专利名称：一种从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙a3的方法
技术领域：
本发明涉及ー种甜菊甙A3的提纯方法，具体是使用混和溶剂从甜菊总甙中结晶分离甜菊甙A3的方法。
背景技术：
甜菊式A3又称莱鲍迪式A(rebaudioside A),分子式为C44H71O24,相对分子质量983，是ー种强效的甜味剂，甜菊甙的甜度为蔗糖的200倍左右，其后味略带甘苦味。甜菊甙A3的甜度为蔗糖的350 400倍，口味纯正，没有后苦味。含80%甜菊甙A3的甜菊糖市价比一般甜菊总甙高4 5倍。甜菊甙类甜味剂已广泛用于食品エ业和医药エ业中作为甜味齐U、添加剂和矫味剂，如糕点、饼干、饮料、罐头、腌制品中，还可用于糖尿病、高血压、肥胖症、诞心病、频齿患者的保健食品和中西药制剂中。 甜菊甙A3的制备方法主要采用树脂分离法和甲醇低温结晶法。树脂分离法是以甜叶菊浓缩液为原料，通过不同树脂反复洗脱获得甜菊甙A3。此法分离树脂洗脱时间较长，洗脱液中甜菊甙A3浓度偏低，且浓缩困难，耗能大。甲醇结晶法是使用甲醇作溶剂，得到一次结晶主要是甜菊甙，随甲醇的浓度、用量不同，其含量有一定波动，大部分甜菊甙A3留在母液中，需要浓缩后进行甲醇二次結晶，且结晶温度需在零度以下的低温进行，该过程也有采用甲醇和异丙醇混和溶剂进行结晶，该方法获得的甜菊甙A3其纯度偏低，约为90%，时间长，约为48h，结晶要求温度低，エ业化成本高，且需经过多次结晶步骤，不仅耗时而且溶剂损失量大。申请号为200810196722. 3的中国发明专利申请公开了一种从甜叶菊浓缩液中分离提纯甜菊甙A3和甜菊甙的方法。该方法通过模拟移动床利用酸性钙型螯合树脂作为固定剂，以浓缩液为原料，以水作为洗脱剂，使甜菊甙A3、甜菊甙和其它甜菊甙分离。该方法采用模拟移动床技术进行提纯甜菊甙A3和甜菊甙，需要合成树脂，分离后树脂存在回收再利用问题，并且分离过程需要温度较高，在加热35°C 95°C完成分离，需要消耗较多热能。专利号为CN200710025792. 8的中国发明专利公开了ー种从甜菊糖中提取高纯度莱鲍迪A甙的方法，该方法利用重结晶和膜分离技术相结合，用甲醇与异丙醇混合溶剂溶解原料甜菊糖进行重结晶，结晶温度需_18°C，结晶时间24-48h后需要重结晶；对晶体用纯水溶解后再膜分离，浓缩、真空干燥获得高纯度莱鲍迪A甙含量大于90%产品。该方法需要反复进行重结晶后，还需进行膜分离技术，在重结晶过程不仅增加了产品生产周期，而且消耗了大量的溶剂，膜分离更是増加成本，还存在膜的回收再利用问题。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的缺点，提供ー种エ艺简化、只需一次结晶，且在4°C 20°C下結晶，无需增加制冷设备，并大大缩短了结晶时间，节能型的从甜菊总甙中分离获得高纯度的甜菊甙A3的方法。发明采用降温法结晶，根据溶质通过降低温度形成过饱和溶液从而析出的原理得到较高纯度的溶质，影响结晶的因素很多，主要有単一或复合溶剂的选择、结晶温度，搅拌速度，搅拌方式，过饱和度的选择等等，其中溶剂的选择是决定物质能否成功结晶的关键因素，根据相似相溶原理，溶质易溶于结构相近的溶剂中，极性物质易溶于极性溶剤，极性较强的溶剂往往有水、甲醇、こ醇等，中等极性及较低极性溶剂有异丙醇、丙酮、こ酸こ酷、氯仿等等。但最终合适溶剂的选择只能用试验的方法来決定。发明中主要对甜菊甙A3进行结晶分离，采用水、甲醇、こ醇混合溶剂作为结晶溶剂，该混合体系可有效溶解原料中的甜菊甙A3和其他杂质，并在降温过程使得甜菊甙A3形成过饱和溶液，可以在短时间内达到结晶分离的目的，水的引入増加了溶剂极性，更好的控制了过饱和区间，使得一次结晶即可获得高纯度甜菊甙A3。而现有技术使用结晶溶剂为甲醇或甲醇和异丙醇混合溶剤，由于极性较低，甜菊甙A3溶解度降低，需要在更低温度不才能使甜菊甙A3处于过饱和状态并缓慢析出，在这过程中其他杂质也一并缓慢析出，因此一次结晶甜菊甙A3不仅时间长，纯度不高，而且需要重结晶进一步分离甜菊甙A3。
