抗干扰素诱导蛋白-10的抗体及其使用方法

专利名称：：抗干扰素诱导蛋白-10的抗体及其使用方法
技术领域：
：本发明大体上涉及完全人类抗干扰素诱导蛋白-10的单克隆抗体，以及上述抗体的使用方法。
背景技术：
：干护乙素i秀导蛋白-IO(IP画IO，CXCL10)是一种细月包表面(CXC)趋化因子，其经由所述的细胞表面趋化因子受体3(CXCR3)受体发出信号。干扰素诱导蛋白-10选择性的趋化Thl淋巴细胞以及单核细胞，并且抑制细胞因子刺激性造血祖细胞的增殖。干扰素诱导蛋白-10最初是作为干扰素(IFN)g诱导基因在单核细胞、成纤维细胞以及内皮细胞中;f皮识别出来的。至此以后已经证明，干扰素诱导蛋白-10mRNA同样受到脂多糖(LPS),白细胞介素画lb(IL-lb),月中瘤坏、死因子-a(TNF-oc),白细月包介素-12以及病毒的i秀导。已经一皮证明能够表达干护C素诱导蛋白-IO的另外的细胞类型包括活化的T-淋巴细胞，脾细胞，角化细胞，造骨细胞，星形胶质细胞以及平滑肌细胞。已经在各种疾病以及障碍中牵连到水平提升的干扰素诱导蛋白-10的表达。因此，存在一种对于以干扰素诱导蛋白-10的活寸生为革a向的治疗方法的需^t。
发明内容本发明提供了能够特异性的与干扰素诱导蛋白10(ip-io在这里也^皮称为cxclio)进4亍结合的完全人类单克隆抗体。范例性的单克隆抗体包括NI-0801,CF1N1R3P4—C7("C7")CF1H1R3P3—Gll("Gll");CF1H1R3P4_B5("B5，，)CF1A11R3P3_F3("F3");CC21R3P1—F1("CC—Fl，，)CB21R3P3—E5("E5");CC21R3P1_H6("H6");CC21R3P5_C5("C5");CB1R3P4—D3("D3，，)；CB2R2P4—C3("C3，，)；CC21R3P4—F4("F4");CC21R3P1—Cla("Cla，，)；CC21R3P3_C1("C1");CC21R3P1一E7("E7");CE7C1R3H8—J9("9");CB21R3P1—Fl("CB一F1");CC21R3P1—A2("A2");CB21R3P6—G7("G7");以及CC21R3P1—B9("B9")。或者，所述的单克隆抗体是一种在与NI-0801，C7,Gll,B5,F3,CC—Fl，E5，H6,C5,D3,F4,Cla,Cl，E7,J9,CB—Fl，A2,G7,C3，或者B9对目同的表<立上进4亍结合的4元体。抗体。本发明所述的人类干扰素i秀导蛋白-10抗体还包括这样的抗体所述的抗体包4舌重链可变氨基酸序列和/或轻《连可变氨基酸序列，其中所述的重链可变氨基酸序列与序列(seqidno)2,12,18,26，31,41,51,54，61,68，75，83，92，102，109，116,123或者137的氨基酸序列具有至少90%,92%,95%，97%,98%，99%或者更高的同一性，所述的轻4连可变氨基酸序列与序歹'J(SEQIDNO)4，14,23，28,33，43,56,63,70,77，85,94,104,111,118，125,139或者145的氨基酸序列具有至少90%,92%，95%，97%,98%，99%或者更高的同一'性。优选的，所述的三个重链互补决定区域(CDR)包括一种氨基酸序列，所述的氨基酸序列与下列序列中的每都具有至少90%,92%，95%，97%，98%，99%或者更高的同一')"生(i)重链可变的(VH)互补决定区域1序列，所述的序列选自由序列5，34，44，64,86,95以及127戶斤纟且成的纟且中；(ii)重《连可变的互补决定区域2序列，所述的序列选自由序列6，15,35，45，65,87，96以及128戶斤纟且成的纟且中；(iii)重《连可变的互4卜决定区i或3序列，戶斤述的序列选自由序歹'J7,21,36,46，52，57，66，78，88,97，105,129，132以及140所组成的组中；并且轻链带有三个互补决定区域，所述的互补决定区域包括一种氨基酸序列，所述的氨基酸序列与下列序列中的每都具有至少90%，92%,95%,97%,98%,99%或者更高的同一'性(iv)轻l连可变的(VL)互补决定区域1序列，所述的序列选自由序列8，16,37，47，71，79,98，106,112，119，133以及141戶斤纟且成的纟且中；(v)轻链可变的互补决定区域2序列，所述的序列选自由序歹'J9,38，48，58，72,80，89,99,113,120以及142所组成的组中；以及(vi)轻链可变的互补决定区域3序列，所述的序歹'J选自由序歹'J10,24，29,39,49，59,73,81，90,100，107，114，121,126以及143所组成的组中。在一种实施方式中，本发明所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体包括可变的重链区域以及轻链可变区域，其中所述的重链区域包括如序列2所示的氨基酸序列，而所述的轻链区域包括如序列4所示的氨基g臾序列。本发明所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体包括重链可变的互4卜决定区i或1,重链可变的互补决定区i或2,以及重链可变的互补决定区域3，其中所述的重链可变的互补决定区域1包括如序列5所示的氨基酸序列；所述的重链可变的互补决定区域2包4舌如序列6所示的氨基酸序列；而所述的重链可变的互4卜决定区域3包括如序列7所示的氨基酸序列。所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体包括轻链可变的互补决定区域1,轻链可变的互补决定区i或2，以及举圣链可变的互^卜决定区i或3，其中所述的轻《连可变的互补决定区域1包括如序列8所示的氨基酸序列；所述的轻《连可变的互补决定区i或2包4舌如序列9所示的氨基酸序列；而所述的轻链可变的互补决定区域3包括如序列10所示的氨基酸序列。在一种优选的实施方式中，所述的人类干护C素i秀导蛋白-lO抗体包4舌重《连可变的互^卜决定区i或1,重《连可变的互^卜决定区^戈2，以及重链可变的互补决定区域3,其中所述的重链可变的互补决定区域1包括如序列5所示的氨基酸序列；所述的重链可变的互4卜决定区i或2包4舌如序列6所示的氨基酸序列；而所述的重链可变的互补决定区域3包括如序列7所示的氨基酸序列，并且包括轻链可变的互补决定区域1,轻链可变的互补决定区域2，以及轻《连可变的互补决定区域3,其中所述的轻链可变的互补决定区域l包4舌如序歹'J8所示的氨基酸序列；所述的轻链可变的互补决定区域2包括如序列9所示的氨基酸序列；而所述的轻链可变的互补决定区域3包括如序列IO所示的氨基酸序列。优选的，所述的人类干护C素i秀导蛋白-lO抗体^皮编排成同型免疫球蛋白(IgG)。更加优选的，所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体—皮编排成同型免疫5求蛋白l(IgGl)。一种范例性的免疫3求蛋白1格式的抗体是所述的免疫球蛋白1格式的NI-0801抗体，所述的抗体包括如序列135所示的重链序列以及如序列134所示的车至《连序列，^p下所示>NI-0801轻链氨基酸序列(序歹'J134)>NI-0801重链氨基酸序列QQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(序列135)与这里描述的所述人类干扰素诱导蛋白-10抗体最密切的种系如下文表1中所示表l.与人类干扰素诱导蛋白-10抗体最密切的种系<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>在另外方面，本发明提供了用于治疗，预防或者緩解免疫相关性障碍的症状的方法，所述的方法通过向宿主施用一种人类干扰素诱导蛋白-10抗体来实现。例如，所述的人类干4尤素诱导蛋白-10抗体蜂皮用来治疗，预防或者》爰解与自身免疫性疾病或者炎性障碍相关的症状。任选的，对所述的宿主进一步施用第二种试剂，所述的第二种试剂例如，但不局限于，一种抗细胞因子试剂或者抗趋化因子试剂，所述的试剂能够识别细月包因子，例如白细月包介素1(IL-1)，白细月包介素2,白细l包介素4,白细月包介素6，白细月包介素12,白细月包介素13，白细月包介素15，白细i包介素17,白细月包介素18，白细月包介素20,白细月包介素21，白细月包介素22，白细月包介素23,白细月包介素27以及白细胞介素31,和/或趋4t因子例如巨噬细胞炎性蛋白1(MIP1)oc,巨噬细胞炎性蛋白1(3,正常T细胞表达和分泌调节因子(RANTES)，单核细胞趋化蛋白l(MCPl),干扰素诱导蛋白-10,干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC),干扰素诱生单核因子(MIG),基质细胞衍生因子(SDF)以及神经趋4匕蛋白(fractalkine)。所述的宿主正患有或者容易患有一种免疫相关性障碍，例如，一种自身免疫性疾病或者一种炎性障碍。^L选的，所述的宿主是哺乳动物，并且更加优选的，所述的宿主是人类。附图1A-附图3B是一系列的曲线图，描述的是本发明所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体对于人类干扰素诱导蛋白-10诱导的钙通量(附图1A-1B)或者细胞趋化现象(附图2A-2B)所产生的剂量依赖性中和活性。附图2A-2B描述的是其对于重组人类干扰素诱导蛋白-10所产生的剂量依赖性中和活性，而附图3A-3B描述的是其对于天然人类干扰素诱导蛋白-10所产生的剂量依赖性中和活性。附图4是图表，描述的是在粘多糖(GAG)中所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体与人类干扰素诱导蛋白-10进行结合的能力。附图5是示意图，将抗体CF1N1R3P4—C7的免疫J求蛋白重链可变基因与人类种系(生殖细月包系)DP-49或者IGHV3-30进4亍了比较。与IGHV3-30相比，所述的C7重链可变区域具有5处突变，三处在所述的互补决定区域1中，一处在互补决定区域2中并且一处在所述的骨架区域四中。与IGLV6-57相比，所述的C7轻链可变区域具有4处突变，全部位于所述的互补决定区域1中。上述发生突变的氨基酸残基在附图5中用方才匡进4亍了标记。附图6A以及6B是一组曲线图，描述的是抗体CC21R3P1—Fl以及NI-0801对于人类干扰素诱导蛋白-10的亲和性。附图7是曲线图，描述的是所述的NI-0801抗体与干护0素诱_导蛋白-10的交叉反应原性，其中所述的干扰素诱导蛋白-10来自于各种不同的种类以及其他的人类趋化因子。附图8A-8B是两个曲线图，描述的是重组人类干扰素诱导T细胞趋化因子(hITAC),人类干扰素i秀生单核因子(hMIG)以及人类干扰素诱导蛋白-10诱导表达人类细胞表面趋化因子受体3(hCXCR3)的L1.2细胞的细胞趋化现象的能力，以及所述的NI-0801抗体中和这些趋化因子的活性的能力。附图9是图表，描述的是NI-0801对于干扰素诱导蛋白-10的中和潜力，其中所述的干扰素诱导蛋白-10来自于各种不同的种类。附图10是示意图，描述的是来自于几个种类的干扰素诱导蛋白-10的蛋白序列的比对。附图11是曲线图，描述的是所述的NI-0801抗体与兔干扰素诱导蛋白-10的变异形式进行结合的能力。具体实施例方式本发明提供了对干扰素诱导蛋白-10(IP-IO，CXCL10)具有特异性的完全人类单克隆抗体。所述的抗体在这里被统称为人类干扰素诱导蛋白-10抗体。所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体与干扰素i秀导蛋白-10进4亍特异性的结合。正如本发明中所^吏用的，所述的术语"对……具有特异性"，"特异性的结合"，"直接抵抗，，(及其所有的语法上的变形)当用在抗体的情况中时可以互换使用，其中所述的抗体能够识别一种干扰素i秀导蛋白-10表位并且与之进行结合，所述的结合发生在当所述的结合平衡常数(Kd)<1孩史摩时，例3口，<100纟内摩，4尤选<10纳摩，并且更力口优选《1纳摩。例如，这里提供的所述的人类干护G素诱导蛋白-IO抗体呈现出在大约《200匹摩(pM)至大约1匹摩之间的结合平衡常数。所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体是，例如，干扰素诱导蛋白-10拮抗剂或者抑制剂，其能够调节干扰素诱导蛋白-10的至少一种生物学活性。干4尤素"i秀导蛋白-10的生物学活性包括，例如，结合所述的干护C素i秀导蛋白-lO受体(细l包表面趋化因子受体3),干扰素诱导蛋白-10所诱导的钙通量，干护G素诱导蛋白-IO所-秀导的细月包的趋化现象，干4尤素诱导蛋白-10结合粘多糖，以及干扰素诱导蛋白-10的低聚作用。例如，所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体通过部分或者全部阻滞干扰素i秀导蛋白-10与干扰素诱导蛋白-10受体(细胞表面趋化因子受体3)进行结合，13乂人而完全或者部分抑制干扰素诱导蛋白-10的活性。在所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体存在的情况下，当所述的千扰素诱导蛋白-10的水平—皮降低了至少95%,例如，被:降Y氐了96%,97%，98%,99%或者100%时，我们认为所述的干^尤素"i秀导蛋白-10抗体完全抑制了干扰素诱导蛋白-10的活性，这种降低是跟在不与本发明所描述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体进行结合时所述的干扰素诱导蛋白-10的水平相比较而言的。在所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体存在的情况下，当所述的干扰素诱导蛋白-10的水平被降低了少于95%,例如，被降低了10%,20%,25%，30%，40%,50%,60%,75%，80%,85%或者90%时，我们i^为所述的干扰素诱导蛋白-10抗体部分抑制了干扰素"i秀导蛋白-10的活性，这种降低是跟在不与本发明所描述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体进行结合时所述的干扰素诱导蛋白-10的水平相比较而言的。本发明所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体是通过使用干扰素诱导蛋白-10对动物进行免疫来制备的，所述的干扰素诱导蛋白-10例如是，鼠科动物或者人类干扰素i秀导蛋白-lO或其免疫原性片4史，书f生物或者变体。或者，使用^皮载体转染的细月包对所述的动物进4亍免疫，其中所述的载体含有编码干护O素i秀导蛋白-lO的核酸分子，这4羊一来干扰素诱导蛋白-10^皮表达并且与所述的-故转染细胞的表面相关|^关。或者，通过筛选文库的方式获得所述的抗体，其中所述的文库中含有用于与干扰素诱导蛋白-10进行结合的抗体或者抗原结合区域序列。例如可以在噬菌体中制备这样的文库，将其作为蛋白或者肽与噬菌体的外壳蛋白发生融合，其中所述的外壳蛋白在组合的噬菌体颗粒表面进行表达，并且在所述的噬菌体颗并立中含有所述的编码DNA的序列(即，"噬菌体展示文库")。本发明所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体包括，例如，下述表2中所示的重链互补决定区域(CDR),表3中所示的轻链互^卜决定区i或，以及它们的组合。表2,来自于与干扰素诱导蛋白-10进行结合并且对其进行中和的抗体克隆的重链可变的互补决定区域序列<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表3.来自于与干扰素诱导蛋白-IO进行结合并且对其进行中和的抗体克隆的轻链可变的互补决定区域序列_轻—链互补决定区域3克隆ID^!i互补决定区域l轻链互补决定区域2N!-卿1CF1N1R3P4—C7CF1H1R3P3—G11CF1A11F13P3一F3CF1H1R3P4—B5CC21R3P1—F1CC21R3P1—B9CB21R3P3一E5CC21R3P1—H6CC21R3P5—C5CB1R3P4一D3CB2B2P4—C3CC21R3P4一F4CC21R3P1一ClaCC21FI3P3一C1CC21R3P1—E7CE7C1R3H8—CB21R3P1一F1ClC21R3P1一A2GB21R3P6—G7TGSGGS......IASNYVQ(SEQNOB)TGSGGS......工DRNYV((SEQNO16)TGSGGS……IDRNYVQ(SEQNOIS)TGSGGS......IEHRNYVQ(SEQNOIS)TGSGGS......IDKWYVQ<SEQNO16)TGSGGS......IDRNWQ(SEQNO16)QGDS........LTSYYAS(SEQNO141)Td!SSGS......工ASNYVQ(SEQNO133)GGDN........IGRKSVH(SEQ.NO98)GGSS........IESKSVH(SEQNO119)QGDS........LRSYYAS(SEQNO37)SGSSSN......工GSNTVN(SEQNO47>GGNN........工GDKSVQ(SEQNO112)GGNN........工GSRSVH<SEQNO79)GGNN........IGSKSVH(SEQMO106)SGSSSW......工GSNTVN(SEQNO47)SGSSSN......工GSNTVNISEQNO47)QGDS........IiRSYYAS(SEQNO37)SGSSSN......工GSDTVN《SEQNO71)SGSSSN......工GSNTVN(SEQNO47)_ED.....《-S￡QNOED.....(SEQNOED，…，，(SEQNOED.....(SEQNOEiD.....(SEQNOED.....(SEQMOGN.....(S印NOe:d.....(SEQNODD.....(SEQNOKD.....(SEQNOGK.....(SEQNONN.....(SEQNODD.....(SEQNOTO.....(SEQNOYD,…'(SEQ恥TN.....(SEQNOTN.....《SEQ加.....<SEQNONN.....(SEQNONN.....(SEQNONQRPS9)NQRPS9)NQRPS9)MQRPS'"NQRPS9)NQ沃PS3)DNRPS"2)DQ鹏58)99)SNRPS120》NNRPS38)DQRPS在8)SD妙S113)SDRPS80)SDRPS80)89)恥RPS89》NNRPS38>3STQRPS72》DQRPS48)QSYDPLPV........WV(SEQNO10)QSYDPLPV,......WV(SEQNO10)QSYDPIiPV........WV(SEQNO10)QSYDS工NL,......WV(S抑NO29》QSYVETPE........WVQSYDSINIj........WV(SEQNO29)GSRDSSGYQ.......W(SEQNO143)QSYVSSK.........WV(SEQNO59)QVWDSSIDHS......WV(SEQNO100)QVWDSSTG........W(SEQNONSRDSSGNH.......W《SEQNO39)ASWDDSLNG.......RV(SEQNO49)QVWDSSSDHPE.....W(SEQNO114)QVWOTSSGH.,.....YV<SEQNO81)QVWDSSSDH.......W(SEQNO107)AAWDDSLNGN......W(SEQNO90》AAWDDSSEPR......W(SEQ加126)NSRDSSGNH,,____VL(SEQ加工58>AAWDDSLNG.......I*V(SEQNO73)ASWDDSLNG，…'….RV(SEQNO49>_一种范例性的人类干护G素i秀导蛋白-lO单克隆抗体是这里所描述的NI-0801抗体。如下文中所示，所述的NI-0801抗体包括重链可变区域(序列2)以及轻4连可变区域(序列3),其中所述的重链可变区域是由如序列1所示的核酸序列进^亍编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列4所示的核酸序列进行编码的。>NI-0801重4连可变区域的核酸序列GTCTCGAGT(序列1)>NI-0801重4连可变区i或的氨基酸序列(序列2)>NI-0801轻链可变区纟或的核酸序列>NI-0801轻《连可变区i或的氨基酸序歹'JRFSGSIDSSSNSASLTISGLKTEDEADYYCQSYDPLPVWVFGGGTKLTVL(序歹寸4)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat,EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五X反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国^:康禾口人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国J文府出片反局))。所述的NI-0801抗体的重链互补决定区域具有下述序歹'J:NSGIH(序歹'J5);VISYDGSNKYYADSVKG(序列6);以及LRDNAEYTDY(序列7)。所述的NI-0801抗体的轻链互补决定区i或具有下述序列TGSGGSIASNYVQ(序歹'J8);EDNQRPS(序歹'J9);以及QSYDPLPVWV(序歹'J10)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CF1N1R3P4_C7("C7")抗体。如下文中所示，所述的C7抗体包括重链可变区域(序歹'j12)以及轻链可变区域(序列14),其中所述的重链可变区域是由如序列ll所示的核酸序列进4亍编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列13所示的核酸序列进行编码的。>CF1N1R3P4C7重链可变区域的核酸序列TCTCGAGTG(序歹'J11)>CF1N1R3P4C7重链可变区域的氨基酸序列S(序列12)>CF1N1R3P4C7轻链可变区域的核酸序列CCGGTGTGGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTCACCGTCCTA(序歹'J13)>CF1N1R3P4C7轻《连可变区域的氨基酸序列18包含所述氨基酸的互补决定区i或(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat,EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五X反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国<建康禾口人类月良务吾卩)，USGovernmentPrintingOffice(美国3文府出片反局))。所述的C7抗体的重链互补决定区i或具有下述序列NSGIH(序歹'J5);VISYDGSNKFYADSVKG(序歹'J15);以及LRDNAEYTDY(序列7)。