一种从罗汉果中制备罗汉果甙v的方法
【专利摘要】本发明公开了一种从罗汉果中制备罗汉果甙V的方法，包括下述步骤:原料处理、高压处理、超临界CO2流体萃取，收集萃取完后得到的提取液，离心，上清液进行HP-20ss树脂柱层析，再用50-60％的乙醇溶液洗脱，经浓缩、喷雾干燥，得到罗汉果甙V。具有含量高，工艺简单，适合生产，生产成本低等优点。
【专利说明】-种从罗汉果中制备罗汉果wt V的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物【技术领域】的提取方法，具体说是一种从罗汉果中制备罗汉果甙V 的方法。
【背景技术】
[0002] 罗汉果，被人们誉为"神仙果"，是我国特有的珍贵葫芦科植物，素有良药佳果之 称。罗汉果属葫芦科植物，是一种多用途的药用和保健果品，是全世界特有的药用植物， 1977年中国药典收载作为中药使用，1987年卫生部又将罗汉果列为既是药品又是食品的 中药之一，据《中药大辞典》等书记载，罗汉果味极甜、性凉、无毒，入脾肺，具有清肺止咳、润 肠通便、清热解毒、祛痰补血、益肝、健脾、镇静、止渴、促进肠胃机能、抑制哮喘以及降压等 功效，常用于肺火燥咳、咽痛失音、肠燥便秘等症。
[0003] 罗汉果提取物的主要成分为罗汉果甜甙，罗汉果甜甙具有很好的保健作用，对促 进肠胃机能和清热止咳、滑肠排毒、嫩肤益颜、清热润肺的效果更为显著，可广泛应用于营 养保健品、食品、药品等行业中。罗汉果甜甙中的有效成分主要是萜类化合物，包括甙III、 甙IV、甙V等，其中罗汉果甜甙V(也称为罗汉果甙V，下同）是其甜味的主要成分，研究表 明：罗汉果果头中分尚并鉴定出了罗汉果式III、罗汉果式IV (mogroside IV)、罗汉果式V、 罗汉果甙II E、罗汉果甙IIIE、罗汉果甙VI、罗汉果甙A、罗汉果新甙（neomogroside)、赛门甙 I (Siamenside I )、ll-〇xo_mogroside、罗汉果二醇苯甲酸酯（mogroester)共 11 种葫芦 烧三廠式类（cucurbitaneglycosides)化合物，该类化合物是罗汉果果实中的主要活性物 质，约占干果重4%，除少数为无甜[如罗汉果式IV (mogroside IV)]或苦味[如罗汉果新 式（neomogroside)]物质外，大多为甜味成分或微甜物质。其中罗汉果式V为三廠系糖式 类S-5的强甜物质，是罗汉果果实中含量和甜度均较高的成分，是主要的甜味成分，其甜度 相当于蔗糖的300倍，比甜菊甙（甜度相当蔗糖100-150倍）要甜得多，而且没有甜菊甙的 苦异味，这种强甜物质味甜而纯正，无异味、回味感强、热稳定好，在l〇〇°C水溶液中稳定，在 120°C连续加热12小时以上仍不被破坏，属非发酵物质，利于加工贮存。根据中国药学资 料和日本学者竹本常松教授的研究证明：罗汉果对各种疾病起主要效果的就是罗汉果甜甙 V。
[0004] 目前，人们从罗汉果中获得提取物的方法主要有以下几种：1、水提加树脂分离 法：其生产工艺是将罗汉果破碎后装入压力罐内，加水加温水提，将多次水提液合并过滤， 上树脂进行吸附分离，用乙醇或甲醇洗脱，洗脱液去醇后，喷雾干燥而成；2、醇提（浸）膜分 离法：其工艺是将罗汉果破碎，加入50%乙醇，装入储罐内常温或加温浸提，多次浸提液合 并过滤，过滤液通过膜分离浓缩，浓缩液进行真空干燥而成；3、采用加热提取的方法。但采 用上述方法得到的罗汉果提取物均存在一定的缺陷：所得到的提取物色泽深并具有浓烈的 中药味和强烈的后苦味、有效成分含量低、提取液的颜色加深，而不利于后续的脱色提纯处 理，能源消耗大、生产成本高的缺点。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从罗汉果中制备罗汉果甙V的方法，具有工艺简单，适 合生产,生产成本低等优点。
[0006] 本发明通过以下技术方案实现，具体包括如下步骤：
[0007] 1)原料处理：取新鲜的罗汉果，洗净，破碎；
[0008] 2)高压处理：将破碎后的罗汉果，放入高压罐中，加入相同重量的纯净水，加压至 4kgf/cm 2,使其压力均匀，并保持10-15min，恢复常压，得到膏状浆液；
