药用载体与治疗有效量的本文详细说明的式(I)化合物或本文详细说明的式(I)化合物的任何子组的化合物密切地混合。
因此，可以将本发明化合物或其任何子组配制成用于给予目的的各种药学形式。作为合适的组合物，所提到的通常使用的所有组合物可以用于系统地给予药物。为了制备本发明的药物组合物，将作为活性组分的有效量的具体化合物(任选加成盐形式或金属配合物)在与可药用载体的密切混合物中进行结合，根据所希望给予的制剂的形式，该载体可以采用多种形式。单位剂型的这些药物组合物是合乎需要的，具体地说，适合口服、直肠、透皮或肠胃外注入的形式给药。例如，在制备口服剂型的组合物过程中，可以使用任何常见的药物介质，例如在口服液体药剂例如悬浮液、浆液、酏剂、乳化液和溶液的情况下，使用水，乙二醇，油，醇等等；或在粉末、丸剂、胶囊和片剂的情况下，使用固体载体，例如淀粉，糖，高岭土，润滑剂，结合剂，崩解剂等等。由于片剂和胶囊容易给予，它们代表最有利的口服剂量单位形式，在这样的情况下，显而易见地使用固体药学载体。对于肠胃外组合物，载体通常包括无菌水，至少大部分，但还可以包括其它组分，例如，帮助溶解的组分。可以制备例如可注射溶液，其中载体包括盐溶液、葡糖溶液或盐水和葡糖溶液的混合物。在可以使用合适液体载体、悬浮剂等等的情况下，还可以制备可注射的悬浮液。还包括的固态制剂，在使用之前不久，可以将其转化为液态制剂。在适合于透皮给药的组合物中，载体任选包括提高渗透的试剂和/或合适润湿剂，任选与任何性质的合适添加剂组合，添加剂占次要比例，添加剂不能对皮肤产生显著的有害影响。
还可以利用本领域通过吸入或吹入方法所使用的方法和制剂，通过口腔吸入或吹入方式给予本发明的化合物。由此，通常本发明的化合物可以以溶液、悬浮液或干粉形式给予肺部，优选溶液。用于通过口腔吸入或吹入方式递送溶液、悬浮液或干粉而开发的任何系统适合于给予本化合物。
由此，本发明还提供了适合于通过口腔吸入或吹入给予的药物组合物，其包含式(I)的化合物和可药用载体。优选，本发明的化合物是通过吸入雾化的溶液或以雾化的剂量给予的。
特别有利的是，将上述药物组合物配制为单位剂型，以便于给药和剂量的均匀性。本文使用的单位剂型是指适合作为单元剂量的物理离散单位，每个单位包含预定数量的、适于产生所需要的治疗效果的活性组分与所需药学载体的结合。这种单位剂型的例子是片剂(包括刻痕或糖衣片剂)，胶囊，丸剂，栓剂，粉状品袋，薄片，可注射溶液或悬浮液等等，和其分离的复合形式。
式(I)的化合物显示了抗病毒特性。使用本发明化合物和方法能治疗的病毒感染和其相关疾病包括由HCV及其它致病的黄热病病毒例如黄热病病毒、登革热(1-4型)病毒、圣路易斯脑炎病毒、日本脑炎病毒、澳洲墨莱溪谷脑炎病毒、西尼罗病毒和库宁病毒引起的那些感染。与HCV相关的疾病包括渐进性的肝纤维化，导致肝硬化的炎症和坏疽，终端阶段肝疾病，和HCC；对于其它致病的黄病毒科，疾病包括黄热病、登革热、出血热和脑炎。此外，许多本发明的化合物针对HCV的突变菌株具有活性。另外，许多本发明的化合物显示了有利的药物动力学特性并在生物利用率方面具有吸引人的性能，包括可接受的半衰期、AUC(曲线下面的面积)和峰值，并且没有例如不够快速起效和组织滞留的不利现象。
式(I)化合物针对HCV的体外抗病毒活性可以在细胞HCV复制子系统中试验，该系统基于Lohmann等人(1999)Science 285110-113，更进一步的变体由Krieger等人(2001)Journal of Virology 754614-4624(引入本文作为参考)进行了描述，这将在实施例部分中进一步举例说明。该模型(尽管不是HCV的完整的感染模型)被广泛地接受，作为现行的自发HCV RNA复制的最实用和有效的模型。在该细胞模型中显示抗HCV活性的化合物被认为是治疗哺乳动物HCV感染的进一步研制的候选物。应理解，重要的是，将特定地妨碍HCV功能的化合物与在HCV复制子模型中产生细胞毒素或抑制细胞效应的那些化合物区分开来，并从而促使HCV RNA的减少或连接的指示酶浓度降低。用于评价细胞毒性的试验是本领域已知的，其基于例如线粒体酶的活性，使用荧光氧化还原染料，例如刃天青。此外，存在细胞的反筛选用于连接指示基因活性(例如荧光虫荧光素酶)的非选择性抑制的评价。通过用荧光素酶指示基因(其表达取决于结构性活性基因启动子)稳定转染来配备合适的细胞类型，并且这种细胞可以用作反筛选，以除去非选择性的抑制剂。
由于式(I)化合物或其任何子组、N氧化物、可药用加成盐和立体化学异构形式的抗病毒性能，具体地说，它们的抗HCV性能，它们可有效用于治疗感染上病毒的个体，具体地说，HCV病毒，并且用于预防病毒感染，尤其是HCV感染。通常，本发明的化合物可以用于治疗感染上病毒的恒温动物，尤其是黄热病病毒，例如HCV。
本发明的化合物或其任何子组可因此用作药物。所述用作药物或治疗方法包括系统给予病毒感染的患者或对病毒感染敏感的患者可有效抵御与病毒感染(尤其是HCV感染)相关的病症的数量。
本发明还涉及本化合物或其任何子组在制备药物中的用途，该药物用于治疗或预防病毒感染，尤其是HCV感染。
此外，本发明涉及治疗病毒感染的或处于病毒感染危险之中的温血动物的方法，尤其是HCV感染，所述方法包括给予抗病毒有效量的本文详细说明的式(I)化合物或本文详细说明的式(I)化合物的任何子组的化合物。
通常，抗病毒有效的每日量是从0.01mg/kg至500mg/kg体重，或从0.1mg/kg至50mg/kg体重，或从0.5mg/kg至5mg/kg体重。在整天的合适间隔，可以用两个、三个、四个或更多个亚剂量来给予所需要的剂量。可以将所述亚剂量配制为单位剂型，例如，每单位剂型包含1至1000mg活性组分，尤其是5至200mg。
本发明还涉及式(I)化合物(包括其立体异构形式、其可药用盐或可药用溶剂化物)和其它抗病毒化合物的组合，尤其是其它抗HCV化合物。术语“组合”可以涉及包含下列的产物(a)上面详细说明的式(I)的化合物，和(b)任选的其它抗HCV化合物，作为组合制剂，在HCV感染的治疗中同时、分开或顺序使用。
可以在这种组合物中使用的抗HCV化合物包括选自下列的药剂HCV聚合酶抑制剂，HCV蛋白酶抑制剂，HCV生命周期中的其它靶向的抑制剂，和免疫调节剂，和其组合。HCV聚合酶抑制剂包括NM283(valopicitabine)，R803，JTK-109，JTK-003，HCV-371，HCV-086，HCV-796和R-1479。HCV蛋白酶抑制剂(NS2-NS3抑制剂和NS3-NS4A抑制剂)包括WO 02/18369(参见例如273页9-22行，和274页4行至276页11行)的化合物；BILN-2061，VX-950，GS-9132(ACH-806)，SCH-503034和SCH-6。可以使用的其它药剂是公开在WO 98/17679、WO00/056331(Vertex)、WO 98/22496(Roche)、WO 99/07734(BoehringerIngelheim)、WO 2005/073216、WO 2005/073195(Medivir)中的那些药剂和结构上类似的药剂。
HCV生命周期中的其它靶向的抑制剂，包括NS3解螺旋酶；金属蛋白酶抑制剂；反义寡核苷酸抑制剂，例如ISIS-14803，AVI-4065等等；siRNA′s例如SIRPLEX-140-N等等；载体编码的短发夹RNA(shRNA)；DNA酶；HCV特异性核糖酶，例如heptazyme，RPI.13919等等；入口抑制剂，例如HepeX-C，HuMax-HepC等等；麦芽糖酶抑制剂例如celgosivir，UT-231B等等；KPE-02003002；和BIVN 401。