所述的C7抗体的轻《连互补决定区域具有下述序列TGSGGSIDSNYVQ(序歹'J16);EDNQRPS(序歹'J9);以及QSYDPLPVWV(序歹'J10)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CF1H1R3P3—Gil("Gil")抗体。如下文中所示，所述的Gil抗体包括重4连可变区域(序歹'J18)以及轻链可变区域(序列20)，其中所述的重链可变区域是由如序列17所示的核酸序列进4亍编码的，而所述的轻《连可变区域是由如序列19所示的核酸序列进4于编》马的。>CF1H1R3P3Gll重链可变区域的核酸序列GTCTCGAGT(序歹'J17)>CF1H1R3P3Gll重《连可变区域的氨基酸序列ADSVKGR—FTISRDNSIANTLYLOMNSLRAEDTAVYYCAKLRDNGE.YLDYWGOGTLVTVSS(序列18)>CF1H1R3P3Gil轻《连可变区域的核酸序歹'jCCGGTGTGGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTCACCGTCCTA(序列19)>CF1H1R3P3Gil轻链可变区域的氨基酸序歹寸包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat,EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国4建康和人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国政府出片反局))。所述的Gil抗体的重链互补决定区i或具有下述序列NSGIH(序歹'J5);VISYDGSNKFYADSVKG(序歹'J15);以及LRDNGEYLDY(序列21)。所述的Gil4元体的轻《连互4卜决定区:t或具有下述序列TGSGGSIDSNYVQ(序歹'J16);EDNQRPS(序歹'J9);以及QSYDPLPVWV(序歹'J10)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CF1H1R3P4—B5("B5")抗体。如下文中所示，所述的B5抗体包4舌重《连可变区i或(序列18)以及轻链可变区域(序列20)，其中所述的重《连可变区域是由如序列17所示的核酸序列进行编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列19所示的核酸序列进行编码的。>CF1H1R3P4B5重链可变区域的核酸序列GTCTCGAGT(序歹'J17)>CF1H1R3P4B5重《连可变区域的氨基酸序列ADSVKGRFTISRDNSIANTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKLRDNGEYLDYWG(5GTLVTVSS(序列18)>CF1H1R3P4B5轻链可变区域的核酸序列CCTGAGTGGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTCACCGTCCTAG(序歹'J22)>CF1H1R3P4B5轻链可变区域的氨基酸序列RFSGSIDSSSNSASLTISGLKTEDEADYYCQSYVETPEWVFGGGTKLTVL(序歹'J23)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自'然》342:877-883中发表的文章；Kabat，EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五片反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国Y建康和人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国iE支府出X反局))。所述的B5抗体的重《连互补决定区i或具有下述序列'.NSGIH(序歹'J5);VISYDGSNKFYADSVKG(序歹'J15);以及LRDNGEYLDY(序列21)。所述的B5抗体的轻《连互谇卜决定区i或具有下述序列TGSGGSIDSNYVQ(序歹'J16);EDNQRPS(序歹'J9);以及QSYVETPEWV(序歹'J24)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CF1A11R3P3—F3("F3")#元体。3口下文中所示，所述的F34元体包4舌重《连可变区i或(序列18)以及4至链可变区i或(序列28)，其中所述的重《连可变区域是由如序列17所示的核酸序列进行编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列27所示的核酸序列进4于编》马的。>CF1A11R3P3F3重《连可变区域的核酸序列GTCTCGAGT(序列17)22>CF1A11R3P3F3重《连可变区i成的氨基酸序列(序列18)>CF1A11R3P3F3轻《连可变区域的核酸序列ATCTTTGGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTAGG(序歹'J27)>CF1A11R3P3F3轻《连可变区域的氨基酸序歹ll包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat，EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国#1康和人类月l务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国J支府出片反局))。所述的F3抗体的重链互补决定区i或具有下迷序列NSGIH(序歹'J5);VISYDGSNKFYADSVKG(序歹'J15);以及LRDNGEYLDY(序列21)。所述的F3抗体的轻链互补决定区i或具有下述序列TGSGGSIDSNYVQ(序歹'J16);EDNQRPS(序歹'J9);以及QSYDSINLWV(序歹'J29)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CB1R3P4_D3("D3")抗体。如下文中所示，所述的D3抗体包括重链可变区域(序列31)以及轻链可变区域(序列33)，其中所述的重链可变区域是由如序列30所示的核酸序列进行编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列32所示的核酸序列进4亍编；马的。>CB1R3P4D3重链可变区域的核酸序列CCGTCTCGAGT(序歹'J30)>CB1R3P4D3重链可变区域的氨基酸序列VSS(序歹ij31)>CB1R3P4D3轻链可变区域的核酸序列GGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(序列32)>CB1R3P4D3轻链可变区域的氨基酸序列SGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCNSRDSSGNHWFGGGTKLTVL(序歹'J33)24包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat，EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国1"建康和人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国政府出版局))。所述的D3抗体的重链互补决定区i或具有下述序歹'J:SYGMH(序歹'J34);VISYDGSIKYYADSVKG(序列35);以及AGYSTDWHPDY(序列36)。所述的D3抗体的轻链互补决定区域具有下述序列QGDSLRSYYAS(序歹'J37);GKNNRPS(序歹'J38);以及NSRDSSGNHVV(序列39)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CB2R2P4—C3("C3")抗体。如下文中所示，所述的C3抗体包括重链可变区域(序列41)以及轻链可变区域(序列43),其中所述的重链可变区域是由如序列40所示的核酸序列进行编码的，而所述的轻《连可变区i或是由如序列42所示的核S臾序列进4亍编》马的。>CB2R2P4C3重链可变区域的核酸序列CCACGGTCACCGTCTCGAGT(序歹'J40)25>CB2R2P4C3重链可变区域的氨基酸序列SS(序歹'J41)>CB2R2P4C3轻《连可变区域的核酸序列ATGGTCGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAG(序歹'J42)>CB2R2P4C3轻链可变区域的氨基酸序列FSGSKSGTSGSLVISGLQSEDEADYYCASWDDSLNGRVFGGGTKLTVL(序列43)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat,EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国#1康和人类月l务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国j!文府出片反局))。所述的C3抗体的重《连互补决定区i或具有下述序列TSGMSVI(序歹'J44);RIDSDDEKHYNTSLKT(序列45);以及LRAGSGPYVFDS(序列46)。所述的C3抗体的轻《连互补决定区i或具有下述序列SGSSSNIGSNTVN(序歹'J47);NNDQRPS(序歹'j48);以及ASWDDSLNGRV(序歹'J49)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CB21R3P1—Fl("CB_F1")抗体。如下文中所示，所述的CB—Fl抗体包括重链可变区域(序列51)以及轻链可变区域(序列145)，其中所述的重《连可变区域是由如序列50所示的核酸序列进行编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列144所示的核酸序列进4亍编；马的。>CB21R3P1Fl重链可变区域的核酸序列ACCCTGGTCACCGTCTCGAGT(序歹'J50)〉CB21R3P1Fl重链可变区域的氨基酸序列YADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ]ASLRAEDTAIYYCARVMGTDPHSYYYMDVWGKGTLVTVSS(序歹ij51)>CB21R3P1Fl轻《连可变区域的核酸序歹'JGCTTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(序列144)>CB21R3P1Fl轻链可变区域的氨基酸序列SGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCNSRDSSGNHVLFGGGTKLTVL(序歹']145)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat,EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五W反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国康,口人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国iE文府出片反局))。所述的CB—Fl抗体的重链互#卜决定区i或具有下述序歹'J:SYGHM(序歹'J34);VISYDGSIKYYADSVKG(序歹'J35);以及VMGTDPHSYYYMDV(序列52)。所述的CB—Fl抗体的轻《连互补决定区域具有下述序列QGDSLRSYYAS(序歹ll37);GK丽RPS(序歹'J38);以及NSRDSSGNHVL(序歹'j39)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CB21R3P3—E5("E5")抗体。如下文中所示，所述的E5抗体包括重链可变区域(序列54)以及轻链可变区域(序列56)，其中所述的重《连可变区域是由如序列53所示的核酸序列进4亍编码的，而所述的轻《连可变区域是由如序列55所示的核酸序列进4亍编》马的。>CB21R3P3E5重链可变区域的核酸序列TCGAGT(序歹ij53)28>CB21R3P3E5重链可变区域的氨基酸序列(序列54)>CB21R3P3E5轻《连可变区域的核酸序列AAGTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(序歹'J55)>CB21R3P3E5轻链可变区域的氨基酸序歹'JRFSGSIDSSSNSASLTISGLRTEDEADYYCQSYVSSKWVFGGGTKLTVL(序歹'J55)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat,EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五X反，USD印artmentofHealthandHumanServices(美国#1康和人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国iE支府出X反局))。所述的E54元体的重《连互补决定区i或具有下述序列SYGHM(序歹'J34);VISYDGSIKYYADSVKG(序歹'J35);以及APDGHQLDY(序列57)。所述的E5抗体的轻《连互补决定区i或具有下述序列TGSSGSIASNYVQ(序歹'J133);EDDQRPS(序歹'J58);以及QSYVSSKWV(序歹'J59)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CB21R3P6_G7("G7")抗体。如下文中所示，所述的G7抗体包括重链可变区域(序列61)以及轻链可变区域(序列63)，其中所述的重链可变区域是由如序列60所示的核酸序列进行编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列62所示的核酸序列进行编码的。>CB21R3P6G7重链可变区域的核酸序歹'j歹'J60)>CB21R3P6G7重链可变区域的氨基酸序列MDVWGQGTLVTVSS(序列61)〉CB21R3P6G7轻链可变区域的核酸序列ATGGTCGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(序列62)〉CB21R3P6G7轻链可变区域的氨基酸序列FSGSKSGTSGSLVISGLQSEDEADYYCASWDDSLNGRVFGGGTKLTVL(序列63)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat,EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国Y建康禾口人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国if夂府出jf反局))。所述的G7抗体的重链互补决定区i或具有下述序列SFSIT(序歹ij64);EITPMFGIANYAQKFOG(序列65);以及DGRFDVSDLLTDKPKVTINYNGMDV(序歹'J66)。所述的G7抗体的轻链互补决定区i或具有下述序列SGSSSNIGSNTVN(序歹'J47);NNDQRPS(序歹'J48);以及ASWDDSLNGRV(序列49)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CC21R3P1—A2("A2")抗体。如下文中所示，所述的A2抗体包括重链可变区域(序列68)以及轻链可变区域(序列70),其中所述的重链可变区域是由如序列67所示的核fi吏序列进4亍编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列69所示的核酸序列进行编码的。>CC21R3P1A2重链可变区域的核酸序列GCCAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGT(序列67)31>CC21R3P1A2重链可变区域的氨基酸序列GTLVTVSS(序歹'J68)〉CC21R3P1A2轻链可变区域的核酸序列GGTCTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTA(序歹'J69)>CC21R3P1A2轻《连可变区域的氨基酸序歹'J包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat,EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五X反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国<建康和人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国政府出版局))。所述的A2抗体的重链互补决定区i或具有下述序歹'J:DTYMN(序歹'J127);SIYSDDSTYYADSVKG(序歹'J128);以及DKEYVTSTGGAYYYFYYMDV(序列129)。所述的A2抗体的轻链互补决定区域具有下述序列SGSSSNIGSDTVN(序列71);NNNQRPS(序歹'J72);以及AAWDDSLNGLV(序歹'J73)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CC21R3P1_C1A("Cla")抗体。如下文中所示，所述的Cla抗体包括重链可变区域(序列75)以及轻链可变区域(序列77)，其中所述的重链可变区域是由如序列74所示的核酸序列进行编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列76所示的核S臾序列进4亍编；马的。>CC21R3P1C1A重链可变区域的核酸序列GT(序列74)>CC21R3P1C1A重链可变区域的氨基酸序列(序歹'J75)>CC21R3P1C1A轻链可变区域的核酸序列TCTTCGGAACTGGGACCAAGGTCACCGTCCTA(序列76)>CC21R3P1C1A轻链可变区域的氨基酸序列GSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTSSGHYVFGTGTKVTVL(序列77)包含所述氨基酸的互补决定区i或(CDR)如Chothia等人以《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat,EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五X反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国<建康禾口人类月艮务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国政府出版局))。所述的Cla抗体的重链互补决定区i或具有下述序列SYGMH(序歹'J34);VISYDGSNKYYADSVKG(序列6);以及DEFDAFDI(序列78)。所述的Cla抗体的轻链互补决定区域具有下述序歹寸GGNNIGSRSVH(序歹'J79);YDSDRPS(序歹'J80);以及QVWDTSSGHYV(序列81)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CC21R3P3_C1("CI")抗体。如下文中所示，所述的CI抗体包括重链可变区域(序列102)以及轻链可变区域(序列104)，其中所述的重链可变区域是由如序列101所示的核酸序列进行编码的，而所述的轻《连可变区i或是由如序列103所示的核酸序列进行编码的。>CC21R3P3Cl重链可变区域的核酸序列CACCGTCTCGAGT(序歹'J101)>CC21R3P3Cl重链可变区域的氨基酸序列200880013529.XVSS(序歹d102)〉CC21R3P3Cl轻链可变区域的核酸序列GGTATTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTA(序歹'J103)>CC21R3P3Cl轻链可变区域的氨基酸序歹'JSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDSSSDHWFGGGTKVTVL(序列104)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat,EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国#:康,口人类月良务吾卩)，USGovernmentPrintingOffice(美国j!支府出片反局))。所述的Cl抗体的重链互补决定区i或具有下述序列SYGMH(序歹'J34);VISYDGSIKYYADSVKG(序歹'J35);以及DWGFSGSLTF(序列105)。所述的Cl抗体的轻链互补决定区域具有下述序列GGNNIGSKSVH(序歹'106);YDSDRPS(序歹'J80);以及QVWDSSSDHVV(序歹'J107)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CC21R3P1—E7("E7")抗体。如下文中所示，所述的E7抗体包括重链可变区域(序列83)以及轻链可变区域(序列85),其中所述的重《连可变区域是由如序列82所示的核酸序列进4亍编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列84所示的核酸序列进4亍编码的。>CC21R3P1E7重链可变区域的核酸序列TCGAGT(序列82)>CC21R3P1E7重链可变区域的氨基酸序列(序歹寸83)>CC21R3P1E7轻链可变区域的核酸序列ATGGTAATGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTA(序歹'J84)>CC21R3P1E7轻链可变区域的氨基酸序列RFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDSLNGNWFGGGTKVTVL(序列85)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat，EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五X反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国<建康和人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国政府出版局))。所述的E7抗体的重链互补决定区i或具有下述序列TYGMH(序歹'J86);VISYDGGTKYYADSVKG(序歹'J87);以及DLGDLPPGLDY(序列88)。