专利名称：一种苜蓿素的制备方法
技术领域：
本发明属于天然产物分离领域，尤其是涉及一种采用超临界(X)2萃取技术结合聚酰胺树脂纯化苜蓿素的方法。
背景技术：
紫花苜蓿Medicago sativa L.为多年生豆科(Leguminosa)草本植物，世界各地广泛作为牧草使用，在我国主要分布于西北、华北、东北、西南地区。在我国民间用于治疗消化不良、肺热咳嗽、黄疸、膀胱结石等症。现代医学研究发现苜蓿具有降低胆固醇、防治冠心病等活性，紫花苜蓿主要含有黄酮、皂苷、香豆素、留醇、单萜和有机酸等化学成分，其中黄酮类化合物是主要功效成分类群。苜蓿素(tricin)，又名小麦黄素、麦黄酮，为紫花苜蓿中主要有效成分之一，属黄酮类物质，能抑制小肠蠕动收缩，并有显著的抗过敏、抗氧化、抗肿瘤等生物活性。翟爱华等研究表明苜蓿素还可作为添加剂加入至面包中提高面包中蛋白质的含量，并且确定了苜蓿素的添加量。苜蓿素=C17H14O7,淡黄色针状结晶体。mp. 291 292°C。现有对苜蓿素的研究较少，市场上也还没有苜蓿素对照品的出售，限制了苜蓿素的进一步研究。目前对苜蓿素的提取研究，大多是采用柱层析或制备高液相的方法，该种方法制备量少、周期长。如张锐等公开的“制备高效液相色谱从竹根中制备苜蓿素的方法”，该文献采用的方法是乙醇液提取，浓缩后加水分散再用乙酸乙酯萃取，萃取液回收乙酸乙酯至干，干法上硅胶柱层析，最后采用制备高效液相制得苜蓿素，该方法虽制得较高含量的苜蓿素，但制备周期长，溶剂使用量大且制备量少。
发明内容
本发明的目的是提供一种高含量的苜蓿素的制备方法，该方法操作简便，能耗相对小，且制得的苜蓿素纯度高。为了解决上述技术问题，本发明的目的是这样来实现的一种苜蓿素的制备方法，其特征在于包含以下步骤以紫花苜蓿为原料，粉碎，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，通入乙醇或甲醇作为夹带剂参与萃取，收集苜蓿素萃取物，用乙醇溶解，加入聚酰胺树脂拌样，挥干溶剂，装柱，先用水洗去杂质，再用酸醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至小体积，放置结晶，滤出结晶物用乙酸乙酯重结晶即得苜蓿素产品。所述的超临界CO2萃取参数条件为萃取温度为40-55°C，萃取压力为25_35MPa，0)2 流量为15-30L/h，萃取时间为1-2. 5h，分离釜I温度为30_40°C，压力为8-lOMPa，分离釜II 温度为22-30°C，压力为5-8MPa。所述的夹带剂用量是药材量的10 30%。所述的聚酰胺树脂粒度为80 200目，用量是药材的1/3 2/3 (w/w)。所述的酸醇为含盐酸的70 90%乙醇溶液，用量为3 7BV。所述的乙酸乙酯重结晶步骤为将结晶物用乙酸乙酯加热溶解，滤除不溶物，回收乙酸乙酯至小体积，放置结晶，滤出结晶即得产品。本方法积极效果是1)本方法采用超临界CO2萃取，能耗低，萃取剂CO2清洁无污染；2)本方法采用聚酰胺树脂纯化苜蓿素，处理量大，洗脱溶剂简单。3)本方法工艺步骤操作较简单，易操作，所得产品纯度高。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1 取紫花苜蓿1kg，粉碎，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，设定萃取釜条件为 萃取温度为40°C，萃取压力为25MPa，CO2流量为15L/h，萃取时间为2.釙，通入IOOml乙醇作为夹带剂参与萃取，设定分离釜条件为分离釜I温度为30°C，压力为8MPa，分离釜II温度为22°C，压力为5MPa，在分离釜II中收集苜蓿素萃取物，用适量乙醇溶解，加入350g聚酰胺树脂(80目)拌样，挥干溶剂，装柱，先用2BV水洗去杂质，再用3BV含盐酸的90% 乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩至小体积，放置结晶，滤出结晶物用乙酸乙酯重结晶1次即得苜蓿素产品0. 