免疫调节剂包括天然和重组体干扰素异构型化合物，包括α-干扰素，β-干扰素，γ-干扰素，ω-干扰素等等，例如Intron A
Roferon-A
Canferon-A300
Advaferon
Infergen
Humoferon
Sumiferon MP
Alfaferone
IFN-beta
Feron
等等；聚乙二醇衍生化的(PEG化的)干扰素化合物，例如PEG干扰素-α-2a(Pegasys
)，PEG干扰素-α-2b(PEG-Intron
)，PEG化的IFN-α-con1等等；干扰素化合物的长效制剂和衍生物，例如白蛋白稠合的干扰素albuferonα等等；促进细胞中干扰素合成的化合物，例如resiquimod等等；白细胞间介素；可提高1型辅助性T细胞响应进展的化合物，例如SCV-07等等；TOLL类受体激动剂，例如CpG-10101(actilon)，艾沙托立宾(isatoribine)等等；胸腺素α-1；ANA-245；ANA-246；二盐酸组按；丙帕锗(propagermanium)；四氯十氧化物(tetrachlorodecaoxide)；聚肌胞(ampligen)；IMP-321；KRN-7000；抗体，例如civacir，XTL-6865，等等；和预防性的和治疗疫苗，例如InnoVac C，HCV E1E2/MF59，等等。
其它抗病毒药包括利巴韦林，金刚烷胺，利巴韦林前体(viramidine)，硝唑尼特(nitazoxanide)；汰比夫定；NOV-205；他立韦林(taribavirin)；内部核糖体入口的抑制剂；广谱病毒抑制剂，例如IMPDH抑制剂，和霉酚酸和它们的衍生物，包括但不限于VX-950，merimepodib(VX-497)，VX-148，和/或VX-944)；或上述任何的组合。
用于所述组合的具体药剂包括干扰素-α(IFN-α)，PEG化的干扰素-α或利巴韦林，以及基于靶向HCV表位的抗体的疗法，小干扰RNA(SiRNA)，核糖酶，DNA酶，反义RNA，例如NS3蛋白酶、NS3解螺旋酶和NS5B聚合酶的小分子拮抗剂。
在另一个方面，提供了本文详细说明的式(I)化合物的与抗HIV化合物的组合。优选，后者是那些对改善生物利用率的药物代谢和/或药物动力学具有正效应的HIV抑制剂。这种HIV抑制剂的例子是利托那韦。因此，本发明进一步提供了组合物，包括(a)式(I)或其可药用盐的HCVNS3/4a蛋白酶抑制剂；和(b)利托那韦或其可药用盐。化合物利托那韦、其可药用盐和其制备方法描述在WO 94/14436中。US 6,037,157和其中引用的参考文献US 5,484,801、US08/402,690、WO95/07696和WO95/09614公开了利托那韦的优选剂型。一个实施方案涉及组合物，包括(a)式(I)或其可药用盐的HCV NS3/4a蛋白酶抑制剂；和(b)利托那韦或其可药用盐；任选包括选自上述化合物的额外的抗HCV化合物。
本发明还涉及制备本文所描述组合物的方法，包括下列步骤将上面详细说明的式(I)化合物与另一种药剂例如抗病毒药剂(包括抗HCV或抗HIV药剂，尤其是上述那些)混合。
所述组合物可以在制备药物方面得到应用，该药物用于治疗受到感染的哺乳动物的HCV感染，或另一种致病的黄或瘟病毒，所述组合物尤其包含上面详细说明的式(I)化合物和干扰素-α(IFN-α)、PEG化的干扰素-α或利巴韦林。或本发明提供了治疗感染上HCV或另一种致病的黄或瘟病毒的哺乳动物(尤其是人)的方法，包括给予所述哺乳动物有效量的本文详细说明的组合物。尤其是，所述治疗包括系统给予所述组合物，有效量是可有效治疗与HCV感染相关的临床病症的数量。
在一个实施方案中，将上述组合配制成药物组合物形式，包含上面描述的活性组分和如上所述的载体。每一活性组分可以独立配制，并且可以共同给予制剂，或可以提供包含两种和(如果需要的话)其它活性组分的一个制剂。在前者情况中，还可以将该组合配制为组合制剂形式，在HCV治疗中用于同时、分开或顺序使用。所述组合物可以采用上面描述的任何形式。在一个实施方案中，将两种组分配制在一个剂型中，例如固定的剂量组合。在具体实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含(a)治疗有效量的式(I)的化合物，包括其立体异构形式，或其可药用盐，或其可药用溶剂化物，和(b)治疗有效量的利托那韦或其可药用盐，和(c)载体。
可以在治疗期间的不同时期给予本发明组合的独立组分，或以分开或单一组合形式同时给予。本发明包括所有的这种同时或交替治疗的方式，并且相应地解释术语“给予”。在优选实施方案中，分开剂型是同时给予的。
在一个实施方案中，本发明的组合物包含适量的利托那韦或其可药用盐，相对于单独给予所述式(I)的HCV NS3/4a蛋白酶抑制剂，其应该足以临床上改善式(I)的HCV NS3/4a蛋白酶抑制剂的生物利用率。或者，本发明的组合物包含适量的利托那韦或其可药用盐，相对于单独给予式(I)的HCV NS3/4a蛋白酶抑制剂时的至少一个药物动力学变量，其应该足以提高式(I)的HCV NS3/4a蛋白酶抑制剂的至少一个所述变量，该变量选自t1/2，Cmin，Cmax，Css，AUC(12小时)或AUC(24小时)。
本发明的组合物可以给予人，对于包含在所述组合物中的每个组份(例如上面详细说明的式(I)的化合物和利托那韦或可药用盐)的具体剂量范围可以具有0.02至5.0g/天范围内的剂量水平。
式(I)化合物与利托那韦的重量比可以在大约30∶1至大约1∶15范围内，或大约15∶1至大约1∶10，或大约15∶1至大约1∶1，或大约10∶1至大约1∶1，或大约8∶1至大约1∶1，或大约1∶5至1∶1至大约5∶1，或大约3∶1至大约1∶1，或大约2∶1至1∶1。式(I)化合物和利托那韦可以一天共同给予一或两次，优选口服，其中每剂量的式(I)化合物的量是大约1至大约2500mg，或大约50至大约1500mg，或大约100至大约1000mg，或大约200至大约600mg，或大约100至大约400mg；每剂量的利托那韦的量是1至大约2500mg，或大约50至大约1500mg，或大约100至大约800mg，或大约100至大约400mg，或40至大约100mg利托那韦。
实施例 下列实施例是为了举例说明本发明，目的不是限制。一些实施例显示了结构单元的制备，该结构单元可以与本文所描述的任何其它合适的结构单元偶合，不仅仅是举例说明的式I的最终产物的结构单元。
实施例1
步骤a1-[(3-氧代-2-氧杂-二环[2.2.1]庚烷-5-羰基)-氨基]-2-乙烯基-环丙烷羧酸乙酯(1a) 在室温下，向3-氧代-2-氧杂-二环[2.2.1]庚烷-5-羧酸(857mg，5.5mmol)的DMF(14ml)和DCM(25ml)溶液中加入1-氨基-2-乙烯基环丙烷羧酸乙酯(1.15g，6.0mmol)、HATU(2.29g，6.0mmol)和DIPEA(3.82ml，22mmol)。在环境温度下、在N2氛围中搅拌反应1小时。LC/MS分析显示完全转化，真空浓缩反应混合物。将残余物再溶于DCM(100ml)和0.1M HCl(aq)中，分离各层。用NaHCO3(aq)和盐水洗涤有机相，干燥(MgSO4)，过滤。真空除去溶剂，得到标题化合物(1.6g，99％)。LC/MS(方法A)tR＝2.46min，＞95％，m/z(ESI+)＝294(MH+) 步骤b2-(1-乙氧羰基-2-乙烯基环丙基氨基甲酰基)-4-羟基-环戊烷羧酸二异丙基乙胺盐(1b) 在20ml微波反应容器中，向酯(1a)(800mg，2.73mmol)的水(15ml)溶液中加入DIPEA(1.2ml，6.8mmol)和磁性搅拌棒。将反应容器密封，剧烈摇动不混溶的浆液，而后插入微波谐振腔中。预先搅拌1分钟之后，将反应辐射40分钟，至100℃的规定温度。冷却至40℃后，真空浓缩透明溶液，将残余的棕色油与乙腈共同蒸发3次，以除去任何残余水。将DIPEA盐形式的粗品标题化合物立即转送到下一步。LC/MS(方法A)tR＝1.29min，＞95％，m/z(ESI+)＝312(MH+)。