所述的E7抗体的轻《连互补决定区域具有下述序列SGSSSNIGSNTVN(序歹l)47);T丽QRPS(序歹'J89);以及AAWDDSLNGNVV(序列90)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CC21R3P1_H6("H6")抗体。如下文中所示，所述的H6抗体包括重链可变区域(序列92)以及轻链可变区域(序列94),其中所述的重《连可变区域是由如序列91所示的核酸序列进4亍编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列93所示的核酸序列进4亍编；马的。>CC21R3P1H6重链可变区域的核酸序列GAGT(序歹ij91)>CC21R3P1H6重链可变区域的氨基酸序列(序列92)>CC21R3P1H6轻链可变区域的核酸序列>CC21R3P1H6轻《连可变区域的氨基酸序列包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat，EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五片反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国<建康详口人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国政府出版局))。所述的H6抗体的重链互补决定区i或具有下述序列NYGMH(序歹'J95);VISYDGSNRYYADSVKG(序歹'J96);以及DAGGPLDY(序歹寸97)。所述的H6抗体的轻《连互补决定区域具有下述序列GGDNIGRKSVH(序歹'J98);DDTDRPS(序歹'J99);以及QVWDSSIDHSWV(序列100)。一种范例性的人类干扰素i秀导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CC21R3P4—F4("F4")4元体。3口下文中戶斤示，所述的F4抗体包括重4连可变区域(序列109)以及轻链可变区域(序列111),其中所述的重链可变区域是由如序列108所示的核酸序列进行编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列110所示的核酸序列进行编码的。38>CC21R3P4F4重链可变区域的核酸序列GAGT(序歹'J108)〉CC21R3P4F4重《连可变区域的氨基酸序列(序歹'J109)>CC21R3P4F4轻《连可变区域的核酸序列>CC21R3P4F4轻链可变区域的氨基酸序列SGSYSRNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDSSSDHPEWFGGGTKLTVL(序列111)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat，EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国<建康升口人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国政府出X反局))。所述的F4抗体的重链互补决定区i或具有下述序列NYGMH(序歹'J95);VISYDGSNRYYADSVKG(序歹'J96);以及DAGGPLDY(序列97)。所述的F4抗体的轻链互补决定区域具有下述序列GG丽IGDKSVQ(序歹'j112);DDSDRPS(序列113);以及QVWDSSSDHPEVV(序列114)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CC21R3P5—C5("C5")抗体。如下文中所示，所述的C5抗体包括重链可变区域(序列116)以及轻链可变区域(序列118),其中所述的重链可变区域是由如序列115所示的核酸序列进4亍编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列117所示的核酸序列进4亍编；马的。>CC21R3P5C5重《连可变区域的核酸序列CACCGTCTCGAGT(序列115)>CC21R3P5C5重链可变区域的氨基酸序列VSS(序列116)>CC21R3P5C5轻链可变区域的核酸序列40TATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(序歹'J117)>CC21R3P5C5轻链可变区域的氨基酸序列SGSNSGNTATLTIGRAQAGDEADYYCQVWDSSTGWFGGGTKLTVL(序歹'J118)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自'然》342:877-883中发表的文章；Kabat，EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五片反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国<建康和人类月l务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国让文府出片反局))。所述的C5抗体的重《连互补决定区i或具有下述序列TYGMH(序歹'J86);VISYDGGTKYYADSVKG(序歹'J87);以及DLGDLPPGLDY(序列88)。所述的C5抗体的轻《连互补决定区i或具有下述序列GGSSIESKSVH(序歹'J119);KDSDRPS(序歹'J120);以及QVWDSSTGVV(序歹'J121)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CE7C1R3H8_J9("J9")抗体。如下文中所示，所述的J9抗体包括重链可变区域(序列123)以及轻链可变区域(序列125),其中所述的重链可变区域是由如序列122所示的核酸序列进行编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列124所示的核酸序列进4亍编；马的。>CE7C1R3H8J9重《连可变区域的核酸序歹'JCACCGTCTCGAGT(序列122)〉CE7C1R3H8J9重链可变区域的氨基酸序列VSS(序歹寸123)>CE7C1R3H8J9轻链可变区域的核酸序列(序歹'J124)>CE7C1R3H8J9轻链可变区域的氨基酸序列RFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDSSEPRWFGGGTKVTVL(序歹'J125)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以《自,然》342:877-883中发表的文章；Kabat，EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五X反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国#:康和人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国iJ文府出片反局))。所述的J94元体的重4连互^卜决定区i或具有下述序列TYGMH(序歹'J86);VISYDGGTKYYADSVKG(序列87);以及DLGDLPPGLDY(序列88)。所述的J9抗体的轻链互补决定区i或具有下述序列SGSSSNIGSNTVN(序歹'47);TNNQRPS(序歹'J89);以及AAWDDSSEPRVV(序歹'J126)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CC21R3P1—B9("B9")抗体。如下文中所示，所述的B9抗体包括重《连可变区域(序列137)以及轻链可变区域(序列139),其中所述的重链可变区域是由如序列136所示的核酸序列进行编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列138所示的核酸序列进4亍编；马的。>CC21R3P1B9重链可变区域的核酸序列ACCGTCTCGAGT(序歹'J136)>CC21R3P1B9重链可变区域的氨基酸序列VSS(序列137)>CC21R3P1B9轻链可变区域的核酸序列GGTGTTCGGCGCAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(序歹'J138)>CC21R3P1B9轻链可变区域的氨基酸序列SGSNSGNTASLTITGAQAEDAADYYCGSRDSSGYQWFGAGTKLTVL(序歹'J139)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat，EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国康和人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国iE支府出片反局))。所述的B94元体的重《连互补决定区i或具有下述序列SYGMH(序歹'J34);VISYDGSNKYYADSVKG(序歹'J6);以及DGGWYDWYFDL(序列140)。所述的B9抗体的轻链互补决定区域具有下述序列QGDSLTSYYAS(序歹'J141);GNDNRPS(序歹'J142);以及GSRDSSGYQVV(序歹'J143)。一种范例性的人类干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体是这里所描述的CC21R3P1—Fl("CC—Fl")抗体。如下文中所示，所述的CC_F1抗体包括重链可变区域(序列26)以及轻链可变区域(序列28),其中所述的重链可变区域是由如序列25所示的核酸序列进行编码的，而所述的轻链可变区域是由如序列27所示的核酸序列进行编码的。>CC21R3P1Fl重链可变区域的核酸序列CGTCTCGAGT(序歹'J25)>CC21R3P1Fl重链可变区域的氨基酸序列(序列26)>CC21R3P1Fl轻《连可变区域的核酸序列ATCTTTGGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTAGG(序列27)>CC21R3P1Fl轻链可变区域的氨基酸序列RFSGSIDSSSNSASLTISGLRTDDEADYYCQSYDSINLWVFGGGTKVTVL(序列28)包含所述氨基酸的互补决定区域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定义(参见ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中发表的文章；Kabat，EA等人于1991年发表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性兴趣的蛋白序列》，第五片反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美国1"建康和人类月良务部)，USGovernmentPrintingOffice(美国jJ支府出片反局))。所述的CC—Fl#元体的重《连互4卜决定区i或具有下述序列NSGIH(序歹'j5);VISYDGSNKFYADSVKG(序列15);以及DGSESEYLDY(序列132)。所述的CC—Fl抗体的轻链互补决定区域具有下述序列TGSGGSIDSNYVQ(序歹'J16);EDNQRPS(序歹寸9);以及QSYDSINLWV(序歹'J29)。45本发明所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体还包括这样的抗体所述的抗体包4舌重链可变氨基酸序列和/或轻链可变氨基酸序列，其中所述的重《连可变氨基酸序列与序列2,12，18，26,31，41，51,54,61，68，75,83，92，102,109，116，123或者137的氨基酸序歹'J具有至少90%，92%,95%,97%,98%，99%或者更高的同一性，所述的轻链可变氨基酸序列与序列(SEQIDNO)4,14,23，28,33，43，56,63,70，77，85,94,104，111，118，125,139或者145的氨基酸序列具有至少90%,92%,95%,97%,98%,99%或者更高的同一'性。或者，所述的单克隆抗体是一种在与NI-0801,C7，Gll，B5,F3，CC—Fl，B9，E5,H6,C5,D3,C3,F4,Cla，Cl,E7，J9,CB—Fl，A2和/或G7相同的表^f立上进4亍结合的^t体。除非另外定义，在本发明中相关使用的科学术语以及技术术语应当具有本领i或普通^支术人员通常所理解的含义。进一步的，除非上下文中另有需求，单凄史形式应当包4舌复凄t并且复凄t形式应当包括单数。一般而言，在这里所描述的用于细胞以及组织培养、分子生物学、以及蛋白和寡核苷酸及多核香酸化学以及杂交的术语以及^支术是本领域熟知并且普遍使用的。利用标准的技术进行DNA的重组、寡核苦酸的合成、以及组织的培养和转化(例如，电穿孔，脂质转染)。依照制造商的i兌明书完成酶反应以及纯化技术，或者按照本领域通常采用的方法或者按照本发明所描述的方法完成没反应以及纯化技术。前述的技术以及操作通常依照本领域熟知的传统方法来完成，并且依照本说明书中所引用的以及所讨论的各种一般性参考文献以及更加具体的参考文献所描述的方法来完成。参见，例3口，Sambrook等人的MolecularCloning:ALaboratoryManual《分子克隆实-险室指南》(第二片反，ColdSpringHarborLaboratoryPress;令7良港实马全室出片反3土，ColdSpring))。在这里所描述的用于分析化学、合成有机化学、以及药物化学和制药化学中的术语以及实验室操作和技术是本领域熟知并且普遍使用的。利用标准的技术进行化学合成，化学分析，药物的制备，配制，以及递送，以及对患者进4于的治疗。正如在本发明公开中所使用的，除非另外指明，下述术语应当4皮理解为具有下述的含义这里所^^吏用的所述术语"抗体，，指的是免疫^求蛋白分子以及免疫球蛋白(Ig)分子的免疫活性部分，即，含有抗原结合位点的分子，所述的抗原结合位点能够特异性的结合(与……发生免疫反应)抗原。这样的抗体包括，〗旦不局限于，多克隆，单克隆，嵌合，单链，Fab，Fab,以及F(ab，)2片段，以及Fab表达文库。"特异性的结合"或者"与……发生免疫反应"指的是所述的抗体与所述的目标抗原的或者多个抗原决定簇发生反应，而不与其他多肽发生反应(即，结合)，或者以极低的亲和性(Kd>10—6)与其他多肽发生结合。已知所述的基本抗体结构单元包括四聚体。每个四聚体是由两对相同的多肽链对组成的，每对具有"轻"链(大约25kDa)以及"重"链(大约50-70kDa)。每条链的氨基末端区域包括具有大约100至110或者更多个氨基酸的可变区域，主要负责进行抗原的识别。每条链的羧基末端区域定义了恒定区域，主要负责效应子功能。人类的轻链j皮归类为K轻链以及人轻链。重链一皮归类为p，S,y，a,或者s，并且分别将所述的同型抗体定义为免疫J求蛋白M,免疫5求蛋白D，免疫5求蛋白A,免疫^求蛋白G以及免疫^求蛋白E。在轻《连以及重《连中，所述的可变区i或与恒定区域通过"J"区i或相互连^妄，其中所述的"J"区i或具有大约12或者更多个氨基酸，而所述的重链还包括"D"区域，所述的"D"区i或具有大约10多个氨基酸。通常可以参见，FundamentalImmunology《基础免疫学》第7章(Paul，W.编辑，第二版，RavenPress,N.Y.纽约(1989年))。每个轻链/重4连乂于的可变区i或构成了所述的抗体结合^f立点。这里所4吏用的所述术语"单克隆抗体"(MAb)或者"单克隆抗体组合物"指的是一类抗体分子，所述的抗体分子仅含有分子种类的抗体分子，由唯一的轻链基因产物以及^奉一的重《连基因产物构成。具体的，在这类分子的全部分子中，所述的单克隆抗体的互补决定区i或(CDR)是相同的。单克隆抗体含有抗原结合位点，所述的抗原结合位点能够与一种特定的抗原表位发生免疫反应，它纟皮定义为对其具有唯一的结合亲和性。一般而言，从人类中获得的抗体分子涉及免疫球蛋白G,免疫球蛋白M,免疫球蛋白A，免疫球蛋白E以及免疫球蛋白D类别中的4壬意，它们通过存在于分子中的重《连的性质而相互区分。某些类别还含有亚类，例如，免疫J求蛋白Gl5免疫^求蛋白G2,以及其4也。此外，在人类中，所述的轻链可能是K轻链或者是X轻链。所述的术语"抗原结合位点"或者"结合部分"指的是参与进行抗原结合的所述的免疫球蛋白分子的部分。所述的抗原结合位点是由所述重《连("H")以及轻链("L，，)的N-末端可变区域("V")上的氨基酸残基形成的。在已知^皮称为"骨架区域"或者"FR"的净交为保守的侧向延伸中插入三个存在于所述的重链以及轻链的可变区域中的高度分歧的延伸，其中所述的高度分歧的延伸被称为"超变区域"。因此，所述的术语"FR"指的是天然发现的存在于免疫^求蛋白中的超变区域中的氨基酸序列，或者邻近所述的超变区i或的氨基酸序列。在抗体分子中，轻链上的所述的三个超变区i或与重链上的所述的三个超变区域在三维空间内依48次排列，乂人而形成抗原结合表面。所述的抗原结合表面互补于一种结合抗原的所述三维表面，并且每个重链以及轻链上的所述的三个超变区域:帔称为"互补决定区域"或者"CDR"。所述的每个区i或的氛基酉臾分布与Kabat在SequencesofProteinsofImmunologicalInterest《具有免疫学兴趣的蛋白序列》(NationalInstitutesofHealth美国国立卫生研究院，Bethesda,Md.(1987年以及1991年))中定义的相一致，或者与Chothia&Lesk于1987年在J.Mol.Biol.《分子生物学杂志》196:901-917中发表的文章中所定义的一致，或者与Chothia等人于1989年在Nature《自然》342:878-883中发表的文章中所定义的一至丈。这里所-使用的所述术语"表位"包括能够与免疫J求蛋白，单链可变区域抗体片,殳(scFv),或者T细月包受体发生特异性结合的任意的蛋白决定簇。所述的术语"表位"包括能够与免疫球蛋白或者T细胞受体发生特异性结合的任意的蛋白决定簇。表位决定簇通常是由分子的化学活性表面基团构成的，例如氨基酸或者并唐侧《连，并且通常具有特异性的三维结构特性，以及特异性的电荷特性。当所述的解离常数《1微摩时，抗体被认为能够特异性的结合抗原，例如，《100纳摩，优选<10纳摩，并且更加优选<200匹摩。这里所使用的所述术语"免疫结合"以及"免疫结合性质"指的是非共价的反应类型，它发生在免疫球蛋白分子与抗原之间，其中所述的免疫球蛋白分子对所述的抗原具有特异性。所述的免疫结合反应的强度或者亲和性可以通过所述反应的解离常数(Kd)来表达，其中较小的解离常数代表较高的亲和性。使用本领域熟知的方法对经选择的多肽的免疫结合性质进行量化。这类方法中的一种方法需要测量抗原结合位点/抗原复合体的形成速率以及解离速率，其中这些速率取决于所述的复合体组成物(partner)的浓度，所述反应的亲和性，以及对两个方向上的速率产生相等的影响的几何学参凄t。因此，通过计算所述的浓度以及结合和解离的实际速率，可以确定所述的"结合速率常tt"(K。n)以及所述的"解离速率常数"(K。ff)。(参见Nature《自然》1993年361:186-87中发表的文章)。所述的解离速率常数/结合速率常ft的比例能够消除不涉及亲和性的全部参ft,并且等于所述的解离常凄tKd(通常可参见Davies等人于1990年在AnnualRevBiochem《生物4匕学年鉴》59:439-473中发表的文章)。当所述的平4軒结合常凄t(Kd)《l孩支摩时，本发明所述的抗体一皮i人为能够与干扰素诱导蛋白-10表位发生特异性的结合，例如，<100纳摩，优选《10纳摩，并且更加优选《1纳摩，上述IW直是利用例如;改射性配位体结合检测或者本领域技术人员已知的类似检测这样的4全测方法测量得到的。例如，本发明提供的所述人类干护G素i秀导蛋白-lO抗体表现出在大约<200匹摩至大约1匹摩的范围之内的解离常凄史。本领域技术人员将能够认识到，不需要过度的试验，就可能确定出一种人类单克隆抗体是否与本发明所述的人类单克隆抗体(例如，单克隆抗体NI-0801,C7，Gll,B5，F3，CB—Fl,B9,E5，H6，C5,D3，C3，F4，Cla，CI,E7,J9，CC_F1,A1或者G7)具有相同的特异性，这是通过确定前者是否阻止后者与一种干扰素诱导蛋白—10抗原多肽进行结合来实现的。如果所述受试的人类单克隆抗体与本发明所述的人类单克隆抗体存在竟争，所述的竟争表现为本发明所述的人类单克隆抗体的结合的减少，那么所述的两种单克隆抗体与同样的表位，或者高度相关的表位发生结合。确定一种人类单克隆抗体是否具有本发明所述的人类单克隆抗体所具有的特异性的另外一种方法是使用一种干扰素诱导蛋白-10抗原多肽对本发明所述的人类单克隆抗体进行预培养，其中本发明所述的人类单克隆抗体对于所述的干扰50素诱导蛋白-10抗原多肽具有普通的反应性，之后，加入受试的人类单克隆抗体，乂人而确定所述受试的人类单克隆抗体与所述的干扰素诱导蛋白-10抗原多肽进行结合的能力是否受到抑制。如果所述受试的人类单克隆抗体受到抑制，那么它极有可能与本发明所述的单克隆抗体具有相同的或者功能等价的表位特异性。使用本领域已知的各种方法来制备直接作用于蛋白例如干扰素诱导蛋白-10蛋白的单克隆抗体，或者来制备针对例如干扰素诱导蛋白-10蛋白这样的蛋白的衍生物、片段、类似物、同系物或者直系同源物的单克隆抗体(参见，例如，Antibodies:ALaboratoryManual《4元体实-验室4旨南》，HarlowE,以及LaneD,1988年，ColdSpringHarborLaboratoryPress,,令7良港实马企室出版社，ColdSpringHarbor冷泉港，NY，在此引入作为参考)。完全人类抗体是这样的抗体分子所述抗体分子的轻链以及重链的全部序列，包括所述的互补决定区域，均由人类基因所产生。这样的抗体在这里^皮称为"人类抗体"或者"完全人类抗体"。人类单克隆抗体是通过4吏用例如在下文中#是供的实施例中所描述的方法来制备的。人类单克隆抗体还可以通过4吏用三瘤体4支术；人类B细J包杂交瘤才支术(参见Kozbor等人于1983年在ImmunolToday《当今免疫学》4:72中发表的文章)；以及用于制备人类单克隆抗体的EB病毒(EBV)杂交瘤技术(参见Cole等人于1985年在MONOCLONALANTIBODIESANDCANCERTHERAPY《单克隆抗体以及癌症的治疗》AlanR.Liss，Inc.,pp.77-96中发表的文章)来制备。可以通过4吏用人类杂交瘤(参见Cote等人于1983年在ProcNatlAcadSciUSA《美国科学院院刊》80:2026-2030中发表的文章)或者通过使用EB病毒体外转化人类B细胞的方法(参见Cole等人于1985年在MONOCLONALANTIBODIESANDCANCERTHERAPY《单克隆抗体以及癌症的治疗》AlanR.Liss,Inc.,pp.77-96中发表的文章)对人类单克隆抗体进行利用并且进行制备。4吏用熟知的冲支术对抗体进行纯化，例如4吏用蛋白A或者蛋白G的亲和色i普法。