为了实现上述发明的目的本发明采用以下的技术方案予以实现一种从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，包括如下步骤(I)混合溶剂配制按体积比为水こ醇甲醇=0. 2 0. 8 I 3 I的比例将水、こ醇和甲醇混合，配制混合溶剂；(2)結晶按甜菊总甙混合物原料与混合溶剂的固液质量体积比为Ig 3ml Ig 5ml的比例将甜菊总甙混合物原料和混合溶剂加入到容器中混合，室温下搅拌溶解10 30min，添加甜菊甙A3晶种，在温度为4°C 20°C搅拌2 6h后离心分离，获得晶体产物；甜菊甙A3晶种为纯度大于99%的甜菊甙A3，甜菊甙A3晶种的用量为甜菊总甙混合物原料中甜菊甙A3重量的I 5% ;所述甜菊总甙混合物原料为甜菊甙A3重量含量大于40%的甜菊总甙混合物；(3)分离所得晶体产物用无水こ醇洗涤后离心分离，再用无水甲醇洗涤；离心分离后，真空干燥，得甜菊甙A3产品。为进ー步实现本发明目的，以质量百分比计，所述甜菊总甙混合物原料中甜菊甙A3含量优选为40 90 %，甜菊甙含量优选为7 50 %，甜菊双糖甙含量优选为I 5 %，甜菊式B含量优选为I 3%,甜菊式C含量优选为I 2%。所述こ醇为体积浓度优选为大于95%的こ醇水溶液或者无水こ醇。所述离心分离的条件优选为2000 3000rpm转速下,离心6 15min。所述真空干燥为优选在真空度为-0. 04 -0. 02MPA下进行。所述无水甲醇洗涤中，晶体与无水甲醇料液质量体积比优选为Ig Iml ig . 5mi。所述无水甲醇洗涤的次数优选为1-3次。所述乙醇洗涤的次数优选为1-3次。相对于现有技术，本发明具有如下优点和积极效果I、本发明选取こ醇、甲醇和水组成的混合溶剂从甜菊总甙中结晶、分离甜菊甙A3，一次结晶和洗涤可使40%的甜菊甙A3纯度提高到85-90%，再用甲醇洗涤可使甜菊甙A3的纯度达到95-99.9%，最大限度的保留了甜菊甙A3，甜菊甙A3的纯度高，该发明比目前报道技术エ艺过程更为简单易行。2、本发明结晶可在4°C 20°C的常温下进行，不需低温结晶、能耗低，生产成本低。在结晶过程中，溶剂的选择是关系到纯化甜菊甙A3和回收率的关键因素之一，本发明混合溶剂中水在这里起了很关键的作用，水、こ醇、甲醇组成的混合溶剂中由于水的加入，达到提高了对甜菊甙A3的溶解能力，使得温度小范围改变，即结晶温度在4°C 20°C下就会使甜菊甙A3达到过饱和区间，溶液达到过饱和状态，使得在4°C 20°C下甜菊甙A3随晶种一同析出结晶，通过洗涤晶体即可获得纯度较高的甜菊甙A3，因此只需结晶一次，并且不需要在公开文献中的零度以下完成结晶过程，能耗将是现有技术的20 %，成本減少一半以上。3、采取真空干燥甜菊甙A3，使得甜菊甙A3干燥彻底，粉碎容易，溶剂较为安全且沸点低，容易被蒸发出去，产品中有机溶剂残留低。4、通过本发明的混合溶剂结晶法，不仅可对大量原料进行结晶分离甜菊甙A3，而且可在室温下进行，结晶后溶剂还可回收再利用，大大降低了成本，实现了可规模化生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进ー步的说明，需要说明的是，实施例并不构成对本发明要求保护范围的限制。实施例I原料为甜菊甙A3重量含量大于40%甜菊总甙混合物，其中，甜菊甙A3含量43%，甜菊甙含量50 %，甜菊双糖甙含量2 %，甜菊甙B含量3 %，甜菊甙C含量2 %。甜菊甙A3的甜度为蔗糖的350 400倍，口味纯正，没有后苦味。甜菊甙A3纯度越高，售价越高。