一种普罗帕酮药物对映体拆分方法
【专利摘要】本发明提供了一种普罗帕酮药物对映体拆分方法。该方法以普罗帕酮盐酸盐为拆分对象，先将普罗帕酮盐酸盐转化为普罗帕酮游离体，用L-酒石酸酯类和硼酸作为拆分试剂，L-酒石酸酯类添加到有机相中，硼酸添加到水相中，采用高速逆流色谱法得到左旋普罗帕酮和右旋普罗帕酮。与现有技术相比，本发明的有益效果主要体现在：采用本方法拆分手性药物普罗帕酮可以达到较高的分离度，并且该方法适用于各种型号的制备型逆流色谱仪，可以分离得到左旋普罗帕酮和右旋普罗帕酮的单体。
【专利说明】一种普罗帕酮药物对映体拆分方法
(-)【技术领域】
[0001]本发明涉及一种普罗帕酮药物对映体拆分方法。
(二)【背景技术】
[0002]手性药物在生物体内的代谢过程、药理活性及毒性都可能存在显著的差异，因此寻找高效、便捷的拆分方法显得尤为重要。普罗帕酮为广谱高效的膜抑制类抗心律失常药，临床主要用于预防和治疗室性或室上的性异位搏动，以及室性或室上的性心动过速、电复律后室颤发作和预激综合征等，其中右旋普罗帕酮有较强的β_受体阻断作用，而左旋普罗帕酮没有，并且左旋普罗帕酮的存在增强了右旋普罗帕酮的β_受体阻断作用。目前，拆分普罗帕酮对映体的方法主要有高效液相色谱法、毛细管电泳法、离子对色谱法、薄层色谱法等。
[0003]从20世纪90年代，越来越多的国家开始制定出手性药物开发的政策和指导原则。1992年，美国食品和药品管理局(FDA)发布的关于手性药物的指导原则中，就明确要求在向FDA提交的有关新药的申请报告必须包含手性药物的化学、药理学、毒理学以及临床作用的所有信息。因此，进行手性药物的拆分并获得单一的手性药物，已成为分离科学领域的一个重要分支。
[0004]高速逆流色谱技术(high-speedcountercurrent chromatography, HSCCC)是 20世纪80年代发展起来的一种不用固态支撑体或载体的液液分配技术，有着许多其他色谱分离技术不可替代的优点，如因为逆流色谱不采用任何固相载体，在分析分离过程中可以完全排除因固相载体对样品的不可逆吸附导致样品的损失、失活以及污染变性等影响，从而实现回收率高、纯净度高、重现性高的较好结果，也能用于大制备量物质的分离纯化。近年来，国际上每年都不断有新的HSCCC技术和应用成果报道出来，国内也有越来越多的专家学者加入其研究队伍。
(三)
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种采用高速逆流色谱技术拆分普罗帕酮药物对映体的方法。
[0006]本发明采用的技术方案是:
[0007]一种普罗帕酮药物对映体拆分方法，所述方法包括:
[0008](I)将含有L-酒石酸酯的有机溶剂和含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液按照体积比1:1混合均匀，静置分层，分离得到有机相和水相，备用；所述有机溶剂中L-酒石酸酯的浓度为 0.02 ~0.5mol/L ；
[0009]所述含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液的pH在2.0~5.0，其中硼酸的浓度为0.01 ~0.30mol/L ；
[0010]所述的有机溶剂为Cl~C8的卤代烷烃、Cl~C8的烷烃、C2~C8的醚或C6~C12的取代芳烃，所述取代芳烃的取代基为一个或多个，所述取代基各自独立选自卤素或Cl~C4的烷基；
[0011]所述的L-酒石酸酯为下列之一:L_酒石酸正己酯、L-酒石酸正丁酯、L-酒石酸正辛酯、L-酒石酸正戊酯、L-酒石酸异丁酯或L-酒石酸-2-乙基己酯；
[0012](2)将普罗帕酮盐酸盐转化为普罗帕酮游离体，并用步骤(1)所得水相溶解，制成
0.1~15mg/ml的样品，作为进样液备用；
[0013](3)采用高速逆流色谱法拆分普罗帕酮:分别以步骤(1)得到的有机相和水相为固定相和流动相，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为5~30°C，开启速度控制器，转速为500~2000rpm，以0.2~3.0ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后(当流动相从色谱柱出口处流出时就认为达到平衡)，步骤(2)进样液由进样阀进样，以波长190~400nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液；
[0014](4)分别从步骤(3)中收集得到的前峰洗脱液和后峰洗脱液中回收得到左旋普罗帕酮和右旋普罗帕酮的单体。
[0015]本发明以普罗帕酮盐酸盐为拆分对象，先将普罗帕酮盐酸盐转化为普罗帕酮游离体，用L-酒石酸酯类和硼酸作为拆分试剂，L-酒石酸酯类添加到有机相中，硼酸添加到水相中，采用高速逆流色谱法得到左旋普罗帕酮和右旋普罗帕酮。