在此之后，或者可以选才奪的，可以将一种特异性的抗原或其表位固定于柱上，通过免疫亲和色i普法对所述的免疫特异性抗体进行纯化，其中所述的特异性抗原是所述的免疫球蛋白所寻找的寧M立。对于免疫J求蛋白的纯化由例如D.Wilkinson(TheScientist《牙牛学家》，由TheScientistInc.，卄牛学家有限7>司出版，PhiladelphiaPA,第14巻，第8期(2000年4月17曰)，pp.25-28)进行过讨论。期望对于本发明所述的抗体的效应子功能进^S奮饰，/人而增强，例如，所述抗体在治疗免疫相关性疾病方面的功^:。例如，可以向所述的Fc区域中导入半胱氨酸残基，从而允许在这一区域中形成链间二硫键。由此生成的所述的同型二聚抗体能够具有改善的内化能力和/或增加的补体介导的杀灭以及抗体依赖性的细胞毒作用(ADCC)。(参见Caron等人于1992年在J.ExpMed.《实马全医学杂志》176:1191-1195中发表的文章，以及Shopes于1992年在J.Imm腸l.《免疫学杂志》148:2918-2922中发表的文章)。可以选才奪的，抗体可以被基因工程化，4吏其具有双重的Fc区域，并且能够因此具有增强的补体溶解以及抗体依赖性的细胞毒作用能力(参见Stevenson等人于1989年在Anti-CancerDrugDesign《:坑癌症药物的诏:计》3:219-230中发表的文章)。本发明还包括Fv,Fab,Fab,以及Fub，)2人类干扰素诱导蛋白-IO片段，单链人类干扰素诱导蛋白-10抗体，双特异性人类干扰素诱导蛋白-10抗体以及人类干扰素诱导蛋白-10抗体复共轭对酉己A净勿。52双特异性抗体是对于至少两种不同的抗原具有结合特异性的抗体。在本发明的情况中，所述的结合特异性中的一种是针对干扰素诱导蛋白-10。所述的第二个结合靶位是任意的其他抗原，并且有利的为一种细胞表面蛋白或者受体或者受体亚单位。用于制备双特异性抗体的方法是本领域已知的。传统意义上，双特异性抗体的重组制备是以所述的两个免疫;求蛋白重链/轻链对的共表达为基础的，其中所述的两个重链具有不同的特异性(参见Milstein以及Cuello于1983年在Nature《自然》305:537-539中发表的文章)。由于所述的免疫球蛋白重链以及轻链的随才几分西己，这些杂交瘤(quadromas)生成了十种不同的才元体分子的可能的混合物，其中只有一种具有所述正确的只又特异性结构。对于所述的正确分子进行的纯化通常是通过亲和色i普法步骤来完成的。类似的才乘作在1993年5月13日/>开的WO93/08829中以及Traunecker等人于1991年在EMBOJ.《欧洲分子生物学学会杂志》10:3655-3659中发表的文章中进4亍了7>开。可以将具有所述的目标结合特异性的抗体可变区域(抗体-抗原结合位点)融合到免疫球蛋白的恒定区域序列中。所述的融合优选发生在免疫球蛋白的重链恒定区域中，包括所述的铰链区域，重链恒定2(CH2)区域，以及重链恒定3(CH3)区域中的至少一部分。优选具有所述的重链恒定区i或1(CH1)，其中所述的重链恒定区i或l中含有与轻《连结合所必需的^f立点，所述的4立点存在于至少一种融合区i或中。DNA编码所述的免疫3求蛋白重链融合区域并且，如果需要的话，将所述的免疫J求蛋白轻链插入到单独的表达载体中，并且共转染至适当的宿主有才几体中。用于产生双特异性抗体的进一步的细节可以参见，例如，Suresh等人于1986年在MethodsinEnzymology《酶学方法》121:210中发表的文章。用于产生双特异性抗体的其他途径在例如WO96/27011中进行了描述，上述文章的全部内容在此引入作为参考。双特异性抗体可以作为完全长度的抗体或者抗体片段(例如，Fub，)2双特异性抗体)来进行制备。用于从抗体片段中产生双特异性抗体的技术已经在上述的文献中进行了描述。例如，可以使用化学连接的方式制备双特异性抗体。参见，例如，Brennan等人于1985年在Science《科学》229:81中发表的文章，上述文章的全部内容在此引入作为参考。除此之外，可以从大肠杆菌(E.coli)中直接回收Fab,片^殳并且进行化学偶联从而形成双特异性抗体。参见，例如，Shalaby等人于1992年在J.Exp.Med.《实-验医学杂志》175:217-225中发表的文章，上述文章的全部内容在此引入作为参考。也已经描述了用于乂人重组细月包培养物中直4妻制备并且分离双特异性抗体片,殳的各种^支术。例如，可以4吏用亮氨酸4立《连对双特异性抗体进行制备。参见，例如，Kostelny等人于1992年在J.Immunol.《免疫学杂志、》148(5):1547-1553中发表的文章，上述文章的全部内容在此引入作为参考。由Hollinger等人于1993年在Proc.Natl.Acad.Sci.USA《美国-牛学P完l^完刊》90:6444-6448中发表的文章中所描述的"双功能抗体"技术已经为双特异性抗体片段的制备提供了一种可供选择的机制，上述文章的全部内容在此引入作为参考。也已经报道了使/^单链Fv(sFv)二聚体制备双特异性抗体片段的另外一种策略。参见，Gruber等人于1994年在J.Immunol.《免疫学杂志》152:5368中发表的文章，上述文章的全部内容在此卩1入作为参考。具有多于两种化合〗介的抗体是可以预期的。例如，可以制备三特异性抗体。参见，Tutt等人于1991年在J.Immunol.《免疫学杂志》147:60中发表的文章。54范例性的双特异性抗体可以与两个不同的表位进行结合，所述表位中的至少起源于本发明所述的蛋白抗原。可以选择的，将免疫3求蛋白分子的^t4元原、^,(anti-antigenicarm)与另夕卜^#进4亍组合，所述的另外臂与存在于白细胞上的一种启动分子(triggeringmolecule)发生了结合，其中所述的启动分子是例如T细月包受体分子(例如，CD2，干护C素Y，CD28,或者B7)，或者是免疫-求蛋白G的Fc受体(FcyR)，例如FcyRI(CD64)，FcyRII(干4尤素y2)以及FcyRIII(CD16),从而聚焦于表达所述特定抗原的细胞的细胞防卫机制。双特异性抗体还可以被用来向细胞呈递细胞毒素试剂，其中所述的细胞表达一种特定的抗原。这些抗体具有抗原结合臂以及与细胞毒素试剂或者放射性核螯合剂发生结合的臂，所述的放射性核螯合剂是例如硫脲基-L-苯基-乙二胺四乙酸(EOTUBE),二乙烯三胺五乙酸(DPTA),十二》克四乙酸(DOTA),或者三乙晞四胺(TETA)。另外一种感兴趣的双特异性抗体与本发明所描述的蛋白抗原发生结合，并且进一步的结合la织因子(TF)。抗体的复共辄对配合物同样落入本发明所述的范围之内。复共辄对配合物抗体是由两个共价连接的抗体所组成的。这样的抗体已经被提议用于例如将免疫系统细胞瞄向(targetto)不期望白勺纟田胞(美国专利No.4,676，980),以及用于治疗人类免疫缺陷病毒(HIV)的感染(WO91/00360;WO92/200373;EP03089)。可以预期，能够使用合成蛋白化学中的已知方法进行所述抗体的体外制备，包括那些涉及到交联试剂的方法。例如，可以通过使用一种二碌u化物交4奐反应或者通过形成錄u醚4走的方式来构建免疫毒素。用于这一目的的适合的试剂的例子包括亚氨基辟u醇盐以及曱基_4_巯基丁基亚氨基盐以及那些例如在美国专利No.4，676,980中7>开的{式剂。本发明还涉及免疫共辄物，所述的免疫共辄物包4舌一种与细胞毒素试剂或者放射性同位素(即，放射性共轭物)共轭的抗体，其中所述的细胞毒素试剂是例如毒素(例如，细菌来源，真菌来源，才直物来源，或者动物来源的酶活性毒素，或者所述酶活性毒素的片段)。可以4吏用的酶活性毒素及其片革殳包4舌白喉毒素A链，白口娱毒素的非结合活性片段，外毒素A链(来自于铜绿假单胞菌)，蓖麻毒素A4连，相思豆毒素A链，药莲毒素A《连，oc-乂乂叠3求菌，油桐蛋白，香石竹毒蛋白(dianthinprotein)，美洲商陆蛋白(PAPI,PAPII，以及PAP-S)，苦瓜抑制剂，泻果素，巴豆毒素，皂草黄抑制剂，多花白树毒蛋白，mitogellin，局限曲霉素，酚霉素，依诺霉素，以及单端孢霉烯族毒素。可以利用各种》文射性核进朽j文射性共辄的抗体的制备。例子包括212铋，131碘，131铟，9GY，以及186铼。使用各种双重功能的蛋白偶联试剂制备所述的抗体与细胞毒素试剂的共轭物，其中所述的试剂是例如3-(2-吡咬二巯基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SPDP),二亚氨基蓬吩(IT),双重功能的酰亚胺酯书f生物(例如二亚胺^己二酸二曱酯盐酸盐)，活性酯(例如辛二酸二琥珀酰亚胺酯)，醛(例如戊二醛)，只又叠氮基化合物(例如双-(对叠氮基苯曱酰基)己二胺)，双-重氮基衍生物(例如双-(对重氮基苯曱酰基)-乙二胺)，二异氰酸盐(例如甲苯-2,6-二异氰酸酯)，以及双-活性氟化合物(例如1，5-二氟-2,4-二硝基苯)。例如，可以按照Vitetta等人于1987年在Science《科学》238:1098中发表的文章中所描述的方法进4亍荒麻毒素免疫毒素的制备。碳14标记的l-异硫氰基苄基-3-曱基二乙基三胺五乙酸(MX-DTPA)是一种范例性的螯合试剂，用于将》文射性核共轭至所述的抗体之中(参见WO94/11026)。56本领域二技术人员将能够i人识到，大量的各种不同的可能的半族能够被偶联到上述得到的抗体之中或者本发明所述的其他分子之中(参见，例^口，"ConjugateVaccines",ContributionstoMicrobiologyandImmunology《"共轭疫苗，，对于孩i生物学以及免疫学所估文出的贡献》，J.M.Cmse以及R.E丄ewis，Jr(编4專)，CargerPress,NewYork纽约，1989年，上述文章的全部内容在此引入作为参考。只要所述的抗体以及所述的其他半族保持它们各自的活性，可以利用4壬意的化学反应完成偶耳关，这将4吏所述的两个分子发生结合。这种连4妻可能包括许多化学机制，例如共价结合，亲和结合，嵌入，平等结合以及络合。然而所述的优选结合方式是共价结合。可以通过现有侧《连的直4妾浓缩来完成共价结合，或者通过导入外部桥接分子来完成共价结合。许多二价或者多价的连接试剂可以有效的用于偶联蛋白分子，例如将本发明所述的抗体偶联至其他分子之中。例如，代表性的偶联试剂可以包括有机化合物例如》克酯，-友化二亚胺，琥珀酰亚胺酯，二异氰S臾酯，戊二醛，重氮基苯以及己二胺。这种列表并不意在彻底的列出本领域已知的各种类别的偶联试剂，而仅仅是所述更多普遍的偶联试剂的范例(参见Killen以及Lindstrom于1984年在Jour.Immun.《免疫学杂志》133:1335-2549中发表的文章；Jansen等人于1982年在ImmunologicalReviews《免疫学回顾》62:185-216中发表的文章；以及Vitetta等人于1987年在Science《科学》238:1098中发表的文章)。优选的连接剂在下述文献中进行了描述(参见，例如，Ramakrishnan，S等人于1984年在CancerRes.《癌症研究》44:201-208中发表的文章，其中描述了MBS(间马来酰亚胺苯曱酰基-N-羟基琥珀酰亚胺酯)的用途。同样可以参见美国专利No.5,030,719,其中描述了囟4匕乙酰肼的用途，其中所述的卣化乙酰肼通过寡肽连接剂的方式^皮偶联至一种抗体之中。特别优选57的连接剂包括(i)EDC(1-乙基-3-(3-二曱基氨基-丙基)碳二亚胺盐酸盐)；(ii)SMPT(4-琥珀酰亚胺基氧基羰基-a-甲基-a-(2-吡咬二石危基)-曱苯)(PierceChem.Co.，Cat#21558G);(iii)SPDP($虎^)醜亚胺画6画[3-(2-(口比口定二石克基)丙醜胺)己酉臾酯](PierceChem.Co.,Cat#21651G);(iv)磺基画LC-SPDP(磺基琥珀酰亚胺-6-[3-(2-(吡i定二石克基)丙酰胺)己酸酯](PierceChem.Co.,Cat弁2165画G);以及(v)与EDC(l-乙基-3-(3画二曱基氨基-丙基)碳二亚胺盐酸盐)共轭的磺基-NHS(N-羟基磺基-琥珀酰亚胺PierceChem.Co.,Cat#24510)。上文中所描述的这些连4妄剂含有具有不同属性的组分，因此导致其以不同的生玉里"匕学性质进4亍共4厄。例3口，磺基-NHS(N-羟基磺基-琥珀酰亚胺)的烷基羧酸酯比磺基-NHS(N-羟基磺基-琥珀酰亚胺)的芳香基羧酸酯更加稳定。含有连4妻剂的NHS-酯(N-羟基-琥珀酰亚胺酯)比磺基-NHS酉旨(N-羟基石黄基-琥珀酰亚胺酯)更力口难溶。而且，所述的连接剂SMPT(4-琥珀酰亚胺基氧基羰基-oc-曱基-oc-(2-吡啶二硫基)-甲苯)含有在原子空间排列上被阻碍的二好"建，并且能够形成具有增加的稳定性的共轭物。二碌u4建在一^:情况下没有其他的连4妄方式稳、定，这是因为所述的二石克4定在体外被切开，使得能够获得较少的可以利用的共轭物。磺基-NHS(N-羟基磺基-琥珀酰亚胺)尤其能够增加碳二亚胺偶联的稳定性。当将碳二亚胺偶联(例如EDC)与磺基-NHS(N-羟基磺基-琥珀酰亚胺)联合使用时，所形成的酯比单独进行石友二亚胺偶耳关反应所形成的酯具有更强的水解抗性。这里所使用的所述术语"被分离的多核苷酸"应当指的是基因多核苦酸，cDNA多核苷酸,或者合成来源的多核苦酸，或者上述多核苷酸的某种组合，由于这些多核苷酸的来源，所述的"#皮分离的多核苷酸"(1)不与一种多核苷酸的全部或者部分相联系，其中所述的"被分离的多核普酸"是天然存在的，(2)其与一种多核苦酸发生可操作的连接，其中所述的多核苷酸不是与其存在天然连4妻的，或者(3)其不会作为更大的序列的一部分而天然存在。在这里所提及的所述术语"被分离的蛋白"指的是cDNA蛋白，重组RNA蛋白，或者合成来源的蛋白，或者上述蛋白的某种组合，由于这些蛋白的来源或者4汙生反应的来源，所述的'4皮分离的蛋白"(1)不与天然存在的蛋白相联系，(2)不含有属于同样来源的其他蛋白，例如，不含有海洋蛋白，(3)是由来自于不同种属的细胞进行表达的，或者(4)不是天然存在的。在这里作为专业术语一皮使用的所述术语"多肽"指的是多肽序列的天然蛋白，片段，或者类似物。因此，天然蛋白片段以及类似物属于所述的多肽属(genus)的种类(species)。依照本发明，优选的多肽包括这里所描述的人类重链免疫球蛋白分子以及这里所描述的人类轻链免疫球蛋白分子，以及抗体分子，以及它们的片,爻和类似物，其中所述的抗体分子是通过所述的重链免疫球蛋白分子与轻链免疫球蛋白分子的组合而形成的，所述的轻链免疫^求蛋白分子例如是k轻《连免疫J求蛋白分子，并且反之亦然。这里所使用的将其应用至物体的所述术语"天然存在的"指的是这样的事实所述的物体是可以在自然中找到的。例如，一种存在于有4几体(包括病毒)中的多肽序列或者多核苷酸序列能够/人一种天然来源中^皮分离出来，并且所述的序列并没有^皮实一睑室人员或者通过另外的方式进行有意的修饰，那么这样的序列是天然存在的。这里所4吏用的所述术语"可才喿作的连4妄"指的是^皮用于这才羊描述的组分所处的位置关系允许它们以它们既定的方式发功能。对照序列"可操作的连接"至编码序列上，指的是所述的对照序列以这样一种方式进行连结在能与所述的对照序列相容的条件下，完成所述编码序列的表达。这里所使用的所述术语"对照序列，，指的是对于实现表达以及加工(processing)编码序列而言所必需的多核苷酸序列，其中所述的编码序列是与所述的多核苷酸序列进4亍连结的。这样的对照序列的性质是不同的，这取决于原核生物中的宿主有机体，这样的对照序列通常包括启动子，核糖体结合位点，以及真核细胞的转录终止序列，一般而言，这样的对照序列包括启动子以及转录终止序列。所述的术i吾"对照序列"意在在最^氐禾呈度上包4舌那些》于于表达以及力口工而言必须存在的全部纟且分，并且还可以包4舌额外的组分，其中所述的额外的组分的存在是有利的，例如，前导序列以及融合伙伴序列。在这里所提及的所述术语"多核苷酸"指的是具有至少10个石成基长度的核苷酸的聚合物，可以是核#唐核苷酸或者脱氧核苷酸或者4壬意类型的核苷酸的々务饰形式。所述的术i吾包4舌单4连形式的DNA以及双链形式的DNA。这里所才是及的所述术语寡核苦酸包括天然存在的以及经过修饰的核苷酸，所述的核苷酸通过天然存在的以及非天然存在的寡核苷酸连4妻#^皮连4妄在一起。寡核普酸是一种多核香酸的亚类，一般而言包括200个;咸基的长度或者更少的长度。优选的，寡核苷酸具有10至60个石威基的长度并且更加优选具有12,13，14,15,16,17,18，19，或者20至40个石威基的长度。寡核苷酸通常是单链的，例如，当用作揮:针时，尽管寡核香酸可以是双链的，例如，当用于进行基因突变体的构建时。本发明所述的寡核香酸可以是正义寡核香酸或者是反义寡核苦酸。这里所^是及的所述术语"天然存在的核香酸"包4舌脱氧核糖核香酸以及核冲唐核苦酸。这里所l是及的所述术i吾"经过》务饰的核普酸"包括含有经过修饰的或者经过取代的糖基团的核苷酸以及类似核香酸。这里所^是及的所述术语"寡核苷酸连接4建"包括例如下述的寡核香酸连4妄4建好"义》粦酸盐，二碌"<》粦酸盐，phosphoroselerloate,phosphorodiselerloate,phosphoroanilothioate，phosphoroaniladate,phosphoronmidate,以及类似连接键。参见,例如，LaPlanche等人于1986年在Nucl.AcidsRes.《核普酸的研究》14:麵1中发表的文章；Stec等人于1984年在J.Am.Chem.Soc.《美国化学学会杂志》106:6077中发表的文章；Stein等人于1988年在Nucl.AcidsRes.《核芬酸的研究》16:3209中发表的文章；Zon等人于1991年在AntiCancerDrugDesign《抗癌症药物的i殳计》6:539中发表的文章；Zon等人于1991年在OligonucleotidesandAnalogues:APracticalApproach《寡核苦酸及其类似物一种实践的途径》pp.87-108中发表的文章(REckstein编辑，OxfordUniversityPress牛津大学出X反3土，OxfordEngland英国牛津)；Stec等人的美国专利No.5,151,510;Uhlmann以及Peyman于1990年在ChemicalReviews《4b学评i仑》90:543中发表的文章。如果需要的话，寡核苷酸可以包4舌一种用于进^f亍:探测的标i己。这里所^是及的所述术语"选4奪性的杂交"指的是可纟罙测性的以及特异性的结合。依照本发明所述的多核苷酸，寡核苦酸以及它们的片l殳选冲奪性的与核酸链进行杂交，其中所述的杂交是在杂交以及洗涤的条件下进行的，从而使与非特异性核酸发生可探测性结合的可感知剂量最小化。可以利用高度严^^各的条件来获得本领域已知的以及本发明中所讨i仑的选择性的杂交条件。一4殳而言，在本发明所述的多核普酸，寡核普酸，以及片革殳与目标核酸序列之间的核酸序列同源性将为至少80%，并且更加典型的具有^尤选的至少85%,90%，95%，99%,以及100%的土曾力口的同源寸生。如果在两个氨基酸序列中具有部分同一性或者完全同一性，那么这两个氨基酸序列是同源的。例如，85%的同源性意"未着当所述61的两个序列以最大程度的匹配进行比对时，有85%的氨基酸是相同的。在最大程度的匹配中允许存在空位(存在于所述进行匹配的两个序列中的任意之上)，空位长度为5或者更小是优选的，空位长度为2或者更小是更加优选的。可以选择的并且是优选的，两个蛋白序列(或者来源于它们的多肽序列，具有至少30个氨基酸的长度)是同源的，这一术语用在这里指的是，当使用带有突变ft据矩阵以及空位罚分为6或者更高的ALIGN程序时，所述的蛋白序列得到高于5(标准偏差单位)的比对得分。参见Dayhoff,M.O.于AtlasofProteinSequenceandStructure《蛋白序列以及结片勾图集》pp.101-110(Volume5，NationalBiomedicalResearchFoundation美国国家生物医学研究基金会，1972年)以及该巻的增刊2,pp.1-10中发表的文章。当4吏用所述的ALIGN程序进4于最优化的比对时，所述的两个序列或其部分中的氨基酸具有大于或者等于50%的同一性，那么所述的两个序列或其部分是更加优选的同源的。这里所使用的所述术语"相应于，，指的是多核苷酸序列与参考的多核苷酸序列的整体或者部分是同源的(即，是相同的，非严格性进化相关)，或者多肽序列与参考的多肽序列是相同的。与之相对照区别的，这里所使用的所述术语"互补于"指的是所述的互补序列与参考的多核苷酸序列的整体或者部分是同源的。作为例子，所述的核苦酸序列"TATAC"相应于参考序列"TATAC"而互补于参考序列"GTATA"。下述的术语-故用来描述两个或者多个多核苷酸序列或者氨基酸序列之间的序列关系"参考序列"，"比4支窗口"，"序列同一性"，"序列同一性百分数"，以及"本质同一性"。"参考序列，，是被定义的序列，用来作为序列比较的基准，参考序列可能是更大的序列的亚类，例:^，作为完全长度的cDNA或者基因序列的片段，其中所述的cDNA或者基因序列在序列列表中给出，或者可以包括完整的cDNA或者基因序列。一般而言，参考序列具有至少18个核苷酸或者6个氨基酸的长度，常常具有至少24个核苷酸或者8个氨基酸的长度，并且通常具有至少48个核苷酸或者16个氨基酸的长度。由于两个多核苷酸序列或者氨基酸序列可能均(1)在所述的两个分子中包括相似的序歹ll(即，所述的完整的多核普酸序列或者氨基酸序列的一部分)，以及(2)在所述的两个多核苷酸序列或者氨基酸序列中可能进一步的包括存在分歧的序列，通常通过在"比4交窗口"中对所述的两个分子的序列进行比较的方式来完成两个(或者多个)分子间的序列比较，用以识别以及比较局部区域的序列相似性。这里所使用的"比较窗口"指的是一种具有至少18个连续的核苷酸位置或者6个氨基酸的概念片段，其中可以将一种多核苷酸序列或者氨基酸序列与一种具有至少18个连续核苷酸或者6个氨基酸序列的参考序列进4亍比4交，并且与所述的参考序列(不包4舌添加或者缺失)相比较而言，其中位于所述的比较窗口之内的所述的多核苷酸序列部分可以包括20%或者更低的添加，缺失，耳又代，以及类似情况(即，空位)，用以-使所述的两个序列进4于最佳的比对。用于4交准比较窗口而进行的序列的最佳比对可以利用下述方式来操作利用Smith以及Waterman于1981年在Adv.Appl.Math.《应用凄t学的研究进展》2:482中发表的文章中描述的局部同源性运算法则，利用Needleman以及Wunsch于1970年在J.Mol.Biol.《分子生物学杂志》48:443中发表的文章中描述的同源性比只于运算法则，利用Pearson以及Lipman于1988年在Proc.Natl.Acad.Sci.(U.S.A.)《美国科学院院刊》85:2444中发表的文章中描述的对相似性方法的寻找，利用这些运算法则的计算机执行(在WisconsinGenetics软件包版本7.0(GeneticsComputerGroup,575ScienceDr.Madison,Wis.)中的GAP,BESTFIT,FASTA,以及TFASTA,Geneworks，或者MacVector專欠件包)，或者通过冲企查，并且对于由上述各种方法所产生的最佳比对(即，在所述的比4交窗口中产生最高百分比的同源性)进4亍选择。63所述的术语"序列同一性，，指的是在所述的比4交窗口中两个多核香酸序列或者氨基酸序列是相同的(即，以核苷酸或者残基的方式)。