1.用于检测猪细小病毒的特异性LAMP引物组,其特征在于:所述引物组为以下六条引物:
F3:5'-gCACACgCATCAAgACTCATAC-3',
B3:5'-TggTggTgAggTTgCTgATTC-3',
FIP:5'-gCATCgTCTTgTACCATTTgTCCCTgCCAgAACACgAAACATACAA-3',
BIP:5'-CCTTggTCACTAATAgATgCTAACgCAgTTTATTTCTgTCATgTTgTTggA-3',
FLoop:5'-TAAATTCAgAATCAggggTggC-3',
BLoop:5'-gCCAgTCCgCTggATTgAA-3'。
2.一种快速显色一步法检测猪细小病毒的LAMP试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括权利要求1所述的引物组。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:还包括含有钙黄素和锰离子的荧光染料。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于:所述荧光染料的用量为在25μL检测体系中含有0.4-1.0μL。
5.根据权利要求2-4任一所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒构成LAMP检测体系;25μL检测体系的具体配置为:
PM预混引物:FIP/BIP (50UM) 0.4μL
FLOOP/BLOOP (50UM) 0.4μL
F3/B3 (10UM) 0.2μL
提取DNA 1.0-2.0μL
Bst酶 1.5μL
2×U-loadmix buffer 12.5μL
含有钙黄素和锰离子的荣研Loopamp 荧光染料 0.4-1.0μL
DEPC-treated ddH2O 补充至25.0μL 。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒的检测反应条件为:63-65℃,45-90分钟;终止反应。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒的检测反应条件为:63℃,45-60分钟;终止反应。