[0016]优选的，所述有机溶剂为下列之一或其中两种以上的混合物:氯仿、二氯甲烷、甲苯、氯苯、正己烷、正庚烷、正戊烷、环己烷、石油醚、乙醚、甲基叔丁基醚，更优选为氯仿或二氯甲烷，最优选为氯仿。
[0017]所述L-酒石酸酯优选为L-酒石酸正己酯或L-酒石酸正丁酯，更优选为L-酒石酸正丁酯。
[0018]本发明优选所述的含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液的pH=2~4，其中硼酸浓度优选为0.1~0.2mol/L ;最优选所述的含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液的pH=3.4，其中硼酸浓度为0.lmol/L。
[0019]本发明优选所述的有机溶剂中L-酒石酸酯的浓度为0.1~0.2mol/L，最优选为
0.lmol/L。
[0020]本发明所述的步骤(2)中，可通过如下方法将普罗帕酮盐酸盐转化为普罗帕酮游离体:取普罗帕酮盐酸盐加入到I~2mol/L氢氧化钠溶液中，加热至40~50°C搅拌2~3min，然后用二氯甲烷萃取，所得有机相用超纯水洗涤至中性、用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液蒸除溶剂即得粗品，粗品用二氯甲烷溶解加入几滴正己烷重结晶，得到普罗帕酮游离体。[0021 ] 本发明步骤(3 )中，经高速逆流色谱法拆分之后，将收集得到的洗脱液进行高效液相检测，两个单体洗脱液的纯度均可大于90%。在拆分过程中，优选逆流色谱分离柱的柱温为5~15°C ;优选以0.5~2.0ml/min的流速将流动相泵入柱内。
[0022]本发明步骤(4)中，可通过如下方法分别从前峰洗脱液和后峰洗脱液中回收左旋普罗帕酮和右旋普罗帕酮的单体:将前峰洗脱液或后峰洗脱液碱化至pH为9~14，析出大量白色粉末后直接用二氯甲烷萃取，二氯甲烷层用饱和食盐水洗涤至中性、无水硫酸钠干燥、过滤、滤液蒸除溶剂即得粗品，粗品用二氯甲烷溶解加入几滴正己烷重结晶即可获得纯化的左旋普罗帕酮单体或右旋普罗帕酮单体。其中前峰洗脱液或后峰洗脱液可用氢氧化钠溶液碱化，氢氧化钠溶液浓度可以是I~2mol/L。[0023]优选的，所述方法如下:
[0024](1)将含有L-酒石酸正丁酯的氯仿和含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液按照体积比1:1混合均匀，静置分层，分离得到有机相和水相，备用；所述氯仿中L-酒石酸酯的浓度为0.1~0.2mol/L ;所述含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液的pH在2.0~4.0，其中硼酸的浓度为0.1~0.2mol/L ；
[0025](2)取普罗帕酮盐酸盐加入到I~2mol/L的氢氧化钠溶液中，加热至40~50°C搅拌2~3min，然后用二氯甲烷萃取，所得有机相用超纯水洗涤至中性、用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液蒸除溶剂即得粗品，粗品用二氯甲烷溶解加入几滴正己烷重结晶，得到普罗帕酮游离体，用步骤(1)所得水相溶解，制成0.1~15mg/ml的样品，作为进样液备用；
[0026](3)采用高速逆流色谱法拆分普罗帕酮:分别以步骤(1)得到的有机相和水相为固定相和流动相，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为5~15°C，开启速度控制器，转速为1500~2000rpm，以0.5~2.0ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，步骤(2)进样液由进样阀进样，以波长254nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液；
[0027](4)将前峰和后峰洗脱液分别用lmol/L氢氧化钠溶液碱化至pHll，析出白色粉末后直接用二氯甲烷多次萃取，合并二氯甲烷层，用饱和食盐水洗涤二氯甲烷层至中性，用无水硫酸钠干燥，过滤后蒸除溶剂即分别得到左旋普罗帕酮和右旋普罗帕酮粗品，分别用二氯甲烷溶解粗品后加入正己烷重结晶，分别得到纯化的左旋普罗帕酮和右旋普罗帕酮。
[0028]本发明可采用分析型和半制备型逆流色谱仪(分析型分离柱柱体积为20ml，半制备型分离柱柱体积为300ml)，逆流色谱仪由恒流泵、主机(分离柱)、紫外检测器、记录仪等组成。
[0029]与现有技术相比，本发明的有益效果主要体现在:采用本方法拆分手性药物普罗帕酮可以达到较高的分离度，并且该方法适用于各种型号的制备型逆流色谱仪，可以分离得到左旋普罗帕酮和右旋普罗帕酮的单体。
(四)【专利附图】
【附图说明】
[0030]图1为实施例1实验条件下的分析型高速逆流色谱图；
[0031]图2为实施例4实验条件下的分析型高速逆流色谱图；
[0032]图3为实施例5实验条件下的分析型高速逆流色谱图；
[0033]图4为实施例8实验条件下的分析型高速逆流色谱图；
