多基因座STR分析方法与流程

技术特征：

1.一种多基因座STR分析方法，其特征在于：该方法包括在使用被荧光染料标记的引物对多基因座STR片段进行PCR复制和扩增之后能够将一个长度特定的单链DNA片段连接到部分扩增后的多基因座STR片段上。

2.根据权利要求1所述的多基因座STR分析方法，其特征在于：所述被荧光染料标记的引物为双向引物中的正向引物或反向引物，且在被荧光染料标记之前，在部分所述正向引物或部分所述反向引物上引入一个脚手架分子。

3.根据权利要求2所述的多基因座STR分析方法，其特征在于：所述脚手架分子包括基本骨架和位于所述基本骨架上与所述单链DNA片段发生化学连接的官能团。

4.根据权利要求3所述的多基因座STR分析方法，其特征在于：所述基本骨架包括具有式(1)或(2)所示的结构，

式(1)和(2)中，n＝1,2,3,4,R为所述骨架上的官能团；

或具有式(3)所示的结构，

式(3)中，n＝1,2,3,R为所述骨架上的官能团；

或具有式(4)所示的结构，

式(4)中，n＝1,2；

或具有式(5)所示的结构，

5.根据权利要求2所述的多基因座STR分析方法，其特征在于：所述单链DNA片段是通过化学合成的引物和生物合成PCR复制扩增获得的一段长度特定的片段，其序列通常与被测样品无关，其长度和序列可依据检测要求做调整和变化；所述单链DNA片段上具有可与所述脚手架分子发生化学连接的官能团。

6.根据权利要求3至5任一项所述的多基因座STR分析方法，其特征在于：所述官能团是马来酰亚胺、卤代乙酰基、氨基、巯基、叠氮基、炔基、肼基、胺氧基、醛基或酮基中的至少一种。

7.根据权利要求6所述的多基因座STR分析方法，其特征在于：所述氨基还包括通过化学转换反应由氨基进一步转换生成的巯基；所述化学转换反应包括与Traut试剂或与N-乙酰基-DL-高半胱氨酸硫代内酯试剂发生的化学反应。

8.根据权利要求6所述的多基因座STR分析方法，其特征在于：所述马来酰亚胺具有如式(6)或式(7)所示的结构，

式(7)中R为直链烷基；所述醛基或酮基具有如式(14)所示的结构，

式(14)中，R₁＝H或直链烷基，R₂为直链烷基或烷氧基。

9.根据权利要求2所述的多基因座STR分析方法，其特征在于：所述荧光染料、脚手架分子与所述正向引物或所述荧光染料、脚手架分子与所述反向引物两两之间设有间隔分子；在同一个基因座STR片段内，所述间隔分子的结构可以相同或不同，所述间隔分子的结构包括线性结构或分叉结构。

10.一种DNA片段连接移位扩容及去光谱交叉分析法在多基因座STR分析中的应用。