[0009] 3)超临界C02流体萃取：将高压处理后的罗汉果膏状浆液置于萃取釜中，以超临 界C0 2流体为萃取溶剂，以体积浓度为50-60%的乙醇溶液为夹带剂进行超临界萃取，膏状 浆液的质量与萃取釜的体积比为1:4,乙醇溶液的体积与萃取釜的体积比为1:2 ;萃取温度 为50-60°C，萃取压力为15-20Mpa，萃取时间为1. 5-2. 0小时；
[0010] 4)收集萃取完后得到的提取液，离心，上清液进行HP-20SS树脂柱层析，再用 50-60%的乙醇溶液洗脱，经浓缩、喷雾干燥，得到罗汉果甙V。
[0011] 本发明步骤4)所述的HP-20SS树脂柱，树脂用量为上清液重量的40-60倍。
[0012] 本发明得到的罗汉果甙V，为白色粉末，经HPLC检测，含量在70%以上。
[0013] 与现有技术相比，本发明的优点：
[0014] 1、现有技术在进行罗汉果甜甙等成分的提取时，前处理一般都是以水或乙醇等为 溶剂，通过加热提取来将有效成分溶出，而本发明采用高压来处理罗汉果原料，相比加热提 取，不仅时间短，而且，避免了高温对罗汉果有效成分的破坏。
[0015] 2、现有技术得到的罗汉果甙V含量一般在40-60%之间，本发明采用高压技术、超 临界C0 2流体萃取和柱层析吸附技术的结合，随着高压技术的加入，使得本发明的技术结合 出现质的提高，相比水提或醇提后柱层析，本发明时间短，罗汉果甙V含量高；相比超临界 C02流体萃取加柱层析，本发明收率高。
[0016] 3、本发明避免了无水乙醇、甲醇等大量有机溶剂的使用，更加环保。
【具体实施方式】
[0017] 下面以实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
[0018] 实施例1 :
[0019] 一种从罗汉果中制备罗汉果甙V的方法，具体包括如下步骤：
[0020] 1)原料处理：取新鲜的罗汉果100kg，洗净，破碎；
[0021] 2)高压处理：将破碎后的罗汉果，放入高压罐中，加入100kg纯净水，加压至4kgf/ cm2,使其压力均匀，并保持15min，恢复常压，得到膏状浆液约200kg ;
[0022] 3)超临界C02流体萃取：将高压处理后的罗汉果膏状浆液置于萃取釜中，以超临 界C0 2流体为萃取溶剂，以体积浓度为60%的乙醇溶液为夹带剂进行超临界萃取，膏状浆 液的质量与萃取荃的体积比为1:4,乙醇溶液的体积与萃取荃的体积比为1:2 ;萃取温度为 60°C，萃取压力为15Mpa，萃取时间为1. 5小时；
[0023] 4)收集萃取完后得到的提取液，离心，上清液进行HP-20SS树脂柱层析，再用50% 的乙醇溶液洗脱，经浓缩、喷雾干燥，得到罗汉果甙V，含量71. 2%。
[0024] 实施例2 :
【权利要求】
1. 一种从罗汉果中制备罗汉果甙V的方法，其特征在于具体包括如下步骤： 1) 原料处理：取新鲜的罗汉果，洗净，破碎； 2) 高压处理：将破碎后的罗汉果，放入高压罐中，加入相同重量的纯净水，加压至 4kgf/cm2,使其压力均匀，并保持10-15min，恢复常压，得到膏状浆液； 3) 超临界C02流体萃取：将高压处理后的罗汉果膏状浆液置于萃取釜中，以超临界C02 流体为萃取溶剂，以体积浓度为50-60%的乙醇溶液为夹带剂进行超临界萃取，膏状浆液 的质量与萃取荃的体积比为1:4,乙醇溶液的体积与萃取荃的体积比为1:2 ;萃取温度为 50-60°C，萃取压力为15-20Mpa，萃取时间为1. 5-2. 0小时； 4) 收集萃取完后得到的提取液，离心，上清液进行HP-20SS树脂柱层析，再用50-60% 的乙醇溶液洗脱，经浓缩、喷雾干燥，得到罗汉果甙V。
【文档编号】C07J17/00GK104086615SQ201410364953
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年7月29日 优先权日:2014年7月29日
【发明者】何伟平 申请人:桂林实力科技有限公司