专利名称：一种地黄苷d标准物质的制备方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种从中药地黄中分离制备地黄苷D标准物质的方法及其质量评价方法。
背景技术：
地黄来源于玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch.的新鲜或干燥块根， 2010年版《中国药典》一部的成方制剂中有近二百种(194种)选用了地黄，是一种常用大宗中药材。作为 我国著名的“四大怀药”道地药材之一，地黄是药用价值很高的滋阴补血类中药，活性作用十分广泛，对免疫、血液、内分泌、心脑血管、神经系统及抗菌、抗炎等方面均有一定的作用。在临床上有鲜用、生用和熟用的不同。鲜地黄与生地黄在性味上有寒与凉之分，鲜地黄的清热生津、止血之功效均胜于生地黄，多用于瘟病伤阴、高热烦渴、吐血、咳血等症，而熟地黄在加工方法上与鲜、生地黄完全不同，所记载的主治功能有更大的区别， 主要用于补血、补肾养阴[1]。地黄中主要含有环烯醚萜苷类化学成分，药理研究表明环烯醚萜苷类成分为其主要活性成分。现已从鲜地黄、生地黄、熟地黄、地黄愈伤组织、地黄叶及有病害的地黄中，已分离鉴定了环烯醚萜苷类24个梓醇、乙酰梓醇、地黄苷A、地黄苷B、jioglutoside Α、二氢梓醇、二氢马鞭草苷、8-表番木鳖酸、京尼平苷、jioglutoside B、桃叶珊瑚苷、单蜜力特苷、蜜力特苷、地黄苷 D、筋骨草醇、6-0-E-feruloyl ajugol、6-0-P-coumaroyl ajugol、 6-0-Z-feruloyl ajugol>6-0-P-hydroxybenzoate ajugol>6-0-vani 1 late ajugol^iiiljilif C、氯化梓醇、6-0-(4〃 -0- α -L-rhamnopyranosyl vanilloyl ajugol 和筋骨草苷。非苷环烯醚萜类11个焦地黄素A、焦地黄素B、焦地黄素C、焦地黄素D、焦地黄素E、地黄素A、地黄素B、地黄素C、地黄素D、焦地黄内酯、焦地黄呋喃。通过比较其来源发现，环烯醚萜类化合物在鲜地黄中均不存在，而是在生地黄和熟地黄中才出现的，说明在加工炮制过程中某些环烯醚萜苷类化合物脱去糖基而发生了一系列的化学变化[2]。地黄现有标准品梓醇系我们在国家七五期间及河南省自然基金课题研究成果，已经推广应用于地黄药材。我们[3]曾对梓醇成分进行分离制备，研究发现但其热稳定性较差， 从鲜品加工成生地黄及熟地黄，梓醇的含量降低至原来的1/10。北川勋M等曾研究了地黄苷成分，发现地黄苷D系三糖苷较稳定，生地、熟地均有较高的含量，经加工炮制过程几乎不分解。于震[5]等对地黄苷D进行了滋阴、补血和降血糖作用的实验研究，研究发现地黄苷D可以使阴虚模型小鼠体重明显增加，血浆cAMP含量明显降低；地黄苷D可以明显升高血虚模型小鼠白细胞数、血小板数、网织红细胞数和骨髓DNA含量和体重；地黄苷D具有降低糖尿病模型小鼠血糖的趋势。地黄苷D的药效学作用亦与中医传统用药相符合，含量均较高而且比较稳定，比较适宜作为地黄药材及制剂中地黄的质量控制标准物质，同时该成分本身具有比较大的药用价值和较好的应用前景。迄今，未见涉及地黄苷D标准物质制备及其质量评价方法的专利报道。参考文献[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[M].北京中国医药科技出版社，2010 115.
[2]刘彦飞，赵宇，武卫红，等.地黄的化学成分及其在加工炮制过程中的变化 [J] ·国外医药·植物药分册，2007，22 (3) 102-108.[3]李更生，王慧森，都恒青，等.液相层析法制备地黄活性成分梓醇[J].中成药， 1998，20 (6) 36.[4]北川勋，西村正，古林安见子.怀庆地黄根茎O成分，药学杂志[日本]，1971， 2001,91(5) 593.[5]于震，王军，李更生，等.地黄甙D滋阴补血和降血糖作用的实验研究[J].辽宁中医杂志，2001，28 (4) 240.