[0034]图5为实施例9实验条件下的分析型高速逆流色谱图；
[0035]图6为实施例10实验条件下的半制备型高速逆流色谱图；
[0036]图7为图6中前部分(260min~386min)洗脱液的高效液相色谱检测谱图，即S型普罗帕酮；
[0037]图8为图6中后部分(398min~554min)洗脱液的高效液相色谱检测谱图，即R型
普罗帕酮。
(五)【具体实施方式】
[0038]下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此:
[0039]实施例1:
[0040]普罗帕酮盐酸盐转化为普罗帕酮游离体:取160mg普罗帕酮盐酸盐，加入到4mLlmol/L的氢氧化钠溶液中，加热至50°C搅拌2~3min,然后转移至分液漏斗中用20mL二氯甲烷萃取4次，合并有机相并用超纯水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，过滤后蒸除溶剂即得普罗帕酮游离体粗品，粗品用二氯甲烷溶解加入几滴正己烷重结晶，得到无色针状晶体121mg，即为游离的普罗帕酮。
[0041]将有机相:水相(有机相为含0.lmol/L L-酒石酸正丁酯的氯仿，水相为0.05mol/L的醋酸/三乙胺缓冲溶液，pH=3.4，并含有0.lmol/L硼酸)按照1:1的体积比配置于分液漏斗中，摇匀后静置分层。待平衡一段时间后，将上下相分开，有机相作为固定相，水相作为流动相。称取7.5mg普罗帕酮对映体用5ml流动相溶解，溶解后制成样品溶液待用。
[0042]采用分析型高速逆流色谱仪拆分普罗帕酮对映体，分离柱体积为20ml。进样前，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为15°C，开启速度控制器，转速为1800rpm，以0.50ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，样品溶液由进样阀进样。然后以波长254nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，计算分离度为0.79。
[0043]分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液，将收集得到的洗脱液进行高效液相检测(结果见图1)，两个单体洗脱液的纯度均大于90%。高效液相色谱的检测条件为=ChiralcelOD-R column (4.6X250mm);柱温:25°C ;流动相:0.2mol/L KPF6:乙腈(60:40, v/v)等度洗脱；流速0.6ml/min ;检测波长254nm ;进样量:10μ I。
[0044]实施例2:
[0045]将有机相:水相(有机相为含0.lmol/L L-酒石酸正己酯的氯仿，水相为0.05mol/L的醋酸/三乙胺缓冲溶液，pH=3.4，并含有0.lmol/L硼酸)按照1:1的体积比配置于分液漏斗中，摇匀后静置分层。待平衡一段时间后，将上下相分开，有机相作为固定相，水相作为流动相。称取实施例1中得到的7.5mg普罗帕酮对映体用5ml流动相溶解，溶解后制成样品溶液待用。
[0046]采用分析型高速逆流色谱仪拆分普罗帕酮对映体，分离柱体积为20ml。进样前，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为15°C，开启速度控制器，转速为1800rpm，以0.50ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，样品溶液由进样阀进样。然后以波长254nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，计算分离度为0.65。分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液，将收集得到的洗脱液进行高效液相检测，两个单体洗脱液的纯度均大于90%。高效液相色谱的检测条件同实施例1。
[0047]实施例3:
[0048]将有机相:水相(有机相为含0.lmol/L L-酒石酸正丁酯的二氯甲烷，水相为0.05mol/L的醋酸/三乙胺缓冲溶液ρΗ=3.4并含有0.lmol/L硼酸)按照1:1的体积比配置于分液漏斗中，摇匀后静置分层。待平衡一段时间后，将上下相分开，有机相作为固定相，水相作为流动相。称取实施例1中得到的7.5mg普罗帕酮对映体用5ml流动相溶解，溶解后制成样品溶液待用。
[0049]采用分析型高速逆流色谱仪拆分普罗帕酮对映体，分离柱体积为20ml。进样前，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为15°C，开启速度控制器，转速为1800rpm，以0.50ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，样品溶液由进样阀进样。然后以波长254nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，计算分离度为0.67。分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液，将收集得到的洗脱液进行高效液相检测，两个单体洗脱液的纯度均大于90%。高效液相色谱的检测条件同实施例1。