所述的术语"序列同一性的百分tt"是通过下述方式计算的在所述的比较窗口中对两个最佳比对的序列进行比较，确定在两个序列中出现同样的核酸石威基(例如，A,T,C,G,U或者I)或者残基的位置的个数，从而获得匹配位置的个数，用所述的匹配〗立置的个凄t除以在所述的比4交窗口中的^f立置的总个数(即，窗口尺寸)，并且将得到的结果乘以100,/人而得出所述的序列同一性的百分数。这里所^吏用的所述术语"本质同一性"代表的是多核苷酸序列或者氨基酸序列的性质，其中所述的多核苷酸序列或者氨基酸序列包括具有至少85%的序列同一性的序列，^f尤选具有至少90%至95%的序列同一'l"生，更常具有至少99%的序列同一性，其中所述的序列同一性是在比库交窗口中与参考序列进行比较而得到的，其中所述的比较窗口具有至少18个核香酸(6个氨基酸)的^立置，通常情况下所述的窗口具有至少24-48个核苷酸(8-16个氨基酸)的位置，其中所述的序列同一性百分数是通过下述方式来计算的将所述的参考序列与一种可能包括缺失或者添加的序列进行比较，其中所述的参考序列的共计20%或者更少位于所述的比專交窗口之中。所述的参考序列可以是更大的序列的亚类。这里所使用的二十个常规氨基酸以及它们的缩略语是依照常^L的用法来4吏用的。参见Immunology画ASynthesis《免疫学合成方法》(第二片反，E.S.Golub以及D.R.Gren编辑，SinauerAssociates,SunderlandMass,1991年)。所述的二十个常^见氨基酸的立体异构体(例如，D-氨基酸)，非天然氨基酸例如ot-,a-二取代氨基酸，N-烷基氨基酸，乳酸，以及其他非常规氨基酸也可能成为本发明所述的多肽中的适合的组分。非常规氨基酸的例子包括4-羟基脯氨酸，？羧基谷氨酸盐，s-N,N,N-三曱基赖氨酸，s-N-乙酰基赖氨酸，O-磷酸化丝氨酸，N-乙酰基丝氨酸，N-曱酰基曱硫氨酸，3-甲基组氨酸，5-羟基赖氨酸，cj-N-甲基精氨酸，以及其他类似的氨基酸以及亚氨基酸(例如，4-羟基脯氨酸)。依照标准的用法以及惯例，在本发明中所4吏用的所述多肽标记中，左侧的方向是所述的氨基末端方向而右侧的方向是所述的羧基末端方向。相类似的，除非另外指明，单链多核普酸序列的左侧端是所述的5，端，^又链多核苷酸序列的左侧端指的是所述的5'方向。初生RNA转录体的5，至3'方向的加成指的是在所述的DNA链上的转录方向序列区域与所述的RNA具有同才羊的序列并且是乂人5，到所述RNA转录体的5'端，这样的序列3皮称为"上游序列"，到所述RNA转录体的3，端，这样的序列一皮称为"下游序列"。当应用于多肽时，所述的术语"本质同一性"指的是当将两个肽序列进4于最佳比对时，它们享有至少80%的序列同一性，优选至少90%的序列同一'I"生，更加优选至少95%的序列同一'l"生，并且最优选至少99%的序列同一性，其中所述的最佳比对是利用例如所述的GAP或者BESTFIT程序在默认空位重量的情况下完成的。优选的，不相同的残基部分中存在着保守性氨基酸取代的差别。保守性氨基酸取代指的是具有类似侧链的残基之间的相互交换能力。例如，具有脂肪族侧链的一组氨基酸是甘氨酸，丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸，以及异亮氨酸；具有脂肪族-羟基侧链的一组氨基酸是丝氨酸以及苏氨酸；具有含有酰胺的侧链的一组氨基酸是天冬酰胺以及谷氨酰胺；具有芳香族侧链的一组氨基酸是65苯丙氨酸，酪氨酸，以及色氨酸；具有石威性侧链的一组氨基酸是赖氨酸，精氨酸，以及组氨酸；具有含硫侧链的一组氨基酸是半胱氨酸以及曱硫氨酸。优选的保守性氨基酸取代组合是缬氨酸-亮氨酸-异亮氨酸，苯丙氨酸-酪氨酸，赖氨酸-精氨酸，丙氨酸，缬氨酸，谷氨酸-天冬氨酸，以及天冬酰胺-谷氨酰胺。正如这里所讨i仑的，可以预期的是，在其氨基酸序列中具有次要变异的抗体或者免疫球蛋白分子是被包括在本发明的范围之内的，只要所述的氨基酸序列中的所述变异保持在至少75%,更加优选至少80%，90%,95%，并且最优选为99%。具体的，保守性氨基酸的取代是可以预期的。保守性取代指的是那些在一类氨基酸家族中发生的取代，其中所述的氨基酸家族是通过它们的侧链相关联的。遗传编码的氨基酸通常被划分为下述家族(l)酸性氨基酸，为天冬氨酸，谷氨酸；(2)石威性氨基酸，为赖氨酸，精氨酸，组氨酸；(3)非极性氨基酸，为丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨S臾，脯氨酸，苯丙氨酸，甲硫氨酸，色氨酸，以及(4)不带电荷的极性氨基酸，为甘氨酸，天冬酰胺，谷氨酰胺，半胱氨酸，丝氨酸，苏氨酸，酪氨酸。所述的亲水性氨基酸包括精氨酸，天冬酰胺，天冬氨酸，谷氨酰胺，谷氨酸，组氨酸，赖氨酸，丝氨酸，以及苏氨酸。所述的疏水性氨基酸包括丙氨酸，半胱氨酸，异亮氨酸，亮氨酸，曱硫氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸，色氨酸，酪氨酸以及缬氨酸。其他的氨基酸家族包括(i)丝氨酸以及苏氨酸，它们是所述的脂肪族-羟基家族；(ii)天冬酰胺以及谷氨酰胺，它们是所述的含有酰胺的家族；(iii)丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸以及异亮氨酸，它们是所述的脂肪族家族；以及(iv)苯丙氨酸，色氨酸，以及酪氨酸，它们是所述的芳香族家族。例如，我们可以合理的预料到，利用异亮氨酸或者缬氨酸对亮氨酸进行单独的取代，利用谷氨酸对天冬氨酸进行单独的取代，利用丝氨酸对苏氨酸进行单独的取代，或者利用在结构上相关联的氨基酸对氨基酸进行类似的取代，这将不会对得到的分子的结合能力或者性质产生较大的影响，特别是当所述的取代不涉及到存在于骨架位点内的氨基酸时。可以通过对所述的多肽4汙生物的特异性活性进行#:测，/人而容易的确定出氨基酸的改变是否产生了功能性的肽。所述的才全测会在本.发明中进4亍详细的描述。本领域普通技术人员能够容易的制备出抗体或者免疫球蛋白分子的片段或者类似物。片段或者类似物的优选的氨基末端以及羧基末端出现在靠近功能性区i或的边界处。可以通过将所述的核苷酸序列和/或氨基酸序列数据与公开的序列数据库或者私有的序列数据库进行比较，来识别结构以及功能区域。优选的，使用计算机化的比较方法来识别序列基序或者预言蛋白的构象区域，其中所述的序列基序或者构象区域存在于具有已知的结构和/或功能的其他蛋白中。用来识别被折叠成已知的三维结构的蛋白序列的方法是已知的。参见Bowie等人于1991年在Science《考牛学》253:164中发表的文章。因此，下述的实施例表明，本领域j支术人员能够识别序列基序以及结构构象，所述的序列基序以及结构构象可以一皮用来定义依照本发明所述的结构以及功能区i或。优选的氨基酸取代是这样的，所述的氨基酸取代能够(1)降低对蛋白质水解的易感性，(2)降低对氧化的易感性，(3)改变用以形成蛋白质复合物的结合亲和性，(4)改变结合亲和性，以及(5)赋予或者修饰这些类似物的其他物理化学特性或者功能特性。类似物可以包4舌序列的各种突变蛋白，其不同于所述的天然存在的肽序列。例如，可以在所述的天然存在的序列中(优选发生在存在于形成分子间^接触的区域之外的多肽部分中)进4亍单个或者多个氨基酸的取代(优选是保守性氨基酸的取代)。保守性氨基酸的取"气应当不能够在本质上改变所述母本序列的结构性质(例如，耳又^的氨基酸应当不能够趋向于石皮坏存在于所述母本序列中的螺旋结构，或者石皮坏用以定义所述的母本序列的其67他类型的次级结构)。本领域认知的多肽的次级结构以及三级结构的例子在下述文章中有所描述Proteins,StructuresandMolecularPrinciples《蛋白的结构以及分子原理》(Creighton编l辱，W.H.FreemanandCompany,NewYork纽约，1984年)；IntroductiontoProteinStructure《蛋白纟吉4勾的介纟召》(C.Branden以及J.Tooze编l專，GarlandPublishing,NewYork纽约N.Y.,1991年)；以及Thornton等人于1991年在Nature《自然》354:105中发表的文章。这里所使用的所述术语"多肽片段"指的是在氨基末端和/或羧基末端上具有缺失的多肽，但是所述多肽上的其余的氨基酸序列与天然存在的序列的相应位置是相同的，其中所述的天然存在的序列例如是乂人完全长度的cDNA序列中推导出来的。片段通常是至少5，6,8或者10个氨基酸的长度，优选至少14个氨基酸的长度，更加优选至少20个氨基酸的长度，通常为至少50个氨基酸的长度，并且甚至更加优选至少70个氨基酸的长度。这里所使用的所述术语"类似物"指的是由具有至少25个氨基酸的片辜殳所构成的多肽，其与4,导(deduced)的氨基酸序列的一部分具有本质同一性，并且其具有下述特性中的至少一种(1)在适当的结合条件下，与干扰素诱导蛋白-10发生特异性的结合，或者(2)具有能够阻碍恰当的干扰素诱导蛋白-10结合的能力。性氨基酸的耳又代(或者添加或者缺失)。类似物通常具有至少20个氨基酸的长度，优选至少50个氨基酸的长度或者更长，并且通常可以与完全长度的天然存在的多肽具有相同的长度。肽的类似物;故普遍应用于制药工业中，作为与所述的才莫板肽具有类似性质的非肽类药物。这些类型的非肽类化合物一皮称为"肽的才莫拟物，，或者"才莫拟肽"。参见Fauchere于1986年在J.Adv.DmgRes.《药物的研究进展杂志》15:29中发表的文章，Veber以及Freidinger于1985年在TINSp.392中发表的文章；以及Evans等人于1987年在J.Med.Chem.《药物化学杂志》30:1229中发表的文章。这类化合物通常要借助于计算机化的分子模型来进行研究。肽的模拟物可以被用来制造一种等价的治疗效应或者预防效应，其中所述的纟莫拟物在结构上与治疗有岁文性的肽的结构相类似。一般而言，模拟肽在结构上类似于模板多肽(即，具有生物化学特性或者药理学活性的多肽)，例如人类抗体，<旦其具有的或者多个肽连4妻4建任选的^皮选自下述组中的连4妻4建进4亍了取代-CH2NH-，-CH2S-,-CH2-CH2-，-CH=CH-(顺式以及反式)，-COCH2-，CH(OH)CH2-，以及画CH2SO-，所述的取^通过本领域熟知的方法来完成。利用同样类型的D-氨基酸(例如，利用D-赖氨酸耳又代L-赖氨酸)对共有序列中的或者多个氨基酸进4亍系统性的耳又^f戈，可以用以生成更加稳、定的肽。除此之夕卜，可以通过本领域已知的方法(参见Rizo以及Gierasch于1992年在Ann.Rev.Biochem.《生物化学年鉴》61:387中发表的文章)生成一种限制性肽，所述的限制性肽包括共有序列或者本质上相同的共有序列变体；例如，通过加入内部半胱氨酸残基的方法，其中所述的半胱氨酸残基能够形成存在于分子内的二碌J定，所述的二石克4建能够-使所述的肽发生环化。用在这里的所述术语"试剂"代表的是化学化合物，化学化合物的混合物，生物大分子，或者是来自于生物物质的纟是取物。这里所-使用的所述术语"标记"或者'4皮标记的"指的是一种可探测性的标记物的导入，例如，导入一种》文射性标记的氨基酸，或者将生物素化的半族与多肽进4亍连4妻，其中所述的生物素化的半力矣能够^皮标记的抗生物素蛋白(例如，含有荧光素标记物或者酶活性的链亲合素，所述的链亲合素可以通过光学方法或者量热方法进行探测)进行探测。在某些情形中，所述的标记或者标记物也可以是具有治疗活性的。用于标记多肽以及糖蛋白的各种方法是本领域已知的并且是可以^皮使用的。用于多肽的标记的例子包括，但不局限于，下述放射性同位素或者放射性核(例如，3氢，14碳，15氮，35硫，90Y,"锝，m铟，125碘，131碘)，荧光素标记(例如，异碌u氰酸，若丹明，稀土石粦)，酶标记(例如，辣根过氧化物酶，p-半乳糖苷酶，荧光素酶，碱性磷酸酶)，化学发光剂，生物素化的基团，由二级报告基因(例如，亮氨酸拉《连对序列，次级抗体的结合位点，金属结合区域，表位标签)识别的预先确定的多肽表位。在一些实施方式中，标记被连4妄上各种长度的间隔臂(spacerarm),用以减少可能的位阻现象。这里所使用的所述术语"药物制剂或者药物"指的是一种化学化合物或者组合物，当将所述的化学化合物或者组合物以适当的形式施用给患者时，能够引发期望的治疗效应。这里所〗吏用的其他的化学术语依照本领域的常^L用法进4亍使用，正如在McGraw-HillDictionaryofChemicalTerms《McGraw-Hill化学术语词典》(Parker,S.编辑，McGraw-Hill,SanFrancisco,1985年)中所例i正的。这里所^使用的"本质上纯的"指的是目标种类是以占主要地位的种类而存在的(即，以分子计，在所述的组合物中，它比其他任〗可的各种种类都更加丰富)，并且优选的，本质上纯化的片段是一种组合物，其中所述的目标种类占所存在的全部的大分子种类的至少大约50%(以分子计)。一般而言，一种本质上纯的组合物将占存在于该组合物中的全部大分子种类的高于大约80%，更加优选高于大约85%,90%,95%,以及99%。最4尤选的，所述的目冲示物种3皮纯4匕成为基本上是同质的(利用常规的探测方法在所述的组合物中不能探测到污70染种类)，其中所述的组合物基本上是由一种大分子种类所组成的。所述的术语患者包4舌人类以及兽医宿主。所述的术语宿主包4舌人类以及其^也哺乳动物。人类抗体以及抗体的人源化利用例如下文中所提供的实施例中描述的方法，生成人类干扰素i秀导蛋白-lO抗体。例如，通过转化单链可变区域抗体片,殳(scFv)克隆一种免疫球蛋白G形式(format),来生成一种免疫球蛋白G人类干扰素诱导蛋白-10抗体(参见，例如，实施例9)。例如，人类干扰素诱导蛋白-10抗体被重新编排成为一种同型免疫球蛋白Gl。在其他的可供选4奪的方法中，例如，利用噬菌体展示的方法形成人类干扰素诱导蛋白-10抗体，其中在所述的方法中使用仅含有人类序列的抗体。这样的方法是本领域熟知的，例如，在WO92/01047以及美国专利No.6,521,404中有所描述，上述文章在此引入作为参考。在这种方法中，利用天然来源或者重组来源的干扰素诱导蛋白-10或其片段对一种噬菌体组合文库进行筛选，其中所述的噬菌体组合文库带有轻链以及重链的随才几组合对。在另外一种方法中，可以使用一种过程制备人类干扰素诱导蛋白-10抗体，其中在所述的过程中的至少步骤中包4舌利用人类干扰素诱导蛋白-10蛋白对转基因的非人类动物进行免疫。在这种方法中，这种异种非人类动物的某些内生性重链位点和/或K轻链位点丧失了作用，并且不能够进4于重新排列，而所述的重新排列是生成基因编码的免疫球蛋白用以应答抗原所必需的。除此之外，至少人类重4连位点以及至少人类轻链位点纟皮稳、固的转染至所述的动物中。因此，在4十只于#1施用的抗原所产生的应答中，所71述的人类位点进行重新排列，从而提供了基因编码的人类可变区通过进行免疫，异种小鼠生成了能够分泌完全人类免疫球蛋白的B细胞。用于制备异种非人类动物的各种纟支术是本领域熟知的。例如，参见美国专利No.6,075,181以及No.6,150,584,上述文章中的全部内容在此引入作为参考。在生成首个异种小鼠XenoMouseTM品系的同时，这种一般性的方法被得到了证明，这是在1994年7>开的。参见Green等人于1994年在NatureGenetics《自然遗传学》7:13-21中发表的文章，上述文章中的全部内容在此引入作为参考。同才羊可以参见，美国专利No.6，162,963,6,150,584,6,114,598,6,075,181,以及5,939,598,以及日本专利No.3068180B2，3068506B2,以及3068507B2,以及g欠洲专禾jNo.EP0463151Bl,以及国际、专矛j申i青No.WO94/02602,WO96/34096，WO98/24893，WO00A76310以及相关的同族申请。在一种可供选才奪的方法中，其他人利用了一种"孩丈小位点(minilocus)"的方法，通过夹杂来自于所述的免疫^求蛋白(Ig)位点的片段(单独的基因)，对外生性免疫球蛋白位点进行模拟。因此，或者多个重链可变区i或(VH)基因，或者多个重《连D区域(Dh)基因，或者多个重链J区域(JH)基因，p恒定区域，以及另外恒定区i或(优选是Y恒定区i或)在构建体中形成，所述的构建体用于插入到动物体内。参见，例如，美国专利No.5,545,806;5,545,807;5,591,669;5,612,205;5,625,825;5,625,126;5,633,425;5,643,763;5,661,016;5,721,367;5,770,429;5,789,215;5,789,650;5,814,318;5,877,397;5，874，299;6，023，010j以及6,255,458;以及区欠洲专矛jNo.O546073Bl;以及国卩示专矛J申请No.WO92/03918,WO92/22645,WO92/22670,WO93/12227，WO94/00569,WO94/25585，WO96/14436，WO97/13852,以及WO98/2484以及相关的同力矣申"i青。经由樣史细胞的融合、大的染色体片,殳、或者完整的染色体途径/人小鼠中生成人类抗体的方法已经#L介绍并且也已经得到了i正明。参见欧洲专矛J申"i青No.773288以及843961。人类抗小鼠抗体(HAMA)的应答引导了制备嵌合抗体或者另外的人源化抗体的工业。由于嵌合抗体具有人类的恒定区域以及免疫可变区域，可以预料到，将能够观察到某些人类嵌合抗体(HACA)的应答，特別是在所述抗体的长期应用或者多剂量应用中。因此，为了损害人类抗小鼠抗体或者人类嵌合抗体的应答的关系和/或效应，提供作用于干扰素诱导蛋白-10的完全人类抗体将是合乎人意的。具有降低的免疫原性的抗体的制备也可以经由人源化技术以及展示才支术来完成，其中4吏用适当的文库。可以感知的是，能够4吏用本领域熟知的4支术对鼠科动物的抗体或者来自于其他物种的抗体进行人源化处理或者灵长目源化处理。参见，例如，Winter以及Harris于1993年在ImmunolTday《当今免疫学》14:43-46中发表的文章以及Wright等人于1992年在Crit，ReviewsinImmunol.《免疫学的评i仑与回顾》12125-168中发表的文章。可以利用重组DNA才支术对所述的目标抗体进4亍工#呈4匕处理，/人而利用相应的人类序列》于所述的重链恒定区i或(CH1)，重链恒定区域2(CH2),重链恒定区域(CH3),4交链区域，和/或骨架区域进行取代(参见WO92102190以及美国专利No.5,530,101,5,585,089,5,693,761,5,693,792，5,714,350,以及5,777,085)。同样的，使用免疫球蛋白cDNA构建嵌合免疫球蛋白基因是本领域已知的(参见Liu等人于1987年在P.N.A.S.《美国科学院院刊》84:3439中发表的文章以及于1987年在J.Immunol.《免疫学杂73志》139:3521中发表的文章)。从杂交瘤或者制备所述抗体的其他细胞中分离出mRNA并且用于制备cDNA。4吏用特异性的引物通过聚合酶链式反应可以对所述的目标cDNA进^f亍扩增(参见美国专利No.4，683,195以及4,683,202)。或者，制备文库并且对其进行筛选，乂人而分离出所述的目标序列。随后，将编码所述抗体的可变区域的所述DNA序列融合到人类恒定区域序列中。所述的人类恒定区域基因序列可以在Kabat等人于1991年在SequencesofProteinsofimmunologicalInterest《具有免疫学兴趣的蛋白序列》N丄H美国国立卫生研究院出版，no.91-3242中发表的文章中找到。可以从已知的克隆中容易的获得人类恒定区域基因。可以利用期望的效应子功能来指导同型体的选#^,所述的效应子功能是例如补体结合，或者抗体依赖性细力包毒作用的活性。优选的同型体是免疫J求蛋白Gl,免疫^求蛋白G3以及免疫5求蛋白G4。所述的人类轻链恒定区域，k或者X,均可以被使用。之后，利用常规的方法使所述的嵌合的人源化抗体进行表达。抗体片段，例如Fv，FUb，)2以及Fab可以通过完整蛋白的裂解来制备，例如，通过蛋白酶裂解或者化学裂解。或者，可以i殳计一种截短型基因。例如，一种编码所述的Fub，,2片萃殳中的一部分的嵌合基因，应当包括编码所述的重链的重链恒定区域1以及铰链区域的DNA序列，以及翻i,终止密码子，/人而生成所述的截短型分子。可以使用重链(H)以及轻链(L)的J区域中的共有序列来设计寡核苦酸，所述的寡核普酸作为引物;波用来向所述的J区域中导入有效的限制性位点，用于进行随后的可变区域片段与人类恒定区i或片|殳的连4妄。可以通过定点突变的方式只于恒定区域的cDNA进行修饰，从而在所述的人类序列的类似位置处设置限制性位点。表达载体包括质粒，逆转录病毒，酵母人工染色体(YAC),来自于EB病毒的游离体，以及类似物质。一种^更利的载体是这样的它编码一种功能完全的人类重链恒定区域或者轻链恒定区域免疫球蛋白序列，其中在适当的限制性位点上进行了工程化处玉里，这—才羊一.来，^f壬4可的重在l可变—或.者4圣会€可变-31,序列可以#史容易的插入并且进4亍表达。在这样的载体中，剪4妄通常发生在所述被插入的J区域中的所述剪接供体位点与在所述的人类恒定区域前面的所述剪4妄供体位点之间，并且也发生在存在于所述的人类重链恒定区i或外显子中的所述剪4妄区i或中。多苦酸化以及转录终止发生在所述的编码区域下游的天然染色体位点上。所得到的嵌合抗体可以与^f壬意的强大启动子进行结合，其中所述的启动子包括逆转录病毒长末端重复序列(LTR),例如，SV-40早期启动子(参见Okayama等人于1983年在Mol.CellBio.《分子生物学》3:280中发表的文章)，劳斯肉瘤病毒长末端重复序列(LTR)(参见Gorman等人于1982年在P.N.A.S.《美国科学院院刊》79:6777中发表的文章)，以及莫洛尼鼠白血病病毒长末端重复序列(LTR)(参见Grosschedl等人于1985年在Cell《纟田胞》41:885中发表的文章)。同^f羊的，可以感知的是，天然的免疫^求蛋白启动子以及类似的启动子是可以被使用的。而且，可以经由展示类才支术来生成人类抗体或者来自于其他物种的抗体，其中所述的展示类技术包括，^旦不局限于，噬菌体展示，逆转录病毒展示，核糖体展示，以及其他的技术，使用本领域熟知的技术进行，并且可以对得到的分子进行额外的成熟，例如亲和力成熟，因为这些才支术是本领i或中熟知的。参见Wright以及Harris在前文中所述的发表的文章，Hanes以及Plucthau于1997年在PNASUSA《美国-牛学院院刊》94:4937-4942中发表的文章(核并唐体展示)，Parmley以及Smith于1988年在Gene《基因》73:305-318中发表的文章(噬菌体展示)，Scott于1992年在TIB5《生物技术发展趋势》17:241-245中发表的文章，Cwirla等人于1990年在PNASUSA《美国科学院院刊》87:6378-6382中发表的文章，Russel等人于1993年在Nucl.AcidsResearch《冲亥酉臾的研究》21:1081-1085中发表的文章，Hoganboom等人于1992年在Immunol.Reviews《免疫学评-论》130:43-68中发表的文章，Chiswell以及McCafferty于1992年在TIBTECH《生物^支术发展趋势》10:80-8A中发表的文章，以及美国专利No.5,733,743。如果利用展示技术来制备不属于人类的抗体，可以按照上文中所描述的方法对这些抗体进4于人源化处理。