专利名称：：雷公藤酮的制备方法及抗生育用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及雷公藤酮的制备方法及抗生育用途。从植物雷公藤[TripterygiumWilfordiiHook.f.]的根茎叶中提取出的化合物雷公藤酮(triptonide)，其化学结构已在《TheJournalofAmericaChemicalscience》，197294(20)7194上发表，结构式如下但其制备方法麻烦且得率低，它的抗肿瘤作用有过报道，但报道中未涉及其抗生育作用。现有的雄性抗生育药物棉酚，有一定的毒副作用在抗生育剂量下，全部服用者均可引起血钾降低，其中1-10%服药者在半年内可发生低血钾症及瘫痪;1/4服药者生育力改变为不可逆;可引起30%服药者不同程度肾小管损害，病理亦有同样表现，在国际上基本否定其作为雄性抗生育药物的应用。因此，研制新的雄性抗生育化合物已成为当务之急。本发明的目的是提供出雷公藤酮新的制备方法及它在雄性抗生育方面的新用途。其制法如下将雷公藤根或茎叶用乙醇提取，提取物用柱层析分离，或将雷公藤原料用水煮，水煮液再用氯仿萃取，浓缩氯仿液，浓缩液用柱层析分离，以有机溶剂洗脱，收集含雷公藤酮的部分，再次层析分离，然后重结晶，即可得雷公藤酮纯品。以上有机溶剂可以是氯仿，乙醚，环乙烷-丙酮，石油醚-丙酮，丙酮-苯，甲醇-氯仿，丙酮-氯仿，乙醇-氯仿，乙酸乙酯-氯仿，环乙烷-氯仿等。该化合物的药理作用如下1、初筛昆明种健康雄性小鼠，27.6±0.5克，每组10只，每日灌胃给药0.56、0.28、0.14mg/kg一次，连续32天，第26天与正常成年雌性小鼠1∶1合笼，第33天解剖雄鼠取一侧输精管全长，用0.5ml生理盐水冲洗精子于试管内，在白细胞计数板上观察精子活力及作精子相对计数。分笼后8天解剖雌鼠，观察胚胎数(活胎及吸收胎)。结果表明三个给药组均使睾丸减重、精子计数减少及活力降低，呈量效关系，并皆导致不育(见表1)。表1、药物对小鼠生殖参数的影响(X±SE)</tables>＊P＜0.05，＊＊＊P＜0.0012、复筛在雄性成熟SO大鼠，每日经口灌服雷公藤酮0.2mg/kg，每周6次，6-7周后交配试验表明，9/10鼠已不育(对照鼠10/10能育，两者差别非常显著，P＜0.001)，附睾尾精子数和活率也显著下降(P＜0.001)，详见表2。此剂量对体重、性行为、血清睾酮、各种副性腺重量均无明显影响。睾丸组织学除见少数脱落精子细胞及一鼠10%曲细精管轻度受损外，余无明显改变。附睾上皮正常，管腔见少量脱落精子细胞。心、肝、肺、脾、胃、肾等身体脏器组织学均正常。对照鼠一切如常。共进行两批实验，每批20鼠(给药及对照各半)，结果基本一致。表2、雷公藤酮对大鼠生育的影响(X±S、O)附睾尾精子交配雌鼠级别(N)密度活率106/ml0/0怀孕率活胎仔/孕鼠死胎仔/孕鼠对照(10)103±683±410/1013.7±2.80雷公藤(10)52±15＊15±11＊1/10＊2＊0＊P＜0.001，与对照组相比本发明所提供的化合物具有明确的雄性抗生育作用，同时，在抗生育剂量下没有明显的细胞毒性，没有其他副作用，有较好的药用前景。本发明提供的制备方法，得率较现有文献的方法高，易于实施。以下为制备实施例。实施例1，将雷公藤原料(根或茎或叶)以酒精(70-95%乙醇)浸取对浸取液浓缩后的浓缩物100g进行硅胶柱层析(硅胶100g，用1%乙醇-氯仿湿法装柱)。以1%乙醇-氯仿洗脱，收集合并含雷公藤酮的组分。将上述含雷公藤酮的组分再进行一次柱层析，以乙醚为洗脱剂，以100ml小瓶收集，将含雷公藤酮的部分合并浓缩，以氯仿重结晶两次得纯雷公藤酮。实施例2，取雷公藤原料(根或茎叶)水煮去渣，氯仿萃取后浓缩，然后按实施例1的方法进行制备。柱层析洗脱溶剂亦可用苯-丙酮，环乙烷-丙酮，乙醚-甲醇，乙酸乙酯-石油醚等。权利要求1.雷公藤酮的制备方法，其特征是对直接用酒精提取雷公藤原料的提取物或用水煮雷公藤原料再以氯仿萃取的物质进行层析分离，以有机溶剂或复合有机溶机进行洗脱，收集合并含有雷公藤酮的组分，然后结晶。2.由权利要求1规定的雷公藤酮制备方法，其特征是所说的有机溶剂或复合有机溶剂指氯仿、乙醚、甲醇-氯仿，丙酮-氯仿，乙醇-氯仿，乙酸乙酯-氯仿，环乙烷-氯仿，环乙烷-丙酮，石油醚-丙酮，丙酮-苯，乙酸乙酯-石油醚或乙醚-甲醇。3.雷公藤酮的用途，其特征是将该化合物作为雄性抗生育药物，由口服或注射用药。全文摘要本发明提供化合物雷公藤酮的制备方法与抗生育用途。其方法为，将植物雷公藤用溶剂提取，再将提取物进行层析，以有机溶剂进行洗脱，然后结晶。所得到的雷公藤酮具有显著的雄性抗生育功效，没有明显的毒副作用。其抗生育作用是明确和可逆的，是一种有前景的雄性抗生育化合物。文档编号C07D493/22GK1060845SQ90105750公开日1992年5月6日申请日期1990年10月13日优先权日1990年10月13日发明者郑家润,钱绍祯,吕燮余,马鹏程,张崇璞,陈沄,顾克显,许烨申请人:中国医学科学院皮肤病研究所,江苏省计划生育科学技术研究所