抗il-17a/il-17f交叉反应性抗体及其使用方法

专利名称：抗il-17a/il-17f交叉反应性抗体及其使用方法
技术领域：
本发明一般涉及识别IL-17F的单克隆抗体(例如完全人的单克隆抗体)、识别异 二聚体IL-17A/IL-17F复合物的单克隆抗体(例如完全人的单克隆抗体)、和识别未复合在 一起的IL-17F和IL-17A 二者的单克隆抗体(例如完全人的交叉反应性抗体)的生成，及 作为治疗剂使用所述单克隆抗体的方法。
背景技术：
IL-17A(最初叫作CTL-8，而且也称作IL-17)是IL-17细胞因子家族的古典/创 立成员。在IL-17A之外，IL-17细胞因子家族的成员目前包括共享保守C端区但N端区段 不同的蛋白质 IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL_17E(也叫作 IL-25)和 IL-17F。IL-17A和IL-17F是该家族在序列和生物学特性这两个方面最密切相关的两个成 员。IL-17F与IL-17A在氨基酸水平共享55%序列同一性。IL-17A和IL-17F都是作为二 硫化物连接的同二聚体分泌的，经由受体IL-17R、IL-17RC、或由IL-17R和IL-17RC构成的 多聚体受体复合物来发信号。二者还在相同的T细胞子集(主要是Thl7 CD4+T细胞)上 共表达。此外，二者已经相似地被暗示为人类中和人类疾病的小鼠模型中多种炎性和自身 免疫性疾病的进展和病理的促成因子。具体而言，IL-17A和IL-17F已经被暗示为触发炎 症应答并由此促成多种自身炎性疾病，包括多发性硬化、类风湿性关节炎、和炎性肠病及癌 症的主要效应器细胞因子。IL-17A和IL-17F 二者已证明的体内活性阐释了 IL-17A和IL-17F拮抗剂的临床 和/或治疗潜力，及对IL-17A和IL-17F拮抗剂的需要。具体而言，结合IL-17A和IL-17F 二者并抑制(拮抗性抗体)IL-17A和I1-17F 二者的一种或多种免疫学活性的抗体会是有 益的。如此，本领域仍然需要与IL-17A和IL-17F 二者和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物 起交叉反应的拮抗剂。发明概述本发明提供特异性结合IL-17F、IL-17F同二聚体、IL-17A、IL-17A同二聚体和/ 或异二聚体IL-17A/IL-17F复合物的单克隆抗体，诸如完全人的单克隆抗体。本发明的抗 体能够调控(例如阻断、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干扰)IL-17、IL-17A和/或 IL-17A/IL-17F介导的促炎性细胞因子和/或趋化因子生成。本发明的例示性单克隆抗体包括例如30D12抗体、29D8抗体、1E4抗体、31A3抗 体、39F12抗体、12B12抗体、15B7抗体、4H11抗体、4B11抗体、8B11抗体、38B1抗体、15E6抗 体、5E12抗体、41B10抗体、及其变体。此类抗体的变体包括30D12BF抗体(具有经过修饰的重链可变区的30D12抗体变体)、39F12A抗体(具有经过修饰的重链可变区的39F12抗 体变体)、和15Ε6Π(抗体(具有经过修饰的轻链可变区的15Ε6抗体变体)。或者，单克隆 抗体是与30D12抗体、29D8抗体、1Ε4抗体、31Α3抗体、39F12抗体、12Β12抗体、15Β7抗体、 4Η11抗体、4Β11抗体、8Β11抗体、38Β1抗体、15Ε6抗体、5Ε12抗体、4IB10抗体，及其变体包 括30D12BF抗体、39F12A抗体和15Ε6Π(抗体结合相同表位的抗体。每一种这些抗体在本文 中分别称作“huIL-17A/F”抗体。huIL-17A/F抗体包括完全人的单克隆抗体，以及人源化单 克隆抗体和嵌合抗体。优选的是，抗体是IgGl。这些抗体显示对人IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的特异 性，而且它们已经显示出抑制IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F介导的细胞因子生成。 这些抗体具有独特的特异性。在一些实施方案中，本发明的huIL-17A/F抗体特异性结合单 独的IL-17F和IL-17A 二者(即未复合在一起)。在一些实施方案中，本发明的huIL_17A/ F抗体特异性结合IL-17F、IL-17F同二聚体、和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物。在一些实 施方案中，本发明的huIL-17A/F抗体特异性结合IL-17F、IL-17F同二聚体、IL-17A、IL-17A 同二聚体、禾口 IL-17A/IL-17F 异二聚体复合物。例如，30D12J9D8、1E4、31A3、39F12、12B12、 15B7、4H11、38B1、15E6、30D12BF、4B11、15E6FK、禾口 39F12A 结合 IL-17F 并与 IL-17A 交叉反 应，而且这些抗体还结合IL-17A/IL-17F异二聚体复合物。5E12和41B10抗体结合IL-17F 和IL-17F同二聚体，但是不结合IL-17A或IL-17A同二聚体。41B10抗体还结合IL-17A/ IL-17F异二聚体复合物。本发明的完全人的抗体含有重链可变区，其具有氨基酸序列SEQ ID NO :2,6,8, 10、14、18、20、24、28、32、34、38、44、48、52、和54。本发明的完全人的抗体含有轻链可变区， 其具有氨基酸序列SEQ ID而4、12、16、22、26、30、36、40、46、和56。三个重链CDR包括包 含与选自 SEQ ID NO :57、60、66、69、76、79、82、85 和 90 的序列至少 90%,92%,95%,97%, 98%、99%或更多相同的氨基酸序列的CDRl区；包含与选自SEQ ID NO :58、61、63、65、67、 70、72、74、77、80、83、86、88、91、93 和 94 的序列至少 90%、92%、95%、97%、98%、99%或更 多相同的氨基酸序列的CDR2区；和包含与选自SEQ ID NO :59、62、64、68、71、73、75、78、81、 84、87、89、92、和95的序列至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或更多相同的氨基酸序 列的⑶R3区。三个轻链⑶R包括包含与选自SEQ ID NO :96、101、104、107和110的序列至 少90%、92%、95%、97% 98 %、99%或更多相同的氨基酸序列的⑶Rl区；包含与选自SEQ ID NO :97、102、105和108的序列至少90%、92%、95%、97% 98%、99%或更多相同的氨基 酸序列的 CDR2 区；和包含与选自 SEQ ID NO :98、99、100、103、106、109、111、112 和 113 的序 列至少90%、92%、95%、97% 98%、99%或更多相同的氨基酸序列的⑶R3区。本发明特异性结合IL-17F、IL-17A和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的抗体识别 并结合IL-17F和IL-17A共享的表位。本发明的抗体特异性结合异二聚体IL-17A/IL-17F 复合物，其中该抗体结合包括人IL-17F、IL-17A或二者上一个或多个氨基酸残基的表位。 本发明的抗体免疫特异性结合IL-17F，其中抗体结合包括人IL-17F上一个或多个氨基酸 残基的表位。本发明的抗体特异性结合IL-17A，其中抗体结合包括人IL-17F、IL-17A或二 者上一个或多个氨基酸残基的表位。huIL-17A/F 抗体结合在 IL-17F 同二聚体、IL-17A 同二聚体和 IL-17A/IL-17F 异 二聚体复合物二者上找到的共同表位。与结合界面处的或以其它方式横跨IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的表位的抗体不同，huIL-17A/F抗体特异性结合IL-17A/IL-17F异二聚体 复合物，而且还识别并结合未复合在一起的IL-17F和IL-17A。如此，huIL_17A/F抗体不需 要IL-17A/IL-17F复合物形成来识别IL-17F和/或IL-17A。huIL-17A/F 抗体展现中和能力并抑制 IL-17F、IL-17A 和 / 或 IL-17A/IL-17F 异二 聚体复合物的一种或多种生物学功能。huIL-17A/F抗体能够结合IL-17F (包括IL-17F同 二聚体)、IL-17A (包括IL-17A同二聚体)、和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物中每一项。huIL-17A/IL"17F 抗体结合 IL-17A 同二聚体、IL-17F 同二聚体和 IL-17A/IL-17F 异二聚体复合物，而且这些抗体展现(i)至少IOOpM或更少的针对IL-17A同二聚体的结合 亲和力，(ii)至少300pM或更少的针对IL-17F同二聚体的结合亲和力，(iii)至少400pM 或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的结合亲和力，(iv)至少13nM或更少的针 对IL-17A同二聚体的中和能力，(ν)至少120nM或更少的针对IL-17F同二聚体的中和能 力，和(vi)至少31nM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的中和能力。在一些实施方案中，huIL-17A/IL-17F抗体结合IL-17A同二聚体、IL-17F同二 聚体和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物，而且这些抗体展现(i)至少40pM或更少的针对 IL-17A同二聚体的结合亲和力，(ii)至少IOpM或更少的针对IL-17F同二聚体的结合亲和 力，和(iii)至少50pM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体的结合亲和力。在一些实施方案中，huIL-17A/IL-17F抗体结合IL-17A同二聚体、IL-17F同二 聚体和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物，而且这些抗体展现(i)至少15pM或更少的针对 IL-17A同二聚体的结合亲和力，(ii)至少IOpM或更少的针对IL-17F同二聚体的结合亲和 力，和(iii)至少30pM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体的结合亲和力。在一些实施方案中，huIL-17A/IL-17F抗体结合IL-17A同二聚体、IL-17F同二 聚体和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物，而且这些抗体展现(iv)至少13nM或更少的针对 IL-17A同二聚体的中和能力，(ν)至少1. 9nM或更少的针对IL-17F同二聚体的中和能力， 和(vi)至少IlnM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的中和能力。在一些实施方案中，huIL-17A/IL-17F抗体结合IL-17A同二聚体、IL-17F同二聚 体和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物，而且这些抗体展现(iv)至少1.6nM或更少的针对 IL-17A同二聚体的中和能力，(ν)至少1. 7nM或更少的针对IL-17F同二聚体的中和能力， 和(vi)至少1. InM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的中和能力。在一些实施方案中，huIL-17A/IL-17F抗体结合IL-17A同二聚体、IL-17F同二聚 体和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物，而且这些抗体展现(iv)至少0. 2nM或更少的针对 IL-17A同二聚体的中和能力，(ν)至少1. 2nM或更少的针对IL-17F同二聚体的中和能力， 和(vi)至少0. 2nM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的中和能力。huIL_17A/F抗体具有下述特征结合亲和力(pM)
所有*huIL-17A/F抗体15E615E6FKIL-17A同二聚体1004015IL-17F同二聚体3001010IL-17A/IL-17F 异二聚体4005030* 所有抗体指下述 huIL-17A/F 抗体15E6、15E6FK、30D12、30D12BF、39F12、 39F12A、和中和能力(nM)，如使用MEF细胞测定法来测量的
所有Λ huIL-17A/F抗体除30D12外的 所有* huIL-17A/F抗体15E615E6FK1L-17A同二聚体13131.60.21L-17F同二聚体1201.91.71.21L-17A/IL-17F 异二聚体31111.10.2* 所有抗体指下述 huIL-17A/F 抗体15E6、15E6FK、30D12、30D12BF、39F12、 39F12A、和 29E8如本文中提到的，结合亲和力是使用本文中，例如实施例5中所描述的测定法来 测定的。如本文中提到的，中和能力是使用本文中，例如实施例7中所描述的小鼠胚胎成纤 维细胞细胞测定法来测定的。在一个优选的实施方案中，huIL-17A/IL-17F抗体结合IL-17A同二聚体、IL-17F 同二聚体和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物，而且这些抗体展现(i)至少40pM或更少的 针对IL-17A同二聚体的结合亲和力，(ii)至少IOpM或更少的针对IL-17F同二聚体的结 合亲和力，(iii)至少50pM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的结合亲和力， (iv)至少1. 6nM或更少的针对IL-17A同二聚体的中和能力，(ν)至少1. 7ηΜ或更少的针对 IL-17F同二聚体的中和能力，和(vi)至少1. InM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复 合物的中和能力。在一个更优选的实施方案中，huIL-17A/IL-17F抗体结合IL-17A同二聚体、 IL-17F同二聚体和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物，而且这些抗体展现(i)至少15pM或更 少的针对IL-17A同二聚体的结合亲和力，(ii)至少IOpM或更少的针对IL-17F同二聚体 的结合亲和力，(iii)至少30pM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的结合亲和 力，(iv)至少0. 2nM或更少的针对IL-17A同二聚体的中和能力，(ν)至少1. 2ηΜ或更少的 针对IL-17F同二聚体的中和能力，和(vi)至少0. 2ηΜ或更少的针对IL-17A/IL-17F异二 聚体复合物的中和能力。在一个优选的实施方案中，huIL-17A/IL-17F抗体是15Ε6抗体或与15E6抗体结合 相同表位或以其它方式与15E6抗体的结合位点交叉竞争的抗体。在一个更优选的实施方 案中，huIL-17A/IL-17F抗体是15Ε6Π(抗体或与15Ε6抗体结合相同表位或以其它方式与 15Ε6Π(抗体的结合位点交叉竞争的抗体。在一个最优选的实施方案中，huIL-17A/IL-17F 抗体具有结合上文所述亲和力和中和条件，而且与15E6抗体结合相同表位或以其它方式 与15E6抗体的结合位点竞争。
