一种快速显色一步法检测猪细小病毒的LAMP试剂盒的制作方法

文档序号:12250029阅读:来源:国知局

技术特征:

1.用于检测猪细小病毒的特异性LAMP引物组,其特征在于:所述引物组为以下六条引物:

F3:5'-gCACACgCATCAAgACTCATAC-3',

B3:5'-TggTggTgAggTTgCTgATTC-3',

FIP:5'-gCATCgTCTTgTACCATTTgTCCCTgCCAgAACACgAAACATACAA-3',

BIP:5'-CCTTggTCACTAATAgATgCTAACgCAgTTTATTTCTgTCATgTTgTTggA-3',

FLoop:5'-TAAATTCAgAATCAggggTggC-3',

BLoop:5'-gCCAgTCCgCTggATTgAA-3'。

2.一种快速显色一步法检测猪细小病毒的LAMP试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括权利要求1所述的引物组。

3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:还包括含有钙黄素和锰离子的荧光染料。

4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于:所述荧光染料的用量为在25μL检测体系中含有0.4-1.0μL。

5.根据权利要求2-4任一所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒构成LAMP检测体系;25μL检测体系的具体配置为:

PM预混引物:FIP/BIP (50UM) 0.4μL

FLOOP/BLOOP (50UM) 0.4μL

F3/B3 (10UM) 0.2μL

提取DNA 1.0-2.0μL

Bst酶 1.5μL

2×U-loadmix buffer 12.5μL

含有钙黄素和锰离子的荣研Loopamp 荧光染料 0.4-1.0μL

DEPC-treated ddH2O 补充至25.0μL 。

6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒的检测反应条件为:63-65℃,45-90分钟;终止反应。

7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒的检测反应条件为:63℃,45-60分钟;终止反应。

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