专利名称：用于治疗炎性疾病的化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的化学化合物、其制备方法、含有它们的药物组合物及其在治疗中的应用。
炎症是对组织损伤或微生物侵入的初级反应，其特征为白细胞与内皮粘着，血细胞渗出且在组织内激活。白细胞激活可以导致有毒氧类物质(如过氧化物阴离子)的生成，释放出粒状产物(如过氧化物酶和蛋白酶)。循环白细胞包括嗜中性白细胞、嗜曙红细胞、嗜碱细胞、单核细胞和淋巴细胞。不同形式的炎症涉及不同类型的浸润白细胞，其具体性能受到粘着分子的性能、细胞因子和趋化因子在组织中的表达调控。
白细胞的主要机能是保护宿主不被生物如细菌和寄生虫侵袭。一旦组织被损伤或感染，会发生一系列可引起循环中的白细胞进入被感染组织内的局部募集的活动。调控白细胞的募集能够顺序破坏和吞噬外源性或死亡细胞，随后修复组织并且消退炎症浸润。然而，在慢性炎症状态中，这种募集常常不适宜，无法充分控制消退，而且炎症反应可引起组织破坏。
整联蛋白是细胞表面异源二聚体蛋白，含有α和β链，包括在残余炎症过程。包括α4β1(也称作极迟抗原-4(VLA-4)或CD49d/CD29)和4αβ7的α4-整联蛋白主要表达在除嗜中性白细胞以外的白细胞上(例如嗜曙红细胞、T-和B-淋巴细胞、嗜碱细胞和肥大细胞)。对α4-整联蛋白的粘着分子配体包括(i)血管细胞粘着分子(VCAM-1；CD106)，(ii)纤连蛋白中可变剪接连接节段-1(CS-1)内的一个序列(胞外基质蛋白)，和(iii)粘膜地址素细胞粘着分子(MAdCAM)上的一个位点。在正常情况下，VCAM-1很少表达在脉管系统中，然而，VCAM-1在内皮细胞上的增量调节发生在接近炎症的位点。在一定范围的非脉管细胞上也可以识别到VCAM-1，这些细胞包括树状细胞、骨髓基质细胞、成滑膜细胞(synoviocyte)、星形胶质细胞和一些皮质神经元。MAdCAM表达主要与肠组织有关，它被表达在肠相关淋巴样组织的高位内皮静脉、外周淋巴节和派伊尔氏淋巴集结中。
α4β1(VLA-4)和α4β7均可以与纤连蛋白和MAdCAM中的VCAM-1，CS-1相互作用。α4-整联蛋白/VCAM-1相作用能够使白细胞粘附并且随后形成透过后毛细血管小静脉壁到组织感染位点的转移。这种相互作用同样能够为T-细胞激活提供共同刺激信号，同时确信α4-整联蛋白/纤连蛋白的相互作用在肥大细胞、嗜碱细胞和嗜曙红细胞的脱粒中具有刺激作用。所以，α4-整联蛋白拮抗剂能够确保在两个水平上干预影响许多慢性病的病生理学中必需的炎症过程的衰减。这些包括(i)抑制白细胞募集到组织的炎症位点，和(ii)抑制白细胞的激活和炎症介质的释放。
由α4-整联蛋白介导的细胞粘着和信号传输是许多生理和病生理过程中所必需的。α4-整联蛋白阻断剂的治疗功效早已通过测试特异性α4-整联蛋白阻断单克隆抗体(抗-α4-mAbs)在体外和体内疾病模型(Lobb和Hemler，1994)的实验中得到评估。抗-α4-mAbs在与哮喘有关的变应性肺炎动物模型中显示出良好作用，包括豚鼠、大鼠、兔子和绵羊模型。另外，抗-α4-mAbs也已在(i)实验变应性脑脊髓炎的大鼠和小鼠模型(被视作T-细胞依赖性自身免疫疾病、多发性硬化的模型)，(ii)接触性过敏的小鼠模型，(iii)棉-顶(Cotton-top)tamarin中的结肠炎，与炎性肠病有关(Podolsky等人，1993)，和(iv)非肥胖糖尿病小鼠中的胰岛素依赖型糖尿病(Baron等人，1994)中显示出有效性。被认为可阻断α4-整联蛋白功能的纤连蛋白衍生肽业已在小鼠接触性过敏症(Ferguson等人，1991)和大鼠佐剂关节炎(Wahl等人，1994)中显示出功效。
国际专利申请号WO 98/53814、WO 98/53817和WO 98/53818(Merck)公开了杂环酰胺类化合物、联芳基链烷酸类化合物和磺胺类化合物分别作为VLA-4和/或α4/β7拮抗剂的应用。WO 98/54207(Celltech)公开了酪氨酸衍生物抑制α4整联蛋白与其配体结合治疗和预防免疫或抗炎疾病的用途。WO 97/03094(Biogen)描述了一种半肽化合物的选择，该化合物能够抑制配体与VLA-4受体结合。
我们目前发现一组新的α4-整联蛋白拮抗剂化合物，它们拮抗α4β1和α4β7两种整联蛋白，有效阻断白细胞粘着和激活，由此影响抗炎特性。因此，这些化合物具有有效的治疗效果，尤其是为避免其中白细胞涉及炎症位点的疾病中由白细胞诱发的组织损伤提供保护作用。α4β1和α4β7整联蛋白两者的拮抗剂可能具有α4β1和α4β7的选择性拮抗剂所没有的优越性，因为这两种整联蛋白被肯定在炎症中起作用。
所以，按照本发明的一个方面，我们提供式1的化合物和其盐和溶剂化物 其中R1和R2独立地表示(i)-C1-6烷基、-C3-8环烷基或-C1-3烷基C3-8环烷基，或上述基团中烷基或环烷基被一个或多个卤素、-CN、硝基、羟基或-OC1-6烷基取代的基团；(ii)-(CH2)eAr1或-(CH2)eOAr1；或NR1R2一起表示吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、硫代吗啉基、吗啉基或吖庚因基，或表示与苯环稠合的这些基团，任意选择性地被一个或多个-(CO)n(CH2)tAr1、-(CO)nC1-6烷基Ar1Ar2、-(CO)nC1-6烷基、-(CH2)rOH、-(CH2)rO(CH2)pOH、-(CH2)rOC1-6烷基、-O(CH2)tAr1、-(CH2)rSO2Ar1、哌啶-1-基、-(CH2)tCONR8R9、-NR10(CO)n(CH2)tAr1、NR10(CO)nC1-3烷基C3-6环烷基、-NR10(CO)nC1-6烷基二C3-6环烷基、-CONR10(CH2)tAr1、卤素、-NHSO2C1-6烷基、-SO2NR10R11、-SO2C1-6烷基或-SO2Ar2取代；R3表示-C1-6烷基NHC(＝NH)NH2、-C2-6链烯基NHC(＝NH)NH2、-C2-6炔基NHC(＝NH)NH2、-C1-6烷基N14R18、-(CH2)hCONR14R18、-(CH2)hCOC1-6烷基、-(CH2)dCHNR18CONR20R21、-(CH2)mNR18CONR14R18、-(CH2)dNR18Ar3、-(CH2)dCONR18Ar3、-(CH2)hCOOR18、-(CH2)cAr3、-O(CH2)cAr3，-(CH2)dCO(CH2)sAr3或-(CH2)dOAr3；或R3表示-(CH2)c-2，4-咪唑烷二酮、-(CH2)c(哌啶-4-基)、-(CH2)c(哌啶-3-基)、-(CH2)c(哌啶-2-基)、-(CH2)c(吗啉-3-基)或-(CH2)c(吗啉-2-基)，氮上任意选择性地被-(CO)fC1-6烷基、-(CO)f(CH2)cAr2或-C(＝NH)NH2取代；
或R3表示选择性被-C1-6烷基或卤素取代的-(CH2)z氧芴；或R3表示-(CH2)c-噻吨-9-酮；或R4表示氢、-C1-6烷基、-C1-3烷基C3-6环烷基、-(CH2)qAr2、-C1-4烷基-X-R7、C1-4烷基SO2C1-4烷基、-C1-6烷基NR12R13或-C1-6烷基NR12COC1-6烷基；R5代表氢，或R4R5与相连的碳原子一起构成C5-7环烷基环；R6表示氢或-C1-6烷基，或R6和R4与同它们分别相连的N和C原子一起构成吡咯烷环；R7表示氢、-(CH2)wNR12R13、-(CH2)uAr2或-(CH2)wNR12COC1-6烷基；R8、R9、R16和R17分别表示氢、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-3烷基C3-6环烷基、-C2-6链烯基，或NR8R9或NR16R17一起表示吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或被-C1-6烷基、-CO苯基或-SO2甲基N取代的哌嗪基；R10、R11、R12、R13、R15、R18、R20和R21独立地表示氢或-C1-6烷基；R14、R19和R22独立地表示氢、-C1-6烷基、-C3-6环烷基或-(CH2)xAr4或NR14R18或NR15R22一起表示吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或N-C1-6烷基哌嗪基；Ar1表示苯基或含有1至3个选自O、N或S的杂原子的5或6元杂环芳香环，它们任意选择性地被一个或多个卤素、C1-6烷基、羟基、-OC1-6烷基、CF3、硝基、-Ar2或-OAr2取代；Ar2表示任意选择性地被一个或多个卤素、-C1-6烷基、羟基、-OC1-6烷基、-CF3或硝基取代的苯基；Ar3表示苯基，含有1至3个选自O、N或S杂原子的5或6元杂环芳香环，或表示与苯环稠合的这些基团，它们任意选择性地被一个或多个-CO(CH2)gAr4、-(CH2)yAr4、-(CH2)yCOAr4、-(CO)aC1-6烷基、-(CO)aC2-6链烯基、-(CO)aC2-6炔基、-(CO)aC3-8环烷基、-(CO)aC1-6卤代烷基、卤素、-COCH2CN、-(CH2)6NR16R17、-(CH2)bNHC(＝NH)NH2、-CYNR16(CO)aR17、-(CH2)bNR15COR19、-(CH2)bCONR15R22、-(CH2)bNR15CONR15R22、-(CH2)bCONR15(CH2)jNR15R22、-(CH2)bSO2NR15R22、-(CH2)bSO2NR15COAr2、-(CH2)bNR15SO2R19、-SO2R19、-SOR19、-(CH2)zOH、-COOR15、-CHO、-OC1-10烷基、-O(CH2)jNR15R22、
-O(CH2)jNHC(＝NH)NH2、-O(CH2)bCONR16R17、-O(CH2)kCOOR15、-O(CH2)jOAr2、-O(CH2)bAr2、3-苯基-2-吡唑啉-5-酮或4，5-二氢-3(2H)-哒嗪酮基取代；Ar4表示苯基或含有1至3个选自O、N或S的杂原子的5或6元杂环芳香环，它们任意选择性地被一个或多个卤素、-C1-6烷基、羟基、-OC1-6烷基、CF3、硝基、或-CONH2取代；X和Y独立地表示O或S；a，f，k，s和n独立地表示0或1；b，c，r，x，y和z独立地表示0-2的整数；d，g和u独立地表示1或2；e，h，q和w独立地表示1-3的整数；j和p独立地表示2至4的整数；m独立地表示0至4的整数；t独立地表示0至3的整数。
Ar1、Ar3和Ar4可以表示的5或6元杂环芳香环实例包括嘧啶、吡啶、呋喃、咪唑、噻吩、吡咯、噻唑、噁唑、异噁唑、1，3，4-噻二唑、1，2，3-噻二唑、1，2，4-噻二唑、1，2，4-噁二唑和吡唑。
Ar1可以表示的5或6元杂环芳香环的特定实例包括嘧啶、吡啶、呋喃、1，2，4-噻二唑和吡唑。
Ar3可以表示的5或6元杂环芳香环的特定实例包括噻唑和吡啶。与苯环稠合的苯基表示萘基。Ar3可以表示的5或6元杂环芳香环的一个实例包括苯并呋喃。
Ar4可以表示的5或6元杂环芳香环的特定实例包括1，3，4-噻二唑、1，2，3-噻二唑、1，2，4-噁二唑和吡唑。
我们优选R1和R2被定义为使NR1R2一起表示哌啶基、哌嗪基、硫代吗啉基、吗啉基或1，2，3，4-四氢异喹啉，它们任意选择性地被-(CO)n(CH2)rAr1，、-(CO)nC1-6烷基、-(CH2)tCONR8R9、-NR10(CO)n(CH2)rAr1、-NR10(CO)nC1-3烷基C3-6环烷基、-NR10(CO)nC1-6烷基二C3-6环烷基、-(CH2)rOC1-6烷基、-(CH2)rO(CH2)pOH、哌啶-1-基、-(CH2)rOH或-CONR10(CH2)rAr1基取代。
我们优选R1和R2被定义为使NR1R2一起表示任意选择性地被-(CO)nC1-6烷基(尤其是-COCH3)N取代的吗啉基或哌嗪基，被-(CO)n(CH2)rAr1(尤其是-CO苯基和-(CO)2-呋喃基)N取代的哌嗪基，被-NR10(CO)n(CH2)rAr1(尤其是-NHCOCH2苯基)取代的哌啶基或被-(CH2)tCONR8R9(尤其是-CONH2)取代的哌啶基。
我们优选R3表示-(CH2)c-2，4-咪唑烷二酮-3-基、-(CH2)c-噻吨-9-酮-3-基、-(CH2)cAr3、-O(CH2)cAr3、-(CH2)dOAr3或-(CH2)z氧芴，特别是-OCH2Ar3、-CH2OAr3或氧芴，尤其是-CH2OAr3或氧芴。
当R3表示-(CH2)z氧芴(特别是氧芴)时，我们优选它表示-(CH2)z-2-氧芴(特别是2-氧芴)。
当R3表示-(CH2)c-2，4-咪唑烷二酮时，我们优选它表示-(CH2)c-(2，4-咪唑烷二酮-3-基)(特别是-CH2-2，4-咪唑烷二酮-3-基)。
当R3表示-(CH2)c-噻吨-9-酮，我们优选它是-(CH2)c-(噻吨-9-酮-3-基)(特别是-CH2-噻吨-9-酮-3-基)。
我们尤其首选R3表示-CH2OAr3。
我们优选R4表示-C1-6烷基，R5表示氢或R4R5与同它们相连的碳一起构成环己基环，和R6表示氢或甲基(特别是氢)。
我们特别优选R4表示-C1-6烷基，和R5与R6表示氢。
我们尤其优选R4表示-CH2CHMe2和R5与R6表示氢。
我们特别优选R4和R5具有如式(Ia)所示的立体化学取向 我们优选R7表示-(CH2)uAr2或-(CH2)wNR12COC1-6烷基。
我们尤其优选R8和R9分别表示氢或NR8R9一起表示哌啶基或吡咯烷基，特别是哌啶基。
我们优选R10表示氢或甲基，特别是氢。
我们优选R11表示氢或甲基，特别是氢。
我们优选R12表示氢或甲基，特别是氢。
我们优选R13表示氢或甲基，特别是氢。
我们优选R14表示氢或甲基，特别是氢。
我们优选R15表示氢或-C1-6烷基，特别是氢。
我们优选R16表示氢、-C1-4烷基或-C2-4链烯基，特别是氢或丙烯基。
我们优选R17表示氢、-C1-4烷基或-C2-4链烯基，特别是氢、甲基或丙烯基。
我们优选R18表示氢或甲基，特别是氢。
我们优选R19表示氢或C1-6烷基，特别是-C1-6烷基，尤其是甲基。
我们优选R20表示氢或甲基，特别是氢。
我们优选R21表示氢或甲基，特别是氢。
我们优选R22表示氢、-C1-6烷基或-(CH2)xAr4或NR15R22一起表示哌啶基、吡咯烷基或吗啉基。
我们尤其优选R15和R22定义为使NR15R22共同表示哌啶基。
我们优选Ar1表示呋喃、嘧啶或苯基，它们任意选择性地被卤素(如氯或氟)或-OC1-6烷基取代。
我们优选Ar2表示未取代的苯基。
我们优选Ar3表示苯基、萘基或苯并呋喃，它们任意选择性地被一个或多个-(CH2)yCOAr4、-COOR15、-(CH2)bSO2NR15R22、-(CH2)bNR15SO2R19、-SO2R19、(CO)aC2-6链烯基、-(CO)aC1-6烷基、-(CO)aC3-8环烷基、卤素、-(CH2)bCONR15R22、3-苯基-2-吡唑啉-5-酮-2-基或4，5-二氢-3(2H)-哒嗪酮-6-基取代。我们特别优选Ar3表示被-(CO)aC1-6烷基、-(CO)aC3-8环烷基、卤素、-(CH2)yCOAr4或-(CH2)bCONR15R22任意选择性取代的苯基或萘基。
我们特别首选Ar3表示被正丙基、叔丁基、环己基、碘、-CO苯基或CO哌啶-1-基取代的苯基或被CO哌啶-1-基取代的萘基。
我们优选Ar4表示被卤素任意选择性地取代的苯基或呋喃，尤其是未取代苯基或呋喃。
我们优选e表示1或2。
我们优选n表示0或1。
我们优选r表示0或1，特别是1。
我们优选p表示2。
我们优选t表示0、1或3，特别是0或1，尤其是0。
我们优选h表示1或2，特别是2。
我们优选d表示1。
我们优选m表示0或1，特别是1。
我们优选c表示0或1，特别是1。
我们优选f表示1。
我们优选q表示1或2，特别是1。
我们优选u表示1。
我们优选w表示1或2，特别是1。
我们优选x表示0或1，特别是1。
我们优选a表示0。
我们优选y表示0或1，特别是0。
我们优选b表示0或1，特别是0。
我们优选j表示2或3，特别是2。
我们优选z表示0或1，特别是0。
我们优选k表示1。
我们优选s表示0。
我们优选g表示1。
我们优选X表示氧。
我们优选Y表示氧。
首选的是式(I)化合物和其盐和其溶剂化物(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-乙酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-{4-[({4[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-乙酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-{[(2S)-2-({2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-乙酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)丙酸。
也特别优选下列化合物和其盐和溶剂化物(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2-(2苯甲酰基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[4-(氨基羰基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}丙酸。
上述优选化合物的特征在于口服生物利用度低，这对于吸入药物而言是有利特性，为的是减小潜在副作用。
式(I)化合物的适用盐包括生理可接受盐，例如碱金属盐，如钙、钠和钾盐以及与(三羟甲基)氨基甲烷形成的盐。式(I)化合物的其他盐包括可能生理不可接受但可用于制备式(I)化合物及其生理可接受盐的盐。如果适宜，酸加成盐可衍生自无机或有机酸，如盐酸盐、氢溴化物、硫酸盐、磷酸盐、醋酸盐、苯甲酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、富马酸、马来酸盐、1-羟基nathanoate、甲烷磺酸盐。溶剂化物的实例包括水合物。
当式(I)化合物的侧链含有手性中心时，本发明还涉及对映异构体(包括外消旋混合物)和非对映异构体的混合物以及各对映异构体。通常，优选采用纯净单一对映异构体形式的式(I)化合物。