利用这些4支术，可以在干扰素"i秀导蛋白-10表达细胞、干扰素诱导蛋白-10本身、干扰素诱导蛋白-10的各种形式、它们的表^f立或者肽、以及其中的表达文库中生成4元体(参见，例如，美国专利No.5，703，057)，在此之后可以按照上文中所描述的方法对于所述抗体所具有的上文中所描述的活性进4亍筛选。其4也治疗剂的"i殳计以及生成导蛋白-10的抗体的活性，可以容易的设计出超越抗体半族的其4也的治疗方法的形态。这冲羊的形态包4舌，卩旦不局限于，高级4元体治疗剂，例如双特异性抗体，免疫毒素，以及放射性标记的治疗方法，生成肽的治疗方法，基因疗法，特別是机体内的反义治疗方法，以及小分子。例如，在与双特异性抗体有关的情形中，可以生成的双特异性抗体包括(i)两种抗体，其中一种对干扰素诱导蛋白-10具有特异性，而另外一种对与其一同共轭的另外分子具有特异性，(ii)一种抗体，所述的抗体中的一条链对干扰素诱导蛋白-10具有特异性，而另外一条链对另外分子具有特异性，或者(iii)一种抗体以及其他分子，其中所述的抗体对干扰素诱导蛋白-10具有特异性。〗吏用本领域熟知的4支术生成这样的双特异性抗体，例如，当出现(i)以及(ii)中所述的情况时，参见，例如，Fanger等人于1994年在ImmunolMethods《免疫学方法》4:72-81中发表的文章以及Wright以及Harris在前文中所述的发表的文章，并且当出玉见(iii)中所述的情况时，参见，例如，Traunecker等人于1992年在Int丄Cancer(Suppl.)《国际癌症杂志(增刊)》7:51-52中发表的文章。在与免疫毒素有关的情形中，可以利用本领域熟知的^支术对抗体进行<务饰，使其发挥免疫毒素的作用。参见，例如，Vitetta于1993年在ImmunolToday《当今免疫学》14:252中发表的文章。同样可以参见美国专利No.5，194，594。在与》丈射性标记的抗体的制备有关的情形中，同样可以利用本领域熟知的技术容易的制备出这样的经过修饰的抗体。参见，例如，Junghans等人在CancerChemotherapyandBiotherapy《癌症的4匕学疗、法以及生物疗法》655-686中发表的文章(第二版，Chafner以及Longo编辑，Lippi腦ttRaven,1996年)。同样可以参见美国专利No.4,681，581，4,735,210，5,101,827，5,102,990(RE35,500)，5,648,471，以及5,697,902。每一种免疫毒素以及i文射性标记的分子都可能杀灭表达干扰素诱导蛋白-10的细胞，并且特别能够杀灭那些本发明所述的抗体在其中有效的发挥作用的细胞。在与治疗性肽的生成有关的情形中，通过利用与干扰素诱导蛋白-10及其抗体相关的结构信息，或者通过对肽文库的筛选，能够生成直接作用于千扰素诱导蛋白-10的治疗活性肽，其中所述的干扰素i秀导蛋白-10的抗体例如是本发明所述的抗体。对于肽治疗剂的设计以及筛选在下述文章中进行了讨-论Houghten等人于1992年在Biotechniques《生物技术》13:412-421中发表的文章，Houghten于1985年在PNASUSA《美国牙牛学院院刊》82:5131-5135中发表的文章，Pinalla等人于1992年在Biotechniques《生4勿4支术》13:901-905中发表的文章，Blake以及Litzi-Davis于1992年在BioConjugateChem.《生物结合物4匕学》3:510-513中发表的文章。免疫毒素以及放射性标记分子还可以以一种与在与上文中与抗体有关的内容中所讨i仑的肽半》矣相关内容相类似的方式进行制备。假定所述的干扰素诱导蛋白-10分子(或者是一种形式，例如是一种剪接变体或者改变的形式)在一种疾病的过程中在功能上是活化的，那么同样有可能通过常规的技术来设计它的基因以及反义治疗方法。这样的形态可以被用来调节所述的干扰素诱导蛋白-10的功能。与此相关的是，本发明所述的抗体促进了功能性检测的设计以及使用，其中所述的功能性4企测是与所述的抗体相关的。在国际专利申"i青No.WO94/29444中详细讨i仑了反义治疗方法的i殳计以及策略。基因疗法的设计以及策略是熟知的。然而，具体的，涉及到机体内的基因治疗4支术的使用能够一皮证明是才各外有利的。参见，例如，Chen等人于1994年在HumanGeneTherapy《人类的基因治疗》5:595-601中发表的文章以及Marasco于1997年在GeneTherapy《基因治疗》4:11-15中发表的文章。在国际专利申请No.WO97/38137中也对基因疗法的一般设计以及涉及基因疗法的顾虑进行了讨论。乂人所述的干4尤素诱导蛋白-10分子的结构及其与本发明所述的其他分子间的相互反应中收集到的知识以及其他内容可以#皮用来理性的"i殳计其他的治疗方法形态，其中所述的本发明所述的其他分子是例如本发明所述的抗体。在这一点上，理性的药物设计技术例如X-射线结晶学，计算机辅助(或者协助)化的分子模型(CAMM),定量或者定性的构效关系(QSAR),以及类似的技术可以被用来集中进行药物探索的努力。理性的设计允许对蛋78白结构或者综合结构进行预言，其中所述的蛋白结构或者综合结构能够与其分子或者具体形式发生相互作用，其可以被用来修饰或者条件所述的干扰素诱导蛋白-10的活性。这样的结构可以被化学合成或者在生物系统中进4亍表达。这一方法已经在下述文章中^^寻以^H仑Capsey等人于1988年在GeneticallyEngineeredHumanTherapeuticDrugs《遗传工禾呈化的人类治疗学药物》(Stockton出版社，纽约)。而且，可以i殳计并且合成组合文库，并且将其用于筛选程序中，例如高通量筛选。治疗剂的施用以及配制可以感知的是，依照本发明所述的治疗剂实体的施用将可以与适当的载体，赋形剂，以及其他试剂一同进行，其中将所述的载体，赋形剂以及其他试剂导入到制剂中，从而提供改善的传递性，递送性，耐受性，以及类似性质。大多lt适合的制剂可以在净皮所有的药物4匕学家已知的头见贝'J中找到Remington'sPharmaceuticalSciences《雷明顿氏制药矛牛学》(第15片反，MackPublishingCompany,Easton，PA,1975年)，净争另'J是其中由Blaug,Seymour编写的第87章。这些制剂包括，例如，粉末，贝占剂，药膏，凝胶剂，蜡剂，油剂，脂质体，含有脂质体(阳离子的或者阴离子的)的泡嚢(例如LipofectinTM),DNA共轭物，无水吸收贴剂，水包油乳液以及油包7JC乳液，乳液，聚乙二醇(各种不同分子量的聚乙二醇)，半固态凝胶，以及含有聚乙二醇的半固态混合物。上述才是及的混合物中的任意一种用于本发明所述的治疗以及疗法中可能是恰当的，只要存在于所述制剂中的活性成分不会#皮所述的制剂进行灭活，并且所述的制剂对于所述的施用途径而言是生理学相容的以及耐受的。同样可以参见BaldrickP.于2000年在Regul.ToxicolPharmacol.《常头见毒物学以及常头见药理学》32(2):210-8中发表的文章"Pharmaceuticalexcipientdevelopment:theneedforpreclinicalguidance《药4勿贝武形齐寸的发展是临床前指导的需要》"，WangW.于2000年在Int丄Pharm.《国际药理学杂志》203(1-2):1-60中发表的文章"Lyophilizationanddevelopmentofsolidproteinpharmaceuticals《固体蛋白药#勿6勺冻干法以及发展》"，CharmanWN于2000年在JPharmSci.《药物科学杂志》89(8):967-78中发表的文章"Lipids,lipophilicdrugs,andoraldrugdelivery-someemergingconcepts《月旨质体，亲月旨')"生药物，以及口月l药物的递送中显i见出的某些7见念》"，Powell等人于1998年在PDAJPharmSciTechnol.《PDA药物科技杂志》52:238-311中发表的文章"Compendiumofexcipientsforparenteralformulations《用于肠胃外制剂中的赋形剂概略》"以及上述文章中所引用到的与药物化学家熟知的制剂、i陚形剂以及载体相关的其他信息。人类干扰素诱导蛋白-10抗体以及本发明所述的治疗制剂被用来治疗或者緩解与免疫相关性障碍有关的症状，其中所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体包括本发明中所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体，其中所述的免疫相关性障碍是例如，自身免疫性疾病或者炎性障碍。自身免疫性疾病包4舌，例如获4寻性免疫缺陷综合症(AIDS,它是一种带有自身免疫成分的病毒性疾病)，斑秃，强直性脊柱炎，抗磷脂抗体综合症，自身免疫性爱迪生氏病，自身免疫性溶血性贫血，自身免疫性肝炎，自身免疫性内耳疾病(AIED),自身免疫性淋巴增生综合症(ALPS),自身免疫性血小板减少性紫癜(ATP)，白塞病，心月几症，口炎性腹泻，疱渗样皮炎，'隻性疲劳免疫功能紊乱综合症(CFIDS)，慢性炎性脱髓鞘性多发性神经病(CIPD),瘢痕性类天疱疮，冷凝集素病，肢端硬皮综合症，克罗恩氏病，过敏性紫癜，幼年型皮肌炎，盘状狼痴，原发性混合型冷凝3求蛋白血症，纤维组织炎症，葛瑞夫氏病，格-巴二氏综合症，桥本氏甲状腺炎，特发性肺纤维化，特发性血小板减少性紫癜(ITP)，免疫J求蛋白A肾病，月夷岛素依赖性并唐尿病，幼年型慢性关节炎(斯蒂尔病)，幼年型风湿性关节炎，美尼尔氏病，混合结締iEL织病，多发性碩j匕症，重症月几无力，恶'1"生贫血，结节性多动脉炎，多软骨炎，多腺体综合症，风湿性多肌痛，多肌炎以及皮肌炎，原发性血中丙球蛋白缺乏，原发性胆汁性肝硬化，4艮屑病，关节病性4艮屑病，雷诺氏症候群，莱特氏综合症，风湿热，风湿,性关节炎，肉^犬瘤病，石更皮病(进4亍性系统性石更4匕症(PSS)，也被称为系统性硬化症(SS)),干燥综合症，僵人综合症，系统性红斑《良痴，大动月永炎，颞动月永炎/巨细月包动脉炎，溃疡性结肠炎，葡萄膜炎，白癜风以及韦格纳肉芽肿。炎性障碍包括，例如，慢性炎性障碍以及急性炎性障碍。炎性障碍的例子包括阿尔茨海默氏症，哞喘，遗传性过敏症，过敏症，动脉-更化症，支气管哮喘，湿渗，血管J求性肾炎，移纟直物抗宿主病，溶血性贫血，骨关节炎，脓血症，脑卒中，组织及器官移植，脉管炎，糖尿病性视网膜病变以及由通气机导致的肺损伤。所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体能够调节宿主中的免疫应答，例如，在人类宿主中调节免疫应答。在一种实施方式中，将用于治疗免疫相关性障碍的所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体组合物与各种抗细胞因子试剂或者抗趋化因子试剂中的任意一种进4亍组合施用。适合的抗细月包因子试剂或者4元趋化因子试剂，能够识别例如，细胞因子例如白细胞介素1(IL-1)，白细胞介素2,白细月包介素4，白细月包介素6，白细月包介素12，白细月包介素13，白细月包介素15，白细月包介素17,白细月包介素18，白细月包介素20,白细月包介素21,白细月包介素22，白细月包介素23,白细胞介素27以及白细胞介素31，和/或趋化因子例如巨噬细胞炎81性蛋白1(MIP1)a,巨噬细胞炎性蛋白1(3,正常T细胞表达和分泌调节因子(RANTES)，单核细月包趋化蛋白1(MCP1),干扰素诱导蛋白-10,干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC),干扰素诱生单核因子(MIG)，基质细胞衍生因子(SDF)以及神经趋化蛋白(fractalkine)。在一种实施方式中，将用于治疗免疫相关性障碍的所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体以及所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体组合物与一种或者多种其他试剂耳关合施用，或者与其他试剂的组合联合施用。例如，将所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体以及其他的试剂配制成一种单一的治疗剂组合物，并且所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体与所述的其他试剂是同时施用的。或者，将所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体与其他的试剂彼此分开，例如，将每一种配制成单独的治疗剂组合物，并且所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体与所述的其他试剂是同时施用的，或者所述的人类千扰素诱导蛋白-10抗体与所述的其他试剂是在治疗方案的过程中的不同时间进行施用的。例如，所述的人类干扰素i秀导蛋白-lO抗体是在所述的其他试剂的施用之前进4亍施用的，所述的人类干扰素i秀导蛋白-10抗体是在所述的其他试剂的施用之后随之进4亍施用的，或者所述的人类干护C素i秀导蛋白-lO抗体与所述的其他试剂是以一种交替的方式进行施用的。正如本发明中所描述的，所述的人类干4尤素i秀导蛋白-10抗体以及其他试剂以单一的剂量形式施用或者以多剂量的形式施用。例如，在多发性硬化症的治疗当中，所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体，或者所述抗体的治疗制剂，是与一种或者多种其他的试剂一同进行施用的，其中所述的其他的试剂是例如干扰素(3la，干扰素Plb,醋酸格拉替雷，那他珠单克隆抗体，克帕松，以及上述试剂的组合物。所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体与所述的其他试剂是同时施用的，或者所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体与所述的其他试剂是在治疗方案的过程中的不同时间进4亍施用的。在克罗恩氏病的治疗当中，所述的人类干护C素i秀导蛋白-lO抗体，或者所述抗体的治疗制剂，是与一种或者多种其他的试剂一同进4亍施用的，其中所述的其他的试剂是例如抗生素，氨基水杨酸盐，英夫利西单克隆4元体，阿达姆单克隆4元体，以及上述^式剂的组合物。适合的抗生素包括，例如，甲硝达唑和/或环丙沙星。适合的氨基水杨酸盐包括，例如，麦色拉明和/或柳氮磺胺吡啶。所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体与所述的其他试剂是同时施用的，或者所述的人类干4尤素"i秀导蛋白-10抗体与所述的其他试剂是在治疗方案的过程中的不同时间进4亍施用的。在溃疡性结肠炎的治疗当中，所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体，或者所述抗体的治疗制剂，是与一种或者多种其他的试剂一同进行施用的，其中所述的其他的试剂是例如6-巯基。票呤，硝基咪唑硫。票呤，英夫利西单克隆抗体以及上述试剂的组合物。所述的人类干扰素i秀导蛋白-10抗体与所述的其他试剂是同时施用的，或者所述的人类干扰素i秀导蛋白-10抗体与所述的其他试剂是在治疗方案的过#呈中的不同时间进4亍施用的。在4艮屑病的治疗当中，所述的人类干护G素诱导蛋白-IO抗体，或者所述抗体的治疗制剂，是与一种或者多种其他的试剂一同进行施用的，其中所述的其他的试剂是例如阿法赛特，依法利5朱单克隆抗体，阿达木单克隆抗体，英夫利西单克隆抗体，环孢霉素，曱氨虫莱卩令，以及上述试剂的组合物。所述的人类干扰素i秀导蛋白-10抗体与所述的其4也试剂是同时施用的，或者所述的人类干护C素i秀导蛋白-10抗体与所述的其他试剂是在治疗方案的过程中的不同时间进4亍施用的。在动脉硬化症的治疗当中，所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体，或者所述抗体的治疗制剂，是与一种或者多种其他的试剂一同进行施用的，其中所述的其他的试剂是例如法华林，降胆固醇类药物，以及上述试剂的组合物。适合的降胆固醇类药物包括，例如，^也汀类以及贝特类。所述的人类干护O素i秀导蛋白-lO4元体与所述的其他试剂是同时施用的，或者所述的人类千扰素诱导蛋白-10抗体与所述的其4也试剂是在治疗方案的过#呈中的不同时间进4亍施用的。所述的人类干护G素i秀导蛋白-10抗体以及所述抗体的治疗制剂被用在治疗或者緩解与免疫相关性障碍有关的症状的方法之中。例如，本发明中所述的组合物#:用来对这里所描述的4壬意一种自身免疫性疾病以及炎性障碍的症状进行治疗或者緩解。与自身免疫性障碍相关的症状包括，例如，炎症，发热，食欲不振，体重减轻，"复部症状例如，腹痛，腹泻或者侵_秘、，关节痛或者疼痛(关节痛)，疲劳，皮渗，贫血，对寒冷的才及度每l感(雷诺氏症候群)，月几肉4欠弱，月几肉疲劳，皮月夫或者组织色调的改变，呼吸短促或者其4也异常的呼吸类型，胸部疼痛或者胸部月几肉的收缩，心率异常(例如，升高或者降低)，光敏感，视力模糊或者其他异常的视觉，以及器官功能的降低。向患有免疫相关性障碍的宿主施用本发明所述的人类干拔』素i秀导蛋白-io抗体以及所述抗体的治疗制剂，其中所述的免疫相关性障碍是例如一种自身免疫性疾病或者一种炎性障碍。可以利用本领域已知的方法对患有自身免疫性疾病或者炎性障碍的宿主进行识别。例如，使用各种临床检验和/或实—睑室检验中的任意一种对免疫状况进行评价，乂人而对患有自身免疫性疾病的宿主进行识别，其中所述的临床检验和/或实-验室纟企-验是例如，身体检查，放射学4全查以及血液、尿液及大便分析，其中所述的自身免疫性疾病是例如克罗恩氏病，狼疮或者银屑病。例如，可以通过使用例如所述的抗核抗体检验(ANA)来确定在所述的血液中是否存在细胞核的自身抗体，从而对患有狼疮的患者进行识别。可以通过使用例如上消化道(GI)摄影和/或结肠镜检查分别对小肠以及大肠进行评1介，从而对患有克罗恩氏病的患者进行识另'J。可以通过例如对取自于受到侵染的皮肤斑点中的组织进行微观检查，从而对患有4艮屑病的患者进行识别，而可以通过使用例如血液4企测和/或x-射线或者其4也iU象"i平估，乂人而只于患有风湿性关节炎的患者进4亍识别。可以通过4吏用例如血液4企测，心电图(ECG),压力测试，冠状血管造影术，超声波，以及计算机断层扫描(CT),从而对患有动脉硬化症的患者进4于识別。如果实现了各种实验室结果或者临床结果中的任何一种，则认为向患有免疫相关性障碍的患者施用人类干扰素诱导蛋白-10抗体是成功的，其中所述的免疫相关性障碍是例如一种自身免疫性疾病或者一种炎性障」碍。例如，当一种或者多种与所述的障碍-相关的症状得到緩解、减轻、抑制或者不再发展到进一步的状态即恶化时，就认为向患有免疫相关性障碍的患者施用人类干扰素诱导蛋白-10抗体是成功的，其中所述的免疫相关性障碍是例如一种自身免疫性疾病或者一种炎性障5竽。如果所述的障-f,例如，一种自身免疫性障碍发生緩解或者不再发展到进一步的状态即恶化时，就i人为向患有免疫相关性障碍的患者施用人类干扰素i秀导蛋白-10抗体是成功的，其中所述的免疫相关性障碍是例如一种自身免疫性疾病或者一种炎性障碍。诊断制剂以及预防制剂本发明所述的完全人类抗干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体被用来作为诊断制剂以及预防制剂。在一种实施方式中，为患者施用本发明所述的人类干护C素"i秀导蛋白-lO单克隆抗体，其中所述85的患者具有发展成上述提及的自身免疫性疾病中的一种的危险。患者易患有一种或者多种上述提及的自身免疫性疾病的易患病体质可以-使用基因型、血清学或者生物化学标记物来确定。在本发明的另外一种实施方式中，向人类个体中施用一种人类干护L素i秀导蛋白-lO抗体，其中所述的人类个体4皮-珍断为患有一种或者多种上述4是及的自身免疫性疾病。在i貪断之后，施用人类干扰素诱导蛋白-10抗体来緩解或者逆转由自身免疫性所产生的作用。本发明所述的抗体同样可以有效的用来在患者样本中对干扰素诱导蛋白-10进行探测，并且因此可以有效的作为诊断剂。例如，本发明所述的人类干扰素诱导蛋白-10抗体可以被用在体外冲企测中，例如，酶耳关免疫口及附4全观'J(ELISA)，用来在患者样本中探测干扰素诱导蛋白-10的水平。在一种实施方式中，本发明所述的人类干护乙素"i秀导蛋白-10抗体一皮固定在一种固体支持物上(例如，孩i滴定一反的孔中)。所述的固定化抗体^皮用来作为一种捕获抗体，用于捕获测试样本中可能存在的4壬何的干护C素i秀导蛋白-10。在将所述的固定化抗体与一种患者样本进行接触之前，对所述的固体支持物进行漂洗并且4吏用阻滞剂对其进4于处理，乂人而预防所述的,皮分析物发生非特异性的吸附，其中所述的阻滞剂是例如水貂蛋白或者白蛋白。随后，-使用受试样本对所述的孔进4亍处理，其中所述的受试样本被怀疑为含有所述的抗原，或者使用含有标准剂量的抗原的溶液对所述的孔进行处理。这样的样本是，例如，来自于宿主的血清样本，其中所述的宿主被怀疑为含有一定水平的循环抗原，#^人为可以进4于病理学的it断。在将所述的受试才羊本或者标准溶液漂洗#皁之后，利用另外一种经过可纟果测性标i己处理的抗体对所述的固体支持物进行处理。所述的经过标记的另外一种抗体被用来作为^t笨测抗体。测量可^t果测性标记的水平，并且通过与来自于所述的标准样本的标准曲线进行比较，乂人而确定出存在于所述的受试样本中的所述干扰素诱导蛋白-10抗原的浓度。可以感知的是，以z使用本发明所述的人类干扰素i秀导蛋白-lO抗体进行体外诊断4企测所得到的结果为基础，依据所述的干扰素i秀导蛋白-10抗原的表达水平对宿主的疾病(例如，自身免疫性障碍或者炎性障碍)进行分级(stage)是可能的。对于一种给定的疾病而言，从宿主中揭:耳又血液样本，其中所述的宿主祐珍断为处于所述疾病的发展的各种不同阶,殳中，和/或处于在所述疾病的治疗的各种不同的时间点处。使用能够为发展或者治疗的每个阶段提供统计学显著性结果的样本群体，可以指定出所述的抗原的浓度范围，这些所述的浓度范围被认为是各个阶段的特征。在这里所引用的全部的/>开出版物以及专利文献均在此引入作为参考，就如同每一篇这样的公开出版物或者文献均被具体的并且单独的指出在此引入作为参考。公开出版物以及专利文献的引用并不意在认可其中的任何一篇为相关的现有技术，也并不构成对关于它们的内容或者日期的"i人可。本发明现在通过4巽写"i兌明书的方式进4亍描述，本领域4支术人员将可以iU只到，本发明能够以各种实施方式的形式进4于实践，并且上述的i兌明以及下述的实施例的目的在于描述，并且不构成对于随后的4又利要求的限制。实施例下述的实施例，包括所进行的试验以及所得到的结果仅仅为出于描述的目的而提供，并不能被解释成对本发明的限制。实施例1:人类干护乙素i秀导蛋白-lO的克隆，表达以及纯4匕克隆利用聚合酶链式反应(PCR)扩增，在表达质粒pET43(NovagenMadison，WI)中进4亍编石马所述的成熟蛋白人类干护C素i秀导蛋白-IO(hIPlO)(NM001565)的基因的克隆。在所述的NusA蛋白的羧基末端导入所述的X因子蛋白酶裂解位点的序列。在所述的趋化因子编码序列的羧基末端导入所述的AviTag(亲抗原性，DenverCO)生物素化位点的序列。来自于pET的质粒^皮用来进4亍与pACYC184-BirA质粒的细菌菌才木OrigamiB共转化，其中所述的pACYC184-BirA质并立编石马所述的生物素连4妾酶基因。