步骤c1-{[2-(己-5-烯基甲基氨基甲酰基)-4-羟基环戊烷羰基]氨基}-2-乙烯基环丙烷羧酸乙酯(1c) 在室温下，将粗品酸(1b)(5.5mmol)溶于DCM(50ml)和DMF(14ml)中，而后加入HATU(2.09g，5.5mmol)、己-5-烯基-甲基-胺(678mg，6.0mmol)和DIPEA(3.08ml，17.5mmol)。将反应在环境温度下搅拌1小时。LC/MS分析显示完全转化，真空浓缩反应混合物。将残余物再溶于EtOAc(100ml)中，用0.1M HCl(aq)、K2CO3(aq)和盐水洗涤有机层，干燥(MgSO4)，过滤。真空蒸发溶剂，得到油，将其用快速色谱(硅胶，EtOAc∶MeOH)纯化，得到标题化合物(1.65g，74％)。TLC(硅胶)MeOH∶EtOAc 5∶95，Rf＝0.5；LC/MS(方法A)tR＝3.44min，＞95％，m/z(ESI+)＝407(MH+)。
步骤d1-{[4-乙氧基甲氧基-2-(己-5-烯基-甲基-氨基甲酰基)-环戊烷羰基]-氨基}-2-乙烯基-环丙烷羧酸乙酯(1d) 在0℃(冰浴)，向二烯1c(7.94g，0.02mol)的DCM和DIPEA(9.7ml，6eq)搅拌溶液中加入氯甲基乙基醚(2.79g，3eq)。在室温下搅拌反应混合物过夜，旋转蒸发浓缩，用硅胶柱色谱纯化(EtOAc/石油醚1∶1→1∶0)，得到纯标题化合物淡黄色浆液(6.67g，74％)。
步骤e17-乙氧基甲氧基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-4-羧酸乙酯(1e) 将二烯(1d)(1.75g)溶于无水二氯乙烷(800ml，0.0046M溶液)中。将该溶液鼓入氩气10分钟，随后加入Hoveyda-Grubbs第一代催化剂(20mg，3.5mol％)，在95℃搅拌反应混合物过夜。将额外的催化剂(25mg)加入到反应混合物中(在氩气流条件下)，在97℃搅拌反应。将反应混合物冷却至室温，加入净化剂(100mg)，在室温下搅拌反应混合物4小时。过滤反应混合物，旋转蒸发浓缩滤液，用硅胶柱色谱纯化残余物，得到纯标题化合物(1.23g，产率75％)。
步骤f17-乙氧基甲氧基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-4-羧酸(1f) 将酯1e(2.26g)与THF(20ml)、MeOH(20ml)和LiOH溶液(1N，20ml)混合，并在55℃搅拌～17小时。旋转蒸发浓缩反应混合物，用水(30-50ml)稀释，用10％枸橼酸酸化至pH3-4。将浑浊的溶液提取到乙酸乙酯(3x50ml)中。合并有机提取物，用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥。过滤除去干燥剂，旋转蒸发除去乙酸乙酯。将残余物高真空干燥，得到2g标题化合物白色泡沫。该产物不用进一步纯化就可直接使用。
步骤g环丙烷磺酸(17-乙氧基甲氧基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-4-羰基)-酰胺(1g) 将酸1f溶于干燥DCM(20ml)中。加入EDC(1.2eq)，在室温下搅拌反应混合物3小时，LC-MS显示起始原料全部转化。用DCM稀释溶液，用水(3x20ml)洗涤。将水相提取到DCM中，将合并的DCM提取物用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，旋转蒸发浓缩，得到淡褐色的浆液，其不用额外纯化就可在下一步中使用。
将浆液溶于无水DCM(20ml)中，并将环丙基磺酰胺(1.1eq)加入到溶液中，而后加入DBU。在室温下将溶液搅拌17小时。用LC-MS监控反应。用DCM(70ml)稀释反应混合物，用10％枸橼酸(2x20ml)和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，旋转蒸发浓缩，用YCM硅胶(大约50g，用醚洗脱)柱色谱纯化，提供纯标题化合物白色泡沫(83％)，(M+H)+512。
步骤h环丙烷磺酸(17-羟基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-4-羰基)-酰胺(1h) 将乙氧基醚1g溶于THF/MeOH/水(1∶1∶1，总体积30ml)的混合物中，然后加入2.5ml浓盐酸，同时搅拌。在室温下搅拌反应过夜，用LC-MS监控。然后将反应混合物倒入饱和NaHCO3水溶液(50ml)中，通过旋转蒸发浓缩至一半体积。将得到的混合物用10％枸橼酸酸化，提取到DCM(3x20ml)中。将合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，旋转蒸发浓缩，高真空干燥过夜。该产物不用额外的纯化就可使用。
步骤i(2-氰基苯基)-氨基甲酸4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(1i) 将醇1h(11mg)溶于无水二氯甲烷(2ml)中，加入2-异氰苄腈(2eq)，而后加入三乙胺(5μl)。在室温下搅拌反应混合物过夜，而后旋转蒸发浓缩。用制备HPLC(水/乙腈(含有0.1％TFA)，梯度30-80)纯化残余物，得到标题化合物(5mg，27％)，[M+H]+598。
实施例2
(2-苯氧基苯基)-氨基甲酸4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(2) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用2-异氰基苯氧基苯酯代替2-异氰苄腈，使醇1h(11mg)反应，得到标题化合物(10mg，63％)，[M+H]+665。
实施例3
(2-甲氧基-苯基)-氨基甲酸4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(3) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用2-异氰基甲氧基苯酯代替2-异氰苄腈，使醇1h(11mg)反应，得到标题化合物(9mg，58％)，[M+H]+603。
实施例4
(3-氰基-5-甲氧基-苯基)-氨基甲酸4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(4) 将醇1h(15mg)溶于无水DCE中，加入20mg碳酸氢钠，而后加入2ml光气的甲苯溶液(20％)。将反应混合物在室温下搅拌3小时(根据LC-MS，全部转化为氯亚胺酯(chloroimidate))，而后旋转蒸发浓缩，高真空干燥过量的光气(1.5小时)。将干燥反应混合物转移到“微波”管瓶(2-5ml)中，与无水DCE(3ml)、3-氨基-5-甲氧基苄腈(2eq)、碳酸钾(9mg，1.5eq)、粉化分子筛(4
5mg)混合，在100℃、在微波中加热45分钟。将反应混合物通过硅胶短垫(洗脱液DCM，然后10％甲醇/DCM)。将得到的包含所需要氨基甲酸酯化合物的馏份合并，旋转蒸发浓缩，用YMC硅胶(15g，乙酸乙酯/石油醚1∶3，除去过量的苯胺，而后二氯甲烷，而后2％甲醇/二氯甲烷)柱色谱纯化，得到标题化合物粉末(15mg，8％)，[M+H]+628。