优选的是，huIL-17A/IL-17F抗体与15E6抗体结合相同表位或以其它方式与15E6 抗体的结合位点竞争，而且huIL-17A/IL-17F抗体还结合IL-17A同二聚体、IL-17F同二聚 体和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物二者，而且这些抗体展现⑴至少40pM或更少的针对 IL-17A同二聚体的结合亲和力，(ii)至少IOpM或更少的针对IL-17F同二聚体的结合亲和 力，(iii)至少50pM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的结合亲和力，(iv)至 少1. 6nM或更少的针对IL-17A同二聚体的中和能力，(ν)至少1. 7ηΜ或更少的针对IL-17F 同二聚体的中和能力，和(vi)至少1. InM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的 中和能力。优选的是，huIL-17A/IL_17F抗体与15Ε6Π(抗体结合相同表位或以其它方式与 15E6FK抗体的结合位点竞争，而且huIL-17A/IL-17F抗体还结合IL-17A同二聚体、IL-17F 同二聚体和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物，而且这些抗体展现(i)至少15pM或更少的 针对IL-17A同二聚体的结合亲和力，(ii)至少IOpM或更少的针对IL-17F同二聚体的结 合亲和力，(iii)至少30pM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的结合亲和力， (iv)至少0. 2nM或更少的针对IL-17A同二聚体的中和能力，(ν)至少1. 2ηΜ或更少的针对 IL-17F同二聚体的中和能力，和(vi)至少0. 2ηΜ或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复 合物的中和能力。本发明的抗体还包括特异性结合IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F的完全人 的抗体，其中，该抗体在体外展现大于50%的对IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F介导 的促炎性细胞因子生成的抑制。例如，本发明的抗体展现大于55 %、60 %、65 %、70 %、75 %、 80 %、85 %、90 %、92 %、95 %、97 %、98 %、或 99 % 的对 IL-17 刺激细胞的 IL-6 分泌的抑制。 如本文中使用的，术语“促炎性细胞因子”指那些促进炎症和/或与炎症有关的免疫调节性 细胞因子。促炎性细胞因子和趋化因子包括例如IL-6、IL-8、G-CSFjnGM-CSF。促炎性趋 化因子包括例如 GRO-α、GR0-b、LIX、GCP-2、MIG、IP10、I-TAC、和 MCP-1、RANTES、Eotaxin、 SDF-I、和 MIP3a。本发明还提供治疗或预防与异常IL-17、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性(例 如异常促炎性细胞因子生成诸如异常IL-6生成)有关的病理，或减轻与此类病理有关的症 状的方法，这通过对想要此类治疗或预防的受试者施用本发明的单克隆抗体(例如完全人 的单克隆抗体)来进行。要治疗的受试者是例如人。以足以治疗、预防或减轻与病理有关的 症状的量施用单克隆抗体。足以在受试者中治疗或预防病理的单克隆抗体量是例如足以降 低IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F信号传导(例如IL-17F诱导的一种或多种促炎 性细胞因子(例如IL-6)生成)的量。如本文中使用的，术语“降低”指本发明的单克隆抗 体存在下促炎性细胞因子的生成降低，其中生成是例如局部促炎性细胞因子生成(例如炎 症组织的部位)或全身促炎性细胞因子生成。当在本发明单克隆抗体的存在下促炎性细胞 因子(例如IL-6)生成水平比对照促炎性细胞因子生成水平(即单克隆抗体缺失下促炎性 细胞因子的生成水平)低大于或等于5%、10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、 75%、80%、90%、95%、99%、或 100%时，IL-17F、IL-17A 和 / 或 IL-17A/IL-17F 信号传导 (例如IL-17F诱导的促炎性细胞因子诸如IL-6)降低。使用例如本文中描述的IL-17刺激 的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)细胞测定法来测量促炎性细胞因子(例如IL-6)生成水平。 本领域技术人员会领会，促炎性细胞因子生成水平可使用多种测定法来测量，包括例如商品化的ELISA试剂盒。使用本发明的单克隆抗体(例如完全人的单克隆抗体)治疗和/或预防的病理包 括例如急性炎症、慢性炎症(例如与变应性状况和哮喘有关的慢性炎症)、自身免疫性疾病 (例如克罗恩氏病、多发性硬化)、炎性肠病、和移植排斥。依照本发明的药物组合物可包括本发明的抗体和载体。这些药物组合物可包括在 试剂盒，诸如例如诊断试剂盒中。本发明还提供可溶性IL-17F蛋白质、用于表达IL-17F蛋白质的方法、和用于纯化 处于可溶性形式的此类蛋白质的方法。在一些实施方案中，要治疗的病理是一种或多种自身免疫性疾病、炎性病症和癌 症。例如但不限于，病理是类风湿性关节炎、克罗恩氏病、银屑病、多发性硬化、慢性阻塞性 肺病、哮喘、血管发生和癌症。依照本发明的药物组合物可包括本发明的抗体和载体。这些药物组合物可包括在 试剂盒，诸如例如诊断试剂盒中。本领域技术人员会领会，本发明的抗体具有多种用途。例如，本发明的蛋白质在病 症诸如例如类风湿性关节炎、克罗恩氏病、银屑病、多发性硬化、慢性阻塞性肺病、哮喘、血 管发生和癌症中用作治疗剂来预防IL-17受体和/或IL-17受体复合物活化。本发明的抗 体还用作诊断试剂盒中的试剂或用作诊断工具，或者这些抗体可用于竞争测定法以生成治 疗性试剂。发明详述本发明提供特异性结合IL-17F的单克隆抗体。本发明进一步提供特异性结合未 复合在一起的IL-17F和IL-17A的单克隆抗体(即交叉反应性单克隆抗体)。本发明进一 步提供特异性结合IL-17F和异二聚体IL-17A/IL-17F复合物(在本文中也称作IL-17A/ IL-17F异二聚体)的单克隆抗体。本发明甚至进一步提供结合IL-17F、IL-17A和异二聚 体IL-17A/IL-17F复合物的交叉反应性单克隆抗体。这些抗体在本文中统称为“huIL_17A/ F”抗体。所述抗体是例如完全人的抗体。本发明的抗体特异性结合IL-17F，其中该抗体结合包括人IL-17F的一个或多个 氨基酸残基的表位。本发明的抗体特异性结合IL-17F和IL-17A 二者，其中该抗体结合包 括人IL-17F、人IL-17A、或二者的一个或多个氨基酸残基的表位。本发明的抗体特异性结 合IL-17F和异二聚体IL-17A/IL-17F复合物二者，其中该抗体结合包括人IL-17F、IL-17A、 或二者的一个或多个氨基酸残基的表位。本发明的抗体以彡1 μ Μ，例如彡ΙΟΟηΜ，优选彡ΙΟηΜ，和更优选彡InM的平衡结合 常数(Kd)结合IL-17F表位和/或IL-17A表位。例如，本文中提供的huIL_17A/F抗体展 现大致介于彡InM至约IpM之间的范围中的Kd。IL-17F的晶体结构揭示该蛋白质采取半胱氨酸结折叠，提示与半胱氨酸结蛋白质 超家族的关系。然而，IL-17F的半胱氨酸结基序只利用四个半胱氨酸而非经典的六个半胱 氨酸来形成结。与半胱氨酸结家族的其它成员一样，IL-17F也作为与IL-17A的异二聚体 存在。认为IL-17A/IL-17F异二聚体经由IL-17R和/或多聚体IL-17R/IL-17RC复合物来 发信号。最新的证据显示了形成IL-17A/IL-17F异二聚体中利用的半胱氨酸残基与IL-17F 同二聚体形成中利用的半胱氨酸相同。此数据提示IL-17F同二聚体或IL-17A/IL-17F异二聚体的受体可结合二聚体界面处的保守半胱氨酸残基，与半胱氨酸结家族中的其它蛋白 质一样。已经报告了 IL-17细胞因子家族的众多免疫调节功能，大概是由于它们对许多免 疫信号传导分子的诱导。IL-17A和IL-17F共享非常相似的生物学功能。二者促进极其多 种细胞(包括成纤维细胞、角质形成细胞、巨噬细胞、上皮细胞和内皮细胞)分泌促炎性细 胞因子(例如 IL-6、IL-8、G-CSFJP GM-CSF)、趋化因子(例如 GRO- α、GR0_b、LIX、GCP-2、 MIG、IP10、I-TAC、和 MCP-l、RANTES、Eotaxin、SDF-l、和 MIP3a)和前列腺素类(例如 PGE2)。 二者还显示出调节软骨基质周转。IL-17F还具有与IL-17A截然不同的生物学功能，诸如刺 激T细胞和外周血单个核细胞(PBMC)增殖和活化，及抑制血管发生的能力。本发明的huIL_17A/F抗体用来调控、阻断、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式 干扰IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的生物学活性。IL-17F、IL-17A 和/或IL-17A/IL-17F的生物学活性包括例如结合IL-17R、IL-17RC和/或多聚体IL-17R/ IL-17RC受体复合物，及诱导靶细胞中的细胞因子和/或趋化因子表达(例如IL-6、IL-8、 G-CSF、GM-CSF、GRO-α、GR0_b、LIX、GCP-2、MIG、IP10、I-TAC、禾口 MCP-I、RANTES、Eotaxin、 SDF-1、和MIP3a)。例如，通过部分或完全调控、阻断、抑制、降低、拮抗、中和、或以其它方式 干扰IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F结合其受体，或者以其它方式部分或完全调控、 阻断、抑制、降低、拮抗、中和IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F复合物信号传导活性， huIL-17A/F抗体完全或部分抑制IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F生物学活性。当IL-17F抗体存在下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平同与本 文所述IL-17F抗体的结合缺失下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平相比 降低至少95%，例如96%,97%,98%,99%^ 100%时，认为huIL_17A/F完全调控、阻断、 抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干扰IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F生物学活 性。当IL-17F抗体存在下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平同与本文所 述IL-17F抗体的结合缺失下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平相比降低 小于 95%，例如 10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、75%、80%、85% 或 90% 时，认为 huIL-17A/F抗体部分调控、阻断、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干扰IL-17F、IL-17A 和 / 或 IL-17A/IL-17F 活性。当IL-17F抗体存在下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平同与本 文所述IL-17F抗体的结合缺失下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平相比 降低至少95%，例如96%,97%,98%,99%^ 100%时，认为huIL_17A/F交叉反应性抗体 完全调控、阻断、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干扰IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/ IL-17F活性。当IL-17F抗体存在下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平同 与本文所述IL-17F抗体的结合缺失下的IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F活性水平 相比降低小于 95%，例如 10%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、75%、80%、85%或 90% 时，认为IL-17F交叉反应性抗体部分调控、阻断、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干扰 IL-17F、IL-17A 和 / 或 IL-17A/IL-17F 活性。