一种人工关节软骨材料及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种人工关节软骨材料，涉及水凝胶软材料化学修饰领域，是用氧化石墨烯和羟基磷灰石修饰聚丙烯酰胺-海藻酸钠水凝胶，并采用自由基聚合反应制备得到的PAM-ALG-GO-HA复合水凝胶。其制备是：在预先均匀分散的GO溶液中逐渐加入针状纳米HA颗粒形成混合水溶液，并加入丙烯酰胺单体、ALG单体以及合成PAM-ALG水凝胶的相关反应剂，采用自由基聚合反应制备PAM-ALG-GO-HA复合水凝胶。本发明充分利用GO纳米片本身的二维结构和表面具有的官能团及HA优异的生物活性对PAM-ALG水凝胶进行化学修饰，有效地提高了PAM-ALG水凝胶的力学性能和生物活性，扩大了PAM-ALG水凝胶的应用范围，具有明确的科学意义和巨大的应用价值。
【专利说明】一种人工关节软骨材料及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种水凝胶软材料化学修饰方法，尤其涉及一种新型人工关节软骨材料PAM-ALG-G0-HA的制备方法。
【背景技术】
[0002]随着仿生学与新材料领域的交叉发展，仿生人体结构制备性能优异的新材料研究日益受到重视。人体膝关节表面覆盖的一层2~7mm厚的光滑、有弹性的组织-关节软骨，能承受人一生中周而复始的各种高负荷的压力与冲击，自然寿命可高达70~80年之久，并可以使关节自由活动，同时可以吸收人体活动时振动所产生的能量，起到缓冲和保护关节的作用。而目前人工膝关节置换材料的“金标准”是钴基合金和超高分子量聚乙烯，这种标准仅用硬的超高分子量聚乙烯作为假体关节接触面间的材料，一方面不能有效地分散关节在运动中产生的应力，会造成植入假体松动和脱位；另一方面，长期临床观察显示，超高分子量聚乙烯材料在长期服役过程中会和周围金属合金摩擦从而产生磨屑，最终人工关节的晚期磨损会非常严重。这些失效现象与当前人工关节设计没有仿生人体关节的天然结构，没有设计关节软骨等缺陷有很大的关系，所以制备新型人工关节软骨材料显得尤为必要和紧迫。
[0003]PAM-ALG新型水凝胶材料以其自身类似于天然软骨的显微孔状结构、高的吸水性和弹性、良好的生物相容性和一定的自我修复功能等特性有望在人工软骨、人工肌肉以及柔性机器人制造等领域获得应用。但是据测算，在人的日常走路运动中，膝关节处软骨承载的应力是人体体重的1.2~7.2倍，髋关节处软骨承载的应力是人体体重的2.5~5.8倍。在承受如此高的应力下，这种软材料作为人工关节软骨置换材料，其力学性能还不能满足在人体正常运动活动中对关节软骨承受高应力的要求。其次，这种软材料作为人工肌肉等其他人工软组织置换材料，尽管本身具有强的生物相容性但是因其生物活性差，不能与周围组织整合。所以，有必要根据其具体的应用环境对PAM-ALG水凝胶作进一步的改进。
【发明内容】
[0004]针对上述现有技术，本发明提供一种人工关节软骨材料及其制备方法，采用氧化石墨烯和羟基磷灰石对聚丙烯酰胺-海藻酸钠水凝胶进行化学修饰，充分发挥水凝胶类似于天然关节软骨的特点，用具有优异力学性能的GO纳米片和良好生物活性的HA对PAM-ALG水凝胶进行化学修饰，有效地提高了 PAM-ALG水凝胶的力学性能和生物活性。
[0005]为了解决上述技术问题，本发明一种人工关节软骨材料，其特征在于，用氧化石墨烯和羟基磷灰石修饰聚丙烯酰胺-海藻酸钠水凝胶，并采用自由基聚合反应制备得到的聚丙烯酰胺-海藻酸钠-氧化石墨烯-羟基磷灰石复合水凝胶。
[0006]本发明一种人工关节软骨材料的制备方法，包括以下步骤:
[0007]配制氧化石墨烯纳米片水溶液，超声处理，使氧化石墨烯纳米片溶液温度保持在10-50°C范围；[0008]将颗粒度为IO-1OOOnm的针状纳米羟基磷灰石颗粒均匀分散于氧化石墨烯纳米片水溶液中，混合过程中，水溶液温度范围控制在10-80°C，均匀混合后，得到羟基磷灰石和氧化石墨烯稳定的混合水溶液；
[0009]在无氧保护环境下，在上述混合水溶液中依次加入自由基聚合反应合成聚丙烯酰胺和海藻酸钠水凝胶的原材料，经过20-90min，在30~70°C温度下通过自由基聚合反应，从而得到聚丙烯酰胺-海藻酸钠-氧化石墨烯-羟基磷灰石复合水凝胶。