NusA-人类干扰素诱导蛋白-lO融合蛋白的表达将隐匿(harboring)所述的表达构建体的细菌的过夜培养物以1:30的比例在才及品肉汤(InvitroGen)中进4亍稀释，其中所述的才及品肉汤中含有50孩i克/毫升的氨千西才木，10樣i克/毫升的卡那霉素，5孩i克/毫升的四环素，20孩史克/毫升的氯霉素以及50微摩的生物素。将所述的培养物于37。C下进行振荡培养，直至达至ijOD600(在600纟内米处的吸光4直)=0.7。之后力口入异丙基石l/f戈半乳糖苷(IPTG),使之最终浓度达到1毫摩，在37。C下培养15分钟并且在25。C下i告养过夜。融合蛋白的纯化以及裂解将细菌J求重新悬浮在Bugbuster蛋白抽才是试剂(Novagen)中，其中所述的Bugbuster蛋白4由才是^式剂中含有Benzonase冲亥酸酶以及蛋白酶抑制剂CompleteEDTA-free(Roche)，并且在4°C下培养1小时。通过在4。C下以lOOOOg离心15分钟的方式分离所述的可溶性片,殳以及难溶性片,史。利用十二烷基石黄酸钠-聚丙烯酰胺凝月交电泳(SDS-PAGE)(Novex凝月交，InvitroGen)对可溶性蛋白片段以及难溶性蛋白片段进行分析。将所述的可溶性片段以1/2的比例利用《爰冲液A(pH为8.0的Tris盐酸100毫摩，氯化钠600毫摩，氯化钙10毫摩，咪唑40毫摩)进行稀释，并且与50%(体积/体积)的次氮基三乙酸4臬(Ni-NTA)琼脂糖(Qiagen)进行混合，其中所述的次氮基三乙酸镍琼脂糖预先使用緩冲液B(pH为8.0的Tris盐酸50毫摩，氯化钠300毫摩，氯化钙5毫摩，咪唑20毫摩)进4亍了平4軒。在室温(RT)下将所述的混合液培养30分钟并伴随着轻柔的振荡。经过离心后获得的珠(bead)装载在Poly-Prep色i普柱(Biorad)中，-使用5体积的》爰冲液B进行三次洗涤并且利用緩冲液C(pH为8.0的Tris盐酸50毫摩，氯化钠200毫摩，氯化钩5毫摩，咪唑400毫摩)进行洗脱。收集含有所述蛋白的洗脱馏分并JU吏用PD-10柱(Amersham)进行脱盐。在3(TC下，将1毫克蛋白在裂解緩冲液(pH为8.0的Tris盐酸50毫摩，氯化钠200毫摩，氯化4丐5毫摩)中4吏用25U的因子Xi咅养共计24小时，乂人而通过因子X(Novagen,Madison，WI)使NusA-趋化因子融合蛋白发生裂解。对于某些融合蛋白而言，进行最佳裂解的所述参数存在些孩l的差别，但其可以通过改变培养时间(4-24小时)和/或温度(25-37°C)来容易的确定。利用十二烷基石黄酸钠-聚丙烯酰胺凝月交电泳(SDS-PAGE)对所述的裂解后的蛋白进行分析，并且通过趋化作用对其活性进行检验。实施例2:人类细胞表面趋化因子受体3(hCXCR3)——人类千扰素诱导蛋白-10的受体的克隆，表达通过转染生成一种鼠科动物前B'淋巴瘤L1.2细月包系，所述的细胞系能够稳定的表达一种趋化因子受体。通过聚合酶链式反应(PCR)对所述的cDNA编码的人类细胞表面趋化因子受体3进行克隆，在所述的克隆中4吏用了淋巴结cDNA(Clontech，PaloAlto,CA)作为才莫4反。使用XbaI以及NotI对所述的聚合酶链式反应产物进行消化，并且将其连结到哺乳动物表达载体pCDNA3.1-C(InvitroGne)中。通过测序对所述受体的所述编码区域的序列进行验证。通过利用20微克的线性化细胞表面趋化因子受体3表达质粒进行的电穿孔，对所述的L1.2细胞(5x106)进行转染。通过在1毫克/亳升的遗传霉素(Geneticin)的存在下进行限制性的稀释，建立其受体表达的L1.2细胞的稳定克隆。通过;危式纟田月包术(FACScan，BectonDickinson,MountainView,CA)对受体的表达水平进行确定，其中使用了直接作用于人类细胞表面趋化因子受体3的单克隆抗体(Sigma，St.Louis,MO)。实施例3:天然人类干扰素诱导蛋白-10的制备在10毫升的培养基中对1x106/毫升的Tamm-Horsfall蛋白(THP)1细月包进4亍i咅养，在所述的培养基中含有50纳克/毫升的重组人干扰素y(IFNy)。在37。c下经过过夜培养之后，对细胞进;f亍离心，收集上清液并且通过酶耳关免疫吸附才企测计算出所述的干扰素诱导蛋白-10的浓度。90实施例4:细胞在细胞表面进行人类干扰素诱导蛋白-10的表逸利用带有c-myc标签的人类干4尤素i秀导蛋白-10cDNA对中国仓鼠卵巢(CHO)细月包(乂人AmericanTypeCultureCollection美国典型微生物保藏中心(ATCC)处获得)进行稳定的转染，其中所述的带有c-myc标签的人类干扰素诱导蛋白-10cDNA在pCDNA3.1质#立(Invitrogen,Carlsbad,CA)中进4亍了亚克隆，在所述的质粒中含有新霉素抗性基因。通过使用这种抗生素对转染子进行选择，并且通过流式细胞术完成连续的细胞分选，在所述的流式纟田胞术中使用了.抗6xHis(Sigma)4元体。通过;危式细月包术i正实了人类干4无素i秀导蛋白-10的表面表达，在所述的流式细胞术中使用了抗干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体(mAb)266(R&DSystems,MinneapolisMN)。实施例5:人类单链可变区域抗体片段(scFv)文库的筛选用于构建并且处理人类单《连可变区i或抗体片,殳文库的一舶:方法在Vaughan等人(于1996年在Nat.Biotech.《天然生物技术》14:309-314中)发表的文章中进行了描述，上述文章的全部内容在此51入作为参考。根据下述的方法对作用于人类干扰素诱导蛋白-10的人类单链可变区域抗体片段文库进行筛选。:^才目的i44奪在室温下，在旋转混合器中利用磷酸緩冲液(PBS)对等份的单链可变区域抗体片段噬菌体文库(1012Pfu)进行1小时的封闭，其中所述的单链可变区域抗体片^:噬菌体文库来自于CambridgeAntibodyTechnology(剑才乔4元体4支术7>司)(剑桥，英国)，所述的磷酸緩冲液中含有3%(重量/体积)的脱脂乳。之后，在室温下，在旋转混合器中利用链霉亲和素》兹性J朱(DynalM-280)对;故封闭的噬菌体进行1小时的取消选定反应。之后，蛋白-10(100纳摩)对取消选定的噬菌体进行2小时的培养。这一选择步骤在NusA-人类干扰素诱导蛋白-lO生物素化的融合蛋白中完成，或者在生物素化的人类干扰素"i秀导蛋白-10中完成，其中所述的生物素化的人类干扰素诱导蛋白-10是通过蛋白水解的裂解反应从所述的融合蛋白中释放出来的。利用》兹性表架捕获所述的珠并且随后使用磷酸緩冲液/0.1%的吐温20进行四次洗涤并且使用磷酸緩冲液进行三次洗涤。之后，将所述的i朱直接加入到10毫升的指数生长的曱状腺球蛋白1(TG1)细胞中并且在37。C下在緩慢振荡(100rpm)的条件下培养1小时。对一等份的所述被感染的曱状腺球蛋白l进行连续稀释，从而对所述的选才奪通量(selectionoutput)进4亍滴定。将剩余的^皮感染的曱状腙_球蛋白1在3000rpm条件下离心(spun)15分钟并且重新悬浮于0.5毫升2倍的胰化蛋白胨酵母-氨千西林葡萄糖(TY-AG)中(2倍的胰化蛋白胨酵母培养基，其中含有10(H效克/毫升的氨千西林以及2%的葡萄糖)并且将其涂覆于2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖琼脂生物检测平板上。经过在30。C下的过夜培养之后，向所述的平板中加入10毫升2倍的胰化蛋白胨酵母氨节西林葡萄糖(TYAG),并且从所述的表面上刮下所述的细胞，并且将所述的细胞转移到50毫升的聚丙烯试管中。向所述的细胞悬浮液中加入含有50%的丙三醇的2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖，乂人而获得最终浓度为17%的丙三醇。将本4仑中选4奪的等份在-80。C下进行保存。细月包表面的选择在室温下，在旋转混合器中利用磷酸緩冲液(PBS)对等份的单链可变区域抗体片段噬菌体文库(1012Pfu)进行1小时的封闭，其中所述的单链可变区域抗体片賴:i寇菌体文库来自于CambridgeAntibodyTechnology(剑桥4元体4支术公司)(剑桥，英国)，所述的磷酸緩冲液中含有3%(重量/体积)的脱脂乳。之后，在37。C下5%的二氧化石友中，利用中国仓鼠卵巢细胞对#1封闭的噬菌体进行l小时的取消选定反应，其中所述的中国仓鼠卵巢细胞被空的展示(pDisplay)载体(在T75长颈瓶中，流量80%)进行了转染，并且所述的中国仓鼠卵巢细月包之前利用含有2%(重量/体积)的脱脂乳的磷酸緩冲液进行了封闭。之后，在室温下利用中国仓鼠卵巢展示人类干扰素y(CHO-pDisplay-hIFNY)细胞对所述的耳又消选定的噬菌体进行培养，并伴随着轻柔的振荡。之后利用^粦酸纟爰沖液对细l包进^于十次的洗涤。通过向所述的T75长颈瓶中直接加入10毫升指数生长的甲状腺球蛋白1(TG1)对结合的噬菌体进行洗脱，并且在37。C下在緩慢振荡的条件下培养1小时。对一等份的所述被感染的曱状腺球蛋白l进行连续稀释，从而对所述的选择通量(selectionoutput)进行滴定。将剩余的被感染的曱状腺3求蛋白1在3000rpm条件下离心(spun)15分钟并且重新悬浮于0.5毫升2倍的胰化蛋白胨酵母-氨千西林葡萄糖(TY-AG)中(2倍的月夷化蛋白胨酵母培养基，其中含有100樣吏克/毫升的氨千西林以及2%的葡萄冲唐)并且将其涂覆于2倍的胰化蛋白胨酵母氨节西林葡萄糖琼脂生物检测平板上。经过在30。C下的过夜培养之后，向所述的平板中加入10毫升2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖(TYAG),并且从所述的表面上刮下所述的细月包，并且将所述的细胞转移到50毫升的聚丙烯试管中。向所述的细胞悬浮液中加入含有50%的丙三醇的2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖，从而获得最终浓度为17%的丙三醇。将本轮中选4奪的等份在-80。C下进行保存。噬菌体营救将100樣i升从先前的几轮选择中获得的细胞悬浮液加入到20毫升2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖中并且在37。C下进4亍4觉才半(240rpm)i咅养，直至OD600(在600纟内米下的吸光<直)达到0.3至0.5。之后，利用3.3x101G个MK13K074甫助p藍菌体对所述的培养物进4亍重叠感染，并且在37。C小进^f亍1小时的培养(150rpm)。之后通过在2000rpm下^1寻戶斤述的细月包离心10分4中来改变所述的培养基，去除所述的培养基并且将所述的小球重新悬浮于20毫升2倍的胰化蛋白胨酵母-氨千西林卡那霉素(TY-AK)中(100微克/毫升的氨苄西林；50微克/毫升的卡那霉素)。之后使所述的培养物在30。C下生长过夜(240rpm)。用于进4于酶耳关免疫吸附试—验(ELISA)的单克隆噬菌体营救将单个的克隆釆集到樣"离定才反内并且4吏其在37。C下生长5-6小时(100-120rpm)，其中在所述的樣i滴定板的每个孔中含有150微升2倍的胰化蛋白胨酵母氨节西林葡萄糖培养基(2%的葡萄糖)。向每个孔中加入M13K07辅助噬菌体，乂人而获得为10的感染复凄t(MOI)(即，在所述i咅养物中的每个细月包有IO个噬菌体)并且在37。C下进行1小时的培养(100rpm)。在生长过后，将所述的培养^反在3200rpm下离心IO分钟。小心的除去上清液，将细胞重新悬浮于150樣i升24咅的力夷化蛋白胨酵母氨千西林卡那霉素培养基中并且在30。C下生长过夜(120rpm)。为了进行酶联免疫吸附试-验，通过加入15(H效升2倍浓度的磷酸緩冲液对所述的噬菌体进行封闭，其中所述的磷酸緩冲液中含有5%的脱脂乳粉末，并且在此之后在室温下进行1小时的培养。之后，将所述的培养斧反在3000rpm下离心10分4中并且将含有上清液的所述的噬菌体用于进4亍所述的酶耳关免疫吸附试-验。94利用存在于磷酸緩冲液中的2微克/毫升的人类干扰素Y对酶联免疫吸附试验培养板(Maxisorb,NUNC)进行过夜涂覆。利用2微克/毫升的牛血清白蛋白(BSA)对对照培养板进行涂覆。之后在室温下利用3%的脱脂乳/-粦酸纟爰冲液对所述的培养4反进4亍l小时的封闭。利用磷酸緩冲液、0.05%的吐温20对培养板进4亍三次洗涤，之后转移所述的预封闭的噬菌体上清液并且在室温下对其进行l小时的培养。利用磷酸緩冲液、0.05%的吐温20对培养板进行三次洗涤。向每个孔中加入50微升3%的脱脂乳/磷酸纟爰沖液，其中含有f束才艮过氧化物酶(HRP)-共举厄的抗M13抗体(Amersham，以l:10000的比例进行了稀释)。在室温下经过了l小时的培养之后，利用磷酸緩冲液、0.05%的吐温20对培养板进行5次洗涤。通过加入50微升的四曱基联苯胺(TMB)(Sigma)以及5(H效升2N的碌u酸来终止所述的反应，从而实现了所述的酶联免疫吸附试-验。在450纳米处读取吸收强度。噬菌体克隆测序将单个的克隆力文置于〗效滴定板内并且4吏其在30°C下生长过-泉(120rpm),其中在所述的孩史滴定4反的每个孔中含有15(H敬升2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖培养基(2%的葡萄糖)。第二天，将5微升的培养物转移至另外培养板中，所述的培养板中含有45孩i升的重水，并且将所述的重水与培养物进4亍混合。之后在-2(TC下对所述的培养板进行冷冻。在融化之后，使用1微升这样的悬浮液用来进行聚合酶链式反应(PCR)扩增，所述的扩增4吏用冲示准的聚合酶链式反应方法，利用只于pCANTAB6具有特异性的引物mycseq，5，-CTCTTCTGAGATGAGTTTTTG-3，(序歹'J130)以及gene3leader,5'-TTATTATTCGCAATTCCTTTAGTTGTTCCT-3,(序歹'J131)。<吏用戶斤述的MontagePCR^t96系纟克(Millipore)在96孑L的才各式中对所述的聚合酶链式反应的反应进行纯化。使用所述的mycseq以及gene3leader引物只于洗脱出的5孩吏升的DNA进4亍测序。用于进行功能检验的单链可变区域抗体片段(scFv)周质的制备将单独的克隆4秦种至深孔樣t滴定4反内并JU吏其在37°C下生长5-6小时(250rpm)，其中在所述的深孔孩i滴定斧反的每个孔中含有0.9毫升2倍的胰化蛋白胨酵母氨苄西林葡萄糖培养基(0.1%的葡萄糖)。之后，向每个孔中加入100樣史升存在于2倍的胰化蛋白胨酵母(TY)培养基中的0.2毫摩的异丙基碌^代半乳糖苷(IPTG),从而得到最终浓度为0.02毫摩的异丙基硫代半乳糖苷。之后在3(TC下将培养^反培养过夜，并且伴随着250rpm的才展荡。将所述的深孔培养4反在2500rpm下离心IO分钟并且小心的除去所述的上清液。将得到的小球重新悬浮于150微升的TES緩冲液中(50毫摩Tris/盐酸(pH为8)，1毫摩乙二胺四乙酸(pH为8),20%的蔗糖，利用完全蛋白酶抑制剂进行补充，Roche)。通过加入150孩t升经过稀释的TES緩冲液(1:5的TES:水的稀释液)并且在冰上培养30分钟来制造低渗性休克。之后将所述的i备养^反在4000rpm下离心10分4中，/人而除去细月包以及石争片。将所述的上清液小心的转移到另外微滴定板中并且将其保存在冰上，用于在功能检测或者酶联免疫吸附试验中进行即时的检验。单链可变区域抗体片段的大规模纯化将1毫升的2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖发酵剂培养物4妄种至单一菌落中并且在37。C下t展荡(240rpm)培养5小时，其中所述的单一菌落来自于新鲜的有条紋的2倍的胰化蛋白胨酵母氨节西林葡萄糖琼脂平板。将0.9毫升的这种培养物接种至400毫升相同培养基的培养物中并且在3(TC下生长过夜，并伴随着剧烈的才展荡(300rpm)。第二天，通过加入400樣i升1摩的异丙基碌^代半乳糖苷对所述的培养进行诱导，并且继续培养3小时。通过在4。C下于5000rpm的条件下离心10分钟，收集所述的细胞。将成为小球的细胞重新悬浮于10毫升的冰冷的TES緩冲液中，如上所述，其中所述的TES緩沖液中补充有蛋白酶抑制剂。通过加入15毫升以1:5的比例稀释的TES緩冲液并且在冰上进行了1小时的培养，实现了渗压^木克。在4。C下，将细胞在10000rpm下离心20分钟，使细胞碎片成为小球。将所述的上清液小心的转移至新鲜的试管中。向所述的上清液中加入。米唑，达到10毫摩的最终浓度。向每个试管中加入在磷酸緩沖液中进行平衡的次氮基三乙酸镍树脂(Ni-NTA)(Qiagen)1毫升，并且在4°C下在旋转混合器中(20rpm)进4亍1小时的i咅养。将所述的试管在2000rpm下离心5分钟并且小心的除去所述的上清液。将成为小J求的树脂重新悬浮于IO毫升冷的(4°C)洗涤緩冲液l中(50毫摩磷酸二氢钠，300毫摩氯化钠，IO毫摩咪口坐，pH为8.0)。^!夸戶斤述的悬〉'孚液力o入到polyprep4主中(Biorad)。4吏用8毫升冷的洗涤纟爰冲液2(50毫摩^粦酸二氢钠，300毫摩氯化钠，20毫摩咪哇，pH为8.0)通过重力流作用对所述的柱进行洗涤。利用2毫升的洗脱緩冲液(50毫摩磷酸二氢钠，300毫摩氯化钠，250毫摩咪哇，pH为8.0)将所述的单链可变区域抗体片,殳乂人所述的4主中洗脱出来。通过在280纳米处的吸收作用对馏分进行分析，并且收集含有蛋白的馏分，此后在PD10脱盐柱(Amersham)上进4亍1￡冲液的交4奂，其中所述的脱盐4主利用^岸酸97緩冲液进行了平衡。利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，并且通过在280纳米处的吸收作用对其进4于量4b。将所述经过纯化的单链可变区i或抗体片革殳进4亍等分，并且在-20。C下以及在4。C下进^f于存4诸。实施例6:4吏用单《连可变区域抗体片,史才是耳又物对人类干扰素诱导蛋白-10诱导的钙离子流的抑制按照上文中所描述的方法，制备各种人类干扰素诱导蛋白-10单链可变区域抗体片段的周质提取物。将表达人类细胞表面趋化因子受体3的L1.2细胞培养于RPMI培养基中，其中在所述的培养基中补充有10%的胎牛血清(FCS)。在室温下，利用2-10纳摩的人类干护C素i秀导蛋白-10(Peprotech,RockyHillNJ)对含有所述的单链可变区域抗体片段的提取物进行30分钟的培养。在磷酸《爰冲液中对细月包进4亍洗涤并且向其中装载2孩史摩的Fura2/AM(钙离子荧光探针)。向96孔的黑色、透明平底培养板的每个孔中加入100孩i升经过装载的细胞并且通过测量位于514纳米处的荧光性来记录钙离子流动力学参数，其中所述的荧光是利用FlexstationII4义器(MolecularDevices)在340纳米或者380纳米处激发的。通过与含有不相关的单链可变区域抗体片段的提取物进行比较，从而评价所述的每个单链可变区域抗体片段提取物的抑制活性。如上文的实施例5中所描述的，所述的阳性单链可变区域抗体片段待测物以更大的规模进行了表达，并且这一结论在4丐离子流检测的剂量应答试验中被得以证实(表4)。表4.在趋化作用以及4丐离子流的功能检测中，以单链可变区域抗体片段的形式受试的抗体的效能。趋化作用是使用2纳摩(，)，l纳摩，或者0.2纳摩(§)的人类干扰素诱导蛋白-10来完成的，而钙离子流是利用10纳摩的人类干扰素诱导蛋白-10进行<table>tableseeoriginaldocumentpage99</column></row><table>实施例7:人类干护G素诱导蛋白-10诱导的细胞趋化作用的单链可变区域抗体片段的抑制将野生型L1.2细胞以及表达人类细胞表面趋化因子受体3的LI.2细月包;咅养于RPMIi备养基中，其中在所述的i咅养基中^卜充有10%的胎牛血清(FCS)。在进^f亍所述试-睑的前一天，利用0.6毫克/毫升的丁酸对所述的细力包进4于培养。利用0.2-10纳摩的重组人类干扰素诱导蛋白-10对不同浓度的经过纯化的单链可变区域抗体片,殳进4亍培养，并且将其》文置于96孔趋化作用培养4反(Neuroprobe)的底部月空室中。^!寻所述的滤柘J文置于所述的趋^M乍用培养板之上并且使用20微升106细胞/毫升的悬浮液对每个孔进行覆盖。在37。C下将所述的培养板进行2小时的培养。利用99DRAQ5(AlexisCorporation)对经由所述的滤玲反进^f亍迁移的细月包进4亍染色，并且利用FMAT8200读凄t器(AppliedBiosystems,FosterCityCA)进行计数。确定每个待测抗体的IC5Q(当所述的人类干扰素诱导蛋白-10诱导的细胞迁移受到50%的程度的抑制时，即，50%的4中制;:农度)(表4)。实施例8:单链可变区域抗体片段转化为免疫球蛋白G形式的重新排列利用特异性的寡核苷酸对筛选出的单链可变区域抗体片段的重链可变区域序列以及轻链可变区域序列进行扩增，在所述的5'端导入前导序列以及HindIII限制性位点。分别向所述的重链序列以及轻链序列的3'端导入Apal位点或者AvrII位点。所述的经过扩增的重链可变区域序列具有消化的HindlII/Apal并且被克隆至所述的pCon—yl表达载体(LONZA，Basel,Switzerland)中。所述的经过扩增的轻链可变区i或序列具有消4匕的HindlII/Avrl1并且一皮克隆至所述的pCon_A2表达载体(LONZA)中。通过测序对所述的构建体进行一险证，在此之后将其转染至哺乳动物细胞中。4吏用Fugene6寿争染i式剂(Roche，Basel,Switzerland)戶斤述的重链可变区i或cDNA序列以及轻链可变区i或cDNA序列转染至哺乳动物细胞中，其中所述的重链可变区域cDNA序列以及轻《连可变区域cDNA序列存在于它们所适合的表达载体中。简要的说，以每孑L6x105个细胞的浓度将尖峰细胞培养于6孔培养板中，其中所述的培养是在含有胎牛血清的2毫升的培养基中进行的。依照制造商的"i兌明书，4吏用所述的Fugene6转染试剂将所述的编码待测的重链可变区域序列以及轻链可变区域序列的表达载体共转染至所述的细胞中。转染之后的第一天，抽出所述的培养基，并且向细胞中加入3毫升不含血清的新鲜培养基，并且在37。C下培养三天。经过了三天的培养周期之后，收集所述的上清液，依照制造商的"i兌明书，在蛋白G-琼脂糖4B快速流动柱(Sigma,St.Louis,MO)中对免疫J求蛋白G进4亍纯4匕。简要的i兌，在4°C下，^吏用ImmunoPure(G)免疫5求蛋白G结合纟爰沖、液(Pierce,RockfordIL)对来自于转染细月包的上清液进4亍过夜培养。之后，将样本通过蛋白G-琼脂糖4B快速流动柱，并且由此^f吏用洗脱緩冲液对所述的免疫球蛋白G进行纯化。之后，通过逆磷S交緩冲液对所述的被洗脱的免疫球蛋白G馏分进行透析，并且通过在280纳米处的吸收作用对所述的免疫球蛋白G的含量进行量化。利用十二烷基石黄酸钠-聚丙烯酰胺凝月交电泳对纯度以及免疫J求蛋白G的完整性进行验证。所述的重新排列成免疫球蛋白Gl的NI-0801抗体的核酸序列以及氨基酸序列如下所示>NI-0801轻链氨基酸序列SLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS(序歹'J134)>NI-0801重链氨基酸序列NVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(序歹']135)实施例9:-使用重新排列成免疫J求蛋白Gl形式的单链可变区域抗体片段对人类千扰素诱导蛋白-10诱导的钙离子流或者细胞的趋化作用进行的抑制4要照上文在实施例8中所描述的方法，将单链可变区域抗体片段重新排列成免疫^求蛋白Gl的形式。