本发明涉及一种从麻黄果中提取维生素C的方法，属于植物提取技术领域。
背景技术：
麻黄，又称麻黄草，草麻黄，中麻黄，木贼麻黄，多年生草本植物，主要分布在我国的沙漠戈壁，一般为天然野生，面积分布广阔，它是一种珍贵的中药。麻黄性平温和，具有解表祛风，理血镇痛，散热利咽，升高血压等功效，是治疗感冒，咳嗽，肺炎，支气管炎，支气管哮喘，关节炎，痛风的良药。尽管麻黄的药用价值、经济价值都是众人周知的，但是麻黄果果实的利用价值就鲜为人知了。
文献[张建中，敖特根，苏日娜，麻黄果营养成分及其利用价值的初步研究，(J)，内蒙古林学院学报]公开了麻黄果主要营养成分有氨基酸、微量元素及维生素C等。其中，麻黄果中维生素C含量高达385.6mg/100g，是沙棘(甘肃)的2倍以上，且高于鲜枣(陕西泾阳)，分别高出苹果梨(甘肃)、鸭梨(北京)和樱桃(山东崂山)的19、27和47倍。因此，麻黄果是很好的维生素C来源。虽然这样，但是有关麻黄果提取维生素C的研究还是非常有限的，这在某程度上限制了麻黄果的应用与发展。因此，探索与研究麻黄果提取维生素C是非常价值的。
技术实现要素：
针对上述现有技术的不足，本发明所要解决的技术问题是提出了一种从麻黄果中提取维生素C的方法。
一种从麻黄果中提取维生素C的方法，包括以下步骤：
1)先将风干的麻黄果果实洗净、消毒，粉碎成100～120目，并加入麻黄果果实重量6～8倍的60～70％乙醇搅拌，搅拌5～10min后用胶体磨研磨30～40min，然后调节料液温度为40～50℃，pH为5～6，同时加入占麻黄果重量0.04～0.06％的复合酶酶解2～3h，最后将酶解液于90～100℃保持6～8min灭菌后，置于超声频率40～50kHz，温度30～40℃下进行超声提取，提取15～20min，过滤，得到滤液1和滤渣1，备用；
2)在步骤1)所得的滤渣1中加入滤渣1重量6～9倍的70～90％乙醇搅拌，搅拌10～15min后用胶体磨研磨40～60min，并置于超声频率30～40kHz，温度30～40℃下进行超声提取，提取15～20min，过滤，得到滤液2和滤渣2，备用；
3)在步骤2)所得的滤渣2中加入滤渣2重量6～8倍的水搅拌，搅拌20～25min后用胶体磨研磨40～60min，置于超声频率40～50kHz，温度30～40℃下进行超声提取，提取10～15min，过滤，得到滤液3，备用；
4)合并滤液1、2、3，并将滤液置于4000～5000转/min的离心机上离心10～15min，过滤，得到麻黄果提取液1，备用；
5)将步骤4)所得的麻黄果提取液1用CO2萃取法进行萃取，过滤，得到麻黄果提取液2，备用；
6)先将聚乙二醇加热50～60℃，至全部熔融，冷却到室温，然后依次加入明胶、壳聚糖和步骤5)所得的麻黄果提取液2搅拌均匀，最后于0～5℃冷藏1～2d，过滤除去沉淀，得到麻黄果提取液3，备用；
7)将步骤6)所得的麻黄果提取液3依次通过孔径为0.1～1μm的微滤膜、孔径为0.01～0.2μm的超滤膜进行纯化，得到麻黄果提取液4，备用；
8)将步骤7)所得的麻黄果提取液4通过聚酰胺柱层析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分别用30～40％乙醇水溶液、50～60％乙醇水溶液洗柱，收集50～60％乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即可得到麻黄果维生素C。
进一步，
步骤1)中，所述的复合酶是由3～5重量份纤维素酶、2～4重量份果胶酶和0.2～0.4重量份蛋白酶混合而成。
进一步，
步骤5)中，所述的CO2萃取，萃取压力为40～50MPa，萃取温度为40～45℃，出口分离温度为40～50℃，萃取时间100～120min。
进一步，
步骤6)中，所述的聚乙二醇的添加量为麻黄果提取液2的0.06～0.08重量份、明胶为0.02～0.04重量份、壳聚糖为0.03～0.05重量份。
进一步，