定义除非另有定义，连同本发明使用的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员普 遍理解的含义。另外，除非上下文另有要求，单数术语应包括复数，而且复数术语应包括单数。通常，连同本文中描述的细胞和组织培养、分子生物学、及蛋白质和寡或多核苷酸化学 和杂交使用的命名及它们的技术就是本领域中众所周知的且普遍使用的那些。使用标准 技术来进行重组DNA、寡核苷酸合成、及组织培养和转化(例如电穿孔、脂转染)。酶促反 应和纯化技术是依照制造商的说明书或者如本领域普遍实现或本文所述实施的。在先技 术和规程通常是依照本领域公知的常规方法及如本说明书中引用和讨论的各种一般的和 更具体的参考文献所述实施的。参见例如Sambrook等Molecular Cloning :A Laboratory Manual (第 2 版，Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N. Y. (1989))。连同本文中描述的分析化学、合成有机化学、及医学和药学化学使用的命名 及它们的实验室规程和技术就是本领域中众所周知的且普遍使用的那些。使用标准技术来 进行化学合成、化学分析、药物制备、配制、和投递、及患者治疗。如依照本公开内容使用的，除非另外指明，下述术语应理解为具有下述含义如本文中使用的，术语白介素-17A、IL-17A、IL17A、IL-17、IL17、CTLA8、CTLA-8、 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原8和白介素-17A前体同义且可互换使用。每一种这些术语 指同二聚体蛋白质，除非另外指明。如本文中使用的，术语白介素-17F、IL-17F、IL17F、ML-1、ML1、白介素_24、IL_24、 ILM和白介素-17F前体同义且可互换使用。每一种这些术语指同二聚体蛋白质，除非另外 指明。如本文中使用的，术语“抗体”指免疫球蛋白分子和免疫球蛋白(Ig)分子的免疫 学活性部分，即含有特异性结合(与...免疫反应)抗原的抗原结合位点的分子。“特异性 结合”或“与...免疫反应”或“针对”意味着抗体与期望抗原的一个或多个抗原决定簇反 应且不与其它多肽反应或以低得多的亲和力(Kd> 10_6)结合。抗体包括但不限于多克隆、 单克隆、嵌合、dAb (结构域抗体)、单链、Fab、Fab，和F(ab' )2片段、scFv、和Fab表达文 库。已知基本的抗体结构单元包含四聚体。每个四聚体由相同的两对多肽链构成，每 对有一条“轻链”(约25kDa)和一条“重链”(约50-70kDa)。每条链的氨基端部分包括主 要负责抗原识别，约100至110或更多个氨基酸的可变区。每条链的羧基端部分限定主要负 责效应器功能的恒定区。一般而言，自人类获得的抗体分子涉及IgG、IgM、IgA、IgE和IgD 任一类，它们彼此因分子中存在的重链的性质而不同。某些类还有亚类，诸如IgG1UgG2、和 其它。另外，在人类中，轻链可以是κ链或λ链。如本文中使用的，术语“单克隆抗体”(MAb)或“单克隆抗体组合物”指一群抗体分 子只含有一种分子种类的抗体分子，其由唯一的轻链基因产物和唯一的重链基因产物组成 的。具体而言，单克隆抗体的互补决定区(CDR)在该群的所有分子中是相同的。MAb含有能 够与抗原的特定表位免疫反应的抗原结合位点，其特征在于独特的对它的结合亲和力。一般而言，自人类获得的抗体分子涉及IgG、IgM、IgA、IgE和IgD任一类，它们彼 此因分子中存在的重链的性质而不同。某些类还有亚类，诸如IgG1UgG2、和其它。另外，在 人类中，轻链可以是κ链或λ链。术语“抗原结合位点”或“结合部分”指免疫球蛋白分子中参与抗原结合的部分。 抗原结合位点是由重链("H")和轻链(“L" )Ν端可变(“V")区氨基酸残基形成的。 重链和轻链V区内称作“高变区”的三个高度多样的区段插在称作“框架区”或"FR"的更保守的侧翼区段之间。如此，术语"FR"指免疫球蛋白中在高变区之间及附近天然找到的 氨基酸序列。在抗体分子中，轻链的三个高变区和重链的三个高变区在三维空间中相对于 彼此部署以形成抗原结合表面。抗原结合表面与所结合抗原的三维表面互补，而且每一条 重链和轻链的三个高变区称作“互补决定区”或“⑶R”。将氨基酸指派至每个域依照Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest(National Institutes of Health, Bethesda，Md. (1987 禾口 1991))、或 Chothia & Lesk J.Mol. Biol. 196 :901-917(1987), Chothia 等 Nature 342:878-883(1989)的定义。如本文中使用的，术语“表位”包括任何能够特异性结合免疫球蛋白或其片段或 者T细胞受体的蛋白质决定簇。术语“表位”包括任何能够特异性结合免疫球蛋白或T细 胞受体的蛋白质决定簇。表位决定簇通常由分子诸如氨基酸或糖侧链的化学活性表面成组 组成，而且通常具有特定的三维结构特征，以及特定的电荷特征。当解离常数< ΙμΜ，例如 (ΙΟΟηΜ，优选彡IOnM和更优选彡InM时，就说抗体特异性结合抗原。如本文中使用的，术语“免疫学结合”和“免疫学结合特性”指免疫球蛋白分子和 该免疫球蛋白对之特异性的抗原之间发生的非共价相互作用类型。免疫学结合相互作用 的强度或亲和力可以在相互作用的解离常数(Kd)方面表述，其中较小的Kd代表较大的亲 和力。选定多肽的免疫学结合特性可以使用本领域公知的方法来量化。一种此类方法需 要测量抗原结合位点/抗原复合物形成和解离的速率，其中那些速率取决于复合配偶的浓 度、相互作用的亲和力、和几何参数，它们以两个方向同等地影响速率。如此，“结合速率常 数”(κ。η)和“解离速率常数”(K。ff)可通过计算浓度及实际结合和解离速率来确定(参见 Nature 361:186-87(1993))。比K。ff/K。n能够消除所有不涉及亲和力的参数，而且等于解离 常数 Kd (—般参见 Davies 等(1990) Annual Rev Biochem 59:439-473)。当平衡结合常数 (Kd) ( ΙμΜ，优选彡ΙΟΟηΜ，更优选彡ΙΟηΜ，和最优选彡IOOpM至约IpM时，如通过测定法 诸如放射性配体结合测定法或本领域技术人员知道的类似测定法测量的，就说本发明的抗 体特异性结合IL-17F同二聚体、IL-A同二聚体和/或IL-17A/IL-17F异二聚体。如本文中使用的，术语“分离的多核苷酸”应意味着基因组、cDNA、或合成起源或者 其一些组合的多核苷酸，由于其起源，该“分离的多核苷酸”(1)与在自然界中找到该“分离 的多核苷酸”时的多核苷酸的整个或部分不结合，(2)可操作连接在自然界中不与其连接的 多核苷酸，或C3)在自然界中不作为更大序列的一部分存在。依照本发明的多核苷酸包括 编码 SEQ ID NO :2、6、8、10、14、18、20、24、28、32、34、38、44、48 或 54 中呈现的重链免疫球蛋 白分子的核酸分子和编码SEQ ID NO =SEQ ID NO :4、12、16、22、洸、30、36、40、46或56中呈 现的轻链免疫球蛋白分子的核酸分子。本文中提到的术语“分离的蛋白质”意味着cDNA、重组RNA、或合成起源或者其一 些组合的蛋白质，由于其起源或衍生来源，该“分离的蛋白质”(1)与在自然界中找到的蛋白 质不结合，(2)不含来自相同来源的其它蛋白质，例如不含海洋蛋白质，(3)由来自不同物 种的细胞表达，或(4)在自然界中不存在。术语“多肽”在本文中作为上位术语用于指天然蛋白质、多肽序列的片段、或类似 物。因此，天然蛋白质片段、和类似物是上位多肽的下位。依照本发明的多肽包含SEQ ID NO :2、6、8、10、14、18、20、24、28、32、34、38、44、48、或54中呈现的重链免疫球蛋白分子和 SEQ ID NO =SEQ ID NO :4、12、16、22、26、30、36、40、46、50 或 56 中呈现的轻链免疫球蛋白分子，以及由包含重链免疫球蛋白分子和轻链免疫球蛋白分子(诸如κ轻链免疫球蛋白分 子)的组合形成的抗体分子，反之亦然，以及它们的片段和类似物。如本文中使用的，术语“天然存在的”在应用于对象时指能在自然界中找到对象的 事实。例如，在生物体(包括病毒)中存在的，能自自然界中的来源分离及尚未在实验室中 人为地或以其它方式有意修饰的多肽或多核苷酸序列就是天然存在的。如本文中使用的，术语“可操作连接”指所描述的各成分的位置处于容许它们以它 们的预定方式发挥功能的关系。与编码序列“可操作连接”的控制序列是以这样一种方式 连接的，编码序列的表达在与控制序列相容的条件下实现。如本文中使用的，术语“控制序列”指实现与它们连接的编码序列表达和加工所必 需的多核苷酸序列。此类控制序列的性质随宿主生物体而不同，在原核生物中，此类控制序 列通常包括启动子、核糖体结合位点、和转录终止序列，在真核生物中，此类控制序列通常 包括启动子和转录终止序列。术语“控制序列”意图最少包括其存在对于表达和加工是至关 重要的所有成分，而且还可包括其存在是有利的别的成分，例如前导序列和融合配偶序列。 如本文中提到的，术语“多核苷酸”意味着长度至少10个碱基的核苷酸(或是核糖核苷酸或 脱氧核苷酸或任一核苷酸类型的修饰形式)的聚合物。该术语包括单链和双链形式的DNA。本文中提到的术语“寡核苷酸”包括通过天然存在的和非天然存在的寡核苷酸连 接而连接在一起的天然存在的和经过修饰的核苷酸。寡核苷酸是通常包含200个碱基或更 少长度的多核苷酸子集。优选的是，寡核苷酸长度为10至60个碱基，而且长度最优选12、 13、14、15、16、17、18、19、或20至40个碱基。寡核苷酸通常是单链的，例如用作探针，尽管 寡核苷酸可以是双链的，例如用于构建基因突变体。本发明的寡核苷酸是有义或反义寡核 苷酸。本文中提到的术语“天然存在的核苷酸”包括脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸。 本文中提到的术语“经过修饰的核苷酸”包括具有经过修饰的或取代的糖基团等等的 核苷酸。本文中提到的术语“寡核苷酸连接”包括寡核苷酸连接，诸如硫代磷酸酯、二 硫代憐酸酉旨、phosphoroselerloate、phosphorodiselenoate、phosphoroanilothioate> phoshoraniladate、phosphoronmidate、等等。参见例如LaPlanche等，Nucl. Acids Res. 14 9081(1986) ；Stec 等，J. Am. Chem. Soc. 106 :6077 (1984) ；Stein 等，Nucl. Acids Res. 16 3209(1988) ；Zon 等，Anti Cancer Drug Design 6:539(1991) ；Zon 等，Oligonucleotides and Analogues :A Practical Approach, pp. 87-108(F. Eckstein 编，Oxford University Press, Oxford England(1991)) ；Stec 等，美国专利 No. 5，151，510 ；Uhlmann 和 Peyman， Chemical Reviews 90:543(1990)。如果需要，寡核苷酸可包括用于检测的标记物。本文中提到的术语“选择性杂交”意味着可检测和特异性结合。依照本发明的多 核苷酸、寡核苷酸及其片段与核酸链在使对非特定核酸的可检测结合的可评估量最小化的 杂交和清洗条件下选择性杂交。高严格性条件可用于实现本领域已知的和本文中讨论的 选择性杂交条件。通常，本发明的多核苷酸、寡核苷酸、和片段与感兴趣合适序列之间的核 酸序列同源性会是至少80 %，而且更通常优选越来越高的同源性，至少85 %、90 %、95 %、 99%、和100%。如果两种氨基酸序列的序列之间有部分或完全同一性，那么它们是同源 的。例如，当两种序列为最大匹配而比对时，85%同源性意味着85%的氨基酸是相同的。在 使匹配最大化时容许缺口(所匹配的两种序列任一中)，缺口长度优选5或更少，更优选2或更少。或者/优选，如果使用程序ALIGN及突变数据矩阵和缺口罚分6或更大，两种蛋 白质序列(或自它们衍生的、长度为至少30个氨基酸的多肽序列)具有大于5(以标准偏 差单位计)的比对得分，那么它们是同源的，如此术语中本文中所使用的。参见Dayhoff， Μ. 0. , in Atlas of Protein Sequence and Structure, pp. 101-110(Volume 5, National Biomedical Research Foundation(1972))及该卷的增刊2第1-10页。如果两种序列或 其部分的序列在使用ALIGN程序最佳比对时大于或等于50%相同，那么它们是更优选同源 的。术语“对应”在本文中用于表示多核苷酸序列与整个或部分参照多核苷酸序列同源(即 相同，不是严格进化相关的)，或者多肽序列与参照多肽序列相同。与之形成对照，术语“互 补”在本文中用于表示互补序列与整个或部分参照多核苷酸序列同源。举例而言，核苷酸序 列“TATAC”与参照序列“TATAC”对应，而与参照序列“GTATA”互补。下述术语用于描述两种或更多种多核苷酸或氨基酸序列之间的序列关系“参照 序列”、“比较窗口”、“序列同一性”、“序列同一性百分比”、和“实质性同一性”。“参照序列” 指用作序列比较之基础的限定序列，参照序列可以是更大序列的子集，例如，序列表中给出 的全长cDNA或基因序列的区段，或者可以包含完整cDNA或基因序列。通常，参照序列长度 为至少18个核苷酸或至少6个氨基酸，常常长度为至少M个核苷酸或8个氨基酸，而且常 常长度为至少48个核苷酸或至少16个氨基酸。由于两种多核苷酸或氨基酸序列可各自 (1)包含在两种分子之间相似的序列(即完整多核苷酸或氨基酸序列的一部分)，而且(2) 可进一步包含在两种多核苷酸或氨基酸序列之间不同的序列，因此两种(或更多种)分子 之间的序列比较通常通过在“比较窗口 ”上比较两种分子的序列以鉴定和比较局部区域的 序列相似性来实施。如本文中使用的，“比较窗口”指至少18个连续核苷酸位置或6个氨 基酸的概念性区段，其中可以将多核苷酸序列或氨基酸序列与至少18个连续核苷酸或6氨 基酸之序列的参照序列比较且其中对于两种序列的最佳比对，多核苷酸序列中在比较窗口 中的部分可包含与参照序列(不包含添加或删除)相比20%或更少的添加、删除、替代、等 等(即缺口)。