一种从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，包括如下步骤(I)混合溶剂配置按体积比为水こ醇甲醇=0.5 2 I的比例将水、こ醇和甲醇混合，配置混合溶剤；(2)结晶在250ml烧杯中，按甜菊总甙混合物原料与混合溶剂的固液质量体积比为Ig : 5ml的比例称取的原料10. 0g、混合溶剂50ml ;室温下,转速为60rpm磁力搅拌下搅拌溶解30min ;按原料中甜菊甙A3总重量5%的比例在烧杯中添加甜菊甙A3晶种(该甜菊甙A3晶种纯度为99%，购制于上海西宝生物科技有限公司)。所得溶液置于4°C ±1°C搅拌结晶，晶体析出时间为2h,在转速为3000rpm条件下离心分离IOmin,得晶体；通过离心可以将液体除去，得到晶体；(3)分离所得晶体用50mlこ醇(95 %，体积百分比)洗涤2次，每次洗涤后均在3000rpm离心分离lOmin，得到甜菊甙A3重量为3.01g，计算回收率为70%，其中回收率计算为实际得到的甜菊甙A3重量除以原料中的甜菊甙A3重量；通过HPLC測定甜菊甙A3的纯度为88%。分离的母液收集后另行处理回收。所得甜菊甙A3用40ml的无水甲醇洗涤后，再3000rpm离心分离IOmin,晶体用无水甲醇40ml洗洚两次，以进ー步除去所含杂质。然后在真空度为-0. 02MPA下进行真空干燥10h。干燥后获得甜菊式A3重量为2. 236g,计算得甜菊甙A3的回收率为52%，甜菊甙A3的回收率计算为实际得到的甜菊甙A3重量除以原料中的甜菊甙A3重量；HPLC測定所得甜菊甙A3的纯度为96. 7%，产品密封待用。该实施例中，获得纯度为96. 7%甜菊甙A3的结晶过程中无需重結晶，仅采用一次结晶过程，并且结晶时间仅为2h，结晶温度在4°C ±1°C下完成，这与专利号为CN200710025792. 8的中国发明专利公开了一种从甜菊糖中提取高纯度莱鲍迪A甙的方法相比较，用甲醇与异丙醇混合溶剂溶解原料甜菊糖进行重结晶，结晶温度需-18°C，结晶时间为24h，对结晶晶体还需要重结晶过程；并且要求晶体用纯水溶解后再膜分离才能获得甜菊甙A3含量90%。从エ艺上简化重结晶、膜分离等技术操作，从结晶时间上节省了 22h，从结晶温度上提高了结晶温度，无需添加昂贵的制冷设备，減少了生产成本。实施例2 :原料为甜菊甙A3纯度大于40% (重量)甜菊总甙混合物，其中甜菊甙A3含量40 %，甜菊甙含量50 %，甜菊双糖甙含量5 %，甜菊甙B含量3 %，甜菊甙C含量2 %。甜菊甙A3的甜度为蔗糖的350 400倍，口味纯正，没有后苦味。甜菊甙A3纯度越高，售价越高。ー种从甜菊甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，包括如下步骤(I)混合溶剂配置按体积比为水こ醇甲醇=0.3 1.6 I的比例将水、こ醇和甲醇混合，配置混合溶剂；
(2)結晶在250ml烧杯中，按甜菊总甙混合物原料与混合溶剂的固液质量体积比为Ig : 5ml的比例称取的原料10. 0g、混合溶剂50ml ;室温下,转速为IOOrpm磁力搅拌下搅拌溶解30min ;按原料中甜菊甙A3总重量I %的比例在烧杯中添加甜菊甙A3晶种(该甜菊甙A3晶种纯度为99%，购制于上海西宝生物科技有限公司)。所得溶液置于15°C ±1°C搅拌结晶，晶体析出时间为6h,在转速为3000rpm条件下离心分离6min,得晶体；通过离心可以将液体除去，得到晶体；(3)分离所得晶体用50mlこ醇(95 %，体积百分比)洗涤3次，每次洗涤后均在3000rpm离心分离6min，得到甜菊甙A3重量为2. 72g，计算回收率为68%，其中回收率计算为实际得到的甜菊甙A3重量除以原料中的甜菊甙A3重量；通过HPLC測定甜菊甙A3的纯度为82%。分离的母液收集后另行处理回收。所得甜菊甙A3用50ml的无水甲醇洗涤后，再3000rpm离心分离6min,晶体用无水甲醇50ml洗漆两次，以进ー步除去所含杂质。