专利名称：卵硒蛋白的提取方法
技术领域：
本发明涉及一种硒蛋白，具体是一种卵硒蛋白的提取方法。主要用于从含有硒、锌等微量元素的卵中富集提取卵硒蛋白和卵锌蛋白。
背景技术：
硒(Selenium，Se)是人体的必需微量营养元素，环境和生物体内的硒主要以中性和离子形态的无机和有机硒化合物、硒代氨基酸和各种硒蛋白的形式存在。不同形态的硒具有不同的功能作用和毒性，其中无机硒有较多的毒副作用，而有机硒的毒性极小或没有毒性。对于不同化学形态硒及硒化合物的代谢、吸收、生物利用率及转化过程的研究，已成为生命科学、医学、环境科学等相关领域关注的热点。硒在卵中多以硒蛋白形式存在。硒蛋白是酶系统的基本成分。其功能促使正常代谢过程中产生的有毒过氧化物的分解，防止其堆积，进而保护细胞中重要的膜结构不受损害；直接参与膜磷脂过氧化氫的还原，从而保护生物膜等。硒对人体来说，最关键的是能抗氧化，能把人体内产生的过氧化物还原、分解掉，降解和消除自由基，保护细胞膜不受自由基的破坏。同时硒对体液免疫功能、细胞免疫功能及吞噬细胞功能均有一定影晌。资料显示，硒具有防癌抗癌作用；硒在人和动物体内能保护组织免疫有毒物质的损害，对机体某些有害金属元素及物质能起到拮抗的作用，使有害金属元素失去原有的毒性，减少其在体内的沉积，促进这些重金属的排泄，而起到解毒、排毒作用。硒还能调节维生素A、C、E、K的吸收与消耗，并与维生素E协同起到延缓衰老作用。鸡蛋中硒含量为一普通通鸡蛋含硒量为0. 1-0. 2微克/克，富硒蛋含硒量可达 0. 5 1. 0微克/克)。中国营养学会推荐每人每天硒供给量50微克的标准；用于代谢综合症或防癌抗癌可以达到每天200微克；蛋白硒作为目前最好的生物硒，因为产品成本太高或者富集品元素混杂，使其因为拮抗作用无法达到应有的效果，至今没有合适上市的产品。
发明内容
本发明提供一种卵硒蛋白的提取方法，能够从禽蛋中低成本的提取提纯不同纯度的卵硒蛋白。本发明是以如下技术方案实现的一种卵硒蛋白的提取方法，以含硒禽蛋为原料， 富集提取卵硒蛋白，具体步骤是
(1)将含硒禽蛋清洗后打蛋，然后将蛋壳蛋液分离；
(2)将分离出的蛋液采用100目-500目膜过滤除去细胞组织，然后均质处理得均质
液；
(3)将均质液采用半透膜透析去除部分分子量低于10000小分子物质；
(4)用超滤或者盐析去除分子量60万以上大分子物质，得到胶体状硒蛋白；
(5)将胶体状硒蛋白80°C-110°C喷雾干燥或者-10°C至-40°C冷冻干燥得固体硒蛋
白；
(6 )将固体硒蛋白粉碎成粉末状即为成品。
一种卵硒蛋白的提取方法，其特征是以含硒禽蛋为原料，先将蛋清和蛋黄分离然后再分别富集提取硒蛋白，具体步骤是
(1)清洗打蛋，将蛋壳与蛋液分离；
(2)将蛋液中的蛋清和蛋黄分离；
(3)将蛋清均质、加蛋清质量的1-10%助滤剂超滤，或者使用琼脂或葡聚糖凝胶过滤后，经-10°C至-40°C冷冻或80°C-110°C喷雾干燥，得到含硒卵硒蛋白；所述的助滤剂为氧化铝、硅藻土、活性炭、氯化钠或硫酸钠；
(4)蛋黄经均质、膜过滤后冷冻干燥，干燥后使用超临界二氧化碳萃取脱除胆固醇和脂肪，得到胆固醇小于0. 3mg/g的含硒的硒蛋白。一种卵硒蛋白的提取方法，以含硒高于lug/g禽蛋为原料，先将蛋清和蛋黄分离、然后再分别富集提取硒蛋白，具体方法是
(1)将含硒禽蛋加温固化，固化后剥去蛋壳，并将蛋白和蛋黄分开，备用；
(2)蛋白经过零下10°C-3(TC冷冻干燥后，得到固形物，固形物粉碎后得卵硒蛋白；
(3)蛋黄零下10°C-30°C冷冻干燥后，得到固形物，将固形物经粉碎后，再超临界二氧化碳萃取分离脂肪，得到脱脂硒蛋白粉和禽蛋脂肪；所述的超临界二氧化碳萃取的工艺条件是温度10_32°C，压力15-30MP,萃取时间4-8小时。本发明的有益效果是提取工艺合理，易于工业化生产，提取率高，得到的产品纯度高，成本低。
具体实施例方式下面结合实施例进一步说明本方法和效果。但不影响本发明的保护范围。实施例1
取含硒0. 35ug/g鸡蛋100枚重量6200克，使用消毒液清洗后，打蛋去掉蛋壳重量约 700克，得到蛋液5500克；蛋液使用电动搅拌按照每分钟120转搅拌30分钟，用300目不锈钢膜过滤后得到滤液5200克；滤液30MP均质处理后，使用火棉纸半透析膜去除部分分子量低于10000小分子物质，得到胶体状物质1500克，再用超滤去除分子量60万以上大分子物质，剩余胶体物1300克。将胶体物进行110°C喷雾干燥，得到368克固体粉末。将固体粉末粉碎后测定其蛋白中硒含量为4. 2ug/g。实施例2:
取含硒lug/g鸡蛋100枚，用实施例1的方法得到硒含量10. Oug/g的硒蛋白370克固体粉末。实施例3:
取含硒0. 35ug/gl00枚鸡蛋，清洗去壳后，得到蛋液5510克，放置一小时后采用惯性梯度分离，分开蛋黄和蛋清，获取蛋清2950克，蛋黄2560克。蛋清加入助滤剂硅藻土 150克和质量浓度3%生理盐水1500ml离心除去不溶物， 得到4300克蛋清液，蛋清液均质处理后采用火棉纸透析处理，得到胶体物1205克，再经过浓度3%生理盐水稀释超滤后得到胶体物950克。胶体物_20°C冷冻干燥得到不含胆固醇的卵硒蛋白80克固体。固体粉碎后检测含硒16ug/g。蛋黄经均质、200目不锈钢膜过滤、蛋黄-30°C冷冻干燥24小时，得到固形物745克，固形物经粉碎，后超临界二氧化碳萃取分离脂肪后(温度32 °C，压力25MP，萃取时间6小时)，得到脱脂硒蛋白粉510克；测定硒含量为3. 5ug/g。实施例4:
取含硒1. 5ug/g的高硒蛋100枚，总重6250克；经过清洗后，加温固化；固化后去除蛋壳703克，得到蛋黄1910克，蛋白3301克。1. 蛋白经过_30°C冷冻干燥24小时，得到固形物390克， 固形物粉碎后检测硒含量为4. 2ug/g卵硒蛋白。蛋黄-30°C冷冻干燥24小时，得到固形物791克，检测固形物含硒量为8ug/g ；固形物经粉碎，后超临界二氧化碳萃取分离脂肪后(温度32°C，压力25MP，萃取时间6小时)， 得到脱脂硒蛋白粉550克；测定硒含量为12. 5ug/g。
权利要求
1.一种卵硒蛋白的提取方法，其特征是以含硒禽蛋为原料，富集提取卵硒蛋白，具体步骤是(1)将含硒禽蛋清洗后打蛋，然后将蛋壳蛋液分离；(2)将分离出的蛋液采用100目-500目膜过滤除去细胞组织，然后均质处理得均质液；(3)将均质液采用半透膜透析去除部分分子量低于10000小分子物质；(4)用超滤或者盐析去除分子量60万以上大分子物质，得到胶体状硒蛋白；(5)将胶体状硒蛋白80°C-110°C喷雾干燥或者-10°C至-40°C冷冻干燥得固体硒蛋白；(6)将固体硒蛋白粉碎成粉末状即为成品。
2.根据权利要求1所述的卵硒蛋白的提取方法，其特征是步骤(2)所述的滤除细胞组织质使用不锈钢膜过滤。
3.根据权利要求1所述的卵硒蛋白的提取方法，其特征是步骤(3)所述的半透膜采用火棉纸膜或玻璃纸膜。
4.一种卵硒蛋白的提取方法，其特征是以含硒禽蛋为原料，先将蛋清和蛋黄分离然后再分别富集提取硒蛋白，具体步骤是(1)清洗打蛋，将蛋壳与蛋液分离；(2)将蛋液中的蛋清和蛋黄分离；(3)将蛋清均质、加蛋清质量的1-10%助滤剂超滤，或者使用琼脂或葡聚糖凝胶过滤后，经-10°C至-40°C冷冻或80°C-110°C喷雾干燥，得到含硒卵硒蛋白；所述的助滤剂为氧化铝、硅藻土、活性炭、氯化钠或硫酸钠；(4)蛋黄经均质、膜过滤后冷冻干燥，干燥后使用超临界二氧化碳萃取脱除胆固醇和脂肪，得到胆固醇小于0. 3mg/g的含硒的硒蛋白。
5.根据权利要求4所述的卵硒蛋白的提取方法，其特征是步骤(2)将蛋液中的蛋清和蛋黄分离采用离心法分离。
6.一种卵硒蛋白的提取方法，其特征是以含硒高于lug/g禽蛋为原料，先将蛋清和蛋黄分离、然后再分别富集提取硒蛋白，具体方法是(1)将含硒禽蛋加温固化，固化后剥去蛋壳，并将蛋白和蛋黄分开，备用；(2)蛋白经过零下10°C-30°C冷冻干燥后，得到固形物，固形物粉碎后得卵硒蛋白；(3)蛋黄零下10°C-30°C冷冻干燥后，得到固形物，将固形物经粉碎后，再超临界二氧化碳萃取分离脂肪，得到脱脂硒蛋白粉和禽蛋脂肪；所述的超临界二氧化碳萃取的工艺条件是温度10_32°C，压力15-30MP,萃取时间4-8小时。
全文摘要
本发明公开了涉及一种卵硒蛋白的提取方法。属硒蛋白技术领域。提取方法是以含硒禽蛋为原料，通过打蛋→蛋壳和蛋液分离→多次膜过滤和均质处理→超滤富集硒蛋白→喷雾或冷冻干燥→粉碎得到卵硒蛋白。本发明的有益效果是提取工艺合理，易于工业化生产，提取率高，得到的产品纯度高，成本低。
文档编号C07K14/465GK102180957SQ20111006700
公开日2011年9月14日 申请日期2011年3月21日 优先权日2011年3月21日
发明者倪华东, 安治和, 张柯, 张洪超, 董雄伟 申请人:江苏汉方生物工程实业有限公司