可通过Smith和Waterman Adv. Appl. Math. 2 :482 (1981)的局部同源性算 法、通过Needleman和Wunsch J. Mol. Biol. 48 :443(1970)的特异性比对算法、通过Pearson 禾口 Lipman Proc. Natl. Acad. Sci. (U. S. A.) 85 :2444 (1988)的相似性搜索方法、通过这些 算法的计算机化执行(Wisconsin Genetics Software Package Release 7. 0 (Genetics Computer Group, 575 ScienceDr. , Madison, Wis·)、Geneworks、或 MacVector 软件包中的 GAP、BESTFIT、FASTA、和TFASTA)、或通过审查来进行最佳序列比对以进行比对比较窗口，并 选择通过各种方法产生的最佳比对(即导致比较窗口上最高的百分比同源性)。术语“序列同一性”意味着两种多核苷酸或氨基酸序列在比较窗口上是相同的 (即以核苷酸或残基计)。术语“百分比序列同一性”是如下计算得到的，即在比较窗口上比 较两种最佳比对的序列，确定两种序列中出现相同核酸碱基(例如A，T，C，G，U或I)或残 基的位置数目以产生匹配位置数目，将匹配位置数目除以比较窗口中的位置总数(即窗口 大小)，并将结果乘以100以产生百分比序列同一性。如本文中使用的，术语“实质性同一 性”表示多核苷酸或氨基酸序列的一项特征，其中多核苷酸或氨基酸包含在至少18个核苷 酸(6个氨基酸)位置的比较窗口上、通常在至少M-48个核苷酸(8-16个氨基酸)位置的 窗口上与参照序列相比具有至少85%序列同一性、优选至少90至95%序列同一性、更通常 至少99%序列同一性的序列，其中百分比序列同一性是通过将参照序列与如下的序列比较而计算得到的，该序列可包括在比较窗口上占参照序列合计20%或更少的删除或添加。参 照序列可以是更大序列的子集。如本文中使用的，20种常规氨基酸及其缩写遵循常规用法。参见Immimology-A Synthesis(2nd Edition,Ε. S. Golub禾口D. R. Gren,Eds. ,Sinauer Associates,Sunderland7 Mass. (1991))。20种常规氨基酸的立体异构体(例如D-氨基酸)、非天然氨基酸诸如α-， α-二取代的氨基酸、N-烃基氨基酸、乳酸、和其它非常规氨基酸也可以是本发明的多肽的 合适成分。非常规氨基酸的例子包括4-羟基脯氨酸、Y -羧基谷氨酸、ε -N, N, N-三甲基 赖氨酸、ε -N-乙酰基赖氨酸、0-磷酸丝氨酸、N-乙酰基丝氨酸、N-甲酰基甲硫氨酸、3-甲 基组氨酸、5-羟基赖氨酸、σ -N-甲基精氨酸、和其它相似氨基酸和亚氨基酸(例如4-羟基 脯氨酸)。在本文中使用的多肽符号中，左手方向是氨基端方向，而右手方向是羧基端方向， 与标准用法和惯例一致。类似地，除非另有规定，单链多核苷酸序列的左手末端是5'末端，双链多核苷酸 序列的左手方向称作5'方向。初生RNA转录物的5'至3'添加的方向称作转录方向，DNA 链上与RNA具有相同序列且位于RNA转录物5'末端的5'的序列区称作“上游序列”，DNA 链上与RNA具有相同序列且位于RNA转录物3'末端的3'的序列区称作“下游序列”。在应用于多肽时，术语“实质性同一性”意味着两种肽序列在最佳比对时(诸如通 过程序GAP或BESTFIT，使用缺省缺口权重)共享至少80 %序列同一性、优选至少90 %序列 同一性、更优选至少95%序列同一性、和最优选至少99%序列同一性。优选的是，不相同的残基位置因保守氨基酸替代而不同。保守氨基酸替代指具有相似侧链的残基的互换。例如，一组具有脂肪族侧链的氨 基酸是甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、和异亮氨酸；一组具有脂肪族-羟基侧链的氨基酸 是丝氨酸和苏氨酸；一组具有含酰胺侧链的氨基酸是天冬酰胺和谷氨酰胺；一组具有芳香 族侧链的氨基酸是苯丙氨酸、酪氨酸、和色氨酸；一组具有碱性侧链的氨基酸是赖氨酸、精 氨酸、和组氨酸；而一组具有含硫侧链的氨基酸是半胱氨酸和甲硫氨酸。优选的保守氨基酸 替代组是缬氨酸-亮氨酸-异亮氨酸、苯丙氨酸-酪氨酸、赖氨酸-精氨酸、苯丙氨酸-缬 氨酸、谷氨酸-天冬氨酸、和天冬酰胺-谷氨酰胺。如本文中讨论的，本发明涵盖抗体或免疫球蛋白分子的氨基酸序列中的次要变 异，前提是氨基酸序列中的变异维持至少75 %，更优选至少80 %、90 %、95 %，且最优选 99%。具体而言，涵盖保守氨基酸替换。保守替换是那些在它们的侧链中相关的氨基酸家 族内发生的。通常将遗传编码的氨基酸分入下述家族(1)酸性氨基酸是天冬氨酸、谷氨 酸；( 碱性氨基酸是赖氨酸、精氨酸、组氨酸；C3)非极性氨基酸是丙氨酸、缬氨酸、亮氨 酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸；而(4)不带电荷的极性氨基酸是甘氨 酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸。亲水性氨基酸包括精氨酸、天 冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、组氨酸、赖氨酸、丝氨酸、和苏氨酸。疏水性氨基酸包 括丙氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬 氨酸。其它氨基酸家族包括(i)丝氨酸和苏氨酸，它们是脂肪族-羟基家族；(ii)天冬酰 胺和谷氨酰胺，它们是含酰胺家族；(iii)丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸，它们是脂肪 族家族；及(iv)苯丙氨酸、色氨酸、和酪氨酸，它们是芳香族家族。例如，合理预期用异亮氨 酸或缬氨酸对亮氨酸、用谷氨酸对天冬氨酸、用丝氨酸对苏氨酸的分离的替换，或者用结构相关的氨基酸对氨基酸的相似替换不会对所得分子的结合或特性产生重大影响，尤其是如 果该替换不涉及框架位点内的氨基酸的话。通过测定多肽衍生物的比活性，可容易地确定 氨基酸变化是否产生功能性肽。本文中详细描述测定法。本领域普通技术人员能容易地制 备抗体或免疫球蛋白分子的片段或类似物。片段或类似物的优选氨基端和羧基端存在于功 能域的边界附近。可通过将核苷酸和/或氨基酸序列数据与公共的或私有的序列数据库比 较来鉴定结构和功能域。优选的是，使用计算机化比较方法来鉴定结构和/或功能已知的 其它蛋白质中存在的序列基序或预测蛋白质构象域。鉴定折叠成已知的三维结构的蛋白质 序列的方法是已知的。253:164(1991)。如此，前述例子证明本领域技术 人员能认出可用于限定依照本发明的结构和功能域的序列基序和结构构象。优选的氨基酸替代是那些⑴降低对蛋白水解的易感性的，⑵降低对氧化的易 感性的，(3)改变形成蛋白质复合物的结合亲和力的，(4)改变结合亲和力的，及(4)赋予或 修饰此类类似物的其它物化或功能特性的。类似物可包括各种序列与天然存在肽序列不同 的突变蛋白。例如，可以在天然存在序列中(优选在多肽中形成分子间接触的结构域以外 的部分中)进行单一或多重氨基酸替代(优选保守氨基酸替代)。保守氨基酸替代不应实 质性改变亲本序列的结构特征(例如替换氨基酸不应趋于打断亲本序列中存在的螺旋，或 破坏亲本序列特征性的其它类型二级结构)。本领域公认的多肽二级和三级结构的例子记 载于Proteins, Structures and Molecular Principles (Creighton,Ed. ,W. H. Freeman and Company,New York(1984)) ；Introduction to Protein Structure(C. Branden禾口 J. Tooze, eds. ， Garland Publishing, New York, N. Y. (1991)) ；R Thornton et at. Nature 354 105(1991)。如本文中使用的，术语“多肽片段”指如下的多肽，其具有氨基端和/或羧基端删 除，但是其中剩余氨基酸序列与自例如全长cDNA序列推导的天然存在序列中的相应位置 相同。片段通常长至少5、6、8或10个氨基酸，优选长至少14个氨基酸，更优选长至少20 个氨基酸，通常长至少50个氨基酸，且甚至更优选长至少70个氨基酸。如本文中使用的， 术语“类似物”指由至少25个氨基酸的区段构成的多肽，其与推导氨基酸序列的一部分具 有实质性同一性且在合适的结合条件下对单独的IL-17F或IL-17A/IL-17F异二聚体(即 复合物)有特异性结合。通常，多肽类似物相对于天然存在序列包含保守氨基酸替代(或 添加或删除)。类似物通常长至少20个氨基酸，优选长至少50个氨基酸或更长，而且常常 可以与全长天然存在肽一样长。肽类似物作为与模板肽具有类似特性的非肽药物普遍用于制药工业。这些类型的 非肽化合物称作“肽模拟物”或“模拟肽”。Fauchere, J. Adv. Drug Res. 15 =29(1986) ；Veber 和 Freidinger TINS p. 392(1985)；及 Evans 等 J. Med. Chem. 30 :1229 (1987)。常常借助计 算机化分子建模来开发此类化合物。在结构上与药学有用肽相似的肽模拟物可用于产生等 同的治疗或预防效果。通常，模拟肽在结构上与范本多肽(即具有生化特性或药理学活性 的多肽)诸如人抗体相似，但是有一个或多个肽连接任选通过本领域公知的方法被选自下 组的连接替换--CH2NH—、-CH2S-, -CH2-CH2-, -CH = CH—(顺式和反式)、-COCH2-, CH(OH)CH2-、和一CH2S0--。用同一类型的D-氨基酸(例如D-赖氨酸替换L-赖氨酸) 对共有序列的一个或多个氨基酸的系统替代可用于生成更稳定的肽。另外，可通过本领 域已知的方法来生成包含共有序列或基本上相同的共有序列变异的受约束的肽(Rizo和Gierasch Ann. Rev. Biochem. 61 :387(1992))；例如通过添加内部半胱氨酸残基，其能够形 成分子内二硫桥，使肽环化。术语“药剂/试剂”在本文中用于表示化学化合物、化学化合物的混合物、生物学 高分子、或自生物学材料制得的提取物。如本文中使用的，术语“标记”或“标记的”指掺入可检测标志物，例如通过掺入放 射性标记的氨基酸或将能通过经标记亲合素(例如含有能通过光学方法或量热法来检测 的荧光标志物或酶促活性的链霉亲合素)来检测的生物素模块附着至多肽。在某些情况 中，标记物或标志物还可以是治疗性的。本领域知道而且可以使用多种标记多肽和糖蛋白 的方法。用于多肽的标记物的例子包括但不限于下述放射性同位素或放射性核素(例如 3H、14C、15N、35S、9°Y、99TC、mIn、125I、131I)、-*#Etl (例如 FITC、罗丹明、镧系元素磷光体)、 酶标记物(例如辣根过氧化物酶、P"半乳糖苷酶、萤光素酶、碱性磷酸酶)、化学发光、生物 素基团、受到二级报告物识别的预定确定的多肽表位(例如亮氨酸拉链对序列、二抗的结 合位点、金属结合域、表位标签)。在一些实施方案中，通过各种长度的间隔物臂来附着标记 物以降低潜在的位阻。如本文中使用的，术语“药剂或药物”指在正确施用于患者时能够诱 导期望的治疗效果的化学化合物或组合物。本文中的其它化学术语依照本领域的常规用法使用，如The McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(Parker,S. ,Ed. ,McGraw-Hi11,San Francisco(1985))例 示的。术语“抗肿瘤剂”在本文中用于指具有抑制人类中新生物(肿瘤)形成或发展的 功能特性的药剂，特别是恶性(癌性)损害，诸如癌瘤、肉瘤、淋巴瘤、或白血病。对转移的 抑制通常是抗肿瘤剂的一项特性。如本文中使用的，“基本上纯的”意味着对象种类是存在的主要种类(即以摩尔 计，它比组合物中的任何其它各种类更丰富)，而且优选的是，基本上纯的级分是如下的组 合物，其中对象种类构成存在的所有高分子种类的至少约50% (以摩尔计)。通常，基本上纯的组合物会包含组合物中存在的所有高分子种类的超过约80%， 更优选超过约85%、90%、95%、和99%。最优选的是，将对象种类纯化至本质上同质(通 过常规检测方法在组合物中检测不到污染物种类)，其中该组合物本质上由单一高分子种 类组成。自身免疫性疾病包括例如获得性免疫缺陷综合征(AIDS，这是一种具有自身免疫 性成分的病毒性疾病)、斑秃、强直性脊柱炎、抗磷脂综合征、自身免疫性阿狄森氏病、自身 免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、自身免疫性内耳病(AIED)、自身免疫性淋巴细胞增生 综合征(ALPS)、自身免疫性血小板减少性紫癜(ATP)、贝切特氏病、心肌病、口炎性腹泻-疱 疹样皮炎；慢性疲劳免疫功能障碍综合征(CFIDS)、慢性炎性脱髓鞘性多神经病(CIPD)、瘢 痕性类天疱疮、冷凝集素病、crest综合征、克罗恩氏病、德戈斯氏病、青少年皮肌炎、盘状 狼疮、特发性混合性冷球蛋白血症、纤维肌痛-纤维肌炎、格雷夫斯氏病、格巴二氏综合症、 桥本氏甲状腺炎、特发性肺纤维化、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、IgA肾病、胰岛素依赖 性糖尿病、青少年慢性关节炎(斯提耳氏病)、青少年类风湿性关节炎、梅尼尔氏病、混合性 结缔组织病、多发性硬化、重症肌无力、恶性贫血、结节性多动脉炎、多软骨炎、多腺性综合 征、风湿性多肌痛、多肌炎和皮肌炎、原发性无丙种球蛋白血症、原发性胆汁性肝硬化、银屑病、银屑病关节炎、雷诺氏现象、莱特尔氏综合征、风湿热、类风湿性关节炎、结节病、硬皮病 (进行性系统性硬化病(PSS)，也称作系统性硬化病(SS))、斯耶格兰氏综合症、僵人综合 征、系统性红斑狼疮、高安动脉炎、颞动脉炎/巨细胞性动脉炎、溃疡性结肠炎、葡萄膜炎、 白癜风和韦格纳氏肉芽肿病。炎性病症包括例如慢性和急性炎性病症。炎性病症的例子包括阿尔茨海默氏病、 哮喘、特应性变态反应、变态反应、动脉粥样硬化、支气管哮喘、湿疹、肾小球肾炎、移植物抗 宿主病、溶血性贫血、骨关节炎、败血病、中风、组织和器官移植、血管炎、糖尿病性视网膜病 和呼吸机诱发的肺损伤。huIL-17F_A 抗体本发明的单克隆抗体(例如完全人的单克隆抗体)具有抑制IL-17F、IL_17A和/ 或IL-1F/IL-17A诱导的促炎性细胞因子(例如IL-6)生成的能力。通过例如本文中描述 的IL-17刺激的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)细胞测定法来测定抑制。例示性的本发明抗体包括例如30D12抗体、29D8抗体、1E4抗体、31A3抗体、39F12 抗体、12B12抗体、15B7抗体、4H11抗体、4B11抗体、8B11抗体、38B1抗体、禾口 15E6抗体、 5E12抗体、41B10抗体、及其变体。