式(I)化合物和其盐和溶剂化物可以通过下述方法制备，这些方法构成本发明的另一个方面。
本发明制备式(I)化合物的方法包括(a)水解式(II)的羧酸酯 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6如上定义并且R是能够形成羧酸酯的基团；或(b)被保护的式(I)化合物脱保护。
在(a)过程中，适当R的实例是C1-6烷基，如甲基或叔丁基。水解或者经酸性方法进行，例如采用三氟乙酸和水；或者经碱性途径，例如利用氢氧化钠和甲醇。在另一固相反应中，R可以表示用可利用的羟基官能化的固体载体。固体载体的实例包括树脂，如聚苯乙烯树脂，其中苯基环经连接体被提供羟基。羟基官能化连接体的实例是-CH2O(4-羟甲基-苯基)(Wang树脂)或3-甲氧基-4-氧基甲基-苯氧基甲基化的1％二乙烯基苯交联苯乙烯的N-Fmoc氨基酸酰酯(Sasrin树脂)。
在(b)中，保护基的实例及其脱除方法可以参见T.W.Greene《有机合成中的保护基》(J.Wiley&Sons，1991)。
适用的胺保护基包括磺酰基(如甲苯磺酰基)，酰基(如苄氧基羰基或叔丁氧基羰基)和芳烷基(如苄基)，它们可以通过适当的水解或氢解脱除。
式(II)的化合物可以按照下列合成路线制备；合成路线1 步骤(i)在这个合成路线中，我们优选R表示甲基。
式(III)和(IV)化合物可以在常规条件下反应用于制备酰胺。希望在惰性溶剂(如MeCN或DMF)中、在可有可无的HOBT下采用偶联剂如WSCDI。P1是胺保护基，如一种已经在方法(b)下描述的保护基。在这个合成路线中，优选P1表示Boc。
步骤(ii)式(V)向(VI)的转化适宜在常规条件下，例如在有机碱如吡啶和惰性有机溶剂如DCM的存在下，利用对硝基苯基氯甲酸酯实施。
步骤(iii)该反应可以通过将反应物在适当溶剂如DCM中、于有机碱如DIPEA的存在下混合进行。
步骤(iv)该脱保护步骤可以在常规条件下进行。当P1表示Boc时，通过以酸如氢卤酸(HX)如HCl的处理可以脱除该基团。，步骤(v)式(VIII)与式R3CO2H的化合物的缩合反应可以在与上述步骤(i)类似的条件下进行。
另一种制备式(II)化合物的方法如合成路线2所示合成路线2
步骤(i)在该合成路线中我们优选R表示t-Bu(叔丁基)。该步骤的反应条件类似于合成路线1步骤(i)。
在这个合成路线中我们优选式(IV)的化合物中P1表示Cbz。
步骤(ii)该过程中包括两个阶段反应，它们是(a)用羧基供体如(Cl3CO)2CO在典型的有机碱如DIPEA和适当溶剂如THF或DCM存在下处理，随后(b)通过用R1R2NH以类似于上述合成路线1步骤(iii)所述方法处理转化得到氨基甲酸酯。
步骤(iii)该脱保护反应可以在常规条件下进行。当P1表示Cbz时，通过氢解可以达到脱保护，例如在Pd/C存在下于溶剂如乙醇中用甲酸铵处理。这个反应可以用酸如氢卤酸处理得到氢卤酸盐(如HCl盐)产物。
步骤(iv)该过程类似于合成路线1的步骤(v)。另一种式(II)化合物的制备方法如以下合成路线3所示
合成路线3 步骤(i)P2是胺保护基，例如如上所述的保护基，和在这个合成路线中我们优选P2表示Fmoc。更优选P2是Boc。
式(IX)的化合物可以在2，6-二氯苯甲酰氯、吡啶和适当溶剂(如DMF)的存在下反应到适当固相，例如羟基官能化聚苯乙烯树脂(如Wang或Sasrin树脂)上。
步骤(ii)N-保护基P2的脱除可以在常规条件下实现；例如当P2表示Fmoc时，通过用有机碱如哌啶在适当溶剂如DMF中处理；或例如当P2表示Boc时，通过用氯三甲基硅烷和苯酚在适当溶剂如DCM中处理。
步骤(iii)在这个合成路线中，P1适宜表示Fmoc。另外，它适宜表示Boc。式(XI)的化合物与式(IV)化合物生成酰胺的反应可以在偶联剂如PyBop、有机碱如DIPEA和适当溶剂如DMF的存在下进行。
步骤(iv)这个脱保护反应可以在常规条件下进行，例如当P1表示Fmoc或Boc时，在类似于步骤(ii)所述条件下进行。
步骤(v)式(XIII)与式R3CO2H的化合物的缩合反应可以在适当偶联剂如PyBop、有机碱DIPEA和适当溶剂如DMF的存在下进行。
步骤(vi)这个步骤包括式(XIV)化合物上烯基链裂解反应生成式(XV)的化合物，譬如，通过用Pd(PH3)4和PhSiH3(或吗啉)在适当溶剂如DCM的存在下处理。
步骤(vii)式(XV)化合物向式(XVI)化合物的转化适宜通过在常规条件下、于有机碱如DIPEA和惰性有机溶剂如THF和/或DCM存在下用对硝基苯基氯甲酸酯处理来实施。
步骤(viii)这个反应可以通过将反应物在有机碱如DIPEA和合适有机溶剂如DCM和/或THF存在下混合来完成。
某些式(II)的化合物的另一制备方法如以下合成路线4所示
合成路线4 步骤(i)在这个合成路线中，我们优选P2表示Fmoc。
该转化反应可以按照类似于合成路线3步骤(i)至(iii)的过程进行。
步骤(ii)烯基链裂解反应可以通过类似于合成路线3步骤(vi)的过程进行。
步骤(iii)对硝基苯基碳酸酯的生成反应可以采用类似于合成路线3步骤(vii)的反应条件进行。
步骤(iv)式(XVIII)向(XIX)的转化反应可以通过类似于合成路线3步骤(viii)的反应进行。
步骤(v)这个脱保护反应可以采用类似于合成路线3步骤(ii)的过程进行。
步骤(vi)式(XX)向(II)的转化可以通过一个缩合反应在适当酸存在下采用在适当偶联剂如PyBop、有机碱如DIPEA和溶剂如DMF进行。
其中R3表示-(CH2)dOAr3的式(II)化合物可以另外由式(XX)的化合物按照步骤(vii)和(viii)进行制备步骤(vii)式(XX)向(XXI)的转化可以通过缩合反应在卤代链烷酸(如溴代衍生物，即Hal表示溴)的存在下、采用适当偶联剂如DIC和溶剂如DMF进行。
步骤(viii)在该步骤中，式(XXI)的化合物与式Ar3-OH的化合物的反应可以在碳酸钾、碘化钠和适当溶剂如DMF的存在下进行。
式III、IV、IV’、HNR1R2、R3COOH、IX、Hal(CH2)dCOOH和Ar3-OH的化合物或者已知，或者可以通过已知方法制得。
按照下列试验可以测试本发明化合物的体外和体内生物活性。(1)Jurkat J6/VCAM-1粘着试验本实验用来测试表达在Jurkat J6(人淋巴母细胞系)细胞膜上的整联蛋白VLA-4与VCAM-1的相互作用。聚苯乙烯96孔微量滴定平板用人免疫球蛋白G(IgG；Sigma Chemicals，UK，产品号14506)以0.05mg/ml碳酸氢盐缓冲液(36mM NaHCO3和22mM Na2CO3，在Dulbecco’s磷酸盐缓冲的盐水中pH 9.8(PBS)时制备；SigmaChemicals，UK，产品号14190-094)的浓度在37℃涂层2小时。随后吸出该溶液并且用PBS将平板洗涤2次。
通过将其组成的七个结构域克隆在具有zz(蛋白质A)标记的果蝇属表达体系中制备VCAM-1。这种zzVCAM-1随后由黄猩猩果蝇(Drosophila melanogaster)S2细胞培养物表达，用铜诱导。加入蛋白酶抑制剂并且经0.2μm滤器过滤或通过离心使培养物上清液澄清。由这种澄清培养基利用IgG琼脂糖柱纯化该zzVCAM-1，该琼脂糖柱或者单独用20mM磷酸钠pH 7.2平衡，或者同时在0.5M氯化钠存在下平衡。用3M硫氰酸铵洗脱该zzVCAM-1柱，此后利用G25脱盐柱除去，平衡采用20mM磷酸钠(pH 7.2)。纯化的zzVCAM-1进一步浓缩为较小体积(Amicon搅拌式细胞浓缩器)直至获得62.5ng/ml的浓度，利用消光系数值计算。
此后，将这种zzVCAM-1溶液在4℃下、于IgG涂层的微量滴定平板中用3％存在于PBS中的牛血清白蛋白(BSA)培养过夜，随后抽出并且用PBS进一步洗涤2次。生长在细胞培养基RPMI 1640(HyCloneLtd，产品号B-9106-L)中的Jurkat J6细胞(6×106细胞/ml)用10μM的荧光染料2’，7’-双(2-羧乙基)-5-(e6)-羧基荧光素乙酸甲酯(BCECF-AM；Molecular Probes Inc，产品号B1150)在37℃下标记10分钟，该RPMI1640培养基中补充有10％热灭活胎牛血清(FCS；Gibco BRL，产品号10099-075)和2mM L-谷酰胺。此后通过在500×g下离心5分钟除去过量染料，将细胞重新悬浮至浓度为1.2×107细胞/ml Hank氏平衡盐溶液(HBSS；Gibco BRL，产品号14190-094)。
将等体积的化合物(溶解在适当溶剂中并且在含有lmM MnCl2的HBSS中稀释)和标记Jurkat J6 cells加入到VCAM-1涂层平板中，并且在37℃下进行30分钟的粘着。通过将平板反转并且用棉纸吸附可除去未粘着或松散粘着的细胞。用PBS洗涤2次且随后进行印迹，此后加入2％洗涤剂(Triton-X；Sigma Chemicals UK，产品号X100)。在华莱士ViktorTM荧光计中进行计数，其中荧光值降低是化合物抑制粘着的指征。所有样本以一式一份进行分析并且按照4个参数曲线拟合，采用公式(I)公式(I)y=a-d1+(xc)b+d]]>其中a是最小值，b是Hill斜率，c是IC50和d是最大值。(最大值和最小值是与化合物不存在和2mM EDTA二钠盐存在下粘着进行比较的值；Sigma Chemicals，UK，产品号ED2P)。数据表示为n次试验的平均pIC50和平均值的标准偏差。(2)CD3/VCAM-1共同刺激的T-淋巴细胞增殖利用抗CD14、CD19、CD16和HLA.DR抗体和Dynal珠、通过阴性选择将得自外周血单核细胞的CD4+T-细胞纯化。平底96孔组织培养平板用1μgml-1抗CD3抗体(OKT3)涂层，洗涤并且与人IgG和zzVCAM-1融合蛋白质培养。将CD4+T细胞(在RPMI-1640培养基中制备，该培养基补充有10％FCS、青霉素或链霉素和L-谷酰胺)加入该涂层平板(1×105细胞/孔)中，在多个剂量的化合物或阻断抗体存在或不存在条件下培养4天。在培养的最后6小时加入放射标记胸腺嘧啶核甙[3H]，此后用Skatron平板收获器收获细胞。利用β平板计数器测量掺入的[3H]标记作为T细胞增殖的指标。化合物一式三份进行测试，并且按照试验(1)所述的类似方法收集数据。(3)对豚鼠中嗜曙红细胞浸润和过度反应性的抑制在基于Danahay等人(1997)所述的方法中，给卵白蛋白敏化豚鼠施用美吡拉敏(30mg/kg ip)以保护不发生过敏性支气管痉挛。将溶解在0.9％盐水中的试验化合物通过吸入途径(呼吸30分钟化合物的气雾剂)或气管内途径在卵白蛋白刺激30分钟之前和6小时之后给药(呼吸10分钟由0.5％卵白蛋白溶液产生的气雾)。在卵白蛋白刺激后24小时利用整体体积描记器(Buxco Ltd.，USA)测量未受限动物中呼吸道对血栓烷模拟物U46619的过度反应性。此后处死豚鼠并且灌洗肺部。由支气管肺泡灌洗液获得白细胞数目的总数和差并测定嗜曙红细胞累积量的减少百分比(Sanjar等人，1992)。利用地塞米松(200μg/kg i.t)作为阳性对照。数据代表特定剂量的抑制作用，表示为以载体对照反应计的百分比。(4)RPMI 8866/MAdCAM-1粘着实验本实验研究表达在RPMI 8866(人B淋巴细胞系)上的α4β7整联蛋白与MAdCAM-1的相互作用。聚苯乙烯96孔微量滴定平板用人免疫球蛋白G(IgG；Sigma Chemicals，UK，产品号14506)以0.05mg/ml碳酸氢盐缓冲液(36mM NaHCO3和22mM Na2CO3，在Dulbecco’s磷酸盐缓冲的盐水pH 9.8(PBS)中制备；Sigma Chemicals，UK，产品号14190-094)的浓度在37℃涂层2小时。随后吸出该溶液并且用PBS将平板洗涤2次。
在多角体蛋白促进剂的调控下，通过将其组成的结构域克隆在具有zz(蛋白质A)标记的杆状病毒表达体系中制得MAdCAM-1。含有zzMAdCAM-1的扩增杆状病毒用来感染草地夜蛾细胞，指征细胞生长在补充有5％胎牛血清的SF900II培养基的混悬液中。该细胞感染为1的多重性感染，48小时后通过离心收获。加入蛋白酶抑制剂并且经0.2m滤器过滤或通过离心使培养物上清液澄清。由这种澄清培养基利用IgG琼脂糖柱纯化该zzMAdCAM-1，该琼脂糖柱或者单独用20mM磷酸钠pH 7.2平衡，或者同时在0.5M氯化钠存在下平衡。用3M硫氰酸铵洗脱该zzMAdCAM-1柱，此后样品彻底透析采用20mM磷酸钠(pH7.2)以除去硫氰酸铵。纯化的zzMAdCAM-1进一步浓缩为较小体积(Amicon搅拌式细胞浓缩器)直至获得0.5mg/ml的浓度，利用消光系数值计算。
将zzMAdCAM-1的这种溶液1∶2500稀释并且随后在4℃下、于IgG涂层的微量滴定平板中用3％存在于PBS中的牛血清白蛋白(BSA)培养过夜，随后抽出并且用PBS进一步洗涤2次。生长在细胞培养基RPMI1640(HyClone Ltd，产品号B-9106-L)中的RPMI 8866细胞(3×106细胞/ml)用10M的荧光染料2’，7’-双(2-羧乙基)-5-(e6)-羧基荧光素乙酸甲酯(BCECF-AM；Molecular Probes Inc，产品号B1150)在37℃下标记10分钟，该RPMI1640培养基中补充有10％热灭活胎牛血清(FCS；Gibco BRL，产品号10099-075)和2mM L-谷酰胺。此后通过在500×g下离心5分钟除去过量染料，将细胞在Hank氏平衡盐溶液(HBSS；GibcoBRL，产品号4190-094)重新悬浮至浓度为6×106细胞/ml。
将等体积的化合物(溶解在适当溶剂中并且在含有1mM MnCl2的HBSS中稀释)和标记RPMI 8866细胞加入到MAdCAM-1涂层平板中，并且在37℃下进行30分钟的粘着。通过将平板反转并且用棉纸吸附可除去未粘着或松散粘着的细胞。用PBS洗涤2次且随后进行印迹，此后加入2％洗涤剂(Triton-X；Sigma Chemicals UK，产品号X100)。在华莱士ViktorTM荧光计中进行计数，其中荧光值降低是化合物业已抑制粘着的指征。所有样本以一式一份进行分析并且按照4个参数曲线拟合，如公式(I)(上面)所示。其中最大值和最小值是与化合物不存在和2mM EDTA二钠盐存在下粘着进行比较的值；SigmaChemicals，UK，产品号ED2P)。数据表示为n次试验的平均pIC50和平均值的标准偏差。
其中本发明化合物具有有效抗炎作用的病症实例包括呼吸道疾病，如支气管炎(包括慢性支气管炎)，哮喘(包括变应原诱发哮喘反应)，慢性阻塞型肺病(COPD)和鼻炎。其它相关疾病包括胃肠道疾病，如肠道炎性疾病，包括炎性肠病(如.克罗恩氏病或溃疡型结肠炎)和辐射暴露或变应原暴露继发的肠道炎性疾病。此外，本发明的化合物可以用来治疗肾炎，皮肤病(如牛皮癣、变应性皮炎和过敏型反应)和具有炎症因素的中枢神经系统的疾病，如阿耳茨海默氏病、脑膜炎、多发性硬化和AIDS痴呆。
本发明化合物具有有效作用的病症的其它实例包括心血管疾病如动脉粥样硬化，外周血管疾病和自发型嗜曙红细胞过多综合征。
本发明的化合物可以有效作为免疫抑制剂，并因此可用于治疗自身免疫疾病，如移植后的同种移植组织排异、类风湿关节炎和糖尿病。
本发明的化合物也可以有效抑制(癌)迁移主要的相关性疾病包括哮喘、COPD和上呼吸道炎性疾病，包括季节性和常年性鼻炎。
所属领域技术人员应理解，本发明所述治疗扩展到已建成疾病的预防和治疗。
如上所述，式(I)化合物可用作药物，特别是抗炎药。
所以，本发明的另一方面提供用作药物、特别是在患有炎性疾病的患者的治疗中使用的式(I)化合物或其生理可接受盐或溶剂化物。
按照本发明的另一个方面，提供式(I)化合物或其生理可接受盐或溶剂化物在制备用于治疗患有炎性疾病的患者的药物中的应用。
在另外或其它方面，提供一种治疗患有炎性疾病的人或动物的方法，该方法包括给予人或动物有效量的式(I)化合物或其生理可接受盐或溶剂化物。
本发明的化合物可以配制为通过任何常规途径给药，因此本发明在其范围内还包括用于抗炎治疗的药物组合物，该组合物含有式(I)化合物或其生理可接受盐或溶剂化物，如果需要，其中同时含有一种或多种生理可接受稀释剂或载体。
本发明也提供一种制备所述药物制剂的方法，其中包括将组分混合。
本发明的化合物可以配制为譬如经口服、经颊、肠胃外、局部或直肠给药，优选局部给药至肺部，如通过气溶胶或作为干粉组合物。
口服给药用片剂和胶囊可以含有常规赋形剂，诸如粘合剂，如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨糖醇、黄芪胶、淀粉胶浆、纤维素或聚乙烯吡咯烷酮；填充剂，如乳糖、微晶纤维素、蔗糖、玉米淀粉、磷酸钙或山梨糖醇；润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸、滑石、聚乙二醇或二氧化硅；崩解剂，例如土豆淀粉、、交联羧甲基纤维素钠或淀粉乙醇酸钠；或湿润剂，如十二烷基硫酸钠。片剂可以按照所属领域的已知方法包衣。口服液体制剂可以是例如水或油性混悬液、溶液、乳液、糖浆或酏剂的形式，或可作为干燥产品提供，使用之前用水或其它适当载体配制。所述液体制剂可以含有常规添加剂，譬如助悬剂，如山梨糖醇糖浆、甲基纤维素、葡萄糖/蔗糖糖浆、明胶、羟甲基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化可食用脂肪；乳化剂，如卵磷脂、脱水山梨糖醇一油酸酯或阿拉伯胶；非水载体(可以包括可食用油)，例如杏仁油、分馏椰油、油性酯、丙二醇或乙醇；或防腐剂，例如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨酸。这些制剂也可以含有缓冲盐、矫味剂、着色剂和/或甜味剂(如甘露糖醇)，如果适当的话。
为了经颊给药，所述组合物可以采取以常规方式制备的片剂或锭剂的形式。
化合物也可以配制为栓剂，如含有常规栓剂基质，例如可可脂或其它甘油酯。
本发明的化合物也可以配制为通过快速浓注或连续输注肠胃外给药，并且可以以单位剂型存在，譬如安瓿、瓶剂、小体积输注液或预填充注射器，或含有附加防腐剂的多剂量容器。该组合物可以采取如存在于水或非水载体中的溶液、混悬液或乳液形式，并且可以含有制剂试剂，例如抗氧剂、缓冲剂、杀菌剂和/或张度调节剂。另外，活性成分可以是粉末形式，在使用之前用适当载体如灭菌无热原水。通过将灭菌粉末在无菌条件下填充到各个灭菌容器中或将灭菌溶液在无菌条件下填充到各个容器内并且冷冻干燥可以制得干燥固体剂型。