步骤8)中，将步骤7)所得的麻黄果提取液4通过聚酰胺柱层析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分别用35％乙醇水溶液、55％乙醇水溶液洗柱，收集55％乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即可得到麻黄果维生素C。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、本发明采用胶体磨研磨、复合酶技术、超声提取技术、CO2萃取技术以及滤膜和聚酰胺柱纯化技术等，不仅使麻黄果能有效地保留维生素C，而且还能提高麻黄果维生素C的提取率和效率。其中，多次胶体磨研磨，提高了细胞破碎率，且粒度均匀，从而提高提取效率；滤膜和聚酰胺柱纯化技术，提高了除杂率，从而提高提取物纯化率。
2、本发明采用整个麻黄果的果实来提取麻黄果，使麻黄果维生素C的含量更高，同时达到了合理利用原料的目的，避免浪费。
3、本发明在麻黄果提取液中加入聚乙二醇、明胶和壳聚糖，并结合冷藏处理，减少了麻黄果维生素C等有效成分因氧化等因素而导致的损失，同时，也延长了麻黄果维生素C的贮存期。
具体实施方式
实施例1
一种从麻黄果中提取维生素C的方法，包括以下步骤：
1)先将风干的麻黄果果实洗净、消毒，粉碎成120目，并加入麻黄果果实重量7倍的65％乙醇搅拌，搅拌8min后用胶体磨研磨35min，然后调节料液温度为45℃，pH为5.5，同时加入占麻黄果重量0.05％的复合酶酶解2.5h，其中，所述的复合酶是由4重量份纤维素酶、3重量份果胶酶和0.3重量份蛋白酶混合而成，最后将酶解液于95℃保持7min灭菌后，置于超声频率45kHz，温度35℃下进行超声提取，提取18min，过滤，得到滤液1和滤渣1，备用；
2)在步骤1)所得的滤渣1中加入滤渣1重量8倍的80％乙醇搅拌，搅拌12min后用胶体磨研磨50min，并置于超声频率35kHz，温度35℃下进行超声提取，提取18min，过滤，得到滤液2和滤渣2，备用；
3)在步骤2)所得的滤渣2中加入滤渣2重量7倍的水搅拌，搅拌22min后用胶体磨研磨50min，置于超声频率45kHz，温度35℃下进行超声提取，提取12min，过滤，得到滤液3，备用；
4)合并滤液1、2、3，并将滤液置于4500转/min的离心机上离心12min，过滤，得到麻黄果提取液1，备用；
5)将步骤4)所得的麻黄果提取液1用CO2萃取法进行萃取，其中，萃取压力为45MPa，萃取温度为42℃，出口分离温度为45℃，萃取时间110min，过滤，得到麻黄果提取液2，备用；
6)先将聚乙二醇加热55℃，至全部熔融，冷却到室温，然后依次加入明胶、壳聚糖和步骤5)所得的麻黄果提取液2搅拌均匀，其中，所述的聚乙二醇的添加量为麻黄果提取液2的0.07重量份、明胶为0.03重量份、壳聚糖为0.04重量份，最后于2℃冷藏1.5d，过滤除去沉淀，得到麻黄果提取液3，备用；
7)将步骤6)所得的麻黄果提取液3依次通过孔径为1μm的微滤膜、孔径为0.2μm的超滤膜进行纯化，得到麻黄果提取液4，备用；
8)将步骤7)所得的麻黄果提取液4通过聚酰胺柱层析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分别用35％乙醇水溶液、55％乙醇水溶液洗柱，收集55％乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即可得到麻黄果维生素C。
经提取得到的麻黄果维生素C采用高效液相色谱法检测，经检测，麻黄果维生素C的含量为379mg/100g。
实施例2
一种从麻黄果中提取维生素C的方法，包括以下步骤：
1)先将风干的麻黄果果实洗净、消毒，粉碎成100目，并加入麻黄果果实重量6倍的60％乙醇搅拌，搅拌5min后用胶体磨研磨30min，然后调节料液温度为40℃，pH为5，同时加入占麻黄果重量0.04％的复合酶酶解2h，其中，所述的复合酶是由3重量份纤维素酶、2重量份果胶酶和0.2重量份蛋白酶混合而成，最后将酶解液于90℃保持6min灭菌后，置于超声频率40kHz，温度30℃下进行超声提取，提取15min，过滤，得到滤液1和滤渣1，备用；
2)在步骤1)所得的滤渣1中加入滤渣1重量6倍的70％乙醇搅拌，搅拌10min后用胶体磨研磨40min，并置于超声频率30kHz，温度30℃下进行超声提取，提取15min，过滤，得到滤液2和滤渣2，备用；