实施例5
3-(4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基氧基羰基氨基)-苯甲酸甲基酯(5) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用3-氨苯甲酸甲基酯代替3-氨基-5-甲氧基苄腈，使醇1h(20mg)反应，得到标题化合物(10mg，36％)，[M+H]+631。
实施例6
步骤a1-甲基-环丙烷磺酸(17-乙氧基甲氧基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-4-羰基)-酰胺(6a) 按照实施例1步骤g所描述方法，但使用甲基环丙基磺酰胺代替环丙基磺酰胺，使酸1f反应，得到标题化合物。
步骤b1-甲基环丙烷磺酸(17-羟基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-4-羰基)-酰胺(6b) 按照实施例1步骤h所描述方法处理乙氧基醚3a，得到标题化合物。
步骤c(5-氰基-2-甲氧基-苯基)-氨基甲酸13-甲基-4-(1-甲基-环丙基磺酰基氨基羰基)-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(6c) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用3-氨基-4-甲氧基苄腈代替3-氨基-5-甲氧基苄腈，使醇3b(30mg)反应，得到标题化合物(12mg，33％)，[M+H]+642。
实施例7
(3-甲基氨基甲酰基-苯基)-氨基甲酸13-甲基-4-(1-甲基-环丙基磺酰基氨基羰基)-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(7) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用3-氨基-N-甲基苯甲酰胺代替3-氨基-5-甲氧基苄腈，使醇3b(34mg)反应，得到标题化合物(8mg，19％)，[M+H]+644。
实施例8
(3-氯-苯基)-氨基甲酸4-(1-甲基环丙基磺酰氨基羰基)-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(5) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用3-氯苯胺代替3-氨基-5-甲氧基苄腈，使醇3b(35mg)反应，得到标题化合物(27mg，66％)，[M+H]+622。
实施例9
(3-二甲基氨基苯基)-氨基甲酸13-甲基-4-(1-甲基-环丙基磺酰基氨基羰基)-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(6) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用3-二甲基氨基苯胺代替3-氨基-5-甲氧基苄腈，使醇3b(80mg)反应，得到标题化合物(50mg，40％)，[M+H]+63。
实施例10
(3-甲氧基苯基)-氨基甲酸4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(10) 将醇1h(6mg)溶于无水二氯甲烷(2ml)中，加入3-异氰基甲氧基苯(2eq)，而后加入三乙胺(5μl)。在室温下搅拌反应混合物过夜，而后旋转蒸发浓缩。用制备HPLC(水/乙腈(含有0.1％TFA)，梯度30-80)纯化残余物，得到标题化合物(2mg，27％)，[M+H]+603。
实施例11
(3-苯氧基-苯基)-氨基甲酸4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(11) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用3-异氰基苯氧基苯代替3-异氰基甲氧基苯，使醇1h(10mg)反应，得到标题化合物(11mg，72％)，[M+H]+665。
实施例12
(3-氰基-苯基)-氨基甲酸4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(12) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用3-异氰基苄腈代替3-异氰基甲氧基苯，使醇1h(10mg)反应，得到标题化合物(10mg，75％)，[M+H]+598。
实施例13
(3-氰基苯基)-氨基甲酸13-甲基-4-(1-甲基环丙基磺酰基氨基羰基)-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(13) 按照实施例7步骤i所描述方法，但使用3-异氰基苄腈代替3-异氰基甲氧基苯，使醇3b(20mg)反应，得到标题化合物(13mg，51％)，[M+H]+612。
实施例14
(3-甲氧基-苯基)-氨基甲酸13-甲基-4-(1-甲基-环丙基磺酰基氨基羰基)-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(14) 按照实施例7步骤i所描述方法，使醇3b(18mg)反应，得到标题化合物(14mg，59％)，[M+H]+617。
实施例15
间甲苯基-氨基甲酸4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(15) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用3-异氰基甲苯代替3-异氰基甲氧基苯，使醇1h(17mg)反应，得到标题化合物(6mg，26％)，[M+H]+587。
实施例16
(2-氟-5-甲基-苯基)-氨基甲酸4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(16) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用4-氟-3-异氰基甲苯代替3-异氰基甲氧基苯，使醇1h(23mg)反应，得到标题化合物(14mg，46％)，[M+H]+605。
实施例17
[3-(2-甲基-噻唑-4-基)-苯基]-氨基甲酸4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(17) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用4-(3-异氰基苯基)-2-甲基-噻唑代替3-异氰基甲氧基苯，使醇1h(30mg)反应，得到标题化合物(19mg，49％)，[M+H]+670。
实施例18
(2-氰基-5-甲基-苯基)-氨基甲酸4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-17-基酯(18) 按照实施例1步骤i所描述方法，但使用2-氨基-4-甲基苄腈代替3-氨基-5-甲氧基苄腈，使醇1h(30mg)反应，得到标题化合物(25mg，70％)。
实施例19
步骤a(1-羟甲基-2-乙烯基环丙基)-氨基甲酸叔丁基酯(19a) 在0℃，向1-叔丁氧羰基氨基-2-乙烯基-环丙烷羧酸乙酯(0.51g，2.0mmol)的THF(10ml)溶液中加入2M硼氢化锂溶液(4ml，8mmol)。用TLC(7∶3己烷-乙酸乙酯，使用钼酸铵-硫酸铈(在10％硫酸水溶液中)染色)监控反应混合物，在室温搅拌过夜之后，使用10％枸橼酸水溶液(25ml，在0℃滴加)小心地猝灭反应。将获得的混合物用二氯甲烷(3x10ml)洗涤，将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。对残余物进行快速色谱，使用1∶1己烷-乙酸乙酯作为洗脱液，而后浓缩合适的馏份，真空干燥残余物过夜，得到产物无色浆液(0.407g，1.91mmol，96％)。