对于本发明所用的局部给药，我们包括经吹入和吸入给药。不同种类局部给药的制剂的实例包括软膏、霜剂、洗剂、散剂、阴道栓剂、喷雾剂、气溶胶、胶囊或吸入器或吹入器所用的药筒，雾化用溶液或滴剂(如滴眼剂或滴鼻剂)。
譬如，软膏和霜剂可以用水或油性基质配制，同时加入适当增稠剂和/或胶凝剂和/或溶剂。所以，所述基质譬如可包括水和/或油如液体石蜡，或植物油如花生油或蓖麻油，或溶剂如聚乙二醇。可采用的增稠剂包括软石蜡、硬脂酸铝、鲸蜡基硬脂基醇、聚乙二醇类化合物、微晶蜡和蜂蜡。
洗剂可以用水或油性基质配制，并且通常也含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、助悬剂或增稠剂。
外用的散剂可以借助于任何适当的粉末基质配制，例如滑石、乳糖或淀粉。滴剂可以用水或非水基质配制，其中也含有一种或多种分散剂、增溶剂或助悬剂。吸入用散剂组合物适宜含有乳糖。喷雾剂组合物可以配制为如水溶液或混悬液，或成为由加压包装输送的气溶胶，同时应用适当的抛射剂，如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷、1，1，1，2-四氟乙烷、二氧化碳或其它适当气体。
鼻内喷雾剂可以用水或非水载体配制，同时加入试剂如增稠剂、缓冲盐或调节pH的酸或碱、等渗调节剂或抗氧剂。
吸入器或吹入器中所用的胶囊和药筒(如明胶胶囊或药筒)，或发泡剂(如层状铝箔)可以配制为含有本发明化合物与适当粉末基质(如乳糖或淀粉)的粉状混合物。
通过喷雾吸入的溶液可以用水载体配制，同时加入试剂如酸或碱、缓冲盐、等渗调节剂或抗菌剂。它们可以经过滤或在高压釜中加热灭菌，或作为非灭菌产品提供。
本发明的药物组合物也可以与其他治疗剂合用，譬如抗炎剂(例如皮质类固醇类(如.丙酸氟替卡松、二丙酸倍氯米松、糠酸莫米松、曲安奈德或布地奈德)或NSAID类(如色苷酸钠、奈多罗米钠、PDE-4抑制剂、白三烯拮抗剂、iNOS抑制剂、类胰蛋白酶和弹性蛋白酶抑制剂、β-2整联蛋白拮抗剂和腺苷2a激动剂))或β-肾上腺素能药(例如沙美特罗、沙丁胺醇、福莫特罗、非诺特罗或特布他林及其盐)或抗感染药(如抗生素、抗病毒药)。
所以，本发明在另一方面中提供一种联合形式，其中含有式(I)化合物或其生理可接受盐或溶剂化物以及另一种治疗活性剂，如抗炎剂如皮质类固醇、NSAID、β肾上腺素能剂或抗感染药。一种药物组合物含有与长效β2肾上腺素能受体激动剂联合的式(I)化合物或其生理可接受盐或溶剂化物(例如沙美特罗或其盐或溶剂化物，如沙美特罗Xinafoate)特别令人感兴趣。
上述联合形式可以方便地以药物制剂的形式使用，这种药物制剂含有定义如上的联合形式以及生理可接受稀释剂或载体，它代表本发明的另一个方面。
上述联合形式中各组分可以顺序或同时地在单独或结合的药物制剂中给药。所属领域技术人员很容易了解已知治疗剂的适用剂量。
本发明的化合物可以方便地以例如0.001至500mg/kg体重、优选0.01至500mg/kg体重、更优选0.01至100mg/kg体重的量给药，每天1至4次。显然，精确剂量应取决于患者的年龄和情况以及给药选择的具体途径。
本发明的化合物的优越性在于，它们更加有效，显示出更高的选择性(如，其中相对于β2整联蛋白如LFA-1或VLA-5(αvβ1)而言它们选择性拮抗α4整联蛋白)，具有较少的副作用，具有更长的作用时间，当吸入给药时生物利用度较低或具有较小的全身活性，合成容易且经济，或具有其它更多的类似已知化合物所没有的理想特性。
某些中间体是新的化合物并且构成本发明的另一方。
本发明可通过参见下列实施例举例说明。
NMR光谱是在Bruker DPX400 400MHz光谱仪上进行。LC/MS系统所用液相色谱质谱(LCMS)系统如下所述A3μmABZ＋PLUS，3.3cm×4.6mm内径柱，洗脱采用溶剂A-0.01M醋酸铵水溶液＋0.1％v/v甲酸，和B-95∶5乙腈/水＋0.05％v/v甲酸，同时流量为3ml/分钟。采用以下的梯度方案100％A共0.7分钟；A＋B的混合物，梯度曲线在3.7分钟内0-100％B；保持100％B共0.9分钟；在0.2分钟内恢复到0％B。
采用正性和负性电子喷射电离。保护的测量测量Fmoc-氨基酸树脂的置换度的方法如下所述向10mg树脂中加入20％存在于DMF中的哌啶(1ml)。20℃下振摇30分钟后，过滤树脂。向50μL滤液中加入20％存在于DMF中的哌啶(0.95ml)，在302nm下用UV分光光度计测量溶液的吸光度。利用以下公式计算出置换度置换度(mmol/g)＝(吸光度×2×104)/(消光系数x以mg计的重量)中间体中间体1(2S)-2-({(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-(4-羟基苯基)丙酸甲酯向N-(叔丁氧基羰基)-L-亮氨酸(7g)在乙腈(100ml)中的溶液内于氮气氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基1)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(5.9g)和1-羟基苯并三唑(4.2g)。在20℃下搅拌30分钟后，加入L-酪氨酸甲酯(5.5g)且继续搅拌18h。将该混合物在真空中浓缩至约10ml，令残余物在1M盐酸(200ml)和乙酸乙酯(100ml)之间分配。分离各层，水相进一步用乙酸乙酯(100ml)提取。合并的有机提取液用饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)、水(2×100ml)和盐水(50ml)洗涤，硫酸钠干燥并且真空蒸发。残余物与氯仿共蒸发得到标题化合物，为白色泡沫(11.3g，98％)。LCMSRt3.11分钟；m/z 409(MH+)。中间体2(2S)-2-{[(2S)-2-氨基4-甲基戊酰基]氨基}-3-(4-羟基苯基)丙酸甲酯盐酸盐向中间体1(3.1g)在1，4-二噁烷(10ml)中的溶液内加入4M存在于1，4-二噁烷(20ml)中的氯化氢。20℃下将该溶液搅拌2小时，随后真空蒸发。残余物用甲苯(2×20ml)和乙醚(2×20ml)共蒸发，得到标题化合物，为白色固体(2.6g，98％)。LCMSRt1.98分钟；m/z309(MH+)。中间体3(2S)-3-(4-羟基苯基)-2-({(2S)-4-甲基-2-[(2-{[3-(1-哌啶基羰基)-2-萘基]氧基}乙酰基)氨基]戊酰基}氨基)丙酸甲酯向中间体44(0.45g)在乙腈(20ml)中的悬浮液内、于氮气氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.31g)和1-羟基苯并三唑(0.22g)。20℃下搅拌30分钟后加入中间体2(0.5g)，随后加入二异丙基乙胺(0.28ml)并且继续搅拌18小时。将该混合物真空浓缩，残余物在2M盐酸(50ml)和乙酸乙酯(30ml)之间分配。分离各层，水相进一步用乙酸乙酯(30ml)提取。合并的有机提取液用饱和碳酸氢钠水溶液(30ml)、水(2×30ml)和盐水(20ml)洗涤，硫酸钠干燥并且真空蒸发。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/石油醚(2∶1)洗脱，得到标题化合物，为白色泡沫(0.6g，69％)。LCMSRt3.42分钟；m/z 604(MH+)。中间体4(2S)-3-(4-羟基苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸甲酯由中间体43(0.81g)和中间体2(1.02g)进行类似制备。粗产物通过闪式柱色谱在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/环己烷(1∶1)洗脱，得到标题化合物，其为白色泡沫(1.2g，74％)。LCMSRt3.40分钟；m/z569(MH+)。中间体5(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b.d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-(4-羟基苯基)丙酸甲酯由中间体45(0.29g)和中间体2(0.5g)进行类似制备。粗产物通过闪式柱色谱在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/环己烷(1∶1)洗脱，得到白色泡沫标题化合物(0.66g，97％)。LCMSRt3.55分钟；m/z 503(MH+)。中间体6(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸甲酯向中间体5(0.59g)在二氯甲烷(5ml)中的溶液内、于氮气氛下加入4-二甲基氨基吡啶(0.18g)。将该混合物冷却至0-5℃并且加入4-硝基苯基氯甲酸酯(0.3g)。继续搅拌18小时，令该反应升至20℃。该溶液用氯仿(60ml)稀释，用1M盐酸(2×40ml)和水(40ml)洗涤，用硫酸镁干燥并且真空蒸发。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用环己烷/乙酸乙酯(3∶2)洗脱，得到标题化合物，为白色泡沫(0.36g，46％)。LCMSRt3.98分钟；m/z 668(MH+)。中间体74-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-({(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-甲氧基3-氧代丙基]苯酯向三光气(0.59g)在无水二氯甲烷(40ml)中的溶液内、于氮气氛下加入中间体1(1.87g)在无水二氯甲烷(10ml)中的溶液，随后加入二异丙基乙胺(1.2ml)。20℃下搅拌3小时后，加入中间体59(1g)，随后加入二异丙基乙胺(0.8ml)。继续搅拌18小时。随后真空中蒸发该混合物。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/环己烷(1∶1开始至5∶1)洗脱，得到标题化合物，为白色固体(1.76g，59％)。LCMSRt3.42分钟；m/z 651[M-H]-。中间体84-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶羧酸4-((2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊酰基]氨基}-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯酯盐酸盐向中间体7(1.76g)在1，4-二噁烷(10ml)中的溶液内加入4M存在于1，4-二噁烷(8ml)中的氯化氢。20℃下搅拌3小时后，真空中蒸发溶剂并且用乙醚研制残余物，得到标题化合物，为膏状固体(1.59g，100％)。LCMSRt2.50分钟；m/z 553(MH+)。中间体9(2S)-2-({(2S)-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸甲酯向中间体1(0.41g)在二氯甲烷(3ml)中的溶液内、于氮气氛下加入吡啶(1ml)。将该混合物冷却至0-5℃并且加入4-硝基苯基氯甲酸酯(0.22g)。继续搅拌18小时，令该反应升至20℃。用二氯甲烷(40ml)稀释并且用1M盐酸(50ml)洗涤。水相进一步用二氯甲烷(40ml)提取，合并的有机提取液用硫酸钠干燥并且真空中蒸发。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用石油醚/乙酸乙酯(3∶1开始，达到3∶2)洗脱，得到标题化合物，为白色固体(0.29g，50％)。LCMSRt3.39分钟；m/z 574(MH+)。中间体104-[(2，2-二环己基乙酰基)氨基]-1-哌啶羧酸4-((2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊酰基]氨基}-3-甲氧基-3-氧代丙基)苯酯盐酸盐向中间体9(0.22g)在无水二氯甲烷(4ml)中的溶液内、于氮气氛下加入中间体58(0.14g)，随后加入二异丙基乙胺(0.08ml)。20℃下搅拌4小时后，该混合物用二氯甲烷(50ml)稀释，用饱和碳酸钾水溶液(3×25ml)和1M盐酸(40ml)洗涤，硫酸钠干燥且真空中蒸发，达到膏状固体。向其中加入4M存在于1，4-二噁烷(3ml)中的氯化氢，将该混合物20℃下搅拌3小时。真空中蒸发溶剂，残余物用乙醚研制，得到标题化合物，为膏状固体(0.24g，95％)。LCMSRt3.05分钟；m/z 641(MH+)。中间体11(2S)-2-[((2S)-2-{[(苯甲酰氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(4-羟基苯基)丙酸叔丁酯向N-苄氧羰基-L-亮氨酸(8.6g)在乙腈(150ml)中的溶液内、在氮气氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(6.83g)和1-羟基苯并三唑(4.81g)。20℃下搅拌30分钟后，加入L-酪氨酸叔丁酯(7.7g)，并且连续搅拌18小时。真空中浓缩该混合物至约10nl，令残余物在1M盐酸(300ml)和乙酸乙酯(150ml)之间分配。分离各层，水相进一步用乙酸乙酯(150ml)提取。合并的有机提取液用饱和碳酸氢钠水溶液(150ml)、水(2×150ml)和盐水(100ml)洗涤，用硫酸钠干燥且真空中蒸发。残余物与氯仿共蒸发，得到标题化合物，为白色泡沫(15g，96％)。LCMSRt3.56分钟；m/z485(MH+)。中间体12(2S)-2-[((2S)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸叔丁酯向中间体11(1.36g)在二氯甲烷(15ml)中的溶液内、于氮气氛下加入4-硝基苯基氯甲酸酯(0.75g)和4-二甲基氨基吡啶(0.47g)。该混合物在20℃下搅拌18小时，随后用氯仿(50ml)稀释，用1M盐酸(2×30ml)和水(30ml)洗涤，用硫酸钠干燥和真空中蒸发。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用石油醚/乙酸乙酯(4∶1开始，达到1∶1)洗脱，得到标题化合物，为白色固体(1.34g，74％)。LCMSRt3.89分钟；m/z 650(MH+)。中间体134-吗啉羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯向中间体12(0.34g)在二氯甲烷(8ml)中的溶液内、于氮气氛下加入吗啉(0.06ml)和二异丙基乙胺(0.15ml)。该混合物在20℃下搅拌18小时，随后用氯仿(30ml)稀释，用饱和碳酸钾水溶液(3×40ml)、2M盐酸(40ml)和水(30ml)洗涤，用硫酸钠干燥和真空中蒸发。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/石油醚(3∶2)洗脱，得到标题化合物，为无色胶(0.31g，99％)。LCMSRt3.60分钟；m/z 598(MH+)。中间体13(另一种方法)4-吗啉羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[(苄氧基)羰基}氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯向三光气(2.24g)在无水二氯甲烷(50ml)中的溶液内、于氮气氛下加入中间体11(10g)在无水THF(50ml)中的溶液，随后加入二异丙基乙胺(3.94ml)。20℃下搅拌4小时后，加入吗啉(2ml)，随后加入二异丙基乙胺(3.94ml)。连续搅拌18小时，此后令混合物在1M盐酸(100ml)和乙酸乙酯(75ml)之间分配。分离各层，水相进一步用乙酸乙酯(75ml)提取。合并的有机提取液用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)、水(50ml)和盐水(30ml)洗涤，用硫酸钠干燥和真空中蒸发。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用环已烷/乙酸乙酯(3∶1开始直至1∶1)洗脱，得到标题化合物，为白色固体(6.8g，58％)。中间体144-(氨基羰基)-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[苄氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯由中间体11(9g)和异哌啶甲酰胺(isonipecotamide)(5.2g)进行类似制备。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物，为白色固体(3.52g，30％)。中间体14(另一种方法)4-(氨基羰基)-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯向中间体12(1g)在二氯甲烷(20ml)中的溶液内、于氮气氛下加入异哌啶甲酰胺(0.23g)和二异丙基乙胺(0.43ml)。20℃下将该混合物搅拌18小时，随后用氯仿(80ml)稀释，用饱和碳酸钾水溶液(3×50ml)、2M盐酸(50ml)和水(50ml)洗涤，硫酸钠干燥和真空中蒸发。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用石油醚/乙酸乙酯(3∶2)开始直至乙酸乙酯/甲醇(4∶1)洗脱，得到标题化合物，为白色固体(0.46g，47％)。LCMSRt3.47分钟；m/z 639(MH+)。中间体154-吗啉羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯向10％钯碳Degussa型E101(0.09g)中、于氮气氛下加入中间体13(0.3g)在乙醇(20ml)中的溶液，随后加入甲酸铵(0.17g)。