专利名称：一种海常黄苷b的制备方法
技术领域：
本发明属于中药有效成分分离制备领域，涉及一种海常黄苷B的制备方法。
背景技术：
海常黄苷B (Clerodendrin B)是一种二萜类化合物，分子式为C31H44O12,分子量为 608. 68，为无色棱晶(己烷-乙酸乙酯，3:2)，mp.2^-230°C。主要存在于马鞭草科苦郎树 Clerodendron inerme Gaerth. 口十禾口海州常山 Cyeroofefli/ro/ trichotomum {l\\m\h.) Nakai 中。其分子结构式如下
药理研究表明，海常黄苷B是一种昆虫生长抑制剂和拒食剂，对烟草夜盗虫幼虫为进食抑制剂，对芜菁叶蜂成虫为进食促进剂。经文献检索，尚未发现大量制备高含量海常黄苷 B的方法报道。
发明内容
本发明旨在提供一种简单、适用于工业生产、产品纯度高、成本低廉的制备海常黄苷B的方法。本发明的目的是通过以下技术方案实现的 一种海常黄苷B的制备方法，其特征在于包括以下步骤
a.将苦郎树叶用含水乙醇或含水丙酮提取，提取2-3次，每次2-4小时，合并浓缩得苦郎树叶提取液；
b.将苦郎树叶提取液上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱至颜色变浅，再用体积比为 70-95%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，将洗脱液通过D941脱色树脂，收集下注液，减压浓缩得
浸膏；
c.将上述浸膏用硅胶与氧化镁混合柱层析分离洗脱，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，乙酸乙酯-丙酮的体积比为15:1-5:1，浸膏与吸附剂的比例为1:5-7，吸附剂中硅胶与氧化镁的比例为10:1 ；
d.将上述步骤的洗脱液浓缩，用超临界(X)2抗溶剂结晶得到高纯度海常黄苷B单体。所述步骤b.中大孔吸附树脂选用DlOl、AB-8、HPD100、HZ801中的一种或几种结合。
所述步骤C.中硅胶与氧化镁短粗柱，柱径高比为1:3-5。所述步骤d.中所述超临界(X)2抗溶剂结晶条件为压力彡25MPa，温度彡60°C。所述步骤d.中所述超临界(X)2抗溶剂结晶条件为压力15_25MPa，温度40_60°C。本发明的有益效果是
本发明采用硅胶与氧化镁混合柱分离海常黄苷B，可提高分离效率，提高产品纯度；采用超临界(X)2抗溶剂结晶，所析晶体纯度高，无需喷雾干燥等耗能工序，具有工序简单、环境污染小、产品品质好等优点。
具体实施例方式下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。实施例1:
取干燥的苦郎树叶3kg用8倍量的含水丙酮回流提取2次，每次提取3小时，和并浓缩得苦郎树叶提取液，加水分散溶解通过AB-8大孔吸附树脂柱，先用水洗脱至色变淡，再用 70%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，通过D941脱色树脂柱，收集下注液，减压浓缩得浸膏，将浸膏与适量硅胶拌混均勻，用相当于浸膏6倍量的硅胶、氧化镁(10 1)装柱，将拌样硅胶置于柱顶，用乙酸乙酯-丙酮15:1洗脱，流速为5ml/min，薄层跟踪监测，收集含海常黄苷B的流分，将流分浓缩至有少量晶体析出，置于超临界(X)2结晶釜中，控制结晶压力为18MPa，温度为44°C，进行超临界(X)2抗溶剂结晶，结晶时间为60min，停机后取出结晶产物，HPLC检测， 产品纯度为98. 7%。实施例2:
取干燥的苦郎树叶3kg用6倍量的含水丙酮回流提取2次，每次提取4小时，和并浓缩得苦郎树叶提取液，加水分散溶解通过HPD100大孔吸附树脂柱，先用水洗脱至色变淡，再用95%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，通过D941脱色树脂柱，收集下注液，减压浓缩得浸膏，将浸膏与适量硅胶拌混均勻，用相当于浸膏6倍量的硅胶、氧化镁(10 1)装柱，将拌样硅胶置于柱顶，用乙酸乙酯-丙酮10:1洗脱，流速为5ml/min，薄层跟踪监测，收集含海常黄苷B的流分，将流分浓缩至有少量晶体析出，置于超临界CO2结晶釜中，控制结晶压力为23MPa，温度为52°C，进行超临界(X)2抗溶剂结晶，结晶时间为90min，停机后取出结晶产物，HPLC检测，产品纯度为98. 1%。实施例3:
取干燥的苦郎树叶3kg用10倍量的含水丙酮回流提取3次，每次提取2小时，和并浓缩得苦郎树叶提取液，加水分散溶解通过DlOl大孔吸附树脂柱，先用水洗脱至色变淡，再用 85%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，通过D941脱色树脂柱，收集下注液，减压浓缩得浸膏，将浸膏与适量硅胶拌混均勻，用相当于浸膏6倍量的硅胶、氧化镁(10 1)装柱，将拌样硅胶置于柱顶，用乙酸乙酯-丙酮10 1洗脱，流速为5ml/min，薄层跟踪监测，收集含海常黄苷B的流分，将流分浓缩至有少量晶体析出，置于超临界(X)2结晶釜中，控制结晶压力为15MPa，温度为40°C，进行超临界(X)2抗溶剂结晶，结晶时间为70min，停机后取出结晶产物，HPLC检测， 产品纯度为98. 5%。实施例4:
取干燥的苦郎树叶3kg用7倍量的含水丙酮回流提取3次，每次提取3小时，和并浓缩
4得苦郎树叶提取液，加水分散溶解通过HZ801大孔吸附树脂柱，先用水洗脱至色变淡，再用 90%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，通过D941脱色树脂柱，收集下注液，减压浓缩得浸膏，将浸膏与适量硅胶拌混均勻，用相当于浸膏6倍量的硅胶、氧化镁(10 1)装柱，将拌样硅胶置于柱顶，用乙酸乙酯-丙酮5:1洗脱，流速为5ml/min，薄层跟踪监测，收集含海常黄苷B的流分，将流分浓缩至有少量晶体析出，置于超临界(X)2结晶釜中，控制结晶压力为25MPa，温度为60°C，进行超临界CO2抗溶剂结晶，结晶时间为lOOmin，停机后取出结晶产物，HPLC检测， 产品纯度为98. 3%。
权利要求
1.一种海常黄苷B的制备方法，其特征在于包括以下步骤a.将苦郎树叶用含水乙醇或含水丙酮提取，提取2-3次，每次2-4小时，合并浓缩得苦郎树叶提取液；b.将苦郎树叶提取液上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱至颜色变浅，再用体积比为 70-95%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，将洗脱液通过D941脱色树脂，收集下注液，减压浓缩得浸膏；c.将上述浸膏用硅胶与氧化镁混合柱层析分离洗脱，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，乙酸乙酯-丙酮的体积比为15:1-5:1，浸膏与吸附剂的比例为1:5-7，吸附剂中硅胶与氧化镁的比例为10:1 ；d.将上述步骤的洗脱液浓缩，用超临界(X)2抗溶剂结晶得到高纯度海常黄苷B单体。
2.根据权利要求1所述的一种海常黄苷B的制备方法，其特征在于，所述步骤b.中大孔吸附树脂选用D101、AB-8、HPD100、HZ801中的一种或几种结合。
3.根据权利要求1所述的一种海常黄苷B的制备方法，其特征在于，所述步骤c.中硅胶与氧化镁短粗柱，柱径高比为1:3-5。
4.根据权利要求1所述的一种海常黄苷B的制备方法，其特征在于，所述步骤d.中所述超临界(X)2抗溶剂结晶条件为压力彡25MPa，温度彡60°C。
5.根据权利要求1所述的一种海常黄苷B的制备方法，其特征在于，所述步骤d.中所述超临界⑶2抗溶剂结晶条件为压力15-25MPa，温度40-60°C。
全文摘要
本发明公开一种海常黄苷B的制备方法，具体方法包括以下步骤用含水乙醇或含水丙酮提取苦郎树叶，提取液经浓缩后得苦郎树叶提取液；将苦郎树叶提取液上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用70-95%乙醇洗脱，洗脱液过D941脱色树脂柱，下注液上浓缩后采用硅胶与氧化镁混合短粗柱层析法分离洗脱，乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，洗脱液浓缩液经超临界CO2抗溶剂结晶得到纯度高达98%的海常黄苷B单体。该分离制备方法简单、成本低、产品纯度高、易于工业化应用。
文档编号C07D493/04GK102351873SQ20111026394
公开日2012年2月15日 申请日期2011年9月8日 优先权日2011年9月8日
发明者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司