[0050]实施例4:
[0051]将有机相:水相(有机相为含0.lmol/L L-酒石酸正丁酯的氯仿，水相为0.05mol/L的醋酸/三乙胺缓冲溶液pH=3.4并含有0.lmol/L硼酸)按照1:1的体积比配置于分液漏斗中，摇匀后静置分层。待平衡一段时间后，将上下相分开，有机相作为固定相，水相作为流动相。称取实施例1中得到的7.5mg普罗帕酮对映体用5ml流动相溶解，溶解后制成样品溶液待用。
[0052]采用分析型高速逆流色谱仪拆分普罗帕酮对映体，分离柱体积为20ml。进样前，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为5°C，开启速度控制器，转速为1800rpm，以0.50ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，样品溶液由进样阀进样。然后以波长254nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，计算分离度为0.85。分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液，将收集得到的洗脱液进行高效液相检测(结果见图2)，两个单体洗脱液的纯度均大于90%。高效液相色谱的检测条件同实施例1。
[0053]实施例5:
[0054]将有机相:水相(有机相为含0.lmol/L L-酒石酸正丁酯的氯仿，水相为0.05mol/L的醋酸/三乙胺缓冲溶液pH=3.4并含有0.lmol/L硼酸)按照1:1的体积比配置于分液漏斗中，摇匀后静置分层。待平衡一段时间后，将上下相分开，有机相作为固定相，水相作为流动相。称取实施例1中得到的7.5mg普罗帕酮对映体用5ml流动相溶解，溶解后制成样品溶液待用。
[0055]采用分析型高速逆 流色谱仪拆分普罗帕酮对映体，分离柱体积为20ml。进样前，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为15°C，开启速度控制器，转速为1800rpm，以0.30ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，由进样阀进样。然后以波长254nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，计算分离度为0.52。分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液，将收集得到的洗脱液进行高效液相检测(结果见图3)，两个单体洗脱液的纯度均大于90%。高效液相色谱的检测条件同实施例1。
[0056]实施例6:
[0057]将氯仿:水(有机相为含0.2mol/L L-酒石酸正丁酯的氯仿，水相为0.05mol/L的醋酸/三乙胺缓冲溶液pH=3.4并含有0.lmol/L硼酸)按照1:1的体积比配置于分液漏斗中，摇匀后静置分层。待平衡一段时间后，将上下相分开，有机相作为固定相，水相作为流动相。称取实施例1中得到的7.5mg普罗帕酮对映体用5ml流动相溶解，溶解后制成样品溶液待用。
[0058]采用分析型高速逆流色谱仪拆分普罗帕酮对映体，分离柱体积为20ml。进样前，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为15°C，开启速度控制器，转速为1800rpm，以0.50ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，样品溶液由进样阀进样。然后以波长254nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，计算分离度为0.82。分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液，将收集得到的洗脱液进行高效液相检测，两个单体洗脱液的纯度均大于90%。高效液相色谱的检测条件同实施例1。
[0059]实施例7:
[0060]将有机相:水相(有机相为含0.lmol/L L-酒石酸正丁酯的氯仿，水相为0.05mol/L的醋酸/三乙胺缓冲溶液pH=3.4并含有0.lmol/L硼酸)按照1:1的体积比配置于分液漏斗中，摇匀后静置分层。待平衡一段时间后，将上下相分开，有机相作为固定相，水相作为流动相。称取实施例1中得到的7.5mg普罗帕酮对映体用5ml流动相溶解，溶解后制成样品溶液待用。