20℃下搅拌4小时后，经Harborlite J2助滤剂垫过滤，该滤垫用乙醇(10ml)洗涤。合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发，令残余物在二氯甲烷(50ml)和1M氢氧化钠(15ml)之间分配。分离各层，有机相进一步用1M氢氧化钠(15ml)和水(15ml)洗涤，用硫酸钠干燥和真空中蒸发，得到灰色胶状标题化合物(0.1g，41％)。LCMSRt2.43分钟；m/z 464(MH+)。中间体164-(氨基羰基)-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯由中间体14(0.46g)进行类似制备。得到标题化合物，为浅黄色胶(0.36g，99％)。LCMSRt2.33分钟；m/z 505(MH+)。中间体174-乙酰基-1-哌嗪羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯向三光气(0.24g)在无水二氯甲烷(5ml)中的溶液内、与氮气氛下加入中间体11(1g)在无水THF(10ml)中的溶液，随后加入二异丙基乙胺(0.43ml)。20℃下搅拌4小时后，加入1-乙酰基哌嗪(0.32g)，随后加入二异丙基乙胺(0.43ml)。继续搅拌18小时，随后令该混合物在1M盐酸(100ml)和乙酸乙酯(75ml)之间分配。分离各层，水相进一步用乙酸乙酯(75ml)提取。合并的有机提取液用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)、水(50ml)和盐水(30ml)洗涤，硫酸钠干燥和真空中蒸发。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯开始直至乙酸乙酯/乙醇(9∶1)洗脱，得到标题化合物，为白色泡沫(1.3g，99％)。LCMSRt3.44分钟；m/z 639(MH+)。中间体184-苯甲酰基-1-哌嗪羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯向三光气(0.24g)在无水二氯甲烷(5ml)中的溶液内、于氮气氛下加入中间体11(1g)在无水THF(10ml)中的溶液，随后加入二异丙基乙胺(0.43ml)。20℃下搅拌4小时后，加入中间体56(0.78g)，随后加入二异丙基乙胺(1.15ml)。继续搅拌18小时，随后令该混合物在1M盐酸(100ml)和乙酸乙酯(75ml)之间分配。分离各层，水相进一步用乙酸乙酯(75ml)提取。合并的有机提取液用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)、水(50ml)和盐水(30ml)洗涤，用硫酸钠干燥和真空中蒸发。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1∶1开始直至2∶1)洗脱，得到标题化合物，为白色泡沫(1.02g，71％)。LCMSRt3.71分钟；m/z 701(MH+)。中间体194-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-[((2S)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯由中间体11(1.81g)和中间体55(0.91g)进行类似制备。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用二氯甲烷/甲醇(20∶1)洗脱，得到标题化合物，为白色泡沫(1.24g，47％)。LCMSRt3.63分钟；m/z707(MH+)。中间体204-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(叔丁氧基)-3氧代丙基]苯酯向10％钯碳Degussa型E101(0.27g)中、于氮气氛下加入中间体19(1.24g)在乙醇(20ml)中的溶液，随后加入甲酸铵(0.77g)。20℃下搅拌4小时后，将该混合物经Harborlite J2助滤剂垫过滤，该滤垫用乙醇(20ml)洗涤。合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发，令残余物在二氯甲烷(50ml)和1M氢氧化钠(15ml)之间分配。分离各层，有机相进一步用1M氢氧化钠(15ml)和水(15ml)洗涤，硫酸钠干燥和真空中蒸发，得到标题化合物，为白色泡沫(0.55g，54％)。LCMSRt2.63分钟；m/z 573(MH+)。中间体214-乙酰基-1-哌嗪羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯盐酸盐向10％钯碳Degussa型E101(0.4g)中、于氮气氛下加入中间体17(1.28g)在乙醇(30ml)中的溶液，随后加入甲酸铵(0.38g)。20℃下搅拌6小时后，将该混合物经Harborlite J2助滤剂垫过滤，该滤垫用乙醇(20ml)洗涤。合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发，令残余物在二氯甲烷(70ml)和1M氢氧化钠(30ml)之间分配。分离各层，水相进一步用二氯甲烷(2×50ml)提取。合并的有机提取液用硫酸钠干燥。该溶液用4M存在于1，4-二噁烷(0.55ml)中的氯化氢处理且真空中蒸发，得到标题化合物，为白色固体(1.02g，94％)LCMSRt2.46分钟；m/z 505(MH+)。中间体224-苯甲酰基-1-哌嗪羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯盐酸盐向10％钯碳Degussa型E101(0.3g)中、于氮气氛下加入中间体18(1g)在乙醇(30ml)中的溶液，随后加入甲酸铵(0.27g)。20℃下搅拌6小时后，将该混合物经Harborlite J2助滤剂垫过滤，该滤垫用乙醇(20ml)洗涤。合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发，令残余物在二氯甲烷(70ml)和1M氢氧化钠(30ml)之间分配。分离各层，水相进一步用二氯甲烷(2×50ml)提取。合并的有机提取液用硫酸钠干燥。该溶液用4M存在于1，4-二噁烷(0.4ml)中的氯化氢处理且真空中蒸发，得到标题化合物，为白色固体(0.8g，100％)LCMSRt2.72分钟；m/z 567(MH+)。中间体234-吗啉羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯盐酸盐向10％钯碳Degussa型E101(2.1g)中、于氮气氛下加入中间体13(6.8g)在乙醇(500ml)中的溶液，随后加入甲酸铵(4.1g)。20℃下搅拌17小时后，将该混合物经Harborlite J2助滤剂垫过滤，该滤垫用乙醇(50ml)洗涤。合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发，令残余物在二氯甲烷(150ml)和1M氢氧化钠(75ml)之间分配。分离各层，水相进一步用二氯甲烷(2×100ml)提取。合并的有机提取液用硫酸钠干燥。该溶液用1M存在于乙醚(13ml)中的氯化氢处理且真空中蒸发。用乙醚研制残余物，得到标题化合物，为白色固体(4.8g，87％)LCMSRt2.50分钟；m/z 464(MH+)。中间体244-(氨基羰基)-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-{[(2S)-2-氨基-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯盐酸盐向10％钯碳Degussa型E101(1.1g)中、于氮气氛下加入中间体14(3.41g)在乙醇(80ml)中的溶液，随后加入甲酸铵(2.1g)。20℃下搅拌3小时后，该混合物经Harborlite J2助滤剂垫过滤，该滤垫用乙醇(40ml)洗涤。合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发，残余物在氯仿(500ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(200ml)之间分配。分离各层，水相进一步用氯仿(2×100ml)提取。合并的有机提取液用饱和碳酸氢钠水溶液(3×100ml)和水(2×100ml)洗涤，随后用硫酸钠干燥。该溶液用4M存在于1，4-二噁烷(1.5ml)中的氯化氢处理，真空中蒸发。残余物与甲苯(2×50ml)共沸，得到标题化合物，为白色固体(2.88g，100％)。LCMSRt2.36分钟；m/z 505(MH+)。中间体25(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(4-羟基苯基)丙酸叔丁酯向10％钯碳Degussa型E101(0.63g)中、于氮气氛下加入中间体11(2g)在乙醇(20ml)中的溶液，随后加入甲酸铵(1.8g)。20℃下搅拌2小时后，该混合物经Harborlite J2助滤剂垫过滤，该滤垫用乙醇(50ml)洗涤。合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发，残余物在二氯甲烷(100ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)之间分配。分离各层，有机相进一步用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)和水(50ml)洗涤，硫酸镁干燥和真空中蒸发，得到白色固体。将其在DMF(5ml)中的溶液加入中间体46(0.879g)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.809g)和1-羟基苯并三唑(0.578g)在乙腈(10ml)中的预混溶液中，该预混溶液业已在在氮气氛和20℃下搅拌30分钟。继续搅拌18小时，该混合物用乙酸乙酯(200ml)稀释，用1M盐酸(3×50ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(3×50ml)和盐水(50ml)洗涤，用硫酸镁干燥和真空中蒸发，得到标题化合物，为白色泡沫(2.1g，94％)。LCMSRt3.83分钟；m/z 541(MH+)。中间体26(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸叔丁酯向中间体25(2.1g)在二氯甲烷(20ml)中的溶液内、于氮气氛下加入4-硝基苯基氯甲酸酯(1.1g)和4-二甲基氨基吡啶(0.69g)。将该混合物在20℃下搅拌18小时，随后用氯仿(80ml)稀释，用1M盐酸(2×50ml)和水(50ml)洗涤，用硫酸镁干燥和真空中蒸发。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用环己烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脱，得到标题化合物，为澄清油(2.65g，97％)。LCMSRt4.17分钟；m/z706(MH+)。中间体274-吗啉羧酸4-[(2S)-2-({(2S)-2-[(2-溴代乙酰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基]苯酯将中间体23(0.5g)和二异丙基乙胺(0.19ml)在二氯甲烷(10ml)中的溶液冷却至0-5℃。向其中加入溴代乙酰氯(0.09ml)，随后加入二异丙基乙胺(0.19ml)并且连续搅拌2小时。该混合物用二氯甲烷(50ml)稀释，用2M盐酸(50ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)和盐水(30ml)洗涤，用硫酸镁干燥并且真空中蒸发，得到标题化合物，为白色泡沫(0.52g，89％)，LCMSRt3.28分钟；m/z 584(MH+)。中间体284-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶羧酸4-[(2S)-2-({(2S)-2-[(2-溴代乙酰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙基]苯酯向中间体8(0.48g)在无水二氯甲烷(4ml)中的溶液内加入二异丙基乙胺(0.142ml)。将该混合物冷却至0-5℃，加入溴代乙酰氯(0.07ml)。继续搅拌1小时，令该反应升至20℃，该混合物用二氯甲烷(5ml)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)、水(10ml)和盐水(10ml)洗涤，用硫酸钠干燥和真空中蒸发，得到标题化合物，为白色固体(0.464g，85％)。LCMSRt3.20分钟；m/z 672[M-H]-中间体29经酸与Wang树脂键合的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙酸向Wang树脂(100-200目，10g)中加入(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙酸(8.5g)在DMF(45ml)中的溶液。15分钟后加入吡啶(2.4ml)，随后加入2，6-二氯苯甲酰氯(2.75ml)。将该混合物在20℃下振摇18小时。过滤树脂，用DMF(5×40ml)、二氯甲烷(5×40ml)和乙醚(5×40ml)洗涤，随后真空中干燥。置换在树脂上的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙酸的量计算出为0.52mmol/g。中间体30经酸与Wang树脂键合的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸中间体29(2.5mmol)用20％存在于DMF(15ml)中的哌啶处理，20℃下振摇30分钟。过滤树脂并且用DMF(5×20ml)洗涤。加入Fmoc-亮氨酸(2.8g)在DMF(10ml)中的溶液，随后加入苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻六氟磷酸盐(4.1g)在DMF(5ml)和二异丙基乙胺(2.8ml)中的溶液。将该混合物在20℃下振摇18小时。过滤树脂，用DMF(5×20ml)、二氯甲烷(5×20ml)和乙醚(5×20ml)洗涤，随后真空干燥，取5mg样品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)处理0.5小时，过滤树脂，滤液利用LCMS分析Rt，4.22分钟；m/z557(MH+)。中间体31经酸于Wang树脂键合的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)4-甲基戊酰基]氨基}丙酸中间体30(1mmol)用20％存在DMF(10ml)中的哌啶处理并且20℃下振摇1小时。过滤树脂并用DMF(5×10ml)洗涤。加入中间体46(0.314g)在DMF(10ml)中的溶液，随后加入苯并三唑-1-基-氧基-三吡咯烷鏻六氟磷酸盐(0.78g)在DMF(5ml)和二异丙基乙胺(0.68ml)中的溶液。将该混合物在20℃下振摇18小时。过滤树脂并且用DMF(5×10ml)、二氯甲烷(5×10ml)和乙醚(5×10ml)洗涤，随后真空干燥。取5mg样品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)处理0.5小时。过滤树脂并且滤液利用LCMS分析Rt4.27min；m/z525(MH+)。中间体32经酸与Wang树脂键合的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]丙酸由中间体30(0.97mmol)和(2-甲基苯氧基)乙酸(0.48g)进行类似制备。LCMSRt3.89分钟；m/z 483(MH+)。中间体33经酸与Wang树脂键合的(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸中间体31(1mmol)用苯基硅烷(1ml)在二氯甲烷(9ml)中的溶液处理，随后用四(三苯基膦)钯(0)(0.1g)处理。将该混合物在20℃下振摇40分钟。过滤树脂并且用二氯甲烷(5×10ml)洗涤，随后再次用苯基硅烷(1ml)在二氯甲烷(9ml)中的溶液处理，随后用四(三苯基膦)钯(0)(0.1g)处理。20℃下振摇40分钟后，过滤树脂并且用二氯甲烷(5×10ml)洗涤，随后用二异丙基乙胺(1.74ml)在1∶1二氯甲烷/THF(16ml)中的溶液处理。分次加入4-硝基苯基氯甲酸酯(2g)，将该混合物在20℃下振摇28小时。过滤树脂并且用二氯甲烷(5×10ml)和乙醚(5×10ml)洗涤，此后真空干燥。取5mg样品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)处理0.5小时，过滤树脂并且滤液利用LCMS分析Rt，4.33分钟；m/z 650(MH+)。中间体34经酸与Wang树脂键合的(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸由中间体32(0.97mmol)进行类似制备。LCMSRt3.31分钟；m/z443(MH+)。中间体35经酸与Wang树脂键合的(2S)-2-[((2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基)苯基)丙酸由中间体30(1.05mmol)进行类似制备。LCMSRt4.32分钟；m/z682(MH+)。