然后在真空度为-0. 04MPA下进行真空干燥10h。干燥后获得甜菊式A3重量为2. OOg,计算得甜菊甙A3的回收率为50%，甜菊甙A3的回收率计算为实际得到的甜菊甙A3重量除以原料中的甜菊甙A3重量；HPLC測定所得甜菊甙A3的纯度为97. 5%，产品密封待用。实施例3原料为甜菊甙A3重量含量大于40%甜菊总甙混合物，其中，甜菊甙A3含量90%，甜菊甙含量7 %，甜菊双糖甙含量I %，甜菊甙B含量I %，甜菊甙C含量I %。甜菊甙A3的甜度为蔗糖的350 400倍，口味纯正，没有后苦味。甜菊甙A3纯度越高，售价越高。一种从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，包括如下步骤(I)混合溶剂配置按体积比为水こ醇甲醇=0.8 3 I的比例将水、こ醇和甲醇混合，配置混合溶剤；(2)结晶在250ml烧杯中，按甜菊总甙混合物原料与混合溶剂的固液质量体积比为Ig : 3ml的比例称取的原料10. 0g、混合溶剂30ml ;室温下,转速为60rpm磁力搅拌下搅拌溶解IOmin ;按原料中甜菊甙A3总重量3%的比例在烧杯中添加甜菊甙A3晶种(该甜菊甙A3晶种纯度为99%，购制于上海西宝生物科技有限公司)。所得溶液置于20°C ±1°C搅拌结晶，晶体析出时间为4h,在转速为2500rpm条件下离心分离8min,得晶体；通过离心可以将液体除去，得到晶体；(3)分离所得晶体用50ml无水こ醇洗涤两次，每次洗涤后均在2500rpm离心分离8min，得到甜菊甙A3重量为6. 12g，计算回收率为65%，其中回收率计算为实际得到的甜菊甙A3重量除以原料中的甜菊甙A3重量；通过HPLC測定甜菊甙A3的纯度为86 %。分离的母液收集后另行处理回收。所得甜菊甙A3用IOml的无水甲醇洗涤后，再2500rpm离心分离8min,晶体用无水甲醇IOml洗涤两次，以进一歩除去所含杂质。然后在真空度为_0. 02MPA下进行真空干燥10h。干燥后获得甜菊甙A3重量为4. 32g，计算得甜菊甙A3的回收率为48%，甜菊甙A3的回收率计算为实际得到的甜菊甙A3重量除以原料中的甜菊甙A3重量；HPLC測定所得甜菊甙A3的纯度为95. 2%，产品密封待用。实施例4原料为甜菊甙A3重量含量大于40%甜菊总甙混合物，其中，甜菊甙A3含量60%，甜菊甙含量30 %，甜菊双糖甙含量5 %，甜菊甙B含量3 %，甜菊甙C含量2 %。甜菊甙A3的甜度为蔗糖的350 400倍，口味纯正，没有后苦味。甜菊甙A3纯度越高，售价越高。
一种从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，包括如下步骤(I)混合溶剂配置按体积比为水こ醇甲醇=0.6 2 I的比例将水、こ醇和甲醇混合，配置混合溶剤；(2)结晶在250ml烧杯中，按甜菊总甙混合物原料与混合溶剂的固液质量体积比为Ig : 5ml的比例称取的原料10. 0g、混合溶剂50ml ;室温下,转速为60rpm磁力搅拌下搅拌溶解15min ;按原料中甜菊甙A3总重量2%的比例在烧杯中添加甜菊甙A3晶种(该甜菊甙A3晶种纯度为99%，购制于上海西宝生物科技有限公司)。所得溶液置于10°C ±1°C搅拌结晶，晶体析出时间为5h,在转速为2000rpm条件下离心分离15min,得晶体；通过离心可以将液体除去，得到晶体；(3)分离所得晶体用50mlこ醇(95%，体积百分比)洗涤I次，毎次洗涤后均在2000rpm离心分离15min，得到甜菊甙A3重量为4. 26g，计算回收率为71%，其中回收率计算为实际得到的甜菊甙A3重量除以原料中的甜菊甙A3重量；通过HPLC測定甜菊甙A3的纯度为85%。分离的母液收集后另行处理回收。所得甜菊甙A3用30ml的无水甲醇洗涤后，再2000rpm离心分离15min,晶体用无水甲醇30ml洗漆I次，以进ー步除去所含杂质。