[0010]进一步讲，本发明中，聚丙烯酰胺-海藻酸钠-氧化石墨烯-羟基磷灰石复合水凝胶中丙烯酰胺单体:海藻酸钠单体:氧化石墨烯:羟基磷灰石的质量比为500:(40-70):(1-5):(5-35)。
[0011]与现有技术相比，本发明的有益效果是:
[0012]本发明充分利用氧化石墨烯(GO)纳米片本身的二维结构和表面具有的官能团及羟基磷灰石(HA)优异的生物活性对聚丙烯酰胺-海藻酸钠(PAM-ALG)水凝胶进行化学修饰，有效地提高了 PAM-ALG水凝胶的力学性能和生物活性，扩大了 PAM-ALG水凝胶的应用范围，具有明确的科学意义和巨大的应用价值。
【专利附图】
【附图说明】
[0013]图1是本发明实施例1中PAM-ALG水凝胶及PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶(c和d)的显微形貌图；其中a和b为PAM-ALG水凝胶的显微形貌图，c和d为PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶的显微形 貌图；
[0014]图2 是本发明实施例1 中 GO，HA, PAM-ALG 水凝胶，PAM-ALG-HA 及 PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶的红外光谱图；
[0015]图3是本发明实施例1中PAM-ALG水凝胶及PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶的压缩试验应力-应变图。
【具体实施方式】
[0016]本发明一种人工关节软骨材料，是用氧化石墨烯和羟基磷灰石修饰聚丙烯酰胺-海藻酸钠水凝胶，并采用自由基聚合反应制备得到的聚丙烯酰胺-海藻酸钠-氧化石墨烯-羟基磷灰石复合水凝胶，其中，丙烯酰胺单体:海藻酸钠单体:氧化石墨烯:羟基磷灰石的质量比为500:(40-70):(1-5): (5-35)。根据GO 二维结构具有巨大比表面积为水凝胶的合成提供了很多接枝点的特点，利用GO上的羧基官能团与水凝胶中的氨基官能团发生脱水缩合反应，实现GO与水凝胶的交联反应提高其力学性能。并在水凝胶中引入HA复合修饰进一步提高水凝胶的生物活性。
[0017]本发明一种人工关节软骨材料的制备方法，包括以下步骤:
[0018]配制氧化石墨烯纳米片水溶液，
[0019]将颗粒度为IO-1OOOnm的针状纳米羟基磷灰石颗粒均匀分散于氧化石墨烯纳米片水溶液中，得到羟基磷灰石和氧化石墨烯稳定的混合水溶液；
[0020]在无氧保护环境下，在上述混合水溶液中依次加入自由基聚合反应合成聚丙烯酰胺和海藻酸钠水凝胶的原材料，经过20-90min，在30~70°C温度下通过自由基聚合反应，从而得到聚丙烯酰胺-海藻酸钠-氧化石墨烯-羟基磷灰石复合水凝胶。[0021]所述无氧保护环境采用的无氧保护性气体以与胶体溶液无反应为准，可选择氮气、氩气等常用保护性气体；依次加入合成PAM和ALG水凝胶的原材料，包括:单体1:丙烯酰胺；引发剂:过硫酸铵；共价键交联剂:甲叉双丙烯酰胺；催化剂:N，N，N’，N’，-四甲基二乙酰胺；离子键交联剂:无水氯化钙；单体2:海藻酸钠；脱水剂:碳化二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺。其中，丙烯酰胺在无氧保护环境下，引发剂过硫酸铵产生初级自由基引发丙烯酰胺和共价交联剂发生交联反应。与此同时，海藻酸钠ALG和二价阳离子Ca2+会形成离子交联反应。当两种单体同时存在时，PAM链构成的网格还会与ALG链构成的网格发生脱水缩合反应形成共价键交联而紧密地结合在一起。同时，一方面由于GO本身具有二维结构，即纵向厚度为几个到几十个纳米之间而横向长度为纳米级到微米级之间，这种巨大的比表面积为水凝胶的合成提供了很多的接枝点。另一方面，GO上羧基官能团与PAM上的氨基官能团发生脱水缩合反应，增加PAM-ALG水凝胶的网格交联度从而进一步增强复合水凝胶的力学性能。