此类抗体的变体包括30D12BF抗体(30D12抗体的变 体)、39F12A抗体(39F12抗体的变体)、和15Ε6Π(抗体(15Ε6抗体的变体)。这些抗体显 示对人IL-17F的特异性，而且它们已经显示出在体外抑制人IL-17F诱导促炎性细胞因子 IL-6。29D8 抗体(“Mab02a，，)、lE4 抗体(“Mab02b”)、31A3 抗体(“Mab02c”)、39F12 抗体 (“Mab06a”)、12B12 抗体(“Mab06b”)、15B7 抗体(“Mab06c”)、4H11 抗体(“Mab09”)、 30D12抗体、8B11抗体、38B1抗体、15E6抗体和4B11抗体还显示对人IL-17A的特异性，而且 已经显示出在体外抑制人IL-17A诱导的IL-6生成。抗体、1E4抗体、31A3抗体、39F12 抗体、12B12抗体、15B7抗体、4H11抗体、30D12抗体、8B11抗体、38B1抗体、15E6抗体和4B11 抗体还显示对人IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的特异性。5E12抗体结合人IL-17F，但是 不结合人IL-17A、IL-17A同二聚体或人IL-17A/IL-17F异二聚体复合物。41B10抗体结合 人IL-17F和人IL-17A/IL-17F异二聚体复合物，但是不结合人IL-17A或IL-17A同二聚体。本文中描述的每一种huIL_17F单克隆抗体包括重链可变区(Vh)和轻链可变区 (\)，如下文列出的氨基酸和相应核酸序列中显示的。30D12抗体包括由SEQ ID N0:1中显 示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO :2)和由SEQ ID NO :3中显示的核酸序列编码 的轻链可变区(SEQ ID NO 4)。> 30D12 Vh 核酸序列(SEQ ID NO 1) CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGATACACCTTCACCAGTTATGATATCAACTGGGTGCGA CAGGCCACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATGAACCCTGACAGTGGTGTCATACGTTATGCACAGAAGTT CCAGGGTAGAGTCACCATGACCAGGAACACCTCCATAAGCACAGCCTACATGGAGCTAAACAGCCTGAGATCTGAGG ACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGAATGGTTCGGGGAGTTACCCTCTTACTACTTCTACTCCGGTATGGACGTC TGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 30D12 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 2) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYDIN WVRQATGQGLEWMGWMNPDSGVIRYAQKFQGRVTMTRNTSISTAYMELNSLRSEDTAVYYCAREWFGELPSYYFYSG MDVffGQGTTVTVSS> 30D12 V1 核酸序列(SEQ ID NO 3) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAG AAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGG CAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGC AGCGTAGCAACTGGCCTCCCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAA> 30D12 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 4) EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAW YQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPTFGPGTKVDIK29D8UE4和31A3抗体每一项包括不同的重链可变区，但是共享共同的轻链可变 区。抗体包括由SEQ ID NO :5中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO :6)。 1E4抗体包括由SEQ ID NO :7中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO :8)。31A3 抗体包括由SEQ ID NO :9中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO 10)。^D8、1E4 和31A3抗体的轻链可变区(SEQ ID NO 12)由SEQ ID NO 11中显示的核酸序列编码。> 29D8 Vn 核酸序列(SEQ ID NO 5) CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGAA GCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTTTGCTTACACCTTTTCCACCTATGGTATCAGCTGGGTGCGAC AGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGCTTACAATAGTAACACAAACTATGCACAGAAAGTC CAGGGCAGAATCACCATGACCACAGACACATCCACGCGCACAGCCTACATGGAGCTGAGGGGCCTGAGATCTGACGA CACGGCCGTGTATTTCTGTGCGACTTTCTTCGGTGGTCACTCTGGCTACCACTACGGGTTGGACGTCTGGGGCCAGG GGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 29D8 Vn 氨基酸序列(SEQ ID NO 6) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKAFAYTFSTYGISW VRQAPGQGLEWMGWISAYNSNTNYAQKVQGRITMTTDTSTRTAYMELRGLRSDDTAVYFCATFFGGHSGYHYGLDVW GQGTTVTVSS> 1E4 Ve 核酸序列(SEQ ID NO 7) CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGAAG CCTGGGGCCTCAGTGAAGGTTTCCTGCAAGGCTTCTGTTTACACCTTTACCACTTATGGTATCAGCTGGGTGCGACA GGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCGTTTACAATGGTAATACAAACTATGGACAGAATTTCC AGGGCAGAGTCAGCATGACCACAGACACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGGAGCCTGAGATCTGACGAC ACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGTTTCCACGGTGGTCACTCTGGCTACCACTACGGTTTGGACGTCTGGGGCCAAGG GACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 1E4 Ve 氨基酸序列(SEQ ID NO 8) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASVYTFTTYGISWV RQAPGQGLEWMGWISVYNGNTNYGQNFQGRVSMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCASFHGGHSGYHYGLDVWG QGTTVTVSS> 31A3 Vh 核酸序列(SEQ ID NO 9) CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGAA GCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGTTTACACCTTTACCACCTATGGTATCAGTTGGGTGCGAC AGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCACCGTTTACAATGGTAACACAAACTATGCACAGAAGTTC CACGGCAGAGTCACCATGACCACAGACACATCCACAAGTACAGCCTACATGGAGCTGAGGAGCCTGAGATCTGACGA CACGGCCGTCTATTACTGTGCGAGTTTCCACGGTGGTCATTCTGGCTACCACTACGGTTTGGACGTCTGGGGCCAAG GGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 31A3 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 10) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASVYTFTTYGIS WVRQAPGQGLEWMGWITVYNGNTNYAQKFHGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCASFHGGHSGYHYGLDV WGQGTTVTVSS> 29D8UE4 和 31Α3 V1 核酸序列(SEQ ID NO 11)GAAATTGTGTTGACNCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCT GGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATNTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCC AGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTA TTACTGTCAGCAGCGTAGCAACTGGCCTCCGTACACTTTTGGCCAGGGGACCAAGCTGGAGATCAAA> 29D8UE4 和 31A3 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 12)EIVLXQSPATLSLSPGERATLSCR ASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLXYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPYTFGQ GTKLEIK4B11抗体包括由SEQ ID NO :13中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO 14)和由SEQ ID NO 15中显示的核酸序列编码的轻链可变区(SEQ ID NO 16)。> 4B11 Vy 核酸序列(SEQ ID NO 13) CAGCTGCAGTTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGA AGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTCTGATGACTACATCAGCAGTAGGAGTTACTACTGGGGCTGG ATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGGAGTATCTATTATAGTGGGAGCACCTACTACAACCCGTC CCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCCGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAAGTGAGTTCTGTGACCGCCA CAGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGTCAGTGGCTGGAACGGGAACTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGAACC CTGGTCACGGTCTCCTCA> 4B11 I 氨基酸序列(SEQ ID NO 14) QLQLQESGPGLVKPSETLSLTCAVSDDYISSRSYY WGWIRQPPGKGLEfflGSIYYSGSTYYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKVSSVTATDTAVYYCARVSGffNGNWFDPffG QGTLVTVSS> 4B11 V1 核酸序列(SEQ ID NO 15) GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTT TGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGTGCATCCAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAG TGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTC AGCAGTATGGTAGCTCACCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAA> 4B11 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 16) EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPITFGQGTRLEIK39F12和12B12抗体每一项包括不同的重链可变区，但是共享共同的轻链可变区。 