然后在真空度为-0. 03MPA下进行真空干燥10h。干燥后获得甜菊甙A3重量为3. 24g，计算得甜菊甙A3的回收率为54%，甜菊甙A3的回收率计算为实际得到的甜菊甙A3重量除以原料中的甜菊甙A3重量；HPLC測定所得甜菊甙A3的纯度为99. 2%，产品密封待用。实施例5原料为甜菊甙A3重量含量大于40%甜菊总甙混合物，其中，甜菊甙A3含量75%，甜菊甙含量20 %，甜菊双糖甙含量I %，甜菊甙B含量3 %，甜菊甙C含量I %。甜菊甙A3的甜度为蔗糖的350 400倍，口味纯正，没有后苦味。甜菊甙A3纯度越高，售价越高。一种从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，包括如下步骤(I)混合溶剂配置按体积比为水こ醇甲醇=0.2 2 I的比例将水、こ醇和甲醇混合，配置混合溶剤；(2)結晶在250ml烧杯中，按甜菊总甙混合物原料与混合溶剂的固液质量体积比为Ig : 4mI的比例称取的原料10. 0g、混合溶剂40ml ;室温下,转速为60rpm磁力搅拌下搅拌溶解30min ;按原料中甜菊甙A3总重量5 %的比例在烧杯中添加甜菊甙A3晶种(该甜菊甙A3晶种纯度为99%，购制于上海西宝生物科技有限公司)。所得溶液置于4°C ±1°C搅拌结晶，晶体析出时间为2h,在转速为3000rpm条件下离心分离IOmin,得晶体；通过离心可以将液体除去，得到晶体；(3)分离所得晶体用50ml无水こ醇洗涤3次，每次洗涤后均在3000rpm离心分离lOmin，得到甜菊甙A3重量为4. 95g，计算回收率为66%，其中回收率计算为实际得到的甜菊甙A3重量除以原料中的甜菊甙A3重量；通过HPLC測定甜菊甙A3的纯度为90%。分离的母液收集后另行处理回收。所得甜菊甙A3用50ml的无水甲醇洗涤I次后，再3000rpm离心分离lOmin。然后在真空度为-0. 04MPA下进行真空干燥10h。干燥后获得甜菊甙A3重量为4. 65g，计算得甜菊甙A3的回收率为62 %，甜菊甙A3的回收率计算为实际得到的甜菊甙A3重量除以原料中的甜菊甙A3重量；HPLC測定所得甜菊甙A3的纯度为99. 9 %，产品密封待用。实施例6原料为甜菊甙A3重量含量大于40%甜菊总甙混合物，其中，甜菊甙A3含量50%，甜菊甙含量45 %，甜菊双糖甙含量I %，甜菊甙B含量2 %，甜菊甙C含量2 %。甜菊甙A3 的甜度为蔗糖的350 400倍，口味纯正，没有后苦味。甜菊甙A3纯度越高，售价越高。一种从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，包括如下步骤(I)混合溶剂配置按体积比为水こ醇甲醇=0.5 I I的比例将水、こ醇和甲醇混合，配置混合溶剤；(2)结晶在250ml烧杯中，按甜菊总甙混合物原料与混合溶剂的固液质量体积比为Ig : 5ml的比例称取的原料10. Og、混合溶剂50ml ;室温下,转速为60rpm磁力搅拌下搅拌溶解30min ;按原料中甜菊甙A3总重量5%的比例在烧杯中添加甜菊甙A3晶种(该甜菊甙A3晶种纯度为99%，购制于上海西宝生物科技有限公司)。所得溶液置于20°C ±1°C搅拌结晶，晶体析出时间为5h,在转速为2000rpm条件下离心分离IOmin,得晶体；通过离心可以将液体除去，得到晶体；(3)分离所得晶体用50mlこ醇(95 %，体积百分比)洗涤3次，每次洗涤后均在2000rpm离心分离lOmin，得到甜菊甙A3重量为3. 25g，计算回收率为65%，其中回收率计算为实际得到的甜菊甙A3重量除以原料中的甜菊甙A3重量；通过HPLC測定甜菊甙A3的纯度为90%。分离的母液收集后另行处理回收。所得甜菊甙A3用30ml的无水甲醇洗涤后,再3000rpm离心分离6min,晶体用无水甲醇30ml洗漆2次，以进ー步除去所含杂质。然后在真空度为-0. 02MPA下进行真空干燥10h。干燥后获得甜菊式A3重量为2. 90g,计算得甜菊甙A3的回收率为58%，甜菊甙A3的回收率计算为实际得到的甜菊甙A3重量除以原料中的甜菊甙A3重量；HPLC測定所得甜菊甙A3的纯度为98. 9%，产品密封待用。
