本发明涉及盐酸尼洛替尼原料或制剂工艺中的重要杂质——4-甲基-N-[3-(4-乙基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式III)，4-甲基-N-[3-(2,4-二甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式IV)，4-甲基-N-[3-(5-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式V)，4-甲基-N-[3-(1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式VI)的制备方法。
背景技术：
盐酸尼洛替尼(Nilotinib Hydrochloride)是一种新型小分子Bcr-Abl酪氨酸激酶的高度选择性和有效的口服抑制剂，主要用于对既往治疗(包括伊马替尼)耐药或不耐受的费城染色体阳性的慢性髓性白血病(Ph+CML)慢性期或加速期成人患者。该药由瑞士诺华公司(Novartis)研发制造，2007年10月29日由美国食品药物管理局所核准上市，2009年申请进口国内，商品名为盐酸尼洛替尼的化学结构式如式I所示：
关于盐酸尼洛替尼的杂质(式II～V所示)，化学名分别为4-甲基-N-[3-(4-乙基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式II)，4-甲基-N-[3-(2,4-二甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式III)，4-甲基-N-[3-(5-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式IV)，4-甲基-N-[3-(1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式V)，目前尚未有相关文献报道，也未见有其合成方法的报道，因此有必要开发此四个杂质的制备方法，用于盐酸尼洛替尼原料和制剂的质量控制。
对盐酸尼洛替尼原料和制剂的质量控制，必须有质量合格的杂质对照品。本发明的式II～V化合物为盐酸尼洛替尼杂质，可以作为杂质对照品控制盐酸尼洛替尼原料或制剂的纯度。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是提供盐酸尼洛替尼杂质的制备方法，其化学结构式如式II～V所示，化学名称分别为：4-甲基-N-[3-(4-乙基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式II)，4-甲基-N-[3-(2,4-二甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式III)，4-甲基-N-[3-(5-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式IV)，4-甲基-N-[3-(1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式V)。
具体合成路线如下(其中R可以是4-乙基-1H-咪唑-1-基，2,4-二甲基-1H-咪唑-1-基，5-甲基-1H-咪唑-1-基，1H-咪唑-1-基)：
本发明的盐酸尼洛替尼杂质的制备方法，包括以下步骤：
第一步：以4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]苯甲酸为原料，在有机溶剂中以氯化剂进行氯化，制备4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]苯甲酰氯；
本步发明所用溶剂为异丙醚，四氢呋喃，甲苯，乙腈。
本步发明优选的溶剂是甲苯。
本步发明所用的氯化剂为二氯亚砜，三氯氧磷，三氯化磷，五氯化磷，草酰氯。
本步发明优选的氯化剂为二氯亚砜。
本步发明所用的氯化剂与原料的摩尔比为10：1～20：1。
本步发明优选的氯化剂与原料的摩尔比为15：1～18：1。
本步发明优选的反应温度为60℃～80℃，反应时间4～7小时。
第二步：以第一步所得产品4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]苯甲酰氯为原料，分别制备4-甲基-N-[3-(4-乙基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式II)，4-甲基-N-[3-(2,4-二甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式III)，4-甲基-N-[3-(5-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式IV)，4-甲基-N-[3-(1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式V)。
本步反应所用溶剂为苯甲醚，二氯乙烷，N-甲基吡咯烷酮，四氢呋喃，甲苯，乙腈。
本步发明优选的溶剂是乙腈。
本步发明优选的反应温度为60℃～90℃，反应时间4～8小时。
本发明制备的化合物4-甲基-N-[3-(4-乙基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式II)，4-甲基-N-[3-(2,4-二甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式III)，4-甲基-N-[3-(5-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式IV)，4-甲基-N-[3-(1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基]-3-[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]苯甲酰胺(式V)，可作为盐酸尼洛替尼的有关物质检测用对照品，用于盐酸尼洛替尼及其相关制剂的质量控制。
本发明采用的技术方案的优点在于：其一，提供了一种操作便捷，反应条件温和可控的盐酸尼洛替尼杂质的制备方法；其二，大大降低了副反应的产生，目标产物易于分离纯化，纯度高。
具体实施方式
本发明将于下文通过实施例更加详细的描述，这些实施例示例性地用于进一步说明，且不应当视为对本发明的限制。
实施例1：式II化合物的制备