中间体36经酸与Wang树脂键合的(2S)-2-[((2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4甲基戊酰基)氨基]-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸中间体35(1.05mmol)用1-(2-糠酰基)哌嗪(0.57g)在1∶1二氯甲烷/THF(9ml)中的溶液处理，随后用二异丙基乙胺(1.1ml)处理。在20℃下搅拌4小时后，过滤树脂并且用二氯甲烷(5×10ml)和乙醚(5×10ml)洗涤，随后真空干燥。取5mg样品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)处理0.5小时，过滤树脂并且滤液通过LCMS分析Rt，3.67分钟；m/z 723(MH+)。中间体37经酸与Wang树脂键合的(2S)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸由中间体35(1.7mmol)和中间体53(1.02g)进行类似制备。LCMSRt4.03分钟；m/z 795(MH+)。中间体38经酸与Wang树脂键合的(2S)-2-({(2S)-2-[(2-溴代乙酰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-[4({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸中间体36(1.05mmol)用20％存在于DMF(8ml)中的哌啶处理并且在20℃下振摇1小时30分钟。过滤树脂并且用DMF(5×10ml)洗涤。加入溴乙酸(0.44g)在DMF(8ml)中的溶液，随后加入1，3-二异丙基碳二亚胺(0.49ml)。将该混合物在20℃下搅拌18小时。过滤树脂并且用DMF(5×10ml)、二氯甲烷(5×10ml)和乙醚(5×10ml)洗涤，随后真空干燥。取5mg样品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)处理0.5小时，过滤树脂并且滤液通过LCMS分析Rt3.11分钟；m/z621(MH+)。中间体39经酸与Wang树脂键合的(2S)-2-({(2S)-2-[(2-溴代乙酰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸由中间体37(0.73mmol)进行类似制备。LCMSRt3.43分钟；m/z695(MH+)。中间体40经酸与Wang树脂键合的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-({(2S)-2-[(2-溴代乙酰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)丙酸中间体30(0.55mmol)用20％存在于DMF(6ml)中的哌啶处理并且在20℃下振摇1小时。过滤树脂并且用DMF(5×10ml)洗涤。加入溴代乙酸(0.23g)在DMF(3ml)中的溶液，随后加入1，3-二异丙基碳二亚胺(0.26ml)。将该混合物在20℃下振摇18小时。过滤树脂并且用DMF(5×10ml)、二氯甲烷(5×10ml)和乙醚(5×10ml)洗涤，随后真空干燥。取5mg样品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)处理0.5小时，过滤树脂并且滤液通过LCMS分析Rt3.47分钟；m/z455(MH+)。中间体41经酸与Wang树脂键合的(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸中间体40(0.55mmol)用DMF(4ml)处理。加入2-环己基苯酚(0.97g)、碳酸钾(0.76g)和碘化钠(0.82g)并且将该混合物在20℃下振摇40小时。过滤树脂并且用水(3×5ml)、DMF(5×5ml)、二氯甲烷(5×5ml)和乙醚(5×5ml)洗涤，随后真空干燥。取5mg样品用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)处理0.5小时，过滤树脂并且滤液通过LCMS分析Rt4.49分钟；m/z 551(MH+)。中间体42经酸与Wang树脂键合的(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(4-{[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}苯基)丙酸中间体41(0.55mmol)用苯基硅烷(1.35ml)在二氯甲烷(10ml)中的溶液处理，随后用四(三苯基膦)钯(0)(0.063g)处理。将该混合物在20℃下振摇40分钟。过滤树脂并且用二氯甲烷(5×10mol)洗涤，随后再次用苯基硅烷(1.35ml)在二氯甲烷(10ml)中的溶液处理，进而用四(三苯基膦)钯(0)(0.063g)处理。20℃下振摇40分钟后，过滤树脂并且用二氯甲烷(5×10ml)洗涤，此后用二异丙基乙胺(1.9ml)在1∶1二氯甲烷/THF(8ml)中的溶液处理。滴加4-硝基苯基氯甲酸酯(2.2g)并且将该混合物在20℃下振摇18小时。过滤树脂并且用二氯甲烷(5×10ml)和乙醚(5×10ml)洗涤，随后真空干燥。取5mg样品在20℃下用三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)(1ml)处理0.5小时。过滤树脂并且滤液通过LCMS分析Rt4.54分钟；m/z 676(MH+)。中间体43(2-碘代苯氧基)乙酸将溴乙酸叔丁酯(4.0ml)加入在DMF(40ml)中含有2-碘代苯酚(4.98g)和碳酸钾(6.3g)的混悬液中。将该混合物在20℃和氮气氛下搅拌1小时，并且随后在乙酸乙酯(150ml)和水(100ml)之间分配。水层用新的乙酸乙酯(2×80ml)提取，合并的有机提取液用盐水(100ml)洗涤，硫酸镁干燥和真空中蒸发，得到澄清液体(7.56g)。将该液体溶解在二氯甲烷(20ml)和三氟乙酸(8ml)中并且将该溶液在20℃下搅拌2小时。真空中蒸发溶剂，残余物用环己烷/乙酸乙酯(5∶1)的混合物研制，得到标题化合物，为白色固体(5.19g，82％)。LCMSRt3.02分钟；m/z 277[M-H]-。中间体44{[3-(1-哌啶基羰基)-2-萘基]氧基}乙酸由3-(1-哌啶基羰基)-2-萘酚(Griffiths和Hawkins，1977)((4.98g)进行类似制备。中间体酯通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/环己烷(1∶1)洗脱，分离标题化合物，为白色固体(3.2g，53％).LCMSRt3.74分钟；m/z 314(MH+)。中间体45二苯并[b，d]呋喃-4-羧酸在-78℃和氮气氛下，将1.6M正丁基锂在己烷(18.5ml)中的溶液滴加到二苯并呋喃(5.0g)在无水THF(25ml)中的搅拌溶液内。令所得混悬液上升至20℃，在此温度下搅拌3小时。随后冷却至-78℃，在氮气氛下，加入过量固体二氧化碳在乙醚(250ml)中的混合物。将所得白色混悬液在20℃下放置1小时，随后用2M氢氧化钠(500ml)稀释。水提取液用乙醚(3×200ml)洗涤，用6M盐酸酸化至pH1并且用乙酸乙酯(3×200ml)提取。合并的有机提取液用盐水(50ml)洗涤，用硫酸镁干燥和真空中蒸发，得到标题化合物，为白色固体(3.64g，58％)。LCMSRt5.06分钟；m/z 213(MH+)。中间体46[2-(叔丁基)苯氧基]乙酸将溴乙酸甲酯(3.0ml)加入在DMF(250ml)中含有2-叔丁基苯酚(5.0ml)和碳酸钾(10.6g)的混悬液中。将该混合物在20℃和氮气氛下搅拌20小时，随后真空中蒸发为浆液，令其在乙醚(200ml)和1M盐酸(100ml)之间分配。水层用更多的乙醚(100ml)提取，合并的有机提取液用盐水(100ml)洗涤，硫酸镁干燥和真空中蒸发。粗原料通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/环己烷(1∶9)洗脱，得到澄清液体(6.64g)。将该液体溶解在甲醇(100ml)和2M氢氧化钠(100ml)中，在20℃下将该溶液搅拌0.5小时。真空中蒸发甲醇，含水残余物用乙醚(50ml)洗涤，用6M盐酸酸化至pH1并且用乙酸乙酯(2×200ml)提取。合并的有机提取液用盐水(50ml)洗涤，硫酸镁干燥和真空中蒸发，得到标题化合物，为白色结晶块(5.86g，95％)。LCMSRt3.78分钟；m/z 207[M-H]-中间体474-(2-甲氧基-2-氧代乙氧基)苯甲酸将溴乙酸甲酯(1.6ml)加入在乙腈(60ml)中含有4-羟基苯甲酸叔丁酯(Shah等人，1992)(3.03g)、碘化钠(2.55g)和碳酸钾(4.2g)中的混悬液内。将该混合物在90℃和氮气氛下搅拌17小时，随后冷却至20℃。令其在水(50ml)和乙酸乙酯(100ml)之间分配，有机提取液用水(2×80ml)和盐水(60ml)洗涤，以硫酸镁干燥和真空中蒸发。粗品通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1∶9)至乙酸乙酯/石油醚(1∶2)的梯度洗脱，得到浅红色胶(3.85g)。将该产物溶解在二氯甲烷(50ml)中，加入三氟乙酸(15ml)，20℃下将该溶液搅拌3小时。真空蒸发溶剂，得到标题化合物，为白色固体(2.97g，91％)。LCMSRt2.45分钟；m/z 211(MH+)。中间体48[4-(1-哌啶基羰基)苯氧基]乙酸向中间体47(2.95g)在乙腈(55ml)中的混悬液内加入二异丙基乙胺(3.5ml)，随后加入(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基铵(uronium)四氟硼酸盐(4.5g)。所得溶液在20℃和氮气氛下搅拌10分钟，随后加入哌啶(1.4ml)，将该混合物在20℃和氮气氛下搅拌18小时，随后真空中蒸发。残余物在乙酸乙酯(100ml)和8％碳酸氢钠水溶液(65ml)之间分配，有机提取液用2M盐酸(50ml)和盐水(100ml)洗涤，用硫酸镁干燥和真空中蒸发，得到橙色油(4.05g)。将该油溶解在甲醇(100ml)中，加入1M氢氧化钠(30ml)，将该混合物在20℃下搅拌3小时。随后用1M盐酸酸化至pH 1并且冷却至5℃，通过过滤收集沉淀并且真空干燥，得到标题化合物，为白色固体(3.03g，80％)。LCMSRt4.17分钟；m/z 264(MH+)。中间体49(2-苯甲酰基苯氧基)乙酸将溴乙酸甲酯(3.0ml)加入在乙腈(35ml)中含有2-羟基二苯酮(2.3g)、碳酸钾(3.2g)和碘化钠(2.33g)的混悬液内。将该混合物在90℃和氮气氛下搅拌18小时并且令其冷却至20℃。随后在乙酸乙酯(80ml)和水(60ml)之间分配，有机提取液用水(2×60ml)和盐水(60ml)洗涤，以硫酸镁干燥和真空中蒸发。粗原料通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1∶1)洗脱，得到浅黄色油(3.05g)。将该油溶解在甲醇(100mol)和1M氢氧化钠(35ml)中，将该溶液在20℃下搅拌18小时。该溶液用2M盐酸酸化至pH 1并且用乙酸乙酯(2×80ml)提取。合并的有机提取液用水(2×70ml)洗涤，硫酸镁干燥和真空中蒸发。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1∶1)至乙酸乙酯/甲醇(4∶1)的梯度洗脱，得到标题化合物，为浅黄胶(1.62g，57％)。LCMSRt3.41分钟；m/z 257(MH+)。中间体50[(1-溴-2-萘基)氧基]乙酸由1-溴-2-萘酚(10.55g)进行类似制备。中间体酯通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/环己烷(1∶3)洗脱，分离标题化合物，为浅棕色固体(11.36g，89％).LCMSRtm/z 281[M-H]+中间体51[4-(氨基羰基)苯氧基]乙酸将4-甲酰基苯氧基乙酸(1.86g)和盐酸羟胺(1.07g)在98％甲酸(50ml)中的溶液在回流下搅拌2小时，随后在冰浴中冷却。通过过滤收集沉淀，用水洗涤并且真空干燥，得到白色固体(1.1g)。在回流和氮气氛下将该固体和氢氧化钾(2.3g)在叔丁醇(50ml)中的混合物搅拌4小时，随后令其冷却。将该混合物用水(100ml)稀释，用乙酸乙酯(50ml)洗涤并且用6M盐酸酸化至pH2。通过过滤收集沉淀，用水洗涤和真空干燥，得到标题化合物，为白色固体(1.06g，53％)。LCMSRt1.90min；m/z 196(MH+)中间体524-氨基-1-哌啶甲酸叔丁酯在10分钟内将三乙酰氧基硼氢化钠(30.2g)分次滴加到冰冷的1-(叔丁氧基羰基)-4-哌啶酮(20.07g)、二苄基胺(19.7g)和乙酸(5ml)在二氯甲烷(500ml)中的混合物内并且在20℃下连续搅拌16小时。将该溶液小心地用2M氢氧化钠(400ml)处理并且分离有机层，用硫酸镁干燥并且真空蒸发。残余物在己烷/乙醚(2∶1)(250ml)中研制得到白色固体(18.75g)。将该固体溶解在THF(50ml)、乙醇(50ml)和2M盐酸(8ml)的混合物中，将该溶液加入20％存在于乙醇(100ml)中的碳载氢氧化钯(5.0g)混悬液内。在20℃和1个大气压下氢化该混合物17小时，随后经Harborlite J2助滤剂垫过滤并且用乙醇(100ml)洗涤该滤垫。合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发，将残余物溶解在水(50ml)中并且用2M氢氧化钠调节至pH9，真空中蒸发。将残余物过滤到乙醇(30ml)和氯仿(70ml)的混合物中，通过过滤除去不溶物。将母液真空中蒸发，得到标题化合物，为无色油(10.04g，49％)。LCMSRt1.81分钟；m/z 201(MH+)。中间体532-(4-氯苯基)-N-(4-哌啶基)乙酰胺盐酸盐向4-氯苯基乙酸(2.55g)在乙腈(100ml)中的溶液内、于氮气氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(3.16g)和1-羟基苯并三唑(2.22g)。在20℃下搅拌10分钟后，加入中间体52(3g)在乙腈(20ml)中的溶液，继续搅拌18小时。该混合物在真空中蒸发，令残余物在水(100ml)和乙酸乙酯(100ml)之间分配。有机相用饱和碳酸氢钠水溶液(2×80ml)和水(50ml)洗涤，用硫酸镁干燥和真空中蒸发，得到浅黄色固体。将该固体在乙醚中研制，得到白色固体(4.15g)。将一部分该固体(2.36g)溶解在1，4-二噁烷(100ml)中，加入4M存在于1，4-二噁烷(12ml)中的氯化氢。该溶液在20℃下搅拌18小时，随后加入另一部分4M存在于1，4-二噁烷(8ml)中的氯化氢。继续在20℃下搅拌18小时，将该溶液真空蒸发，得到白色固体。将该固体在乙醚中研制，得到标题化合物，为白色固体(1.9g，77％)。LCMSRt1.89分钟；m/z 253(MH+)。中间体54N-(4-氟苄基)-4-哌啶甲酰胺盐酸盐向1-叔丁氧基羰基哌啶-4-甲酸(3.61g)在乙腈中(25ml)的溶液内、于氮气氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(3.21g)和1-羟基苯并三唑(2.29g)。在20℃下搅拌20分钟后，加入4-氟苄胺(2.0ml)并且继续搅拌3小时。真空中浓缩该混合物，令残余物在1M盐酸(50ml)和乙酸乙酯(200ml)之间分配。分离各层，有机相用1M盐酸(3×50ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(3×50ml)和盐水(50ml)洗涤，用硫酸镁干燥和真空中蒸发。粗原料通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用环己烷/乙酸乙酯(1∶1)至乙酸乙酯的梯度洗脱，得到无色结晶(5.02g)。将一部分该固体(4.96g)溶解在1，4-二噁烷(20ml)中，加入4M存在于1，4-二噁烷(15ml)中的氯化氢。将该混合物在20℃下搅拌2小时，通过过滤收集沉淀，用1，4-二噁烷和乙醚洗涤，真空干燥，得到标题化合物，为白色吸湿固体(3.54g，83％)。LCMSRt1.52分钟；m/z 237(MH+)。中间体551-(4-哌啶基羰基)哌啶盐酸盐由1-叔丁氧基羰基哌啶-4-甲酸(3.68g)和哌啶(1.6ml)进行类似制备。中间体酰胺通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用二氯甲烷/甲醇(10∶1)洗脱，分离标题化合物，为白色固体(3.26g，93％)。MSm/z197(MH+)，TLCRf0.1[二氯甲烷/乙醇/880氨(50∶8∶1)用碘代铂酸显色]。中间体561-苯甲酰基哌嗪由苯甲酸(5.02g)和1-(叔丁氧基羰基)哌嗪(7.66g)进行类似制备，分离标题化合物，为白色固体(7.7g，82％)。LCMSRt0.51分钟；m/z 191(MH+)。中间体572-环己基-N-(4-哌啶基)乙酰胺在20℃和氮气氛下将4-氨基-1-苄基哌啶(5.0ml)、环己烷乙酸(3.79g)和(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基铵四氟硼酸盐(8.35g)在乙腈(60ml)中的溶液搅拌18小时，随后真空蒸发为浆液。令其在乙酸乙酯(200ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(200ml)之间分配。有机提取液用饱和碳酸氢钠水溶液(2×100ml)和盐水(100ml)洗涤，用硫酸镁干燥和真空中蒸发，得到灰白色固体。由环己烷结晶得到膏状晶体(6.24g)。将一份该固体(3.8g)溶解在乙醇(100ml)中并且用10％钯碳Degussa型E101(1.2g)和甲酸铵(2.24g)处理。该混合物在20℃和氮气氛下搅拌2.5小时，随后经Harborlite J2助滤剂垫过滤并且用乙醇(100ml)洗涤该滤垫。合并的滤液和洗涤液真空蒸发，残余物在氯仿(100ml)和0.5M氢氧化钾(10ml)之间分配。分离各层，水相用新鲜氯仿(2×100ml)提取，合并的有机提取液用硫酸镁干燥和真空中蒸发，得到白色固体。