3)在步骤2)所得的滤渣2中加入滤渣2重量6倍的水搅拌，搅拌20min后用胶体磨研磨40min，置于超声频率40kHz，温度30℃下进行超声提取，提取10min，过滤，得到滤液3，备用；
4)合并滤液1、2、3，并将滤液置于4000转/min的离心机上离心10min，过滤，得到麻黄果提取液1，备用；
5)将步骤4)所得的麻黄果提取液1用CO2萃取法进行萃取，其中，萃取压力为40MPa，萃取温度为40℃，出口分离温度为40℃，萃取时间100min，过滤，得到麻黄果提取液2，备用；
6)先将聚乙二醇加热50℃，至全部熔融，冷却到室温，然后依次加入明胶、壳聚糖和步骤5)所得的麻黄果提取液2搅拌均匀，其中，所述的聚乙二醇的添加量为麻黄果提取液2的0.06重量份、明胶为0.02重量份、壳聚糖为0.03重量份，最后于0℃冷藏1d，过滤除去沉淀，得到麻黄果提取液3，备用；
7)将步骤6)所得的麻黄果提取液3依次通过孔径为0.1μm的微滤膜、孔径为0.01μm的超滤膜进行纯化，得到麻黄果提取液4，备用；
8)将步骤7)所得的麻黄果提取液4通过聚酰胺柱层析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分别用30％乙醇水溶液、50％乙醇水溶液洗柱，收集50％乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即可得到麻黄果维生素C。
经提取得到的麻黄果维生素C采用高效液相色谱法检测，经检测，麻黄果维生素C的含量为375mg/100g。
实施例3
一种从麻黄果中提取维生素C的方法，包括以下步骤：
1)先将风干的麻黄果果实洗净、消毒，粉碎成120目，并加入麻黄果果实重量8倍的70％乙醇搅拌，搅拌10min后用胶体磨研磨40min，然后调节料液温度为50℃，pH为6，同时加入占麻黄果重量0.06％的复合酶酶解3h，其中，所述的复合酶是由5重量份纤维素酶、4重量份果胶酶和0.4重量份蛋白酶混合而成，最后将酶解液于100℃保持8min灭菌后，置于超声频率50kHz，温度40℃下进行超声提取，提取20min，过滤，得到滤液1和滤渣1，备用；
2)在步骤1)所得的滤渣1中加入滤渣1重量9倍的90％乙醇搅拌，搅拌15min后用胶体磨研磨60min，并置于超声频率40kHz，温度40℃下进行超声提取，提取20min，过滤，得到滤液2和滤渣2，备用；
3)在步骤2)所得的滤渣2中加入滤渣2重量8倍的水搅拌，搅拌25min后用胶体磨研磨60min，置于超声频率50kHz，温度40℃下进行超声提取，提取15min，过滤，得到滤液3，备用；
4)合并滤液1、2、3，并将滤液置于5000转/min的离心机上离心15min，过滤，得到麻黄果提取液1，备用；
5)将步骤4)所得的麻黄果提取液1用CO2萃取法进行萃取，其中，萃取压力为50MPa，萃取温度为45℃，出口分离温度为50℃，萃取时间120min，过滤，得到麻黄果提取液2，备用；
6)先将聚乙二醇加热60℃，至全部熔融，冷却到室温，然后依次加入明胶、壳聚糖和步骤5)所得的麻黄果提取液2搅拌均匀，其中，所述的聚乙二醇的添加量为麻黄果提取液2的0.08重量份、明胶为0.04重量份、壳聚糖为0.05重量份，最后于5℃冷藏2d，过滤除去沉淀，得到麻黄果提取液3，备用；
7)将步骤6)所得的麻黄果提取液3依次通过孔径为1μm的微滤膜、孔径为0.2μm的超滤膜进行纯化，得到麻黄果提取液4，备用；
8)将步骤7)所得的麻黄果提取液4通过聚酰胺柱层析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分别用40％乙醇水溶液、60％乙醇水溶液洗柱，收集60％乙醇洗脱液，浓缩，干燥，即可得到麻黄果维生素C。
经提取得到的麻黄果维生素C采用高效液相色谱法检测，经检测，麻黄果维生素C的含量为376mg/100g。
当然，上面只是本发明优选的具体实施方式作了详细描述，并非以此限制本发明的实施范围，凡依本发明的原理、构造以及结构所作的等效变化，均应涵盖于本发明的保护范围内。