NMR数据(400MHz，CDCl3)1H，0.98(m，1H)，1.15(m，1H)，1.44(s，9H)，1.84(m，1H)，3.20(brs，1H)，3.60(dd，1H)，3.78(brm，1H)，5.10-5.26(m，3H)，5.70(m，1H)。
步骤b(1-甲酰基-2-乙烯基-环丙基)-氨基甲酸叔丁基酯(19b) 在室温，向醇19a(0.152g，0.71mmol)的二氯甲烷(5ml)搅拌溶液中加入Dess-Martin高碘烷(0.33g，0.78mmol)。用TLC监控反应(3∶2己烷-乙酸乙酯，UV-监控，使用钼酸铵-硫酸铈(在10％硫酸水溶液中)染色)。染色显示了相当纯净的反应，但UV监控显示了一些副产物。1小时之后，将获得的黄红色溶液用二氯甲烷(20ml)稀释，然后用1∶1的10％硫代硫酸钠水溶液/饱和碳酸氢钠水溶液(3x20ml)洗涤，然后干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。对残余物进行快速色谱，使用阶式梯度洗脱(乙酸乙酯/己烷20-30％)，而后浓缩合适的馏份，真空干燥残余物过夜，得到标题化合物无色油(0.054g，0.255mmol，36％)。
步骤c[1-(叔丁基氨基甲酰基-羟基-甲基)-2-乙烯基-环丙基]-氨基甲酸叔丁基酯(19c) 在氮气氛围中，向醛19b(0.054g，0.255mmol)和叔丁基异腈(0.043ml，0.38mmol)的二氯甲烷(1ml)和吡啶(0.083ml，1.02mmol)溶液中加入三氟乙酸(0.039ml，0.51mmol)。在室温30分钟之后，使反应混合物达到室温，另外搅拌2天。TLC(7∶3己烷-乙酸乙酯)和LC-MS监控显示了大约60％转化率，用乙酸乙酯(10ml)稀释反应混合物。将溶液用10％枸橼酸水溶液(3x5ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(3x5ml)连续地洗涤，然后干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。然后在室温用1∶1∶1 1M LiOH水溶液/THF/MeOH(1.5ml)将残余物处理10分钟，然后用10％枸橼酸水溶液稀释，接纳到乙酸乙酯中，然后干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。对残余物进行柱色谱，使用7∶3己烷-乙酸乙酯作为洗脱液，而后浓缩合适的馏份，真空干燥残余物过夜，得到产物无色固体(0.027g，0.086mmol，34％)。
NMR数据(400MHz，CDCl3)1H，1.24(m，1H)，1.33-1.40(m，10H)，1.44(s，9H)，1.87(m，1H)，3.65(d，1H)，5.21(m，3H)，5.50(d，1H)，5.89(m，1H)，7.03(brs，1H)。
然后如下获得本发明的式(I)化合物的α-羟基酰胺衍生物从标题化合物中除去N-BOC基团，而后按照实施例1步骤g所描述方法，得到的胺与酸例如酸1f偶合，而后分别按照实施例1步骤h和i中描述的方法，除去羟基保护基和进行甲氨酰化反应。
将α-羟基酰胺氧化为α-酮酰胺的一般方法 典型地，在室温，将α-羟基酰胺溶于二氯甲烷(20-30ml/g)中，然后加入Dess-Martin高碘烷(1.1当量)，通过TLC和LC-MS监控反应混合物。反应接近完成之后，将反应混合物用二氯甲烷稀释，而后用1∶1的10％硫代硫酸钠水溶液/饱和碳酸氢钠水溶液(3次)洗涤，然后干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。用柱色谱或制备LC纯化残余物。
实施例20
步骤a1-{[2-(己-5-烯基甲基氨基甲酰基)-4-羟基环戊烷羰基]氨基}-2-乙烯基环丙烷羧酸(20a) 将化合物1c(493mg，1.21mmol)溶于DMF(1ml)中，并转入20ml微波反应容器中。然后，加入LiOH水溶液(2M，10.5ml)和搅拌棒。将反应容器密封，剧烈摇动不混溶的浆液，而后插入微波谐振腔中。辐射反应30分钟，至130℃。将反应混合物冷却至40℃，用HCl水溶液(1M，24ml)将澄清溶液酸化至pH2，用EtOAc(20ml)提取3次。将收集的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤。真空蒸发溶剂，得到标题化合物(410mg，90％)。LC/MS＞95％，m/z(ESI+)＝379(MH+)。
步骤b2-(己-5-烯基-甲基-氨基-羰基)-4-羟基-环戊烷羧酸(1-环丙基磺酰基氨基羰基-2-乙烯基-环丙基)-酰胺(20b) 在室温下，将粗品酸20a(410mg，1.09mmol)溶于DMF(1.5ml)和DCM(4.5ml)中，而后加入EDAC(417mg，2.18mmol)。将混合物在室温下培养，同时搅拌。10分钟之后，加入DMAP(133mg，1.09mmol)，而后在室温下再培养20分钟。随后，加入预先混合的环丙烷磺酸酰胺(527mg，4.36mmol)和DBU(663mg，4.36mmol)的DMF(2ml)和DCM(2ml)溶液，而后在微波中加热至100℃，保持30分钟。将得到的红色溶液真空浓缩，并再溶于EtOAc(20ml)中。用1M HCl(aq)(3x10ml)和盐水(10ml)洗涤有机相，干燥(MgSO4)，过滤。真空蒸发溶剂，得到粗品磺酰胺，将其用色谱进一步纯化(硅胶，EtOAc/MeOH，97.5∶2.5)，得到标题化合物(403mg，77％)。LC/MS，＞95％，m/z(ESI+)＝482(MH+)。
使用上面描述的任何方法，例如实施例1步骤i或实施例10中描述的方法，通过进行甲氨酰化反应，而后按照实施例1步骤e中描述的闭环易位反应，可以由中间体20b获得式(I)的化合物。
实施例21
步骤a2-(1-乙氧羰基-2-乙烯基-环丙基氨甲酰基)-4-羟基-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(21a) 将Boc-保护4-羟基脯氨酸(4g，17.3mmol)、HATU(6.9g，18.2mmol)和1-氨基-2-乙烯基-环丙烷羧酸乙酯(按照WO03/099274中描述的方法制备)(3.5g，18.3mmol)溶于DMF(60ml)中，并在冰浴上冷却至0℃。加入二异丙基乙基胺(DIPEA)(6ml)。除去冰浴，将混合物在环境温度下放置过夜。然后加入二氯甲烷(～80ml)，用碳酸氢钠水溶液、枸橼酸、水、盐水洗涤有机相，用硫酸钠干燥。用快速色谱纯化(醚→7％甲醇/醚)，得到纯标题化合物(6.13g，96％)。
步骤b2-(1-乙氧羰基-2-乙烯基-环丙基氨甲酰基)-4-(4-硝基-苯甲酰氧基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(21b) 将化合物21a(11.8g，32.0mmol)和吡啶(27ml，305mmol)溶于DCM(200ml)中，并冷却至0℃，加入4-硝基苯甲酰氯(6.6g，35.6mmol)，在室温下搅拌溶液过夜。用NaHCO3(aq)、枸橼酸水溶液和盐水洗涤反应混合物，用MgSO4干燥，在硅胶上蒸发。用硅胶柱色谱纯化粗品(EtOAc/正庚烷50∶50)，得到11.84g(72％)标题化合物。