将其用乙醚研制，得到标题化合物，为白色固体(2.01g，60％)。LCMSRt1.93分钟；m/z 225(MH+)。中间体582，2-二环己基-N-(4-哌啶基)乙酰胺将在DMF(250ml)中含有二环己基乙酸(4.75g)、二异丙基乙胺(7.5ml)和苯并三唑-1-基-氧基-三吡咯烷鏻六氟磷酸盐(11g)的溶液在20℃下搅拌10分钟，随后在10分钟内滴加4-氨基-1-苄基哌啶(4.3ml)。将该混合物在20℃下搅拌18小时，随后用乙酸乙酯(200ml)稀释，通过过滤收集沉淀，用乙酸乙酯(60ml)和水(50ml)洗涤，真空干燥，得到白色固体(5.91g)。将一份该固体(3g)悬浮在乙醇(300ml)中，用10％钯碳Degussa型E101(1.2g)和甲酸铵(2.68g)处理。在20℃和氮气氛下将该混合物搅拌4小时。随后经Harborlite J2助滤剂垫过滤并且用乙醇(50ml)洗涤该滤垫。合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发，残余物在氯仿(200ml)和0.5M氢氧化钠(150ml)之间分配。分离各层，水相用新鲜氯仿(100ml)提取，合并的有机提取液用硫酸镁干燥和真空中蒸发，得到白色固体。将其在冰冷的乙醚中研制，得到标题化合物，为白色固体(1.8，78％)。LCMSRt2.69分钟；m/z307(MH+)。中间体592-苯基-N-(4-哌啶基)乙酰胺向苯基乙酸(3.4g)在乙腈(100ml)中的溶液内、于氮气氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(5.28g)和1-羟基苯并三唑(3.72g)，在20℃下搅拌30分钟后，加入4-氨基-1-苄基哌啶(5.1ml)，连续搅拌18小时。真空浓缩该混合物。残余物在2M盐酸(100ml)和乙酸乙酯(75ml)之间分配。分离各层，水相再用乙酸乙酯(75ml)洗涤，用固体碳酸钾碱化，用二氯甲烷(2×100ml)提取。合并的有机提取液用水(2×100ml)和盐水(50ml)洗涤，用硫酸钠干燥和真空中蒸发，得到白色固体(4.8g)。将一份该固体(4.7g)溶解在乙醇(150ml)中，用10％钯碳Degussa型E101(1.5g)和甲酸铵(2.88g)处理。混合物在20℃和氮气氛下搅拌4小时，随后经Harborlite J2助滤剂垫过滤并且用乙醇(150ml)洗涤该滤垫。合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发，令残余物在氯仿(l00ml)和0.5M氢氧化钠(50ml)之间分配。分离各层，水相用新鲜氯仿(2×100ml)提取，合并的有机提取液用硫酸钠干燥和真空中蒸发，得到标题化合物，为白色固体(2.4g，45％)。MSm/z 219(MH+)，TLCRf，0.16[二氯甲烷/甲醇/880氨(40∶10∶1)用碘显色]。
将200g树脂用20％存在于DMF(1.21)中的哌啶处理并且在20℃下搅拌3小时。过滤树脂并且用DMF(3×11)、甲醇(3×11)和二氯甲烷(3×11)洗涤。向其中加入Fmoc-亮氨酸(233.3g)、1，3-二异丙基碳二亚胺(84.7g)和1-羟基苯并三唑(89.3g)在NMP(1.21)中的溶液。将该混合物在20℃下搅拌18小时。过滤树脂并且用NMP(3×11)、甲醇(3×11)和二氯甲烷(3×11)洗涤。
树脂用20％存在于DMF(1.21)中的哌啶处理并且在20℃下搅拌3小时。过滤树脂并且用DMF(3×11)、甲醇(3×11)和二氯甲烷(3×11)洗涤。
向其中加入中间体46(68.8g)、1，3-二异丙基碳二亚胺(42.3g)和1-羟基苯并三唑(44.7g)在NMP(1.21)中的溶液。将该混合物在20℃下搅拌18小时。过滤树脂并且用DMF(3×11)、甲醇(3×11)和二氯甲烷(3×11)洗涤。
向树脂中加入二氯甲烷(500ml)、苯基硅烷(160ml)和四(三苯基膦)钯(0)(34g)在二氯甲烷(500ml)中的浆液。将该混合物在20℃下搅拌2小时。过滤树脂并且用二氯甲烷(3×11)、乙醚(3×11)和二氯甲烷(6×11)洗涤。
树脂在二氯甲烷(800ml)中的浆液用二异丙基乙胺(120ml)处理，随后用4-硝基苯基氯甲酸酯(131g)分三份每隔10分钟进行处理。i将该混合物在20℃下搅拌2小时。过滤树脂，用二氯甲烷(3×11)、乙醚(3×11)和DMF(3×11)洗涤。树脂在DMF(800ml)中的浆液用吗啉(56.5ml)在DMF(200ml)中的溶液处理。将该混合物在20℃下搅拌2小时。过滤树脂并且用DMF(3×11)、乙醚(3×11)和二氯甲烷(3×11)洗涤。
树脂在二氯甲烷(400ml)中的浆液用10％存在于二氯甲烷(800ml)中的TFA处理。在20℃下搅拌30分钟后，过滤树脂并且用二氯甲烷(2×500ml)洗涤。合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发。残余物用乙醚(750ml)研制，过滤所得白色固体。向其中加入乙腈(500ml)，将该混合物加热回流。过滤热溶液，令滤液冷却至20℃。过滤该混合物，得到标题化合物，为白色固体(50.9g)。实施例25(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]-3-{4-{[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸向(2-甲基苯氧基)乙酸(0.332g)在乙腈(40ml)中的溶液内、于氮气氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.383g)和1-羟基苯并三唑(0.27g)。在20℃下搅拌30分钟后，加入中间体23(1g)，随后加入二异丙基乙胺(0.35ml)，继续搅拌18小时。令该混合物在1M盐酸(50ml)和乙酸乙酯(75ml)之间分配。分离各层，有机相用饱和碳酸氢钠水溶液(40ml)和水(50ml)洗涤，用硫酸钠干燥并且真空蒸发得到白色泡沫。向该泡沫在二氯甲烷(20ml)中的溶液内加入三氟乙酸(20ml)和水(1ml)。在20℃下搅拌4小时后，真空中蒸发溶剂，残余物用乙醚研制，得到标题化合物，为白色固体(0.895g，80％).LCMSRt3.31分钟；m/z 556(MH+)。实施例26(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基)氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸由中间体43(0.06g)和中间体24(0.1g)进行类似制备。得到标题化合物，为白色固体(0.07g，56％)。LCMSRt3.33分钟；m/z 709(MH+)。实施例27(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]丙酸向(2-甲基苯氧基)乙酸(0.345g)在乙腈(50ml)中的溶液内、于氮气氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.4g)和1-羟基苯并三唑(0.3g)。在20℃下搅拌30分钟后加入中间体24(1g)，随后加入二异丙基乙胺(0.35ml)，继续搅拌18小时。将该混合物真空浓缩，令残余物在1M盐酸(100ml)和乙酸乙酯(300ml)之间分配。分离各层，有机相用1M盐酸(2×100ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(3×100ml)和盐水(100ml)洗涤，用硫酸镁干燥和真空中蒸发，得到白色固体。向该固体在氯仿(5ml)中的溶液内加入三氟乙酸(5ml)和水(1ml)。在20℃下搅拌3小时后，真空中蒸发溶剂，残余物与甲苯(2×20ml)共沸，随后用乙醚研制，得到标题化合物，为白色固体(1.06g，96％).LCMSRt3.20分钟；m/z 597(MH+)。在水中的溶解度0.01mg/ml。NMR(DMSO-d6)δH12.75(brs，1H)，8.33(d，1H)，7.81(d，1H)，7.32(br s，1H)，7.21(d，2H)，7.15(d，1H)，7.11(t，1H)，6.98(d，2H)，6.79-6.89(m’s，3H)，(AB体系，2H)，4.39-4.46(m’s，2H)，3.95-4.14(m’s，2H)，2.80-3.10(m’s，4H)，2.33(m，1H)，2.20(s，3H)，1.75(m，2H)，1.40-1.60(m’s，5H)，0.82-0.87(m’s，6H)。实施例27(另一种方法)(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基氧基)苯基]-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]丙酸向Wang树脂(50g)加入(2S)-3-[4-(烯丙氧基)苯基]-2-[(叔丁氧基羰基)氨基]丙酸(115.8g)和1-羟基苯并三唑(48.6g)在DMF(475ml)中的溶液。15分钟后，加入1，3-二异丙基碳二亚胺(56.5ml)，并且将该混合物在45℃下搅拌24小时。过滤树脂并且用DMF(3×360ml)、甲醇(3×360ml)和二氯甲烷(3×700ml)洗涤。向树脂在二氯甲烷(644ml)中的浆液中加入吡啶(14.7ml)。加入乙酸酐(26.9ml)，在20℃下将该混合物搅拌12小时。过滤树脂并且用二氯甲烷(3×550ml)、甲醇(3×370ml)和二氯甲烷(3×550ml)洗涤。
将20g树脂在二氯甲烷(100ml)中的浆液冷却至2-5℃并且用苯酚(20g)在二氯甲烷(80ml)中的溶液处理。滴加氯三甲基硅烷(20ml)，将该混合物在2-5℃下搅拌6小时。过滤树脂并且用二氯甲烷(3×200ml)、甲醇(3×200ml)、含10％水的DMF(2×200ml)、含10％二异丙基乙胺的DMF(3×200ml)、DMF(200ml)、甲醇(3×200ml)和二氯甲烷(3×200ml)洗涤。
树脂在DMF(55ml)中的浆液用Fmoc-亮氨酸(32.7g)和1-羟基苯并三唑(12.5g)在DMF(85ml)中的溶液处理。15分钟后，加入1，3-二异丙基碳二亚胺(19.3ml)，将该混合物在20℃下搅拌15小时，过滤该树脂并且用DMF(3×150ml)、甲醇(3×150ml)和二氯甲烷(3×150ml)洗涤。
树脂用20％存在于DMF(180ml)中的哌啶处理并且在20℃下搅拌1小时。过滤树脂并且用DMF(3×150ml)、二氯甲烷(3×150ml)、DMF(3×150ml)和二氯甲烷(3×150ml)洗涤。向该树脂在DMF(50ml)中的浆液内加入(2-甲基苯氧基)乙酸(17.9g)和1-羟基苯并三唑(14.6g)在DMF(100ml)中的溶液。5分钟后加入1，3-二异丙基碳二亚胺(16.9ml)，将该混合物在20℃下搅拌65小时。过滤树脂并且用DMF(2×150ml)、甲醇(3×150ml)和二氯甲烷(3×150ml)洗涤。
树脂在二氯甲烷(60ml)中的浆液用四(三苯基膦)钯(0)(5.21g)在二氯甲烷(140ml)中的溶液处理，随后用吗啉(13ml)处理。在20℃下搅拌该混合物2小时，随后过滤树脂并且用二氯甲烷(7×200ml)洗涤。
树脂在二氯甲烷(160ml)中的浆液用二异丙基乙胺(12.4ml)处理，随后用4-硝基苯基氯甲酸酯(24.8g)分三份间隔5分钟进行处理。
将该混合物在20℃下搅拌1小时。过滤树脂并且用二氯甲烷(3×200ml)洗涤。树脂用异哌啶甲酰胺(15.8g)在DMF(180ml)中的溶液处理，将该混合物在20℃下搅拌1.5小时。过滤该树脂并且用DMF(4×200ml)和二氯甲烷(2×200ml)洗涤。
树脂用50％存在于二氯甲烷(200ml)中的TFA处理。20℃下搅拌1小时后，过滤树脂并且用二氯甲烷(5×200ml)处理。合并的滤液和洗涤液在真空中蒸发。残余物与甲苯(2×100ml)共蒸发，用乙醚(50ml)研制，过滤所得白色固体。向其中加入乙腈(150ml)，将该混合物加热回流。令所得混悬液冷却至20℃并且搅拌18小时。过滤该混合物，得到标题化合物，为白色固体(4.9g)。实施例27A(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]丙酸钾盐将实施例27(10g)在甲醇(150ml)的混悬液加热回流得到澄清溶液。向其中加入碳酸钾(1.169)在水(7.5ml)中的溶液。加热回流2分钟后，真空蒸发溶剂得到松脆泡沫。向其中加入乙腈(100ml)，并且将该混合物加热回流，在此期间泡沫破碎并且开始结晶。10分钟后，令该混合物冷却至20℃，随后在减压下过滤，用乙腈(25ml)和乙醚(50ml)洗涤，得到标题化合物，为白色固体(10.65g，100％)。可以肯定分离出的产物是其一水合物。在水中的溶解度＞250mg/ml。NMR(DMSO-d6)δH8.27(d，1H)，7.42(d，1H)，7.37(d，1H)，7.04-7.16(m’s，4H)，6.78-6.88(m’s，5H)，4.44-4.59(AB体系，2H)，4.21(m，1H).(br m’s，2H)，3.87(m，1H)，2.80-3.10(m’s，4H)，2.34(m，1H)，2.20(s，3H)，1.75(m，2H)，1.41-1.60(m’s 5H)，0.86(d，3H)，0.80(d，3H)。实施例28(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)丙酸向中间体45(0.438g)在乙腈(50ml)中的溶液内、于氮气氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.4g)和1-羟基苯并三唑(0.29g)。在20℃下搅拌30分钟后，加入中间体24(1g)，随后加入二异丙基乙胺(0.35ml)，继续搅拌18小时。将该混合物真空浓缩，残余物在1M盐酸(100ml)和乙酸乙酯(300ml)之间分配。分离各层，有机相用1M盐酸(2×100ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(3×100ml)和盐水(100ml)洗涤，用硫酸镁干燥并且真空蒸发得到白色固体。向该固体在氯仿(5ml)中的溶液内加入三氟乙酸(5ml)和水(1ml)。在20℃下搅拌3小时后，真空蒸发溶剂，残余物与甲苯(2×20ml)共沸腾，然后用乙醚研制，得到标题化合物，为白色泡沫(0.95g，80％)。LCMSRt3.48分钟；m/z 643(MH+)。实施例29(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸向中间体46(0.1g)在乙腈(5ml)中的溶液内、于氮气氛下加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.09g)和1-羟基苯并三唑(0.063g)。在20℃下搅拌30分钟后加入中间体20(0.18g)，继续搅拌18小时。令混合物在水(20ml)和乙酸乙酯(20ml)之间分配。分离各层，有机相用饱和碳酸氢钠水溶液(2×30ml)、水(30ml)和盐水(30ml)洗涤，用硫酸钠干燥和真空中蒸发。粗原料通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用二氯甲烷/甲醇(20∶1)洗脱得到澄清油。向该产物在二氯甲烷(8ml)中的溶液内加入三氟乙酸(2ml)。在20℃下搅拌2小时后，真空中蒸发溶剂，粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用二氯甲烷/甲醇/乙酸/水(240∶15∶3∶2)洗脱，得到标题化合物，为白色泡沫(0.08g，36％)。LCMSRt4.07分钟；m/z 707(MH+)。实施例30(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]3-[4-({[4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸由(2-甲基苯氧基)乙酸(0.09g)和中间体20(0.3g)进行类似制备。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用二氯甲烷/甲醇/乙酸/水(240∶15∶3∶2)洗脱，得到标题化合物，为白色泡沫(0.116g，34％)。LCMSRt3.56分钟；m/z 665(MH+)。实施例31(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-[4-({[4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸由中间体45(0.1g)和中间体20(0.176g)进行类似制备。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用二氯甲烷/甲醇/乙酸/水(180∶15∶3∶2)洗脱，得到标题化合物，为白色泡沫(0.075g，35％)。LCMSRt4.09分钟；m/z 711(MH+)。实施例32(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[(1-溴-2-萘基)氧基}乙烯基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸由中间体50(0.124g)和中间体20(0.168g)进行类似制备。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用二氯甲烷/甲醇/乙酸/水(200∶15∶3∶2)洗脱，得到标题化合物，为白色泡沫(0.055g，24％)。LCMSRt4.19分钟；m/z 779(MH+)。实施例33(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}丙酸向中间体26(0.47g)在二氯甲烷(8ml)中的溶液内、于氮气氛下加入异哌啶甲酰胺(0.106g)和二异丙基乙胺(0.2ml)。