39F12抗体包括由SEQ ID NO :17中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID N0:18)。 12B12抗体包括由SEQ ID NO :19中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO :20)。 39F12和12B12抗体的轻链可变区(SEQ ID NO 22)由SEQ ID NO :21中显示的核酸序列编 码。> 39F12 Vh 核酸序列(SEQ ID NO 17) CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAG AAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCCTCAGCAGCTATGCTTTCAGCTGGGTGCG ACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTTTCTTTGGAACAACAAATTACGCACAGAAGT TCCAGGGCAGAGTCATAATTACCGCGGACGAATCCACGAACACAGCCTACATGGAGCTGAGCGGCCTGAGATCTGAG GACACGGCCGTGTATTATTGTGCGAGAGACAGGGATTACTATGGTTTGGGGAGTCCCTTCTACTACTACGGTATGGA CGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 39F12 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 18) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTLSSYAF SWVRQAPGQGLEWMGGIIPFFGTTNYAQKFQGRVIITADESTNTAYMELSGLRSEDTAVYYCARDRDYYGLGSPFYY YGMDVffGQGTTVTVSS
> 12B12 Vy 核酸序列(SEQ ID NO 19) CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAG AAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCCTCAGCAGCTATGCTTTCAGCTGGGTGCG ACAGGCCCCTGGACAAGGCCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCCCTTTCTTTGGAACAGTAAACTACGCACAGAAGT TCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAACACTGCCTATATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAG GACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGACAGGGATTATTATGGTTTGGGGAGTCCCCTCCACTACTACGGTTTGGA CGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 12B12 I 氨基酸序列(SEQ ID NO 20) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTLSSYAF SWVRQAPGQGLEWMGGIIPFFGTVNYAQKFQGRVTITADESTNTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDRDYYGLGSPLHY YGLDVffGQGTTVTVSS> 39F12 和 12B12 V1 核酸序列(SEQ ID NO 21) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGACT TTCAGTCTGTGACTCCAAAGGAGAAAGTCACCATCACCTGCCGGGCCAGTCAGAGCATTGGTAGTAGCTTACACTGG TACCAGCAGAAACCAGATCAGTCTCCAAAGCTCCTCATCAAGTATGCTTCCCAGTCCTTCTCAGGGGTCCCCTCGAG GTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACCCTCACCATCAATAGCCTGGAAGCTGAAGATGCTGCAGCGTATT ACTGTCATCAGAGTAGTAGTTTACCGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA> 39F12 和 12B12 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 22) EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCRAS QSIGSSLHWYQQKPDQSPKLLIKYASQSFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTINSLEAEDAAAYYCHQSSSLPWTFGQGTK VEIK4H11抗体包括由SEQ ID NO :27中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO 28)和由SEQ ID NO 29中显示的核酸序列编码的轻链可变区(SEQ ID NO 30)。> 4H11 I 核酸序列(SEQ ID NO 23) GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCCGGGGGAGGCTTGGTCC AGCCTGGGGGGTCCCTGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGGTTCACCTTCAGTGGCTCTTCTATGCACTGGGTCCGC CAGGCTTCCGGGAAAGGGCTGGACTGGGTTGGCCGTATTAGAAGCAAAGCTAACAGTTACGCGACAGCATATGCTGC GTCGGTGATAGGCAGGTTCACCATCTCCAGAGATGATTCAAAGAACACGGCGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAAA CCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTACTACATCAGTGGCTACTACCCTTACTGACTACTACGGTATGGACGTCTGG GGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 4H11 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 24) EVQLVESGGGLVQPGGSLKLSCAASGFTFSGSSMH WVRQASGKGLDWVGRIRSKANSYATAYAASVIGRFTISRDDSKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCTTSVATTLTDYYGM DVffGQGTTVTVSS> 4H11 V1 核酸序列(SEQ ID NO 25) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTT TGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAG AAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGG CAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAAC AGCGTAGCAACTGGCCTCCATTCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAA> 4H11 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 26) EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAW YQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPFTFGPGTKVDIK8B11抗体包括由SEQ ID NO 31中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO 32)和由SEQ ID NO 33中显示的核酸序列编码的轻链可变区(SEQ ID NO 34)。> 8B11 Vh 核酸序列(SEQ ID NO 27) GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTAC ACCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTTTAACATGGACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTTTCATCCATTAGTACTACTAGCAGAATCATATACTCTGCAGACTCTGT GAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGCCAGGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGACGAGG ACACGGCTGTATATTACTGTGCGAGAGTCAGTTACTATGGCCACGGATTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTC ACCGTCTCCTCA> 8B11 I 氨基酸序列(SEQ ID NO 28) EVQLVESGGGLVHPGGSLRLSCAASGFTFSSFNMD WVRQAPGKGLEWVSSISTTSRIIYSADSVKGRFTISRDNARNSLYLQMNSLRDEDTAVYYCARVSYYGHGFDYWGQG TLVTVSS> 8B11 V1 核酸序列(SEQ ID NO 29) GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCACTGTCTG CATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGGTATTAGCAGCTGGTTAGCCTGGTATCAGCAG AAACCAGAGAAAGCCCCTAAGTCCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGG CAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGCCAAC AGTATAATAGTTACCCTCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 8B11 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO :30)DIQMTQSPSSLSASV⑶RVTITCRASQGISSWLAW YQQKPEKAPKSLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYNSYPLTFGGGTKVEIK与39F12和12B12抗体相比，15B7抗体包括不同的由SEQ ID NO :35中显示的核 酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO 36)，而且共享共同的由SEQ ID NO :21中显示的核 酸序列编码的轻链可变区(SEQ ID NO :22)，如先前显示的。> 15B7 I 核酸序列(SEQ ID NO 31) CAGGTCCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCACCCTCAGCAGCTATGCTTTCAGCTGGGTGCGA CAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGAATCATCCCTTTCTTTGGAACAGCACACTACGCACAGAAGTT CCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAATCCACGAACACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAGG ACACGGCCGTATATTACTGTGCGAGAGATAGGGACTACTATGGTTCGGGGAGTCCCTTCCACTTCTCCGGTTTGGAC GTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 15B7 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 32) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTLSSYAFS WVRQAPGQGLEWMGGIIPFFGTAHYAQKFQGRVTITADESTNTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDRDYYGSGSPFHFS GLDVffGQGTTVTVSS38B1抗体包括不同的由SEQ ID NO 33中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO 34)和由SEQ ID NO 35中显示的核酸序列编码的轻链可变区(SEQ ID NO 36)。