步骤c4-硝基-苯甲酸5-(1-乙氧羰基-2-乙烯基-环丙基氨甲酰基)-吡咯烷-3-基酯(21c) 将化合物21b(11.84g，22.9mmol)在溶于DCM(100ml)的TFA(30ml)中脱保护，而后用化学领域已知的方法后处理，得到标题化合物(9.37g，98％)。
步骤d4-硝基-苯甲酸5-(1-乙氧羰基-2-乙烯基-环丙基氨甲酰基)-1-[庚-6-烯基-(4-甲氧基-苄基)-氨基甲酰基]-吡咯烷-3-基酯(21d) 将胺21c(4.68g，11.2mmol)溶于THF(100ml)中，加入NaHCO3(s)(大约5ml)，而后加入光气-溶液(20％，在甲苯中，11.6ml，22.5mmol)。剧烈搅拌反应混合物1小时，而后过滤，蒸发，并再溶解在DCM(100ml)中。加入NaHCO3(s)(大约5ml)，而后加入庚-6-烯基-(4-甲氧基-苄基)-胺(3.92g，16.8mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜，过滤，在硅胶上蒸发。用硅胶柱色谱纯化粗品(EtOAc/正庚烷25/75)，得到标题化合物(6.9g，91％)。
步骤e14-(4-甲氧基-苄基)-18-(4-硝基-苯甲酰氧基)-2，15-二氧代-3，14，16-三氮杂-三环[14.3.0.0*4，6*]十九-7-烯-4-羧酸乙酯(21e) 将二烯21d(406mg，0.6mmol)溶于DCE(250ml)中，并脱气。加入Hoveyda-Grubbs催化剂第二代(26mg，0.042mmol)，将溶液加热至回流。3小时之后，蒸发溶液，并直接在下一步中使用。
步骤f18-羟基-14-(4-甲氧基-苄基)-2，15-二氧代-3，14，16-三氮杂-三环[14.3.0.0*4，6*]十九-7-烯-4-羧酸乙酯(21f) 将粗品化合物21e(445mg)溶于THF(20ml)、MeOH(10ml)和水(10ml)中。冷却至0℃后，加入1M LiOH(2ml)。1.5小时之后，水解完成，加入HOAc(1ml)，将溶液蒸发至大约10ml。加入水，用DCM(2x30mL)提取混合物。将收集的有机相用NaHCO3(aq)、水、盐水洗涤，用MgSO4干燥。用硅胶柱色谱纯化粗品(DCM/MeOH100/0-80/20)，得到标题化合物(201mg，67％)。
步骤g18-乙氧基甲氧基-14-(4-甲氧基-苄基)-2，15-二氧代-3，14，16-三氮杂-三环[14.3.0.0*4，6*]十九-7-烯-4-羧酸乙酯(21g) 在0℃，向醇21f(1.35g，2.70mmol，75％纯度)和N-乙基二异丙基胺(1.42ml，8.1mmol)的二氯甲烷(15ml)搅拌溶液中加入氯甲基乙基醚(0.5ml，5.4mmol)。在室温搅拌之后，将反应混合物冷却至0℃，加入更多的N-乙基二异丙基胺(1ml，5.7mmol)和氯甲基乙基醚(0.3ml，3.2mmol)，然后在室温额外搅拌16小时。然后将反应混合物直接施加在硅胶柱上，使用阶式梯度洗脱(乙酸乙酯/己烷50-80％)。将合适的馏份浓缩，得到标题化合物淡褐色浆液，经过静置，其结晶(0.8g，53％)。LR-MSC30H44N3O7的计算值558.实测值558[M+H]。
步骤h18-乙氧基甲氧基-14-(4-甲氧基-苄基)-2，15-二氧代-3，14，16-三氮杂-三环[14.3.0.0*4，6*]十九-7-烯-4-羧酸(21h) 将在1∶1∶1 THF-甲醇-1M LiOH水溶液(36ml)中的酯21g(0.775g，1.39mmol)的溶液在室温搅拌3.5小时，而后TLC(95∶5和9∶1二氯甲烷-甲醇)和LC-MS显示完全转化为羧酸。然后将反应混合物浓缩到体积的大约1/3，然后用水(10ml)稀释，使用10％枸橼酸水溶液(60ml)酸化至大约pH4，接着形成沉淀。用乙酸乙酯(3x25ml)洗涤混合物，用盐水(2x50ml)洗涤合并的有机层，然后干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。用甲苯(3x10ml)浓缩残余物，得到粗品标题化合物类白色泡沫(0.75g，定量)。LR-MSC28H40N3O7的计算值530.实测值530[M-H]。
步骤i化合物21i 在室温，向羧酸21h(大约1.39mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入N-乙基-N′-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺x HCl(0.32g，1.67mmol)，然后搅拌过夜，而后LC-MS显示酸完全转化为产物。然后用二氯甲烷(10ml)稀释反应混合物，用水(3x10ml)洗涤，然后干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到无色固体(粗品产率0.7g)，其可立即在下一步中使用。LR-MSC28H38N3O6的计算值512.实测值512[M+H]。
步骤j环丙烷磺酸[18-乙氧基甲氧基-14-(4-甲氧基-苄基)-2，15-二氧代-3，14，16-三氮杂-三环[14.3.0.0*4，6*]十九-7-烯-4-羰基]-酰胺(21j) 向粗品噁唑啉酮21i(0.328g，0.64mmol)的二氯甲烷(4ml)搅拌溶液中加入环丙基磺酰胺(0.117g，0.96mmol)和1，8-氮杂双环[5.4.0]-十一-7-烯(0.19ml，1.3mmol)，然后在室温搅拌过夜。用LC-MS监控反应混合物，然后用二氯甲烷(20ml)稀释，用10％枸橼酸水溶液(3x15ml)和盐水(1x15ml)连续地洗涤，然后干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到类白色泡沫。对残余物进行柱色谱，使用阶式梯度洗脱(乙酸乙酯/甲苯60-100％)，而后浓缩并干燥合适的馏份，得到标题化合物无色泡沫(0.27g，66％，3步)。
NMR数据(500MHz，DMSO-d6)1H，0.9-1.6(m，14H)，1.80(m，1H)，1.90(m，1H)，2.0-2.2(m，3H)，2.25(m，1H)，2.95(m，1H)，3.05(m，1H)，3.3-3.4(m，2H)，3.50(q，2H)，3.7-3.8(m，4H)，3.97(d，1H)，4.3-4.4(m，2H)，4.55(d，1H)，4.63(m，2H)，5.12(m，1H)，5.70(m，1H)，6.88(d，2H)，7.19(d，2H)，8.12(s，1H).LR-MSC31H45N4O8S的计算值633.实测值633[M+H]。
步骤k环丙烷磺酸(18-羟基-2，15-二氧代-3，14，16-三氮杂-三环[14.3.0.0*4，6*]十九-7-烯-4-羰基)-酰胺(21k) 将缩醛21j(0.038g，0.06mmol)的1∶1∶1 THF-甲醇-2M aq.盐酸(1.5ml)溶液在室温搅拌30分钟，然后加入额外的浓盐酸(0.1ml)，而后在室温搅拌过夜。然后使用饱和碳酸氢钠水溶液中和反应混合物，然后在硅胶上浓缩。对残余物进行快速色谱，使用9∶1乙酸乙酯/甲醇，得到无色泡沫(0.020g，73％)。LR-MSC20H29N4O6S的计算值453.实测值453[M-H]。
使用上面描述的任何方法，例如实施例1步骤i或实施例10中描述的方法，通过进行甲氨酰化反应，由中间体2 1k获得本发明的抑制剂。
实施例22