在20℃下将该混合物搅拌18小时，随后用氯仿(100ml)稀释，用饱和碳酸钾水溶液(3×50ml)、1M盐酸(3×50ml)和水(50ml)洗涤，用硫酸镁干燥和真空中蒸发，得到白色泡沫。向该泡沫在氯仿(3ml)中的溶液内加入三氟乙酸(3ml)。在20℃下搅拌4小时后，真空中蒸发溶剂，残余物用乙醚研制，得到标题化合物，为白色固体(0.223g，52％)。LCMSRt3.35分钟；m/z 639(MH+)。实施例34(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(4-{[(4-{[(4-氟苄基)氨基]羰基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸由中间体26(0.312g)和中间体54(0.181g)进行类似制备。得到标题化合物，为白色固体(0.187g，57％)。LCMSRt3.71分钟；m/z 747(MH+)。实施例35(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2.4-二氯苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸向无水碳酸钾(0.057g)和碘化钠(0.051g)在无水DMF(1ml)中的混悬液加入2，4-二氯苯酚(0.166g)，随后加入中间体27(0.2g)。在20℃下将该混合物搅拌18小时，随后在饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)和乙酸乙酯(10ml)之间分配。分离各层，有机相进一步用饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)和盐水(10ml)洗涤，用硫酸镁干燥和真空中蒸发。粗原料通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/环己烷(1∶1)洗脱，得到白色泡沫。向该泡沫在二氯甲烷(2ml)中的溶液加入三氟乙酸(2ml)。在20℃下搅拌2小时后，真空中蒸发溶剂，残余物用乙醚研制，得到标题化合物，为白色固体(0.146g，70％)。LCMSRt3.70分钟；m/z 610(MH+)。实施例36(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-苯甲酰基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸由2-羟基二苯酮(0.2g)和中间体27(0.2g)进行类似制备。得到标题化合物，为浅黄色泡沫(0.057g，26％)。LCMSRt3.60分钟；m/z 646(MH+)。实施例37(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-丙基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸由2-丙基苯酚(0.14ml)和中间体27(0.2g)进行类似制备。得到标题化合物，为白色固体(0.141g，70％)。LCMSRt3.71分钟；m/z584(MH+)。实施例38(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[(1-溴-2-萘基)氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸由1-溴-2-萘酚(0.23g)和中间体27(0.2g)进行类似制备。得到标题化合物，为白色固体(0.11g，48％)。LCMSRt3.91分钟；m/z 670(MH+)。实施例39(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸向无水碳酸钾(0.1g)和碘化钠(0.06g)在无水DMF(1ml)中的混悬液中加入2-环己基苯酚(0.12g)，随后加入中间体27(0.2g)。将该混合物在20℃下搅拌18小时，随后在饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)和乙酸乙酯(10mol)之间分配。分离各层，有机相进一步用饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)和盐水(10ml)洗涤，用硫酸镁干燥和真空中蒸发。粗原料通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/环己烷(1∶1)洗脱，得到白色泡沫。向该泡沫在二氯甲烷(3ml)中的溶液内加入三氟乙酸(3ml)。在20℃下搅拌2小时后，真空中蒸发溶剂，残余物与甲苯共沸，随后用乙醚研制，得到标题化合物，为白色固体(0.118g，55％)。LCMSRt4.16分钟；m/z 624(MH+)。实施例40(2S)-2-[((2S)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸向中间体13(0.19g)在氯仿(2ml)中的溶液内加入三氟乙酸(2ml)。在20℃下搅拌4小时，真空蒸发溶剂，残余物用乙醚研制，得到标题化合物，为白色固体(0.156g，90％).LCMSRt3.22分钟；m/z 542(MH+)。实施例41(2S)-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸中间体38(0.26mmol)用DMF(4ml)处理。加入2-碘代苯酚(0.57g)、碳酸钾(0.36g)和碘化钠(0.39g)，在20℃下振摇该混合物。填装树脂，用水(2×5ml)、DMF(5×5ml)和二氯甲烷(5×5ml)洗涤，随后用1∶1三氟乙酸/二氯甲烷(4ml)处理。30分钟后，过滤树脂，滤液真空蒸发。残余物与甲苯(5ml)共沸，随后用乙醚研制。粗产物自乙腈中结晶，得到标题化合物，为白色固体(0.043g)。LCMSRt3.50分钟；m/z 761(MH+)。实施例42(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸中间体38(0.26mmol)用DMF(4ml)处理。加入2-叔丁基苯酚(0.4ml)、碳酸钾(0.36g)和碘化钠(0.39g)，将该混合物在20℃下搅拌16小时。过滤树脂，用水(2×5ml)、DMF(5×5ml)和二氯甲烷(5×5ml)洗涤，随后用1∶1三氟乙酸/二氯甲烷(4ml)处理。30分钟后，过滤树脂，滤液在真空中干燥。残余物与甲苯(5ml)共沸，随后用乙醚研制。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶1)洗脱，得到标题化合物，为白色固体(0.04g)。LCMSRt3.63分钟；m/z 691(MH+)。实施例43(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基)氧基)苯基]丙酸由中间体38(0.26mmol)和2-环己基苯酚(0.46g)进行类似制备。粗产物用含有反相硅胶的固相提取柱纯化，用氯仿/甲醇梯度(由98∶2增加至80∶20)洗脱，得到标题化合物，为膏状固体(0.037g)。LCMSRt3.83分钟；m/z 717(MH+)。实施例44(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[(1-溴-2-萘基)氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸由中间体38(0.26mmol)和1-溴-2-萘酚(0.58g)进行类似制备。粗产物由乙腈结晶，得到标题化合物，为膏状无色固体(0.064g)。LCMSRt3.69分钟；m/z 763(MH+)。实施例45(2S)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸由中间体39(0.29mmol)和2-环己基苯酚(0.48g)进行类似制备。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶0.5)洗脱，得到标题化合物，为白色固体(0.073g)。LCMSRt4.13分钟；m/z 789(MH+)。实施例46(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-苯甲酰基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸由中间体39(0.29mmol)和2-羟基二苯酮(0.55g)进行类似制备。粗产物通过闪式柱层析在硅胶上纯化，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶0.5)洗脱，得到标题化合物，为白色固体(0.065g)。LCMSRt3.75分钟；m/z 811(MH+)。实施例47(2S)-3-(4-{[(4-{(2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸用20％哌啶的DMF(5ml)溶液处理中间体37(0.27mmol)，并在20℃振动1小时。过滤树脂并用DMF(5×5ml)洗涤。加入中间体43(0.154g)的DMF(3ml)溶液，随后加入六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(0.285g)的DMF(2ml)溶液和二异丙基乙胺(0.26ml)。在20℃下振动混合物18小时。过滤树脂，用DMF(5×5ml)和二氯甲烷(5×5ml)洗涤，然后用1∶1的三氟乙酸/二氯甲烷(5ml)处理。30分钟后，过滤树脂，真空蒸发滤液。粗产物用闪计硅胶柱色谱法提纯，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶0.5)洗脱，得到白色固体标题化合物(0.083g)。LCMSRt3.76分钟；m/z 833(MH+)。实施例48(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸该化合物可类似地由中间体37(0.27mmol)和中间体46(0.115g)制得。粗产物用闪式硅胶柱色谱法提纯，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶0.5)洗脱，得到白色固体标题化合物(0.107g)。LCMSRt3.93分钟；m/z763(MH+)。实施例49(2S)-3-(4{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)丙酸该化合物可类似地由中间体37(0.27mmol)和中间体45(0.117g)制得。粗产物用闪式硅胶柱色谱法提纯，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶0.5)洗脱，得到白色固体标题化合物(0.056g)。LCMSRt3.80分钟；m/z765[M-H]-。实施例50(2S)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-4-甲基-2-[(2-{[3-(1-哌啶基羰基)-2-萘基]氧基}乙酰基)氨基]戊酰基}氨基)丙酸该化合物可类似地由中间体37(0.27mmol)和中间体44(0.173g)制得。粗产物用认式硅胶柱色谱法提纯，用氯仿/甲醇/乙酸(95∶5∶0.5)洗脱，得到白色固体标题化合物(0.062g)。LCMSRt3.71分钟；m/z 868(MH+)。实施例51(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-{4-[({4-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸用1∶1二氯甲烷/THF(3ml)处理中间体33(0.23mmol)。加入中间体59(0.105g)，随后加入二异丙基乙胺(0.16ml)。在20℃下摇动18小时后，过滤树脂，用二氯甲烷(4×5ml)和乙醚(3×5ml)洗涤，然后真空干燥。LCMS表明，一些碳酸4-硝基苯酯已水解成苯酚，因此，用1∶1二氯甲烷/THF(3ml)、二异丙基乙胺(0.2ml)和氯甲酸4-硝基苯酯(0.23g)处理树脂。在20℃振动18小时后，过滤树脂，用二氯甲烷(4×5ml)洗涤，然后用1∶1二氯甲烷/THF(3ml)、中间体59(0.07g)和二异丙基乙胺(0.12ml)处理。在20℃振动18小时后，过滤树脂，用二氯甲烷(4×5ml)洗涤，然后用1∶1三氟乙酸/二氯甲烷(3ml)处理。30分钟后，过滤树脂，真空蒸发滤液。将残余物与二氯甲烷共蒸发，随后与乙醚共蒸发，得到灰白色固体标题化合物(0.083g)。LCMSRt3.99分钟；m/z 729(MH+)。实施例52(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-{4-[({4-[(2-环己基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸该化合物可类似地由中间体33(0.23mmol)和中间体57(0.106g)制得。得到灰白色固体标题化合物(0.073g)。LCMSRt4.27分钟；m/z 735(MH+)。实施例53(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-{4-[({4-[(2，2-二环己基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸所述化合物可类似地由中间体33(0.25mmol)和中间体58(0.144g)制得。得到灰白色固体标题化合物(0.105g)。LCMSRt4.63分钟；m/z 817(MH+)。实施例54(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]-3-{4-[({4-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸所述化合物可类似地由中间体34(0.3mmol)和中间体59(0.196g)制得。粗产物用闪式硅胶柱色谱法提纯，用二氯甲烷/甲醇/乙酸/水(240∶15∶3∶2)洗脱，得到浅黄色泡沫状标题化合物(0.091g)。LCMSRt3.49分钟；m/z 687(MH+)。实施例55(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[({4-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸用中间体59(0.178g)的1∶1二氯甲烷/THF(2ml)溶液处理中间体42(0.27mmol)，随后用二异丙基乙胺(0.95ml)处理。在20℃振动2小时后，过滤树脂，用二氯甲烷(5×5ml)洗涤，然后用1∶1三氟乙酸/二氯甲烷(3ml)处理。30分钟后，过滤树脂，真空蒸发滤液。用乙醚研磨残余物，得到灰白色固体标题化合物(0.074g)。LCMSRt4.04分钟；m/z 755(MH+)。实施例56(2S)-3-{4-[({4-[(2-环己基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}-2-[((2S)-2-{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸所述化合物可类似地由中间体42(0.27mmol)和中间体57(0.18g)制得。得到灰白色固体标题化合物(0.102g)。LCMSRt4.22分钟；m/z 761(MH+)。生物学数据将上述实施例的化合物按试验(1)，Jurkat粘着试验进行试验，结果如下
*SEM n次实验的平均标准偏差实施例16、17、20、21、23、24、27和28的化合物按试验(2)，CD3/VCAM-1共同刺激的T细胞增殖试验进行试验，结果如下
实施例16、17、20、21、23、24、27和28的化合物还按试验(3)，豚鼠肺嗜曙红细胞浸润和过度反应性的抑制试验进行试验(在抗原攻击之前0.5小时和之后6小时给予气管内的剂量)，结果如下
实施例16、17、20、21、23、24、27和28的化合物还按试验(4)，RPMI 8866/MAdCAM-1粘着试验进行试验，结果如下
*SEM n次试验的平均标准偏差缩写WSCDI1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐PyBop六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基-三吡咯烷鏻DIC 1，3-二异丙基碳化二亚胺HOBT 1-羟基苯并三唑Boc 叔丁氧基羰基Fmoc 9-芴基甲氧基羰基Cbz 苄氧羰基DIPEA二异丙基乙胺DCM 二氯甲烷DMF 二甲基甲酰胺THF 四氢呋喃NMP 1-甲基-2-吡咯烷酮参考文献Baron，J.L.等，(1994).J.Clin.Invest.93，1700-1708.Danahay等，(1997).Br.J.Pharmacol.120(2)，289-297.Ferguson，T.A等，(1991).Proc.Natl.Acad.Sci.USA88，8072-8076.Griffiths，J.and Hawkins，C.(1977).J.Appl.Chem.Biotechnol.27(10)，558-564.Lobb，R.R.and Hemler，M.E.(1994).J.Clin.Invest.94，1722-1728.Podolsky，D.K.等，(1993).J.Clin.Invest.92，372-380.Sanjar，S.，McCabe，P.J.，Fattah，D.，Humbles，A.A.and Pole，S.M.(1992).Am.Rev.Respir.Dis.145，A40.Shah，S.等，(1992).J.Med.Chem.35(21)，3745-3754.Wahl，S.M.等，(1994).J.Clin.Invest.94，655-662.