权利要求
1.一种从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，其特征在于包括如下步骤 (1)混合溶剂配制按体积比为水こ醇甲醇=0.2 0. 8 I 3 I的比例将水、こ醇和甲醇混合，配制混合溶剂； (2)結晶按甜菊总甙混合物原料与混合溶剂的固液质量体积比为Ig 3ml Ig 5ml的比例将甜菊总甙混合物原料和混合溶剂加入到容器中混合，室温下搅拌溶解10 30min，添加甜菊甙A3晶种，在温度为4°C 20°C搅拌2 6h后离心分离，获得晶体产物；甜菊甙A3晶种为纯度大于99%的甜菊甙A3，甜菊甙A3晶种的用量为甜菊总甙混合物原料中甜菊甙A3重量的I 5% ;所述甜菊总甙混合物原料为甜菊甙A3重量含量大于40%的甜菊总甙混合物； (3)分离所得晶体产物用无水こ醇洗涤后离心分离，再用无水甲醇洗涤；离心分离后，真空干燥，得甜菊甙A3产品。
2.根据权利要求I所述的从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，其特征在于以质量百分比计，所述甜菊总甙混合物原料中甜菊甙A3含量40 90 %，甜菊甙含量7 50%，甜菊双糖甙含量I 5%，甜菊甙B含量I 3%，甜菊甙C含量I 2%。
3.根据权利要求I所述的从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，其特征在于所述こ醇为体积浓度大于95%的こ醇水溶液或者无水こ醇。
4.根据权利要求I所述的从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，其特征在于所述离心分离条件为2000 3000rpm转速下,离心6 15min。
5.根据权利要求I所述的从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，其特征在于所述真空干燥为在真空度为-0. 04 -0. 02MPA下进行。
6.根据权利要求I所述的从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，其特征在干所述无水甲醇洗涤中，晶体与无水甲醇料液质量体积比为Ig Iml Ig 5ml。
7.根据权利要求I所述的从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，其特征在于所述无水甲醇洗涤的次数为1-3次。
8.根据权利要求I所述的从甜菊总甙混合物中结晶分离甜菊甙A3的方法，其特征在于所述こ醇洗涤的次数为1-3次。
全文摘要
本发明公开了一种从甜菊总甙中结晶分离甜菊甙A3的方法。该方法先配置混合溶剂，然后按甜菊总甙混合物原料与混合溶剂的固液质量体积比为1g∶3ml～1g∶5ml的比例将甜菊总甙混合物原料和混合溶剂加入到容器中混合，室温下搅拌溶解10～30min，添加甜菊甙A3晶种，在温度为4C～20℃搅拌2～6h后离心分离，获得晶体产物；所得晶体产物用无水乙醇洗涤后离心分离，再用无水甲醇洗涤；离心分离后，真空干燥，得甜菊甙A3产品。本发明制备的甜菊甙A3是从甜菊总甙中采用结晶分离技术，获得了纯度在95-99.9％甜菊甙A3。本发明工艺简单易行，且能耗低，易于实现工业化生产。
文档编号C07H1/06GK102775453SQ20121020831
公开日2012年11月14日 申请日期2012年6月21日 优先权日2012年6月21日
发明者左锋, 张丽萍, 钱丽丽 申请人:黑龙江八一农垦大学