步骤a1-甲基-环丙烷磺酸[18-乙氧基甲氧基-14-(4-甲氧基-苄基)-2，15-二氧代-3，14，16-三氮杂-三环[14.3.0.0*4，6*]十九-7-烯-4-羰基]-酰胺(22a) 向噁唑啉酮21i(0.372g，0.73mmol)的二氯甲烷(4ml)搅拌溶液中加入环丙基甲基磺酰胺(0.147g，1.09mmol)和1，8-二氮杂二环[5.4.0]-十一-7-烯(0.22ml，1.45mmol)，然后在室温搅拌过夜。按照实施例19步骤j中描述的方法进行后处理和色谱，得到所需要的产物无色浆液，一旦静置，其开始结晶(0.31g，65％，3步)。NMR数据(500MHz，DMSO-d6)1H，0.92(m，2H)，1.1-1.6(m，15H)，1.78(m，1H)，1.88(m，1H)，2.0-2.1(m，3H)，2.26(m，1H)，3.02(m，1H)，3.2-3.4(m，2H)，3.49(q，2H)，3.7-3.8(m，4H)，3.95(d，1H)，4.3-4.4(m，2H)，4.54(d，1H)，4.6-4.7(m，2H)，5.06(m，1H)，5.69(m，1H)，6.88(d，2H)，7.19(d，2H)，8.22(s，1H)，11.23(s，1H)..LR-MSC32H47N4O8S的计算值647.实测值647[M+H]。
步骤b1-甲基-环丙烷磺酸(18-羟基-2，15-二氧代-3，14，16-三氮杂-三环[14.3.0.0*4，6*]十九-7-烯-4-羰基)-酰胺(22b) 将缩醛化合物22a(0.301g，0.465mmol)脱保护，使用2∶1∶0.1二氯甲烷/三氟乙酸/水(6.2ml)，在室温进行4小时，然后浓缩在硅胶上，快速色谱，使用9∶1乙酸乙酯/甲醇，得到产物无色泡沫(0.065g，30％)。LR-MSC21H33N4O6S的计算值469.实测值469[M+H]。
使用上面描述的任何方法，例如实施例1步骤i或实施例10中描述的方法，通过进行甲氨酰化反应，由中间体22b获得式(I)的化合物。
实施例23
步骤i6H-菲啶-5-羧酸4-环丙基磺酰基氨基羰基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.04，6]十八-7-烯-17-基酯(1i) 使用下列方法制备5，6-二氢-菲啶(1k)向配备有磁性搅拌棒和回流冷却器的500mL圆底烧瓶中放入6(5H)-菲啶酮(1000mg，5123μmol)、THF(250mL)(细悬浮液)。将烧瓶鼓入氮气，加入2M BH3-二甲硫醚复合物/THF(10mL)。将其回流搅拌24小时。TLC显示反应还不完全(1/1，乙酸乙酯/庚烷)。减压除去溶剂。加入水(50ml)和乙酸乙酯(100ml)。用乙酸乙酯(3x100mL)分离水层。合并有机层，干燥(硫酸钠)，过滤除去固体，减压除去溶剂。用硅胶柱色谱纯化，使用庚烷至50％乙酸乙酯/庚烷。收集最好的馏份，减压除去溶剂，得到类白色固体(270mg，产率29％)。LC-MS显示质量182(M+H)+。
将醇1h(15mg)溶于无水DCE中，加入20mg碳酸氢钠，而后加入2ml光气的甲苯溶液(20％)。将反应混合物在室温下搅拌3小时，而后旋转蒸发浓缩，高真空干燥过量的光气(1.5小时)。将干燥反应混合物转移到“微波”管瓶(2-5ml)中，与无水DCE(3ml)、5，6-二氢-菲啶(1k)(2eq)、碳酸钾(9mg，1.5eq)、粉化分子筛(4
5mg)混合，在100℃、在微波中加热45分钟。将反应混合物通过硅胶短垫(洗脱液DCM，然后10％甲醇/DCM)。将得到的包含所需要氨基甲酸酯化合物的馏份合并，旋转蒸发浓缩，用YMC硅胶柱色谱纯化(15g，乙酸乙酯/石油醚1∶3，除去过量的5，6-二氢-菲啶(1k)，而后二氯甲烷，而后2％甲醇/二氯甲烷)，得到标题化合物粉末。
实施例24 1-甲基环丙烷磺酸(17-羟基-13-甲基-2，14-二氧代-3，13-二氮杂-三环[13.3.0.0*4，6*]十八-7-烯-4-羰基)-酰胺(24) 按照实施例23中描述的方法，使如上所述制备的化合物(6b)与环胺(23k)反应，得到(23i)的甲基环丙基类似物。
式(I)化合物的活性 复制子试验 在细胞试验中，检验式(I)化合物在抑制HCV RNA复制中的活性。试验显示，式(I)的化合物针对细胞培养物中的HCV复制子功能显示了活性。该细胞试验基于双顺反子表达结构，如下列所描述Lohmann等人(1999)Science vol.285 pp.110-113，在多靶向筛选策略中具有下列所描述的改进Krieger等人(2001)Journal of Virology 754614-4624。实质上，该方法如下。
该试验使用稳定转染的细胞系Huh-7luc/neo(下文称为Huh-Luc)。这种细胞系藏有编码双顺反子表达结构的RNA，其包括在指针部分(FfL-荧光素酶)之前的HCV1b型的野生型NS3-NS5B区域，其由脑心肌炎病毒(EMCV)的内部核糖体进入位点(IRES)转译，以及选择性标记部分(neoR，新霉素磷酸转移酶)。该结构由HCV1b型的5′和3′NTRs(非翻译区)所界定。在G418(neoR)的存在下，复制子细胞的继续培养取决于HCVRNA的复制。表达HCV RNA的稳定转染的复制子细胞(其自动地复制并且达到高水平，尤其编码荧光素酶)用于筛选抗病毒化合物。
在试验和对照化合物(以各种浓度加入)的存在下，将复制子细胞涂覆在384孔平皿中。培养三天之后，通过试验荧光素酶活性(使用标准荧光素酶试验基质和试剂和Perkin Elmer ViewLuxTm ultraHTS微板成象仪)来测定HCV复制。在没有任何抑制剂的情况下，对照培养物中的复制子细胞具有高的荧光素酶表达。在Huh-Luc细胞上监控化合物对荧光素酶活性的抑制活性，对于每个试验化合物制作剂量反应曲线。然后计算EC50值，该值表示降低50％水平的所检测的荧光素酶活性所要求的化合物量，或更具体地说，表示遗传性连接的HCV复制子RNA的复制能力。
抑制试验 这种体外试验的目标是测定本发明的化合物对HCV NS3/4A蛋白酶复合物的抑制。该试验提供了本发明的有效化合物如何抑制HCVNS3/4A蛋白质分解活性的指标。
基本上按照Poliakov，2002 Prot Expression & Purification 25 363 371中描述的方法，测定全长丙型肝炎NS3蛋白酶的抑制。简要地说，在肽辅因子KKGSVVIVGRIVLSGK(
Department of MedicalBiochemistry and Microbiology，Uppsala University，Sweden)的存在下，螢光分析测定缩酚酸肽基质(Ac-DED(Edans)EEAbuφ[COO]ASK(Dabcyl)-NH2(AnaSpec，San José，USA))的水解。[Landro，1997 #Biochem 36 9340-9348]。在30℃，将酶(1nM)在50mMHEPES(pH7.5)、10mM DTT、40％丙三醇、0.1％正辛基-D-葡糖苷中用25μM NS4A辅因子和抑制剂培养10分钟，通过加入0.5μM基质来引发反应。将抑制剂溶于DMSO中，超声处理30秒，并旋转。在测定之间，将溶液在-20℃下存储。
将分析试样中的DMSO的最后浓度调节至3.3％。按照公开的方法[Liu，Analytical Biochemistry，1999，vol.267，pp.331-335]，通过内部过滤效应校正水解速度。使用竞争性抑制模型和Km的定值(0.15μM)，通过非线性回归分析(GraFit，Erithacus Software，Staines，MX，UK)评价Ki值。对于所有的测定，进行最少两个重复实验。