在说明书和权利要求书中，除非上下文需要，否则术语“包括”应理解为包括规定的整数或步骤，但并不排除任何其它整数或步骤。
权利要求
1.下式I的化合物和其盐和溶剂化物 其中R1和R2独立地表示(i)-C1-6烷基、-C3-8环烷基或-C1-3烷基C3-8环烷基，或上述基团中烷基或环烷基被一个或多个卤素、-CN、硝基、羟基或-OC1-6烷基取代的基团；(ii)-(CH2)eAr1或-(CH2)eOAr1；或NR1R2一起表示吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、硫代吗啉基、吗啉基或吖庚因基，或表示与苯环稠合的这些基团，任意选择性地被一个或多个-(CO)n(CH2)tAr1、-(CO)nC1-6烷基Ar1Ar2、-(CO)nC1-6烷基、-(CH2)rOH、-(CH2)rO(CH2)pOH、-(CH2)rOC1-6烷基、-O(CH2)tAr1、-(CH2)rSO2Ar1、哌啶-1-基、-(CH2)tCONR8R9、-NR10(CO)n(CH2)tAr1、-NR10(CO)nC1-3烷基C3-6环烷基、-NR10(CO)nC1-6烷基二C3-6环烷基、-CONR10(CH2)tAr1、卤素、-NHSO2C1-6烷基、-SO2NR10R11、-SO2C1-6烷基或-SO2Ar2取代；R3表示-C1-6烷基NHC(＝NH)NH2、-C2-6链烯基NHC(＝NH)NH2、-C2-6炔基NHC(＝NH)NH2、-C1-6烷基N14R18、-(CH2)hCONR14R18、-(CH2)hCOC1-6烷基、-(CH2)dCHNR18CONR20R21、-(CH2)mNR18CONR14R18、-(CH2)dNR18Ar3、-(CH2)dCONR18Ar3、-(CH2)hCOOR18、-(CH2)cAr3、-O(CH2)cAr3，-(CH2)dCO(CH2)sAr3或-(CH2)dOAr3；或R3表示-(CH2)c-2，4-咪唑烷二酮、-(CH2)c(哌啶-4-基)、-(CH2)c(哌啶-3-基)、-(CH2)c(哌啶-2-基)、-(CH2)c(吗啉-3-基)或-(CH2)c(吗啉-2-基)，氮上任意选择性地被-(CO)fC1-6烷基、-(CO)f(CH2)cAr2或-C(＝NH)NH2取代；或R3表示任意选择性被-C1-6烷基或卤素取代的-(CH2)z氧芴；或R3表示-(CH2)c-噻吨-9-酮；或R4表示氢、-C1-6烷基、-C1-3烷基C3-6环烷基、-(CH2)qAr2、-C1-4烷基-X-R7、-C1-4烷基SO2C1-4烷基、-C1-6烷基NR12R13或-C1-6烷基NR12COC1-6烷基；R5代表氢，或R4R5与相连的碳原子一起构成C5-7环烷基环；R6表示氢或-C1-6烷基，或R6和R4与同它们分别相连的N和C原子一起构成吡咯烷环；R7表示氢、-(CH2)wNR12R13、-(CH2)uAr2或-(CH2)wNR12COC1-6烷基；R8、R9、R16和R17分别表示氢、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-3烷基C3-6环烷基、-C2-6链烯基，或NR8R9或NR16R17一起表示吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或被-C1-6烷基、-CO苯基或-SO2甲基N-取代的哌嗪基；R10、R11、R12、R13、R15、R18、R20和R21独立地表示氢或-C1-6烷基；R14、R19和R22独立地表示氢、-C1-6烷基、-C3-6环烷基或-(CH2)xAr4或NR14R18或NR15R22一起表示吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或N-C1-6烷基哌嗪基；Ar1表示苯基或含有1至3个选自O、N或S的杂原子的5或6元杂环芳香环，它们任意选择性地被一个或多个卤素、C1-6烷基、羟基、-OC1-6烷基、CF3、硝基、-Ar2或-OAr2取代；Ar2表示任意选择性地被一个或多个卤素、-C1-6烷基、羟基、-OC1-6烷基、-CF3或硝基取代的苯基；Ar3表示苯基，含有1至3个选自O、N或S杂原子的5或6元杂环芳香环，或表示与苯环稠合的这些基团，它们任意选择性地被一个或多个-CO(CH2)gAr4、-(CH2)yAr4、-(CH2)yCOAr4、-(CO)aC1-6烷基、-(CO)aC2-6链烯基、-(CO)aC2-6炔基、-(CO)aC3-8环烷基、-(CO)aC1-6卤代烷基、卤素、-COCH2CN、-(CH2)bNR16R17、-(CH2)bNHC(＝NH)NH2、-CYNR16(CO)aR17、-(CH2)bNR15COR19、-(CH2)bCONR15R22、-(CH2)bNR15CONR15R22、-(CH2)bCONR15(CH2)jNR15R22、-(CH2)bSO2NR15R22、-(CH2)bSO2NR15COAr2、-(CH2)bNR15SO2R19、-SO2R19、-SOR19、-(CH2)zOH、-COOR15、-CHO、-OC1-10烷基、-O(CH2)jNR15R22、-O(CH2)jNHC(＝NH)NH2、-O(CH2)bCONR16R17、-O(CH2)kCOOR15、-O(CH2)jOAr2、-O(CH2)bAr2、3-苯基-2-吡唑啉-5-酮或4，5-二氢-3(2H)-哒嗪酮基取代；Ar4表示苯基或含有1至3个选自O、N或S杂原子的5或6元杂环芳香环，它们任意选择性地被一个或多个卤素、-C1-6烷基、羟基、-OC1-6烷基、CF3、硝基或-CONH2取代；X和Y独立地表示O或S；a，f，k，s和n独立地表示0或1；b，c，r，x，y和z独立地表示0-2的整数；d，g和u独立地表示1或2；e，h，q和w独立地表示1-3的整数；j和p独立地表示2至4的整数；m独立地表示0至4的整数；t独立地表示0至3的整数。
2.根据权利要求1的化合物，其中R4表示-C1-6烷基，R5代表氢，或R4R5与相连的碳原子一起构成环己基环，并且R6表示氢或甲基。
3.根据权利要求2的化合物，其中R4表示-C1-6烷基，R5和R6代表氢。
4.根据权利要求3的化合物，其中R4表示-CH2CHMe2，R5和R6代表氢。
5.根据权利要求1-4中任一权利要求的化合物，其中NR1R2一起表示哌啶基、哌嗪基、硫代吗啉基、吗啉基或1，2，3，4-四氢异喹啉，它们任意选择性地被-(CO)n(CH2)rAr1、-(CO)nC1-6烷基、-(CH2)tCONR8R9、-NR10(CO)n(CH2)rAr1、-NR10(CO)nC1-3烷基C3-6环烷基、-NR10(CO)nC1-6烷基二C3-6环烷基、-(CH2)rOC1-6烷基、-(CH2)rO-(CH2)pOH、哌啶-1-基、-(CH2)rOH或-CONR10(CH2)rAr1取代。
6.根据权利要求5的化合物，其中NR1R2一起表示任意选择性地被-(CO)nC1-6烷基N-取代的吗啉基或哌嗪基，被-(CO)n(CH2)rAr1N-取代的哌嗪基，被-NR10(CO)n(CH2)rAr1取代的哌啶基或被-(CH2)tCONR8R9取代的哌啶基。
7.根据权利要求1-6中任一权利要求的化合物，其中R3表示-(CH2)c-2，4-咪唑烷二酮-3-基、-(CH2)c-噻吨-9-酮-3-基、-(CH2)cAr3、-O(CH2)cAr3、-(CH2)dOAr3或-(CH2)z氧芴。
8.根据权利要求7的化合物，其中R3表示-OCH2Ar3、-CH2OAr3或氧芴。
9.根据权利要求8的化合物，其中R3表示-CH2OAr3。
10.根据权利要求1-9中任一权利要求的化合物，其中R4和R5具有下式(Ia)的立体化学取向。
11.式(I)的化合物，选自(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-苯甲酰基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[({4-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-({(2S)-4-甲基-2-[(2-{[3-(1-哌啶基羰基)-2-萘基]氧基}乙酰基)氨基]戊酰基}氨基)-3-{4-[({4-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-{4-[({4-[(2，2-二环己基乙酰基)氨基-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}-2-{[(2S)-4-甲基-2-({2-[4-(1-哌啶基羰基)苯氧基]乙酰基}氨基)戊酰基]氨基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-4-甲基-2-({2-[4-(1-哌啶基羰基)苯氧基]乙酰基}氨基)戊酰基]氨基}-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-{[(2S)-4-甲基-2-({2-[4-(1-哌啶基羰基)苯氧基]乙酰基}氨基)戊酰基]氨基}丙酸；(2S)-3-{4-[({4-[(2-环己基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}-2-[((2S)-2{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-{4-[({4-[(2，2-二环己基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-{4-[({4-[(2-苯基乙酰基)-1-哌嗪基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[({4-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-乙酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2，4-二氯苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[(4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]-3-[4-({[4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-[4-({[4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[(1-溴-2-萘基)氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4-(1-哌啶基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(4-{[(4-{[(4-氟苄基)氨基]羰基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2，4-二氯苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-苯甲酰基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-丙基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[(1-溴-2-萘基)氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[(苄氧基)羰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[(1-溴-2-萘基)氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-苯甲酰基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-{(2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-{[2-(4-氯苯基)乙酰基]氨基}-1-哌啶基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-4-甲基-2-[(2-{[3-(1-哌啶基羰基)-2-萘基]氧基}乙酰基)氨基]戊酰基}氨基)丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基)氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-{4-[({4-[(2-环己基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-{4-[({4-[(2，2-二环己基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]-3-{4-[({4-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-2{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[({4-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-{4-[({4-[(2-环己基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}-2-[((2S)-2-{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；和其盐和溶剂化物。
12.式(I)的化合物，选自(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-碘代苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-乙酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-2-{[2-(2-环己基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]-3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-{4-[({4-[(2-苯基乙酰基)氨基]-1-哌啶基}羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-{[(2S)-2-({2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-乙酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)-3-[4-({[4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基]羰基}氧基)苯基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-(4-{[(4-苯甲酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)丙酸；和其盐和溶剂化物。
13.式(I)的化合物，选自(2S)-3-(4-{[(4-乙酰基-1-哌嗪基)羰基]氧基}苯基)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-({(2S)-2-[(二苯并[b，d]呋喃-4-基羰基)氨基]-4-甲基戊酰基}氨基)丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-{[(2S)-2({2-[2-(叔丁基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}丙酸；(2S)-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]3-{4-[(4-吗啉基羰基)氧基]苯基}丙酸；(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-2-{[2-(2-苯甲酰基苯氧基)乙酰基]氨基}-4-甲基戊酰基)氨基]丙酸；(2S)-2-{[(2S)-2-({2-[4-(氨基羰基)苯氧基]乙酰基}氨基)-4-甲基戊酰基]氨基}-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]丙酸；和其盐和溶剂化物。
14.式(I)的化合物，其为(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]丙酸或其盐或溶剂化物。
15.根据权利要求14的式(I)化合物，其为(2S)-3-[4-({[4-(氨基羰基)-1-哌啶基]羰基}氧基)苯基]-2-[((2S)-4-甲基-2-{[2-(2-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}戊酰基)氨基]丙酸的钾盐或其溶剂化物。
16.含有权利要求1-15中任一权利要求定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物和一种或多种药学上可接受的稀释剂或载体的药物组合物。
17.含有权利要求1-15中任一权利要求定义的式(I)化合物或其生理可接受盐或溶剂化物和长效β2肾上腺素能受体激动剂的药物组合物。
18.权利要求1-15中任一权利要求定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物用作药物。
19.权利要求1-15中任一权利要求定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗炎性疾病的药物中的用途。
20.一种治疗或预防诸如哮喘的炎性疾病的方法，包括给患者施用有效量的权利要求1-15中任一权利要求定义的式(I)化合物或其生理可接受盐或溶剂化物。
21.一种制备权利要求1-20中任一权利要求定义的式(I)化合物的方法，包括(a)水解式(II)的羧酸酯 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6如权利要求1-10中的定义，R是能够形成羧酸酯的基团；或(b)被保护的式(I)化合物脱保护。
22.式(II)的化合物， 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6如权利要求1-10中的定义，R是能够形成羧酸酯的基团。
23.式(VI)的化合物， 其中P1表示Boc，R4、R5和R6如权利要求1-4和10中的定义，R表示能够形成羧酸酯的基团。
24.式(VII)的化合物， 其中P1表示Boc，R1、R2、R4、R5和R6如权利要求1-6和10中的定义，R表示能够形成羧酸酯的基团。
25.式(VIII)的化合物， 其中R1、R2、R4、R5和R6如权利要求1-6和10中的定义，HX是氢卤酸，R表示能够形成羧酸酯的基团。
26.式(XIII)的化合物， 其中R4、R5和R6如权利要求1-4和10中的定义，R’表示羟基官能化的聚苯乙烯树脂。
27.式(XIV)的化合物， 其中R3、R5、R5和R6如权利要求1-4和7-10中的定义，R’表示羟基官能化的聚苯乙烯树脂。
28.式(XXI)的化合物， 其中R1、R2、R4、R5和R6和d如权利要求1-6和10中的定义，R’表示羟基官能化的聚苯乙烯树脂，并且Hal表示卤素。
全文摘要
本发明提供了新的式(Ⅰ)化合物,其中R
文档编号C07K5/065GK1330637SQ99814654
公开日2002年1月9日 申请日期1999年12月16日 优先权日1998年12月18日
发明者D·R·阿穆, D·布朗, M·S·康格雷维, P·M·戈雷, D·V·S·格林, S·霍尔曼, T·I·M·杰克, S·P·凯林, A·M·马森, K·莫里斯, N·G·拉姆斯登, P·瓦德 申请人:葛兰素集团有限公司