[0022]以下通具体实施例讲述本发明的具体制备过程。本发明提供实施例是为了准确理解，绝不是限制本发明。本领域的技术人员在本发明启示下，在不脱离本发明宗旨的前提下做出的各种替换、变化和修改等，均属于本发明保护范围。
[0023]实施例1:
[0024]I)将Hmnmers法制备的氧化石墨烯GO纳米片水溶液充分超声I小时。
[0025]2)在上述浓度为2mg/ml的15ml GO纳米片水溶液中机械共混5%的HA，并超声振荡30min，保证HA均匀分散于GO纳米片水溶液中。
[0026]3)在上述GO和HA混合溶液中，在高纯氮气的保护环境下，依次加入自由基聚合反应合成PAM-ALG水凝胶的原材料，，即单体1:丙烯酰胺5g ;引发剂:过硫酸铵0.015g ；共价键交联剂:甲叉双丙烯酰·胺0.0031g ;催化剂:N，N，N’，N’，-四甲基二乙酰胺16 μ L ;离子键交联剂:无水氯化韩0.0661g ;单体2:海藻酸钠0.5g ;脱水剂:碳化二亚胺0.04g和N-羟基琥珀酰亚胺0.02g。经过60min，在50°C温度下通过自由基聚合反应，制备得到PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶。
[0027]如图1所示水凝胶及PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶的显微形貌图。从图1 (a)和(b)中可以发现，水凝胶的显微形貌呈现血管状的三维多孔网状结构，孔径在几个微米左右。这种结构与天然人体关节软骨的显微形貌相似，多孔的网格使得组织间液在其相互贯通的孔洞之间自由流动，这样就会分散外界运动对关节产生的压力，这种显微结构对于关节软骨的润滑、减震和膨胀功能至关重要。PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶的显微形貌(图1c和图1d)所示，通过向PAM-ALG水凝胶中引入无机增强相GO和HA，水凝胶硬化，在PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶被冷冻干燥的过程中，硬的水凝胶网格阻止了 HA晶体的生长，因此在图1c中能够清晰地看到有一层柳絮状的薄层紧密地依附在高分子水凝胶基体的网格边缘。综上所述，水凝胶及PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶的显微形貌呈现出显微多孔网格状，且网格分布较均匀。
[0028]图2为GO，HA，水凝胶，PAM-ALG-HA及PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶的红外光谱图。从图上可以发现，GO和HA分别如图标识相应的特征峰位，其中在水凝胶的红外光谱谱图中1263.1OcnT1峰位对应仲胺键中的C-N键的伸缩振动峰，这表明水凝胶中的两种单体网格PAM和ALG以化学键的形式结合。在PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶的红外光谱图中1418.59CHT1峰位对应酰胺键中C-N键的伸缩振动峰，这表明GO和水凝胶网格中的单体PAM产生了化学交联反应。
[0029]图3为PAM-ALG复合GO和HA前后水凝胶的压缩试验应力-应变图。从图上可以看出，添加GO和HA后，曲线的斜率即压缩弹性模量大大升高，所以复合水凝胶具有更强的力学性能。
[0030]实施例2:
[0031]I)将Brodie法制备的氧化石墨烯GO纳米片水溶液充分超声1.5小时。
[0032]2)在上述浓度为0.5mg/ml的20ml GO纳米片水溶液中机械共混3%的HA，并超声振荡40min，保证HA均匀分散于GO纳米片水溶液中。
[0033]3)在上述GO和HA混合溶液中，在高纯氩气的保护环境下，依次加入自由基聚合反应合成PAM-ALG水凝胶的原材料，，即单体1:丙烯酰胺；引发剂:过硫酸铵0.015g ;共价键交联剂:甲叉双丙烯酰胺0.003Ig ;催化剂:N, N，N，，N，，-四甲基二乙酰胺16 μ L ;离子键交联剂:无水氯化钙0.0661g ;单体2:海藻酸钠0.6g ;脱水剂:碳化二亚胺0.04g和N-羟基琥珀酰亚胺0.02g。经过40min，在60°C温度下通过自由基聚合反应，制备得到PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶。