> 38B1 Vh 核酸序列(SEQ ID NO 33) GAAGTACAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTAC AGCCTGGCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTGATGATTTTGCCATGCACTGGGTCCGG CAAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAATTGGAATAGTGGTAGCATAGGCTATGCGGACTCTGT GAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCCGAGG ACACGGCCTTGTATTACTGTGCAAAAGATATAGCAGCAGCTGGTGAATTCTACTTCGATATGGACGTCTGGGGCCAA GGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 38B1 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 34) EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDFAMH WVRQAPGKGLEWVSGINWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCAKDIAAAGEFYFDMDV WGQGTTVTVSS> 38B1 V1 核酸序列(SEQ ID NO 35) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTT TGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGG CAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGC AGCGTAGCAACTGGCCTCCGACTTTTGGCCAGGGGACCAAGCTGGAGATCAAA> 38B1 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 36) EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAW YQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPTFGQGTKLEIK15E6抗体包括不同的由SEQ ID NO 37中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO 38)和由SEQ ID NO 39中显示的核酸序列编码的轻链可变区(SEQ ID NO 40)。> 15E6 I 核酸序列(SEQ ID NO 37) GAAGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTAC AGCCTGGCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTGATGATTATGCCATGCACTGGGTCCGG CAAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAATTGGAATAGTGGTGGCATAGGCTATGCGGACTCTGT GAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCTGAGG ACACGGCCTTGTATTACTGTGCAAGAGATATGGGGGGGTTCGGGGAGTTTTACTGGAACTTCGGTCTCTGGGGCCGT GGCACCCTGGTCACTGTCTCCTCA> 15E6 I 氨基酸序列(SEQ ID NO 38) EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMH WVRQAPGKGLEWVSGINWNSGGIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCARDMGGFGEFYWNFGL WGRGTLVTVSS> 15E6 V1 核酸序列(SEQ ID NO 39) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTT TGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGAAGCTACTTAGCCTGGTACCAACAG AAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGCCACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGG CAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGC AGCGTAGCAACTGGCCTCCGGCCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 15E6 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 40) EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVRSYLAW YQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPPATFGGGTKVEIK5E12抗体包括由SEQ ID NO :43中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO 44)和由SEQ ID NO 45中显示的核酸序列编码的轻链可变区(SEQ ID NO 46)。5E12抗体 结合IL-17F和IL-17F同二聚体，但是不结合IL-17A或IL-17A/IL-17F异二聚体复合物。> 5E12 Vh 核酸序列(SEQ ID NO 43) CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGGAGGCTTGGTAC AGCCTGGCAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTGATGATTATGCCATGCACTGGGTCCGG CAAGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGGTCTCAGGTATTAGTTGGAATAGTGGTACCATAGGCTATGCGGACTCTGT GAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCCCTGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAGAGCTGAGG ACACGGCCTTGTATTACTGTGCAAAAGAACTGTATATCAGTGACTGGGACTCCTACTCCTACGGTATGGACGTCTGG GGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA> 5E12 Vh 氨基酸序列(SEQ ID NO 44) QVQLVQSGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFDDYAMH WVRQAPGKGLEWVSGISffNSGTIGYADSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTALYYCAKELYISDWDSYSYGM DVffGQGTTVTVSS> 5E12 V1 核酸序列(SEQ ID NO 45) GAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTT TGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGCAGCAGCTACTTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGTGCATCCAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAG TGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGATTTTGCAGTGTATTACTGTCAGCAGTATGGTAGCTCACCTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA> 5E12 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO 46) EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSSYLA WYQQKPGQAPRLLIYGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPFGGGTKVEIK41B10抗体包括由SEQ ID NO :47中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO 48)和由SEQ ID NO 49中显示的核酸序列编码的轻链可变区(SEQ ID NO 50)。5E12抗 体结合IL-17F、IL-17F同二聚体、和IL-17A/IL-17F异二聚体复合物，但是不结合IL-17A。> 41B10 I 核酸序列(SEQ ID NO 47) GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTA AAGCCTGGGGGGTCCCTTAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAACGCCTGGATGAGCTGGGTCCG CCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGGTTGGCCGTATTAAAAGCAAAACTGATGGTGGGACAACAGACTACGTTG CACCCGTGAAAGGCAGATTCACCATCTCAAGAGATGATTCAAAAAACACCCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAA ACCGAGGACACAGCCGTATATTACTGTACCACATCGTATAGCAGTTACTGGTTCCCCTACTACTTTGACTACTGGGG CCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA> 41B10 I 氨基酸序列(SEQ ID NO 48) EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSNAWM SWVRQAPGKGLEWVGRIKSKTDGGTTDYVAPVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLKTEDTAVYYCTTSYSSYWFPYYF DYffGQGTLVTVSS> 41B10 V1 核酸序列(SEQ ID NO 49) GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCACTGTCT GCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGGTATTAGCAGCTGGTTAGCCTGGTATCAGCA GAAACCAGAGAAAGCCCCTAAGTCCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCG GCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGCCAA CAGTATAATAGTTACCCGATCACCTTCGGCCAAGGGACACGACTGGAGATTAAA> 41B10 V1 氨基酸序列(SEQ ID NO :50)DIQMTQSPSSLSASV⑶RVTITCRASQGISSWLA WYQQKPEKAPKSLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYNSYPITFGQGTRLEIK本发明的huIL_17A/F抗体另外包含例如下文表1中显示的重链互补决定区(Vh OTR)和表2中显示的轻链互补决定区⑶Rs)，及其组合。huIL_17F抗体的变体通过修饰亲本抗体编码基因的DNA序列，制备了本文所述数种huIL_17F抗体的变 体。例如，对30D12和15E6重链可变区和39F12轻链可变区进行了 DNA修饰。具体而言， 这些氨基酸变化导致这些抗体中的多处变化。例如，对30D12重链可变区进行的修饰导致 30D12重链中糖基化位点的消除。(N连接的糖基化位点是NXS或NXT，其中X是除P以外 的任何氨基酸)。另外，通过消除(即替代)倾向于化学修饰的残基，对30D12和15E6 Vh CDR进行的修饰提供更大的化学稳定性和抗体制备同质性。例如，在15E6 VH&CDR2中，能 够形成异天冬氨酸的天冬酰胺残基被变成丝氨酸。在30D12 Vh⑶R2和15E6 Vh⑶R3中， 甲硫氨酸残基分别被变成亮氨酸和异亮氨酸，以消除甲硫氨酸硫氧化的可能性。对30D12 重链可变区和39F12轻链可变区的别的修饰恢复了初始的人种系框架序列(例如30D12 Vh 框架3中的Asn变成kr，及39F12 Vl框架3中的Ala变成Thr)。30D12、15E6和39F12变体在本文中分别描述为30D12BF、15E6FK和39F12A。下文 列出的氨基酸和相应核酸序列显示每一种这些变体的重链可变区(Vh)和轻链可变区(\)。与亲本30D12抗体相比，30D12BF抗体包括不同的由SEQ ID NO 51中显示的核酸 序列编码的重链可变区(SEQ ID NO :52)，而且共享由SEQ ID NO :3中显示的核酸序列编码的轻链可变区(seq id no :4)。seq id no :51中显示的核酸序列中经过修饰的残基以粗 体、下划线和阴影字母指示。seq id no :52中显示的氨基酸序列中的⑶r以双下划线字母 指示，而经过修饰的残基是非粗体、斜体和阴影灰色的。> 30d12bf vh 核酸序列(seq id no 51) caggt g cagctggtgcagtctggggctgaggt gmgaagcctggggcctcagtgmggtctcctgcaaggcttctggatacaccttcaccagttatgatatcaactgggt gcgacaggccactggacaagggcttgagtggatgggatgg￡tgaaccctgacagtggtgtcatacgttatgcacaga