[0061]采用分析型高速逆流色谱仪拆分普罗帕酮对映体，分离柱体积为20ml。进样前，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为15°C，开启速度控制器，转速为1500rpm，以0.50ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，样品溶液由进样阀进样。然后以波长254nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，计算分离度为0.73。分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液，将收集得到的洗脱液进行高效液相检测，两个单体洗脱液的纯度均大于90%。高效液相色谱的检测条件同实施例1。
[0062]实施例8:
[0063]将有机相:水相(有机相为含0.lmol/L L-酒石酸正丁酯的氯仿，水相为0.05mol/L的醋酸/三乙胺缓冲溶液pH=3.4并含有0.2mol/L硼酸)按照1:1的体积比配置于分液漏斗中，摇匀后静置分层。待平衡一段时间后，将上下相分开，有机相作为固定相，水相作为流动相。称取实施例1中得到的7.5mg普罗帕酮对映体用5ml流动相溶解，溶解后制成样品溶液待用。
[0064]采用分析型高速逆流色谱仪拆分普罗帕酮对映体，分离柱体积为20ml。进样前，将逆流色谱分离柱填满固定相， 柱温为15°C，开启速度控制器，转速为1800rpm，以0.50ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，样品溶液由进样阀进样。然后以波长254nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，计算分离度为0.74。分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液，将收集得到的洗脱液进行高效液相检测(结果见图4)，两个单体洗脱液的纯度均大于90%。高效液相色谱的检测条件同实施例1。
[0065]实施例9:
[0066]将有机相:水相(有机相为含0.lmol/L L-酒石酸正丁酯的氯仿，水相为0.05mol/L的醋酸/三乙胺缓冲溶液pH=4.35并含有0.lmol/L硼酸)按照1:1的体积比配置于分液漏斗中，摇匀后静置分层。待平衡一段时间后，将上下相分开，有机相作为固定相，水相作为流动相。称取实施例1中得到的7.5mg普罗帕酮对映体用5ml流动相溶解，溶解后制成样品溶液待用。
[0067]采用分析型高速逆流色谱仪拆分普罗帕酮对映体，分离柱体积为20ml。进样前，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为15°C，开启速度控制器，转速为1800rpm，以0.50ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，样品溶液由进样阀进样。然后以波长254nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，计算分离度为0.63。分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液，将收集得到的洗脱液进行高效液相检测(结果见图5)，两个单体洗脱液的纯度均大于90%。高效液相色谱的检测条件同实施例1。
[0068]实施例10:
[0069]将有机相:水相(有机相为含0.lmol/L L-酒石酸正丁酯的氯仿，水相为0.05mol/L的醋酸/三乙胺缓冲溶液pH=3.4并含有0.lmol/L硼酸)按照1:1的体积比配置于分液漏斗中，摇匀后静置分层。待平衡一段时间后，将上下相分开，有机相作为固定相，水相作为流动相。称取实施例1中得到的91.6mg普罗帕酮对映体用15ml流动相溶解，溶解后制成样品溶液待用。
[0070]采用半制备型高速逆流色谱仪拆分普罗帕酮对映体，分离柱体积为300ml。进样前，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为15°C，开启速度控制器，转速为800rpm，以
2.0Oml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，样品溶液由进样阀进样。然后以波长254nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，接收前峰洗脱液和后峰洗脱液，计算分离度为0.83。将收集得到的洗脱液进行高效液相检测(结果见图6~8)，两个单体洗脱液的纯度均大于90%。高效液相色谱的检测条件同实施例1。
[0071]从洗脱液中回收样品:将前峰和后峰洗脱液分别用lmol/L氢氧化钠溶液碱化至PHlI左右，析出大量白色粉末后直接用70~SOmL 二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷层，用饱和食盐水洗涤二氯甲烷层至中性，用无水硫酸钠干燥，过滤后蒸除溶剂即得左旋普罗帕酮和右旋普罗帕酮，最后用二氯甲烷溶解粗品后加入几滴正己烷重结晶，分别获得纯化的20mg~25mg左旋普罗帕酮和20mg~25mg右旋普罗帕酮。