将式VI化合物(3.5g)，甲苯(35ml)，氯化亚砜(14ml)加入反应瓶中，升温至80℃反应5h。将反应液旋干，加入3-(4-乙基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯胺(2.0g)，乙腈(70ml)，升温至80℃反应7h。将反应液浓缩，得到黑色油状物，将黑色油状物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为二氯甲烷：甲醇＝30：1，收集产品，浓缩后得到2.9g式II化合物，摩尔收率为69％，HPLC纯度98.40％。ESI-MS(m/z):543.9[M+H]+；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ:10.62(s，1H，CONH),9.30(s，1H，ArH),9.18(s，1H，NH)，8.70(s，1H，ArH),8.56(d，J＝4.8Hz，1H，ArH),8.46(d，J＝8.0Hz，1H，ArH),8.46(d，J＝8.0Hz，1H，ArH),8.34(d，J＝1.6Hz，1H，ArH),8.31(s，1H，ArH),8.23(s，1H，ArH),8.18(s，1H，ArH),7.77(dd，J＝8.0，1.6Hz，1H，ArH),7.75(s，1H，ArH),7.51～7.54(m，2H，ArH),7.49(d，J＝4.8Hz，1H，ArH),7.46(d，J＝8.0Hz，1H，ArH),2.55(m，J＝7.4Hz，2H，CH2),2.37(s，3H，CH3),1.22(t，J＝7.4Hz，3H，CH3)；13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ:166.16,162.12,161.51,160.03,151.91,148.61,141.84,138.67,138.46,137.30,135.43,134.73,132.60,132.27,131.79,131.16,130.91,124.70,124.27,123.99,122.78,115.43,114.70,113.67,112.03,108.45,21.69,18.70,13.80。
实施例2：式III化合物的制备
将式VI化合物(3.5g)，四氢呋喃(25ml)，草酰氯(15ml)加入反应瓶中，升温至60℃反应6h。将反应液旋干，加入3-(2,4-二甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯胺(2.0g)，甲苯(100ml)，升温至70℃反应6h。将反应液浓缩，得到黑色固体，将黑色固体用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为二氯甲烷：甲醇＝50：1，收集产品，浓缩后得到2.5g式III化合物，摩尔收率为59％，HPLC纯度99.03％。ESI-MS(m/z):543.9[M+H]+；1H NMR(400MHz，CDCl3):9.32 (d,J＝2.0Hz,1H,ArH),8.85(d,J＝1.6Hz,1H,ArH),8.69(dd,J＝4.8、1.6Hz,1H,ArH),8.66(s,1H,CONH),8.56(d,J＝5.6Hz,1H,ArH),8.39(dt,J＝8.0、2.0、1.6Hz,1H,ArH),8.10(d,J＝1.6Hz,1H,ArH),7.91(s,1H,ArH),7.61(dd,J＝7.8、1.8Hz,1H,ArH),7.43(dd,J＝7.8、5.0Hz,1H,ArH),7.38(d,J＝8.0Hz,1H,ArH),7.30(s,1H,ArH),7.25(d,J＝5.6Hz,1H,ArH),7.18(s,1H,NH),6.80(d,J＝0.8Hz,1H,ArH),2.47(s,3H,CH3),2.40(s,3H,CH3),2.25(s,3H,CH3)；13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ:166.22,162.79,160.32,159.09,151.70,148.43,143.82,140.29,139.16.,137.83,137.08,134.45,132.58,132.50,132.42,132.26,131.03,123.74,122.33,121.91,119.93,119.54,117.05,116.75,115.84,108.79,18.22,13.81,13.32。
实施例3：式IV化合物的制备
将式VI化合物(0.4g)，乙腈(4ml)，氯化亚砜(1.8ml)加入反应瓶中，升温至80℃反应5h。将反应液旋干，加入乙腈(10ml)，3-(5-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯胺(0.2g)，升温至60℃反应4h。将反应液浓缩，得到黄色固体，将此固体用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为二氯甲烷：甲醇＝40：1，收集产品，浓缩后得到0.27g式IV化合物，摩尔收率为61％，HPLC纯度99.49％。ESI-MS(m/z):529.9[M+H]+；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ:9.32(d,J＝1.6Hz,1H,ArH),8.85(d,J＝1.6Hz,1H,ArH),8.68(dd,J＝4.8、1.6Hz,1H,ArH),8.62(s,1H,CONH),8.55(d,J＝5.3Hz,1H,ArH),8.38(dt,J＝8.0、1.9、1.9Hz,1H,ArH),8.10(t,J＝1.8Hz,1H,ArH),7.97(s,1H,ArH),7.62(s,1H,ArH),7.60(dd,J＝7.8、1.8Hz,1H,ArH),7.42(dd,J＝7.8、4.8Hz,1H,ArH),7.38(d,J＝8.0Hz,1H,ArH),7.31(s,1H,ArH),7.25(d,J＝5.3Hz,1H,ArH),7.16(s,1H,NH),6.93(s,1H,ArH),2.46(s,3H,CH3),2.25(s,3H,CH3)；13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ:166.04,162.87,160.27,159.16,151.80,148.44,140.25,137.94,137.76,136.90,134.44,132.68,132.52,132.46,132.26,131.18,127.99,127.94,123.79,123.21,122.18,120.10,119.00,117.40,116.22,108.94,18.26,9.95。
实施例4：式V化合物的制备
将式VI化合物(3.5g)，异丙醚(30ml)，氯化亚砜(16ml)加入反应瓶中，升温至70℃反应6h。将反应液旋干，加入3-(1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯胺(2.0g)，N-甲基吡咯烷酮(60ml)，升温至90℃反应4h。将反应液浓缩，得到油状物，将此油状物用硅胶柱分离纯化，洗脱剂为二氯甲烷：甲醇＝30：1，收集产品，浓缩后得到2.5g式VI化合物，摩尔收率为56％，HPLC纯度99.00％。ESI-MS(m/z):515.9[M+H]+；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ:10.70(s，1H，CONH),9.29(s，1H，ArH),9.17(s，1H，NH),8.69(d，J＝3.2Hz，1H，ArH),8.56(d，J＝4.8Hz，1H，ArH),8.45(d，J＝7.2Hz，1H，ArH),8.35(s，2H，ArH),8.34(s，1H，ArH),8.23(s，1H，ArH),7.80(s，2H，ArH),7.78(s，1H，ArH),7.52(dd，J＝7.2，3.2Hz，1H，ArH),7.49(d，J＝5.6Hz，1H，ArH),7.45(s，1H，ArH),7.17(s，1H，ArH),2.37(s，3H，CH3)；13C-NMR(100MHz，DMSO-d6)δ:166.20,162.11,161.52,160.04,151.90,148.61,141.90,138.67,138.34,136.28,134.75,132.59,132.27,131.48,131.16,130.91,130.76,124.74,124.25,124.03,122.75,118.65,116.04,115.16,112.55,108.45,18.70。