agttccagggtagagtcaccatgaccagggacacctccataagcacagcctacatggagctaagcagcctgagat ctgaggacacggccgtgtattactgtgcgagagaatggttcggggagttaccctcttactacttctactccggtatg gacgtctggggccaagggaccacggtcaccgtctcctca> 30d12bf i 氨基酸序列(seq id no 52)
OVOTVOSCAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYDINWVROATGOGLE WMGW7,NPPSGVIRYAOKFOGRVTMTRDTSISTAYMEL,SSLRSEPTAV YYCAREWFGELPSYYFYSGMDVWGOGTTVTVSS在SEQ ID NO 52中，Met被变成Leu以防止可能的甲硫氨酸硫氧化；NTS基序被 变成DTS以消除框架3中的糖基化位点；而Asn变成kr的回复突变(变成种系)被引入 框架3。与亲本15E6抗体相比，15Ε6Π(抗体包括不同的由SEQ ID NO 53中显示的核酸序 列编码的重链可变区(SEQ ID NO 54)，而且共享由SEQ ID NO :39中显示的核酸序列编码 的轻链可变区(SEQ ID N0:40)。SEQ ID NO :53中显示的核酸序列中经过修饰的残基以粗 体、下划线和阴影字母指示。SEQ ID NO :54中显示的氨基酸序列中的⑶R以双下划线字母 指示，而经过修饰的残基是非粗体、斜体和阴影灰色的。> 15e6fk i 核酸序列(seq id no 53) gaagtgcagctggtggagtctgggggaggcttggt acagcctggcaggtccctgagactctcctgtgcagcctctggattcacctttgatgattatgccatgcactgggtcc
ggcaagctccagggaagggcctggagtgggtctcaggtattaattggaqc agtggtggcataggctatgcggact
ctgtgaagggccgattcaccatctccagagacaacgccaagaactccctgtatctgcmatgaacagtctgagagctg
aggacacggccttgtattactgtgcaagagatatCggggggttcggggagttttactggmcttcggtctctggggc
cgtggcaccctggtcactgtctcctca> 15e6fk i 氨基酸序列(seq id no 54)
EVOLVESGGGLVOPGRSLRLSCAASGFTFDPYAMHWVROAPGKGLE
WVSGINW^SGGIGYADSVKGRFTISRDNAKNST.YT^OMNST.RAFDTAT,
YYCARO/GGFGEFYWNFGLWGRGTLVTVSS在SEQ ID NO :54中，CDR2中的NS被变成SS以防止Asn脱酰胺的可能，而Met被 变成Ile以防止甲硫氨酸硫氧化的可能。与亲本39f12抗体相比，39f12a抗体共享由seq id no 17中显示的核酸序列编码的重链可变区(SEQ ID NO 18)，而且包括不同的由SEQ ID NO :55中显示的核酸序列编 码的轻链可变区(SEQ ID N0:56)。SEQ ID NO :55中显示的核酸序列中经过修饰的残基以 粗体、下划线和阴影字母指示。SEQ ID NO :56中显示的氨基酸序列中的⑶R以双下划线字 母指示，而经过修饰的残基是非粗体、斜体和阴影灰色的。> 39F12A V1 核酸序列(SEQ ID NO 55) GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGACTTTCAGTC TGTGACTCCAAAGGAGAAAGTCACCATCACCTGCCGGGCCAGTCAGAGCATTGGTAGTAGCTTACACTGGTACCAGC AGAAACCAGATCAGTCTCCAAAGCTCCTCATCAAGTATGCTTCCCAGTCCTTCTCAGGGGTCCCCTCGAGGTTCAGT GGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACCCTCACCATCAATAGCCTGGMGCTGAAGATGCTGCAACGTATTACTGTCA TCAGAGTAGTAGTTTACCGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA> 39F12A VL 氨基酸序列(SEQ ID NO 56)
ErVLTOSPDFOSVTPKEKVTITCRASOSIGSSLHWYOOKPDOSPKLLIK YASOSFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTINSLEAEDAA7YYCHQSSSLPWTF
GQGTKVEIK在SEQ ID NO 56中，Ala变成Thr的回复突变被引入框架3。每一种这些变体另外包含例如下文表1中显示的重链互补决定区(VhCDR)、表2中 显示的轻链互补决定区久⑶R)、及其组合。这些克隆中对VH⑶R的修饰在表1中以粗体、 斜体、和下划线字母显示。表1 来自结合并中和huIL_17A/F生物学活性的抗体克隆的VH⑶R序列
克隆ID重链CDRl重链CDR2重链CDR3基因家族30D12 IgGlSYDIN (SEQ ID NO:57)WMNPDSGVIRY AQKFQG (SEQ ID NO:58)EWFGELPSYYFYSGMDV (SEQ ID NO:59)IGHV1-829D8 “1TYGlSWISAYN SNTN Y AQKVQGFFGGHSGYHYGLDVIGHV1-18
权利要求
1.一种分离的完全人的单克隆抗体，其结合IL-17A同二聚体、IL-17F同二聚体和 IL-17A/IL-17F异二聚体复合物，其中该抗体展现(i)至少IOOpM或更少的针对IL-17A同 二聚体的结合亲和力，( )至少300pM或更少的针对IL-17F同二聚体的结合亲和力，(iii) 至少400pM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的结合亲和力，(iv)至少13nM或 更少的针对IL-17A同二聚体的中和能力，(ν)至少120nM或更少的针对IL-17F同二聚体 的中和能力，和(vi)至少31nM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的中和能力。
2.权利要求1的抗体，其中该抗体展现(i)至少40pM或更少的针对IL-17A同二聚体 的结合亲和力，(ii)至少IOpM或更少的针对IL-17F同二聚体的结合亲和力，和(iii)至 少50pM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体的结合亲和力。
3.权利要求1的抗体，其中该抗体展现(i)至少15pM或更少的针对IL-17A同二聚体 的结合亲和力，(ii)至少IOpM或更少的针对IL-17F同二聚体的结合亲和力，和(iii)至 少30pM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体的结合亲和力。
4.权利要求1的抗体，其中该抗体展现(iv)至少13nM或更少的针对IL-17A同二聚体 的中和能力，(ν)至少1. 9nM或更少的针对IL-17F同二聚体的中和能力，和(vi)至少IlnM 或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的中和能力。
5.权利要求1的抗体，其中该抗体展现(iv)至少1.6nM或更少的针对IL-17A同二聚 体的中和能力，(ν)至少1·7ηΜ或更少的针对IL-17F同二聚体的中和能力，和(vi)至少 1. InM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的中和能力。
6.权利要求1的抗体，其中该抗体展现(iv)至少0.2nM或更少的针对IL-17A同二聚 体的中和能力，(ν)至少1. 2nM或更少的针对IL-17F同二聚体的中和能力，和(vi)至少 0. 2nM或更少的针对IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的中和能力。
7.权利要求1的抗体，其中该抗体是15E6且包含含有氨基酸序列SEQIDNO 85的Vh CDRl序列、包含氨基酸序列SEQ ID N0:86的Vh CDR2序列、包含氨基酸序列SEQ ID NO 87 的Vh⑶R3序列、包含氨基酸序列SEQ ID NO :110的\⑶Rl序列、包含氨基酸序列SEQ ID NO 97的VlCDR2序列和包含氨基酸序列SEQ ID NO :111的V1^ CDR3序列。
8.权利要求1的抗体，其中该抗体是15Ε6Π(且包含含有氨基酸序列SEQID NO 85的 Vh CDRl序列、包含氨基酸序列SEQ ID Ν0:94的Vh CDR2序列、包含氨基酸序列SEQ ID NO: 95的Vh CDR3序列、包含氨基酸序列SEQ ID NO :110的\ CDRl序列、包含氨基酸序列SEQ ID NO 97的VlCDR2序列和包含氨基酸序列SEQ ID NO :111的V1^ CDR3序列。
9.权利要求1的抗体，其中该抗体与15E6抗体结合相同表位。
10.权利要求1的抗体，其中该抗体与15Ε6Π(抗体结合相同表位。
11.权利要求1的抗体，其中该抗体结合IL-17A、IL-17F和IL-17A/IL-17F异二聚体复 合物并阻止IL-17F、IL-17A或IL-17A/IL-17F异二聚体复合物之一项或多项结合其受体。
12.—种分离的完全人的单克隆抗体或其片段，其中所述抗体包含(a)包含氨基酸序列SEQ ID NO 57、60、66、69、76、79、82、或 85 的 Vh CDRl 区；(b)包含氨基酸序列SEQ ID NO :58、61、63、65、67、70、72、74、77、80、83、86、93 或 94 的 Vh CDR2 区；(c)包含氨基酸序列SEQ ID NO :59、62、64、68、71、73、75、78、81、84、87、或 95 的 Vh CDR3 区；(d)包含氨基酸序列SEQ ID NO :96、101、104、107 或 110 的 Vl CDRl 区；(e)包含氨基酸序歹IjSEQ ID NO :97、102、105 或 108 的 VL CDR2 区；禾口(f)包含氨基酸序列SEQ ID NO :98、99、100、103、106、109、或 111 的 VL CDR3 区，其中所述抗体结合IL-17F和IL-17A。
13.权利要求12的抗体，其中所述抗体还结合IL-17A/IL-17F异二聚体复合物。
14.权利要求12的抗体，其中所述抗体是IgG同种型。
15.权利要求12的抗体，其中所述抗体是IgGl同种型。
16.权利要求12的抗体，其中所述抗体包含重链可变序列，其包含选自SEQIDNO :2、6、 8、10、14、18、20、24、28、32、34、38、52、和 54 的氨基酸序列。
17.权利要求12的抗体，其中所述抗体进一步包含轻链可变序列，其包含选自SEQID NO :4、12、16、22、26、30、36、40 和 56 的氨基酸序列。
18.一种分离的完全人的单克隆抗体，其包含重链可变序列和轻链可变序列，该重链 可变序列包含氨基酸序列SEQ ID NO :2、6、8、10、14、18、20、24、28、32、38、52、或54，该轻链 可变序列包含氨基酸序列SEQID NO :4、12、16、22、26、30、36、40、或56，其中所述抗体结合 IL-17F 和 IL-17A。
19.权利要求18的抗体，其中所述抗体是IgG同种型。
20.权利要求18的抗体，其中所述抗体是IgGl同种型。
21.一种分离的完全人的单克隆抗体或其片段，其中所述抗体包含(a)包含氨基酸序列SEQID NO 85或90的Vh CDRl区；(b)包含氨基酸序列SEQID NO 88或91的Vh CDR2区；(c)包含氨基酸序列SEQID NO 89或92的Vh CDR3区；(d)包含氨基酸序列SEQID NO 101或107的\ CDRl区；(e)包含氨基酸序列SEQID NO 102或108的\ CDR2区；和(f)包含氨基酸序列SEQID NO 112或113的VLCDR3区，其中所述抗体结合IL-17F。
22.权利要求21的抗体，其中所述抗体不结合IL-17A或IL-17A同二聚体。
23.权利要求21的抗体，其中所述抗体是IgG同种型。
24.权利要求21的抗体，其中所述抗体包含重链可变序列，其包含选自SEQIDNO :44和 48的氨基酸序列。
25.权利要求21的抗体，其中所述抗体进一步包含轻链可变序列，其包含氨基酸序列 SEQ ID NO 46 和 50。
26.—种药物组合物，其包含前述权利要求任一项的抗体和载体。
27.一种减轻受试者中与类风湿性关节炎、克罗恩氏病、银屑病、多发性硬化、慢性阻塞 性肺病、或哮喘有关的临床适应证的症状的方法，该方法包括以足以减轻与类风湿性关节 炎、克罗恩氏病、银屑病、多发性硬化、慢性阻塞性肺病、或哮喘有关的临床适应证的症状的 量对有所需要的受试者施用IL-17A/IL-17F异二聚体复合物的拮抗剂。
28.权利要求27的方法，其中所述受试者是人。
29.权利要求27的方法，其中所述拮抗剂是单克隆抗体或其片段。
30.权利要求29的方法，其中所述单克隆抗体是依照权利要求1-20任一项的抗体或其片段。
31.一种减轻受试者中自身免疫性疾病、炎性病症或细胞增殖病症的症状的方法，其中 该方法包括以足以减轻自身免疫性疾病、炎性病症或细胞增殖病症的症状的量对有所需要 的受试者施用依照权利要求1-25任一项的抗体。
32.权利要求31的方法，其中所述受试者是人。
全文摘要
本发明提供识别IL-17F、IL-17F同二聚体、IL-17A、IL-17A同二聚体、和/或异二聚体IL-17A/IL-17F蛋白质复合物的完全人的单克隆抗体。本发明进一步提供作为治疗剂、诊断剂、和预防剂使用此类单克隆抗体的方法。
文档编号C07K16/00GK102083858SQ200980126177
公开日2011年6月1日 申请日期2009年5月5日 优先权日2008年5月5日
发明者克尔奇茨托夫·马斯特纳克, 奥利维尔·莱格 申请人:诺维莫尼公司