【权利要求】
1.一种普罗帕酮药物对映体拆分方法，所述方法包括: (1)将含有L-酒石酸酯的有机溶剂和含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液按照体积比1:1混合均匀，静置分层，分离得到有机相和水相，备用；所述有机溶剂中L-酒石酸酯的浓度为0.02~0.5mol/L ;所述含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液的pH在2.0~5.0，其中硼酸的浓度为0.01~0.30mol/L ;所述的有机溶剂为Cl~C8的卤代烷烃、Cl~C8的烷烃、C2~C8的醚或C6~C12的取代芳烃，所述取代芳烃的取代基为一个或多个，所述取代基各自独立选自卤素或Cl~C4的烷基；所述的L-酒石酸酯为下列之一:L-酒石酸正己酯、L-酒石酸正丁酯、L-酒石酸正辛酯、L-酒石酸正戊酯、L-酒石酸异丁酯或L-酒石酸-2-乙基己酯； (2)将普罗帕酮盐酸盐转化为普罗帕酮游离体，并用步骤(1)所得水相溶解，制成0.1~15mg/ml的样品，作为进样液备用； (3)采用高速逆流色谱法拆分普罗帕酮:分别以步骤(1)得到的有机相和水相为固定相和流动相，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为5~30°C，开启速度控制器，转速为500~2000rpm，以0.2~3.0ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，步骤(2)进样液由进样阀进样，以波长190~400nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液； (4)分别从步骤(3)中收集得到的前峰洗脱液和后峰洗脱液中回收得到左旋普罗帕酮和右旋普罗帕酮的单体。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述有机溶剂为下列之一或其中两种以上的混合物:氯仿、二氯甲烷、甲苯、氯苯、正己烷、正庚烷、正戊烷、环己烷、石油醚、乙醚、甲基叔丁基醚。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述L-酒石酸酯为L-酒石酸正己酯或L-酒石酸正丁酯。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述方法如下: (O将含有L-酒石酸正丁酯的氯仿和含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液按照体积比1:1混合均匀，静置分层，分离得到有机相和水相，备用；所述氯仿中L-酒石酸酯的浓度为0.1~0.2mol/L ;所述含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液的pH在2.0~4.0,其中硼酸的浓度为 0.1 ~0.2mol/L ； (2)取普罗帕酮盐酸盐加入到I~2mol/L的氢氧化钠溶液中，加热至40~50°C搅拌2~3min，然后用二氯甲烷萃取，所得有机相用超纯水洗涤至中性、用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液蒸除溶剂即得粗品，粗品用二氯甲烷溶解加入几滴正己烷重结晶，得到普罗帕酮游离体，用步骤(1)所得水相溶解，制成0.1~15mg/ml的样品，作为进样液备用； (3)采用高速逆流色谱法拆分普罗帕酮:分别以步骤(1)得到的有机相和水相为固定相和流动相，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为5~15°C，开启速度控制器，转速为1500~2000rpm，以0.5~2.0ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后，步骤(2)进样液由进样阀进样，以波长254nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液； (4)将前峰和后峰洗脱液分别用lmol/L氢氧化钠溶液碱化至pHll，析出白色粉末后直接用二氯甲烷多次萃取，合并二氯甲烷层，用饱和食盐水洗涤二氯甲烷层至中性，用无水硫酸钠干燥，过滤后蒸除溶剂即分别得到左旋普罗帕酮和右旋普罗帕酮粗品，分别用二氯甲烷溶解粗品后加入正己烷重结晶， 分别得到纯化的左旋普罗帕酮和右旋普罗帕酮。
【文档编号】C07C213/10GK103570564SQ201310316865
【公开日】2014年2月12日 申请日期:2013年7月24日 优先权日:2013年7月24日
【发明者】童胜强, 颜继忠, 沈芒芒 申请人:浙江工业大学