23g，HPLC检测含量98. 1%.实施例2 取紫花苜蓿10kg，粉碎，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，设定萃取釜条件为 萃取温度为，萃取压力为35MPa，CO2流量为30L/h，萃取时间为lh，通入2L甲醇作为夹带剂参与萃取，设定分离釜条件为分离釜I温度为40°C，压力为lOMPa，分离釜II温度为 30°C，压力为8MPa，在分离釜II中收集苜蓿素萃取物，用适量乙醇溶解，加入6kg聚酰胺树脂(120目)拌样，挥干溶剂，装柱，先用3BV水洗去杂质，再用7BV含盐酸的70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩至小体积，放置结晶，滤出结晶物用乙酸乙酯重结晶2次即得苜蓿素产品2. 74g，HPLC检测含量98. 5%0实施例3 取紫花苜蓿20kg，粉碎，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，设定萃取釜条件为 萃取温度为45°C，萃取压力为30MPa，CO2流量为25L/h，萃取时间为池，通入3L乙醇作为夹带剂参与萃取，设定分离釜条件为分离釜I温度为35°C，压力为9MPa，分离釜II温度为 25°C，压力为6MPa，在分离釜II中收集苜蓿素萃取物，用适量乙醇溶解，加入8kg聚酰胺树脂(200目)拌样，挥干溶剂，装柱，先用4BV水洗去杂质，再用6BV含盐酸的85%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩至小体积,放置结晶，滤出结晶物用乙酸乙酯重结晶3次即得苜蓿素产品5. 5g，HPLC检测含量98. 7%。
权利要求
1.一种苜蓿素的制备方法，其特征在于包含以下步骤以紫花苜蓿为原料，粉碎，加入萃取釜中，采用超临界(X)2萃取，通入乙醇或甲醇作为夹带剂参与萃取，收集苜蓿素萃取物， 用乙醇溶解，加入聚酰胺树脂拌样，挥干溶剂，装柱，先用水洗去杂质，再用酸醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至小体积，放置结晶，滤出结晶物用乙酸乙酯重结晶即得苜蓿素产品。
2.根据权利要求1所述苜蓿素的制备方法，其特征在于所述的超临界CO2萃取参数条件为萃取温度为40-55°C，萃取压力为25-35MPa，萃取时间为1_2. 5h，分离釜I温度为 30-40°C，压力为8-10MPa，分离釜II温度为22_30°C，压力为5_8MPa。
3.根据权利要求1所述苜蓿素的制备方法，其特征在于所述的夹带剂用量是药材量的 10 30%。
4.根据权利要求1所述苜蓿素的制备方法，其特征在于所述的聚酰胺树脂粒度为80 200目，用量是药材的1/3 2/3 (w/w)。
5.根据权利要求1所述苜蓿素的制备方法，其特征在于所述的酸醇为含盐酸的 70 90%乙醇溶液，用量为3 7BV。
6.根据权利要求1所述苜蓿素的制备方法，其特征在于所述的乙酸乙酯重结晶步骤为将结晶物用乙酸乙酯加热溶解，滤除不溶物，回收乙酸乙酯至小体积，放置结晶，滤出结晶艮口得广品。
全文摘要
本发明涉及一种苜蓿素的制备方法，方法是以紫花苜蓿为原料，粉碎，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集苜蓿素萃取物，用乙醇溶解，加入聚酰胺树脂拌样，挥干溶剂，装柱，先用水洗去杂质，再用酸醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至小体积，放置结晶，滤出结晶物用乙酸乙酯重结晶即得苜蓿素产品。本方法具有能耗低，制备周期短，产品纯度高的优点。
文档编号C07D311/30GK102241656SQ20111011795
公开日2011年11月16日 申请日期2011年5月6日 优先权日2011年5月6日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司