发明内容
本发明的目的在于提供一种地黄苷D标准物质的制备方法。本发明的另一个目的在于提供一种地黄苷D标准物质的质量评价方法。本发明所述的地黄苷D标准物质系从中药地黄中提取分离得到。其结构如下
权利要求
1.一种地黄苷D标准物质，其特征在于该标准物质由中药地黄中提取获得。
2.如权利要求1所述的地黄苷D标准物质，其特征在于地黄为市售地黄、熟地黄饮片或玄参科植物地黄的新鲜、干燥块根、加工炮制品。
3.如权利要求1所述的地黄苷D标准物质，其特征在于地黄苷D标准物质纯度为98 100% (w/w) O
4.如权利要求1 3所述的地黄苷D标准物质，其特征在于采用溶剂提取法、溶剂萃取法、大孔吸附树脂法、柱色谱法、液-液逆流分配色谱法等任意一种方法，或这些方法的任意组合进行制备。
5.如权利要求4所述的地黄苷D标准物质制备方法，其特征在于在使用这些方法进行制备时，包括以下一个或几个步骤提取提取原料中可以采用无氧条件下加热或直接用水蒸气热处理或拌入碳酸钙或氢氧化钡，用来抑制酶的活性和中和植物酸，也可以不灭活直接提取；所用溶剂可以是水或任意一种醇类、酮类及脂类溶剂，或这些溶剂按一定比例组成的混合溶剂；提取方法可以是浸渍、渗滤、煎煮、回流提取、连续回流提取、超声波提取、微波辅助提取、酶法提取等；除杂使用或不使用以下任一种澄清剂或其组合醇沉剂、各种树脂、101果汁澄清剂、 甲壳素类(如壳聚糖)、ZTC天然澄清剂、明胶、鞣酸等；过滤包括离心、抽滤、超滤、压滤等方法；浓缩包括常压或减压条件下的薄膜蒸发、旋转蒸发及煎煮浓缩等；干燥包括真空干燥、喷雾干燥、冷冻干燥等。
6.如权利要求4所述的地黄苷D标准物质制备方法，其特征在于当使用大孔吸附树脂时，所用的大孔树脂可以是非极性、弱极性、中等极性等任何一种类型，如D101、DA-201、 D301、HPD400、AB-8、S_8、XAD-2等，其中优选的为弱极性或中等极性的树脂，如D101、AB-8、 HPD400等，所用的洗脱剂为水和含水的乙醇、甲醇等。
7.如权利要求4所述的地黄苷D标准物质制备方法，其特征在于选用AB-8、HPD400、 DlOl等中等极性、弱极性或非极性大孔吸附树脂作为纯化树脂，地黄甲醇提取物上样液浓度0. 1 1.0g/mL，吸附流速1 6BV/h，树脂柱径高比1 5 1 10，0 20%乙醇洗脱 1 4倍树脂体积进行除杂，除杂流速为1 6BV/h，用20% 90%乙醇洗脱3 6倍树脂体积进行解吸，解吸流速为1 6BV/h。
8.如权利要求4所述的地黄苷D标准物质制备方法，其特征在于当采用柱层析法进行制备时，其处理的对象可以是上述提取步骤所获得的产物，也可以是经上述溶剂提取法、 溶剂萃取法、大孔吸附树脂法初步纯化后的产物，所用的柱填料可以是硅胶、氧化铝、聚酰胺、葡聚糖(S印hadex系列或S印hadexLH-20系列)、C_8、C_18、活性碳、纤维素等，所用的洗脱液因填料的不同而不同，一般是由水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等组成的混合溶剂。
9.如权利要求1所述的地黄苷D的应用，其特征在于具有滋阴、补血和降血糖作用的该单体物质，可以单独或与其它任何中西药物或食物按任意比例配伍，用于制备药物或功能性食品，所制得的药物或功能性食品可以是胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂、口服液、糖浆、酒齐U、注射剂、饮料等。
全文摘要
本发明公开了一种从中药地黄中提取得到的地黄苷D标准物质及其制备方法。地黄苷D标准物质可由溶剂提取法、溶剂萃取法、大孔吸附树脂法、柱色谱法、液-液逆流分配色谱法等任意一种方法，或这些方法的任意组合进行制备。所制得的地黄苷D标准物质纯度为98～100％(w/w)。
文档编号C07H1/08GK102382156SQ20111027551
公开日2012年3月21日 申请日期2011年9月16日 优先权日2011年9月16日
发明者刘明, 李更生, 王慧森 申请人:河南省中医药研究院