优选，本发明的化合物针对自然型病毒和突变株HCV病毒是有效的，特别是包括药物逃逸突变的病毒。药物逃逸突变是由于现有技术的抗病毒药的选择性压力而在患者中产生的那些突变，并且其对那些抗病毒药的抗药性增加。
按照WO2004/039970中描述的方法，测定本发明化合物所显示的对某些突变株HCV病毒的抑制。
在使用NS3蛋白酶抑制剂的HCV治疗的上下文中，A156T和D168V是特别相关的药物逃逸突变株，优选，本发明化合物针对这些突变株具有低的Ki值。
下列表1列出了按照上述实施例的任一项所制备的化合物。所试验化合物的活性也描述在表1中。值A、B、C、D、E和F的说明如下 -值A相当于EC50值＞10μM； -值B相当于EC50值在10μM和1μM之间； -值C相当于EC50值在0.99μM和200nM之间； -值D相当于EC50值在0.99nM和0.5nM之间； -值E相当于Ki＞100nM； -值F相当于Ki在100nM和30nM之间； -值G相当于Ki在29.9nM和0.1nM之间；
权利要求
1.式(I)的化合物
包括其立体异构体，其中
A 是-C(＝O)OR1，-C(＝O)-NH-SO2-R2，-C(＝O)C(＝O)NR3aR3b，-C(＝O)-NH-SO2-NR3aR3b，-C(＝O)NH-P(＝O)(OR4a)(R4b)或-P(＝O)(OR4a)(R4b)，其中
R1是氢；芳基；Het；任选被C1-6烷基取代的C3-7环烷基；或任选被C3-7环烷基、芳基或Het取代的C1-6烷基；
R2是芳基；Het；任选被C1-6烷基取代的C3-7环烷基；或任选被C3-7环烷基、芳基或Het取代的C1-6烷基；
R3a和R3b各自独立地是氢；任选被C1-6烷氧基、羟基、卤素、C3-7环烷基、芳基或Het取代的C1-6烷基；芳基；C2-6烯基；Het；任选被C1-6烷基取代的C3-7环烷基；或R3a和R3b与它们相连接的氮原子一起形成基团Het1；R3a还可以是C1-6烷氧基；
R4a是氢，C1-6烷基，C2-6烯基，C3-7环烷基，芳基，或任选被C3-7环烷基或芳基取代的C1-6烷基；
R4b是R4b′、OR4b′或NHR4b′；
R4b′是C1-6烷基，C2-6烯基，C3-7环烷基，芳基，或任选被C3-7环烷基或芳基取代的C1-6烷基；
X是N、CH，且当X携带双键时，它是C；
E是NR5，或当X是N时，则E是NR5或CR6aR6b；
R5是氢，C1-6烷基，C1-6烷氧基C1-6烷基或C3-7环烷基；
R6a和R6b独立地是氢或C1-6烷基，或R6a和R6b与它们相连接的碳原子一起形成C3-7环烷基；
n是3、4、5或6；
每个虚线-----独立地表示任选的双键；
R7是氢，或如果X是C或CH，R7还可以是C1-6烷基；
R8是下式的基团
R8a和R9a各自独立地是氢，C1-6烷基，C2-6烯基，C1-6烷氧基，羟基，卤素，多卤代C1-6烷基，氰基，氨基，单或C1-6二烷基氨基；
每个R9独立地是任选被C1-6烷氧基、羟基或卤素取代的C1-6烷基；C3-7环烷基；C2-6烯基；C1-6烷氧基；C3-7环烷基氧基；芳氧基；Het-O-；羟基；氰基；多卤代C1-6烷基；单或C1-6二烷基氨基；
每个R10独立地是氢，C1-6烷基，C2-6烯基，C1-6烷氧基，羟基，卤素，多卤代C1-6烷基，氰基，氨基，单或C1-6二烷基氨基；
每个芳基独立地是任选被一个、两个或三个选自下列的取代基取代的苯基卤素，羟基，硝基，氰基，羧基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷氧基C1-6烷基，C1-6烷基羰基，氨基，单或二C1-6烷基氨基，叠氮基，巯基，C1-6烷硫基，多卤代C1-6烷基，多卤代C1-6烷氧基，C3-7环烷基和Het1；
每个Het独立地是含有1、2、3或4个杂原子的5或6元饱和、部分不饱和或完全不饱和的杂环，杂原子各自独立地选自氮、氧和硫，所述杂环任选被一个、两个或三个取代基取代，该取代基各自独立地选自卤素，羟基，硝基，氰基，羧基，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6烷氧基C1-6烷基，C1-6烷基羰基，氨基，单或二C1-6烷基氨基，叠氮基，巯基，多卤代C1-6烷基，多卤代C1-6烷氧基，C3-7环烷基，Het1；
每个Het1独立地是吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，4-C1-6烷基-哌嗪基，4-C1-6烷基羰基-哌嗪基，和吗啉基，且其中吗啉基和哌啶基可以任选被一或两个C1-6烷基取代；
或其N-氧化物、可药用加成盐或可药用溶剂化物。
2.按照权利要求1的化合物，其中n是4或5。
3.按照权利要求1或2的化合物，其中相邻-(CH2)n-部分的-----是双键。
4.按照权利要求1、2或3的化合物，其中在具有X的五元环中的-----是单键，和R7是氢。
5.按照权利要求1-4的化合物，其中E是NR5。
6.按照权利要求1-5的化合物，其中X是N。
7.按照权利要求1-6的化合物，其中R8是下式的基团
R8是下式的基团
R8是下式的基团
8.按照权利要求1-6的化合物，其中R8是下式的基团
9.按照权利要求7或8的化合物，其中R9是C1-6烷基(例如甲基，乙基或异丙基)；C1-6烷氧基(例如甲氧基，乙氧基或异丙氧基)；芳氧基；Het-O-；氰基；或R9是C1-6烷氧基(例如甲氧基，乙氧基或异丙氧基)或芳氧基(例如苯氧基或4-甲氧基-苯氧基)。
10.按照权利要求7或8的化合物，其中R10是氢；C1-6烷基(例如甲基，乙基或异丙基)；C1-6烷氧基(例如甲氧基，乙氧基或异丙氧基)；氰基。
11.按照权利要求1-6的化合物，其中基团
具有下列结构
12.按照权利要求11的化合物，其中基团
具有下列结构
13.按照权利要求11或12的化合物，其中R8、R8a、R9是氢。
14.按照权利要求1-13的化合物，其中芳基是任选被C1-6烷氧基取代的苯基，且Het是吡啶基或嘧啶基。
15.按照权利要求1-14的化合物，其中A是-C(＝O)-NH-SO2R2，尤其是，其中R2是C3-7环烷基，苯基或基团Het，例如噻唑基或吡啶基，两个都任选被一个或多个例如一或两个选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、三氟甲基和卤素的取代基取代，或尤其是被一或两个选自甲基、氟和氯的取代基取代；或A是C(＝O)OR1，其中R1是氢或C1-C6烷基，例如甲基。
16.药学制剂，其包含作为活性组分的权利要求1-15的任一项所定义的式(I)化合物和载体。
17.权利要求1-15的任一项所要求的化合物作为药物的用途。
18.权利要求1-15的任一项所要求的化合物在制备药物中的用途，该药物用于治疗或预防病毒感染。
19.按照权利要求18的用途，其中病毒感染是HCV感染。
20.权利要求1-15的任一项所要求的化合物与其它抗病毒化合物的组合。
21.按照权利要求20的组合，其中其它抗病毒化合物是抗HCV化合物。
全文摘要
式I的化合物包括其立体异构体或其N-氧化物、可药用加成盐和可药用溶剂化物；用作HCV抑制剂；制备这些化合物的方法以及包含这些化合物作为活性组分的药物组合物。
文档编号C07D245/04GK101627020SQ200880004388
公开日2010年1月13日 申请日期2008年2月8日 优先权日2007年2月8日
发明者P·J·-M·B·拉博伊森, D·安托诺夫, S·阿耶萨艾瓦雷茨, A·K·G·L·贝尔弗拉格, C·E·D·琼森, D·C·麦克戈万, K·M·尼尔森, A·A·K·罗森奎斯特, B·B·萨穆尔森 申请人:泰博特克药品有限公司, 美迪维尔公司