[0034]实施例3:
[0035]I)将Staudenmaier法制备的氧化石墨烯GO纳米片水溶液充分超声2小时。
[0036]2)在上述浓度为2mg/ml的25ml GO纳米片水溶液中机械共混5%的HA，并超声振荡30min，保证HA均匀分散于GO纳米片水溶液中。
[0037]3)在上述GO和HA混合溶液中，在高纯氮气的保护环境下，依次加入自由基聚合反应合成PAM-ALG水凝胶的原材料，，即单体1:丙烯酰胺；引发剂:过硫酸铵0.015g ;共价键交联剂:甲叉双丙烯酰胺0.003Ig ;催化剂:N, N，N，，N，，-四甲基二乙酰胺16 μ L ;离子键交联剂:无水氯化钙0.0661g ;单体2:海藻酸钠0.5g ;脱水剂:碳化二亚胺0.04g和N-羟基琥珀酰亚胺0.02g。经过80min，在40°C温度下通过自由基聚合反应，制备得到PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶。
[0038]实施例4:
[0039]I)将Hmnmers法制备的氧化石墨烯GO纳米片水溶液充分超声I时。
[0040]2)在上述浓度为2mg/ml的15ml GO纳米片水溶液中机械共混7%的HA，并超声振荡40min，保证HA均匀分散于GO纳米片水溶液中。
[0041]3)在上述GO和HA混合溶液中，在高纯氩气的保护环境下，依次加入自由基聚合反应合成PAM-ALG水凝胶的原材料，，即单体1:丙烯酰胺；引发剂:过硫酸铵0.015g ;共价键交联剂:甲叉双丙烯酰胺0.0031g;催化剂:N，N，N’，N’，-四甲基二乙酰胺16 μ L ;离子键交联剂:无水氯化钙0.0661g ;单体2:海藻酸钠0.6g ;脱水剂:碳化二亚胺0.04g和N-羟基琥珀酰亚胺0.02g。经过60min，在50°C温度下通过自由基聚合反应，制备得到PAM-ALG-G0-HA复合水凝胶。
[0042]尽管上面结合图对本发明进行了描述，但是本发明并不局限于上述的【具体实施方式】，上述的【具体实施方式】仅仅是示意性的，而不是限制性的，本领域的普通技术人员在本发明的启示下，在不脱离本发明宗旨的情况下，还可以作出很多变形，这些均属于本发明的保护之内。
【权利要求】
1.一种人工关节软骨材料，其特征在于，用氧化石墨烯和羟基磷灰石修饰聚丙烯酰胺-海藻酸钠水凝胶，并采用自由基聚合反应制备得到的聚丙烯酰胺-海藻酸钠-氧化石墨烯-羟基磷灰石复合水凝胶。
2.如权利要求1所述一种人工关节软骨材料，其特征在于:聚丙烯酰胺-海藻酸钠-氧化石墨烯-羟基磷灰石复合水凝胶中丙烯酰胺单体:海藻酸钠单体:氧化石墨烯:羟基磷灰石的质量比为 500:(40-70):(1-5):(5-35)。
3.如权利要求1所述一种人工关节软骨材料的制备方法，其特征在于:包括以下步骤: 配制氧化石墨烯纳米片水溶液，超声处理，使氧化石墨烯纳米片溶液温度保持在10-50°C范围； 将颗粒度为IO-1OOOnm的针状纳米羟基磷灰石颗粒均匀分散于氧化石墨烯纳米片水溶液中，混合过程中，水溶液温度范围控制在10-80°C，均匀混合后，得到羟基磷灰石和氧化石墨烯稳定的混合水溶液； 在无氧保护环境下，在上述混合水溶液中依次加入自由基聚合反应合成聚丙烯酰胺和海藻酸钠水凝胶的原材料，经过20-90min,在30~70°C温度下通过自由基聚合反应，从而得到聚丙烯酰胺-海藻酸钠-氧化石墨烯-羟基磷灰石复合水凝胶。
4.如权利要求3中所述一种人工关节软骨材料的制备方法，其特征在于:聚丙烯酰胺-海藻酸钠-氧化石墨烯-羟基磷灰石复合水凝胶中丙烯酰胺单体:海藻酸钠单体:氧化石墨烯:羟基磷灰石 的质量比为500:(40-70):(1-5): (5-35)。
【文档编号】C08F251/00GK103845757SQ201310694865
【公开日】2014年6月11日 申请日期:2013年12月13日 优先权日:2013年12月13日
【发明者】魏强, 吝德智, 张善勇 申请人:天津大学