4吏用在实施例6以及实施例8中所描述的基于细胞的检测，对所述的免疫球蛋白G对于人类干护C素i秀导蛋白-10i秀导的钙离子流或者细月包的趋化作用所产生的中和效能进4亍评1介。正如附图1，附图2以及附图3中所示，这些免疫^求蛋白G克隆以一种剂量依赖的方式同时抑制重组人干扰素诱导蛋白-10以及天然人干扰素诱导蛋白-10的活性。在这些检测中，每个抗体的ICso值在表5以及表6中进行了概括。表5.在趋化作用以及4丐离子流的功能4企测中，以免疫球蛋白Gl的形式受试的抗体的效能。趋化作用是^f吏用1纳摩，或者0.2纳摩(§)的重组人类干护G素i秀导蛋白-lO来完成的，而钙离子流是利用10纳摩的重组人类干扰素诱导蛋白-10进行诱导的。表才各的顶端部分所述的抗体是经过亲和性成熟之后获得的。克隆ID趋化作用IC幼(纳摩)钙离子流IC抑(纳摩)Nl柳10.24s6.3Cf1N1R3P4一C70.19s4.1Cf1H1R3P3一G110.2s7.9C訓R3P4一B50.42s4.7Cf1A"R3P^F30.69s5.9CC21R3P1一F139.8CB21R3P3_E5122NDCC21R3P1一H675>200CB2R2P4J333>200CC21R3P:一F4157>200CC21R3P1一E756>200CC21R3P1一A23.29.8CB21R3P6G78.86.2102表6.在趋化作用功能检测中，以免疫球蛋白Gl的形式受试的抗体的效能，其中所述的趋化作用功能才佥测是使用0.6纳摩的天然人类干护C素i秀导蛋白-10(hIP-lO)来完成的。克隆ID<table>tableseeoriginaldocumentpage103</column></row><table>实施例10:与固定于粘多糖之上的人类干扰素诱导蛋白-10进4亍结合的抗体与许多的趋化因子一起，人类干扰素诱导蛋白-10能够进行低聚并且与在细月包表面上进行表达的粘多if唐(GAG)进4亍结合，其中所述的细胞是例如内皮细胞。为了确认所述的抗体能够与本文中所述的人类干扰素"i秀导蛋白-10进4亍结合，在下述的4企测中对它们进行测试。利用抗人类恒定区域抗体片l殳(Fc)(Jackson,WestGrove，PA)只于Maxisorb96孑L培养4反进4亍》'余覆，其中所述的抗人类恒定区域抗体片段(Fc)作为受试的人类免疫球蛋白G的捕获试剂。使用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的肝磷脂(Sigma，St.Louis，MO)作为原生型粘多糖(GAG)，并且利用人类干扰素"i秀导蛋白-10对其进行培养，在此之后将其加入到所述的^皮捕获的抗人类干扰素诱导蛋白-10抗体中。使用一种经过辣根过氧化物酶(HRP)偶耳关的抗异石克氰酸荧光素Fab(Roche,Basel,Switzerland)-使所述的结合显现出来。如附图4中所示，当与粘多糖发生结合时，有些抗体能够结合人类干扰素诱导蛋白-io，而另外一些则不能发生这种结合，这可能是因为在所述的低聚结构中，它们对于人类干扰素诱导蛋白-10的表位不再是可以接近的。在所述的粘多#唐情况中所述的抗体结合人类干护C素i秀导蛋白-10的能力在表7中进行了概括。表7.抗体与被固定于粘多糖之上的人类干扰素诱导蛋白-10进行结合的能力克隆ED与存在千粘多糖之上的人类千扰素诱导蛋白-io的结合N1-0801有CF1N1R3P4C7有CF1H1R3P3Gll有CF1H1R3P4B5有CF1A11R3P3F3有CC21R3P1Fl有CB21R3P3E5有CC21R3P1H6有CC21R3P1A2没有CB21R3P6G7没有CC21R3P4F4实施例11:抗体CCFl的亲和性成熟为了增加对于人类干护C素i秀导蛋白-lO的亲和性以及在人类干扰素诱导蛋白-10的中和4企测中的效能，对筛选出的前导待测物(leadcandidate)(CC21R3P1—Fl)进4亍亲和性成熟处理。对存在于所述的重链或者轻链的互补决定区域3中的5个残基的片段进行随机排列，从而生成6个文库(文库的大小从5x107至2x108)。換照实施例5中所描述的方法，完成三l仑高度严格的筛选。在一种表位竟争性检测中，使用单链可变区域抗体片段的周质才是耳又物完成对改进的变体的筛选。简要的i兌，将所述的母本抗体(CC21R3P1—Fl)涂覆于培养板上并且向每个孔中加入经过稀释的周质单链可变区域抗体提取物。之后加入生物素化的人类干扰素诱导蛋白-10并且在室温下进行2小时的培养。进行洗涤之后，4吏用与链霉亲和素偶写关的夢束才艮过氧化物酶(Jackson,WestGrovePA)使得仍然与所述的涂覆的母本抗体发生结合的人类干扰素i秀导蛋白-10显现出来。作为识别改进的变体的一种参考，使用CC21R3P1一F1单链可变区域抗体片段与涂覆后的CC21R3P1_F1进4亍竟争，其中所述的CC21R3P1—Fl是以免疫J求蛋白G的形式存在的。在竟争性4企测以及趋化作用与钙离子流的检测中，所述的克隆CF1A11R3P3—F3祐:认为是一种更加有效能的抗体。利用克隆CF1A11R3P3—F3完成第二l仑的亲和'I"生成熟处理，所述的处理是通过合并其重链以及轻链来完成的，其中所述的重链以及轻链是在所述的CC21R3P1—Fl亲和性成熟处理过程中被筛选出来的。所述的第二|仑导致了对于所述的克隆CF1H1R3P4—B5以及CF1H1R3P3_G11的识别。第三l仑的亲和性成熟处理是在克隆CF1H1R3P3_G11的重链互补决定区i或3中完成的，并且乂人中分离出更好的改进的抗体变体，CF1N1R3P4—C7(表4,表5以及表6)。在并4亍的处5里中，另外^寺测物CC21R3P1—E7同样、接受了以所述的轻链的互补决定区域3为目标的相似的亲和性成熟处理。在这一过程中，所述的克隆CE7C1R3H8—J9被分离出来，并且与所述的母本抗体相比，所述的克隆在趋化作用测中更具有效妙b匕。实施例12:人类干扰素诱导蛋白-10抗体克隆C7向生殖细月包序列的回复突变在这里所描述的研究中，所述的CF1N1R3P4—C7克隆的核酸序列以及氨基酸序列中的核苷酸以及氨基酸残基发生了突变，所述的突变与在所述的生殖细胞序列中发现的所述的核苷酸或者氨基酸残基相一致。这一过程在这里被称为"回复突变"。CF1N1R3P4—C7重链抗体CF1N1R3P4_C7的所述免疫J求蛋白重链可变基因与所述的人类生殖细月包系DP-49或者IGHV3-30(GenBankAccessionnumberM99663)具有96%的同源寸生。与IGHV3-30相比，CF1N1R3P4—C7具有5处突变，三处发生在所述的互4卜决定区i或1，一处发生在互4卜决定区i或2，而另外一处发生在所述的骨架区域四中。所述的发生突变的氨基酸残基在附图5中用方框进行了标记。所述的五处突变是在Kabat位置31处由丝氨酸突变为天冬氨酸；在Kabat位置32处由酪氨酸突变为丝氨酸；在Kabat位置34处由曱碌u氨酸突变为异亮氨酸；在Kabat位置58处由酪氨酸突变为苯丙氨酸以及在Kabat位置94处由精氨酸突变为赖氨酸。CF1N1R3P4—C7中的全部五个氨基酸分别回复突变为它们的生殖细胞等价物并且在趋化作用以及钙离子流功能检测中对所述的突变对于抗体效能的影响进行评价。发生在所述的互补决定区域l中的所有变化中观察到了效能的显著降低，并且因此在最终的NI-0801序列中在CF1N1R3P4—C7中发现所述的氨基酸未发生变化。发生在所述的互补决定区域2以及所述的骨架区i或四的端点处的突变^L有改变所述抗体的岁丈能，并且因此^皮导入到所述的NI-0801重链可变序列中。将CF1N1R3P4—C7的所述免疫^求蛋白重链结合(IGHJ)区域与所述的六种人类功能化免疫球蛋白重链结合区域进行比较。在所述的互补决定区i或3编石马的区i或之外，具有100%的同源性的所述CF1N1R3P4—C7免疫球蛋白重链结合区域被认定为是免疫球蛋白重《连结合区域4。CF1N1R3P4—C7轻链抗体CF1N1R3P4—C7的所述免疫J求蛋白X轻链可变基因(VL)属于所述的免疫球蛋白轻链可变区域(IGLV)6-57或者V1-22亚纟且(GenBankAccessionNumberZ73673)。与免疫球蛋白轻链可变区域(IGLV)6-57相比，CF1N1R3P4—C7的？i轻链可变基因具有四处突变，全部位于所述的互补决定区域l内。所述的发生突变的氨基酸残基在附图5中用方框进行了标注。所述的四处突变是在Kabat位置25处由精氨酸突变为甘氨酸；在Kabat位置27出由丝氨酸突变为甘氨酸；在Kabat位置29以及30处分别由丙氨S臾突变为天冬氨酸以及由丝氨酸突变为4青氨酸。发生在所述的骨架区i或中的四处突变都是成对变化的(即，甘氨酸25精氨酸/甘氨酸27丝氨酸以及天冬氨酸29丙氨酸/精氨酸30丝氨酸)。在甘氨酸25精氨酸/甘氨酸27丝氨酸突变中7见察到效能的显著降4氐，并且因此在CF1N1R3P4—C7的这些位置处发现的氨基酸是未发生变化的。天冬氨酸29丙氨酸/姊青氨酸30丝氨酸没有改变所述抗体的效能，并且因此在所述的NI-0801X轻链可变基因序列中，这两种氨基酸突变为它们的生殖细月包等1"介物。将CF1N1R3P4_C7的所述免疫J求蛋白轻链结合(IGLJ)区域与所述的七种人类功能化免疫球蛋白轻链结合区域进行比较。在所述的互补决定区i或3编码的区域之外，具有100%的同源性的所述CF1N1R3P4—C7免疫球蛋白轻链结合区域净皮认定为是免疫^求蛋白轻链3结合区i或4(IGL3J4)。实施例13:人类干扰素诱导蛋白-10抗体的亲和性以及结合动力学矛J用Biacore20004义器(BiacoreAB，Uppsala,Sweden)3于NI-0801以及CC21R3P1—Fl的所述的亲和性以及结合动力学特征进行表征。利用碳二亚胺(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)化学试剂将200RU(应答单位)的山羊抗人类多克隆免疫J求蛋白G(ahlgG;BiacoreAB，Uppsala,Sweden)固定在CIBiacore芯片上。这个表面^皮用来捕获NI-0801或者其他一皮定义的人类免疫球蛋白Gl。在每个循环之后，通过注射10毫摩pH为1.5的甘氨酸对所述的表面进4亍再生，其中所述的注射是以3(H效升/分钟的速度注射30秒钟，之后在羟乙基哌噢乙石危石黄酸-内啡肽(HBS-EP)》爰冲液中进4亍1分钟的稳、定。通过流经人类干护O素i秀导蛋白-10(Peprotech,RockyHillNJ)或者NusA-人类干扰素诱导蛋白-10融合蛋白，对结合进行测量，其中所述的人类干护G素"i秀导蛋白-lO(Peprotech，RockyHillNJ)或者NusA-人类干扰素诱导蛋白-10融合蛋白具有下述浓度34.7纟内摩，11.6纟内，，3.85纟内，，1.28纟内，，0.428纟内摩，0.142纟内摩以及0纳摩。所有的溶液都在羟乙基哌、秦乙碌j黄酸-内啡肽(HBS-EP)纟爰冲液(BiacoreAB,Uppsala，Sweden)中进4亍了稀释。以50微升/分钟的速度完成3分钟的注射，在此之后为12分钟的解离时间并且将所述的温度i殳定为25°C。依照1:l的朗繆尔^f莫型对所述的^t据进行拟合(fit),并且确定所述的结合速率常数(K。n),解离速率常数(K。ff)以及解离常数(KD)的值。使用重组人类干扰素诱导蛋白-10或者所述的NusA-人类干扰素诱导蛋白-10融合蛋白能够获得非常相似的数值，但是在所述的融合蛋白中获得了更好的应答信号，这是因为融合蛋白具有更大的尺寸，能够在所述的Biacore上诱导更好的应答。所述的抗体108CC21R3P1—Fl以及NI-0801对人类干扰素诱导蛋白-10的亲和性分别为90.2纳摩以及109匹摩(附图6)。因此可以看出，在所述的亲和性成熟过程中，所述的CC21R3P1_F1的亲和性提高了90倍。两种抗体的亲和性以及动力学常数均在表8中进行了概括。表8.利用Biacore测量到的动力学常数以及亲和性常数<table>tableseeoriginaldocumentpage109</column></row><table>实施例14:人类干护O素"i秀导蛋白-lO抗体的交叉反应原性结合#r测4吏用一种捕获酶4关免疫吸附试-验形式的枱r观'J对NI-0801结合干扰素诱导蛋白-10的能力进行测试，其中所述的干扰素诱导蛋白-10是来自于不同的物种的。简要的说，按照实施例1中所描述的方法，对从cDNA中克隆的干扰素诱导蛋白-10进行表达以及纯化，其中所述的cDNA是从小鼠，大鼠，兔和猕猴以及人类趋化因子小组中分离得到的。利用在一定浓度范围内的NusA融合蛋白对NI-0801进4亍涂覆以及i咅养。4吏用一种抗NusA抗体4吏所述的结合水平显现出来。正如附图7中所示，NI-0801-f义与猕猴的干扰素诱导蛋白-10发生交叉反应，并且不与来自于受试的其他物种的干扰素诱导蛋白-10发生交叉反应，也不与受试的其他人类趋化因子中的任何一种发生交叉反应。功能性检测人类干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC)以及人类干扰素诱生单核因子(MIG)同样是经由人类细胞表面趋化因子受体3产生信号的趋化因子。在实施例7中所描述的趋化作用才企测中，^j"NI-0801中和这些其〗也的人类细月包表面趋^:因子受体3配位体的能力进行了测试。重组的人类干扰素诱导T细胞趋化因子，人类干扰素诱生单核因子以及人类干扰素诱导蛋白-10(Peprotech)全部能够诱导表达人类细胞表面趋化因子受体3的L1.2细胞发生细胞的趋化作用，而NI-0801"f又能够中和所述的人类干扰素诱导蛋白-10的活性(附图8A-8B)。同样针对NI-0801对来自于不同物种的干扰素诱导蛋白-10所产生的中和效能进行了功能性的评1介。正如附图9中所示，重组的人类、小鼠、大鼠以及兔的干扰素诱导蛋白-10能够诱导细胞的趋化作用，但是所述的人类干扰素诱导蛋白-10的活性仅仅可以被饱和剂量的NI-0801(50微克/毫升)进4亍中和。实施例15:人类干扰素诱导蛋白-10抗体的表位定位在一种酶联免疫吸附;险测中，NI-0801以等^f介的表面亲和性与人类干扰素诱导蛋白-10以及猕猴干扰素诱导蛋白-10发生结合(附图7)。为了对人类干扰素诱导蛋白-10与NI-0801进行结合而可能需要的残基进行识别，我们对来自于几个物种的所述的干扰素诱导蛋白-10的蛋白序列进行了比对，如附图IO中所示。在所述的比对中，我们对这样的残基进行了寻找所述的残基在人类序列以及猕猴序列间是保守的，并且在NI-0801不能够进行结合的那些物种的干护G素i秀导蛋白-lO中是不同的。所述的兔干扰素诱导蛋白-10的序列与所述的人类干扰素诱导蛋白-10的序列是接近的，尽管NI-0801不能对这种蛋白进行中和。当与人类干扰素诱导蛋白-10以及猕猴干扰素诱导蛋白-10进行比较时，我们识别出了在兔干扰素i秀导蛋白-lO中存在不同的几个残基N13,K17,D48，L48,K63,F68，R74，G75以及S77。为了在这些位置处恢复所述的人类残基，通过进行位点指导的突变生成兔干扰素i秀导蛋白-lO的四种突变体[N13S/K17Q];[D48K];[L48S/K63N/F68V]以及[L48S/K63N/F68V/R74K/G75R/S77P]。按照实施例1中所描述的方法，将兔干4尤素i秀导蛋白-10的这些突110变形式作为NusA融合蛋白进行表达。之后，我们在一项酶耳关免疫吸附检测中检验这些残基的导入能否使NI-0801恢复与兔干扰素诱导蛋白-10间的结合。在4。C下，将NusA-人类干扰素诱导蛋白-10以及上述不同的NusA-兔干扰素诱导蛋白-lO突变体以5微克/毫升的量在Maxisorb培养板(Nunc)中进4亍涂覆过夜。在利用3%的磷酸緩冲液-牛血清白蛋白(PBS-BSA)对其进行封闭并且利用一定剂量范围内的NI-0801对其进^f亍培养之后，对所述的培养才反进4亍洗涤并且利用山羊抗人类免疫J求蛋白FcY-特异性抗体对其进4亍培养，其中所述的Fc特异性抗体与-束才艮过氧化物酶(Jackson)发生了偶联。在进行洗涤之后，利用四曱基联苯胺(TMB)^吏所述的4言号显现出来并且利用碌LJ臾对其进^f亍终止。在450纳米处对所述的培养々反进行读取。正如附图11中所示，所述的[N13S/K17Q]突变体恢复了NI-0801与兔干扰素诱导蛋白-10的结合，逸意p未着S13以及Q17对于NI-0801在人类干扰素诱导蛋白-10上的表位的完整性而言是至关重要的。其他的实施方式尽管本发明通过其中的详细说明进行了描述，前述的说明意在进行描述而不能限制本发明的范围，本发明所述的范围是由后附的^又利要求所定义的。其他的方面，优点，以及々务饰均落入下述权利要求的范围之内。权利要求1.一种分离的完全人类单克隆抗干扰素诱导蛋白-10抗体或其片段，其中所述的抗体包括(a)重链可变的互补决定区域1，所述的区域1包括序列5，34，44，64，86，95，或者127所示的氨基酸序列；(b)重链可变的互补决定区域2，所述的区域2包括序列6，15，35，45，65，87，96，或者128所示的氨基酸序列；以及(c)重链可变的互补决定区域3，所述的区域3包括序列7，21，36，46，52，57，66，78，88，97，105，129，132或者140所示的氨基酸序列，其中所述的抗体与干扰素诱导蛋白-10进行结合。2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述的抗体进一步包括(d)轻《连可变的互补决定区域1,所述的区域1包括序歹'J8，16,37,47，71，79，98，106,112，119,133或者141所示的氨基g臾序列；(e)轻链可变的互补决定区域2，所述的区域2包括序歹ll9，38，48，58，72,80,89,99,113，120或者142中所示的氨基S臾序列；以及(f)轻链可变的互补决定区域3,所述的区域3包括序歹'J10，24,29,39,49，59，73，81，90，100,107,114,121，126或者143中所示的氨基酉臾序列。3.才艮据4又利要求1所述的抗体，其中所述的抗体是一种免疫3求蛋白G的同型体。4.4艮据4又利要求1所述的抗体，其中所述的抗体是一种免疫5求蛋白Gl的同型体。5.根据权利要求2所述的抗体，其中所述的抗体包括重链可变的互补决定区域1，重链可变的互补决定区域2,重链可变的互补决定区域3,轻链可变的互补决定区域1，轻链可变的互补决定区域2,以及轻链可变的互补决定区域3,其中所述的重《连可变的互^卜决定区i或1包4舌如序列5所示的氨基酸序列；所述的重《连可变的互补决定区域2包括如序列6所示的氨基酸序列；所述的重《连可变的互补决定区i或3包4舌如序列7所示的氨基酸序列；所述的轻纟连可变的互4卜决定区域^1包括如序歹'J8所示的氨基酸序列；所述的轻链可变的互补决定区i或2包括如序列9所示的氨基酸序列；而所述的轻链可变的互补决定区域3包括如序列IO所示的氨基酸序列。6.才艮据^又利要求5所述的抗体，其中所述的抗体包括重链可变序列以及轻《连可变序列，其中所述的重链可变序列包括如序歹'J2所示的氨基酸序列，而所述的轻《连可变序列包4舌如序列4所示的氨基酸序列。7.—种分离的完全人类单克隆抗体，所述的抗体包括重链序列以及轻链序列，其中所述的重链序列包括如序列134所示的氨基酸序列，而所述的轻链序列包括如序列135所示的氨基酸序列。8.根据权利要求7所述的抗体，其中所述的抗体是一种免疫球蛋白Gl的同型体。9.一种分离的完全人类单克隆抗体，所述的抗体包4舌重链可变的氨基酸序列，其中所述的重链可变氨基酸序列选自由下述序列所纟且成的纟且中序歹'J2,12,18，26，31，41,51，54,61，68，75,83，92，102,109,116,123以及137,其中所述的抗体与干扰素诱导蛋白-10进行结合。10.根据权利要求9所述的抗体，其中所述的抗体进一步包括轻链可变的氨基酸序列，其中所述的轻《连可变氨基酸序列选自由下述序列所组成的组中序歹'J4，14，23,28,33,43,56，63，70,77,85，94，104，111,118，125，139以及145,其中所述的抗体与干扰素"i秀导蛋白-10进行结合。11.才艮据一又利要求10所述的抗体，其中所述的抗体是一种免疫5求蛋白G的同型体。12.才艮据权利要求11所述的抗体，其中所述的抗体是一种免疫^求蛋白Gl的同型体。13.—种分离的完全人类单克隆抗体，所述的抗体包括重链可变的互S卜决定区i或1，重链可变的互S卜决定区i或2，重链可变的互补决定区域3,轻链可变的互补决定区域1,轻链可变的互补决定区i或2，以及轻链可变的互补决定区域3，其中所述的重链可变的互补决定区域1包括如序列5所示的氨基酸序列；所述的重链可变的互补决定区域2包括如序列6所示的氨基S臾序列；所述的重链可变的互补决定区域3包括如序列7所示的氨基S菱序列；所述的轻链可变的互4卜决定区域i1包4舌3。序列8所示的氨基酸序列；所述的#圣链可变的互#卜决定区i或2包4舌:^序列9所示的氨基酸序列；而所述的轻《连可变的互补决定区域3包括如序歹'jIO所示的氨基酸序列。14.才艮据4又利要求13所述的抗体，其中所述的抗体是一种免疫J求蛋白G的同型体。15.根据权利要求14所述的抗体，其中所述的抗体是一种免疫J求蛋白Gl的同型体。16.—种药物组合物，所述的药物组合物中包括^L利要求1，7,9或者13中的任意一项所述的抗体以及一种载体。17.—种IC解自身免疫性疾病或者炎性障碍的症状的方法，所述的方法包括向有此需要的宿主施用根据前述权利要求中任意一项所述的抗体，以足以纟爰解由所述宿主的自身免疫性疾病或者炎性障碍所产生的症状的量进行施用。18.4艮据4又利要求17所述的方法，其中所述的宿主是人类。19.才艮据4又利要求17所述的方法，其中所述的抗体包括重《连可变的互补决定区i成1，重链可变的互补决定区域2,重链可变的互补决定区域3,轻链可变的互补决定区域1，轻链可变的互补决定区域2,以及轻链可变的互补决定区域3，其中所述的重《连可变的互补决定区域1包^舌如序列5所示的氨基酸序列；所述的重链可变的互补决定区域2包括如序列6所示的氨基酸序列；所述的重链可变的互补决定区域3包括如序列7所示的氨基酸序列；所述的轻链可变的互4卜决定区域1包括如序歹'J8所示的氨基酸序列；所述的轻链可变的互^卜决定区i或2包4舌如序列9所示的氨基酸序列；而所述的丰至链可变的互补决定区域3包括如序列IO所示的氨基酸序列。20.根据权利要求19所述的方法，其中所述的抗体包括重链可变序列以及轻4连可变序列，其中所述的重链可变序列包4舌如序列2所示的氨基酸序列，而所述的轻链可变序列包括如序列4所示的氨基酸序列。21.4艮据i又利要求19所述的方法，其中所述的抗体包括重链序列以及轻链序列，其中所述的重链序列包括如序列134所示的氨基酸序列，而所述的轻链序列包括如序列135所示的氨基酸序列。全文摘要本发明涉及完全人类抗体及其片段，所述的抗体及其片段与干扰素诱导蛋白-10(IP-10，CXCL10)发生结合，从而调节干扰素诱导蛋白-10与其受体CXCR3(细胞表面趋化因子受体3)之间的相互作用，和/或调节干扰素诱导蛋白-10的生物活性。本发明还涉及这样的抗干扰素诱导蛋白-10抗体用于预防或者治疗免疫相关性障碍的用途，以及用于改善与免疫相关性障碍有关的一种或者多种症状的用途。文档编号C07K16/24GK101668774SQ200880013529公开日2010年3月10日申请日期2008年2月28日优先权日2007年2月28日发明者奥利维尔·莱格,尼古拉斯·费希尔,马瑞·科斯库-维尔博斯申请人:诺维莫尼公司