本发明属于生物技术及饲料加工领域，具体涉及一种鱼蛋白小肽螯合锌的制备方法。技术背景锌是动物必须的微量元素之一，以骨骼、肝脏、毛皮等组织器官含量最高。锌与体内的300多种酶和功能蛋白组成有关。锌的种类有无机锌、有机锌、螯合锌，第一代补锌剂，硫酸锌等无机试剂，对胃肠有刺激作用，生物学效价较低。第二代补锌剂，葡萄糖酸锌、乳酸锌等，其性能优于第一代锌补剂，而第三次补锌剂是氨基酸螯合锌和多肽螯合锌，研究表明，所有螯合锌能以肽/氨基酸的形式被吸收，其结构中的金属离子能直接通过肠绒毛，以胞饮形式被吸收。螯合物还能直接通过细胞膜，以载体的形式促进微量元素的吸收和利用，其生物利用率高于无机锌和有机锌，并能有效促进动物生长。添加到饲料中适口性好，还具有抗应激和抗病能力，还能减少环境污染。小肽的转运系统和氨基酸相比，具有耗能低、转运速度快和不易被饱和的特点，可提高氨基酸的利用率，促进蛋白质的合成和矿物质元素的吸收等。因此，锌与小肽螯合物是一种补锌的功能性营养强化剂。我国海水养殖产量居世界前列，产生大量的鱼皮，鱼骨，鱼内脏等下脚料，含有较高的蛋白质，直接丢弃不仅污染环境，而且造成资源严重浪费；通过资源合理化高值利用，利用酶解技术将得到的鱼蛋白小肽与锌在一定条件下进行螯合，制备出的鱼蛋白小肽螯合锌可以不仅可以补充动物需要的氨基酸和锌，还可以大大提高鱼下脚料的附加值。技术实现要素：为了解决现有工艺制备螯合锌，螯合过程不易控制，螯合时间长，螯合率低的问题。本发明提供了一种鱼蛋白小肽螯合锌的制备方法，采用超声处理，制备工艺步骤简单，能有效控制螯合过程，螯合时间短，操作简便，螯合率高。为实现上述目的，本发明采用如下技术手段：一种鱼蛋白小肽螯合锌的制备方法，包括如下步骤：（1）将鱼蛋白小肽溶于水中后，将pH调节至5.0~5.5，得小肽溶液；在pH5.0~5.5时，鱼蛋白小肽螯合锌螯合率较高；（2）在小肽溶液中加入锌盐，充分溶解，升温至30~40°C，超声反应15-20min得反应液，其中锌盐中的Zn2+与鱼蛋白小肽的质量比为1:2~1:3;（3）将反应液过滤后浓缩至原体积的30%~50%，喷雾干燥后得鱼蛋白小肽螯合锌；（4）小肽锌螯合率的计算：准确移取螯合锌浓缩液10ml于100ml容量瓶中，定容，摇匀。用EDTA络合滴定法测定微量元素的总量。另移取螯合锌浓缩液10ml于100ml烧杯中，加热浓缩至干。加入50ml无水乙醇，充分搅拌后离心分离，将沉淀用水溶解后定容，摇匀。采用EDTA滴定法测定螯合态微量元素的含量。EDTA滴定法：准确移取25ml试液于250ml锥形瓶中，加入50ml水，滴加2~3滴二甲酚橙作指示剂，用0.02mol/lEDTA标准溶液滴定，溶液颜色由紫红变为亮黄色即为滴定终点。螯合率/%=×100=（CV1/CV0）×100=（CV1/CV0）×100C-EDTA溶液的浓度，mol/l；V1-滴定螯合锌所消耗的EDTA溶液体积，ml；V0-滴定锌的总量所消耗的EDTA溶液体积，ml；进一步地，本发明还提供了上述制备方法的优选条件，如优选步骤（1）小肽溶液中鱼蛋白小肽的质量百分含量为20%~30%。所述的优选步骤（2）锌盐为氯化锌或硫酸锌。所述的优选步骤（2）超声条件为超声时间5-10秒，间隙时间2-5秒，超声功率100~400W，利用超声处理有利于螯合液中鱼蛋白小肽与Zn2+的充分接触，均匀混合，大大提高螯合速率与螯合物的得率。本发明的第一目的在于保护上述制备方法得到的鱼蛋白小肽螯合锌，可借助小肽的吸收特点和机制以螯合物整体的形式通过小肠被主动吸收，可促进锌的吸收，并增强体内酶的活性，增强抗病免疫力等。本发明的第二目的在于保护上述鱼蛋白小肽螯合锌作为饲料添加剂的应用，由于采用小肽螯合技术，对胃肠无刺激，能够有利于动物吸收，可作为动物功能营养补锌剂应用于动物饲料中。本发明的优点在于：制备工艺步骤简单，能有效控制螯合过程，螯合时间短，操作简便，螯合率高。具体实施方式实施例1（1）将鱼蛋白小肽溶解后，调节pH至5.0~5.5，得小肽溶液，小肽溶液的质量百分含量为20%。（2）在小肽溶液中加入氯化锌，氯化锌与小肽溶液的质量比为1:2，充分溶解，升温至35°C，超声反应15min，超声条件超声时间为5秒，间隙时间2秒，超声功率70%。（3）将反应液过滤后浓缩至原体积的40%，喷雾干燥后得鱼蛋白小肽螯合锌。经检测，本实施例中鱼蛋白小肽螯合锌的螯合率为98.2%，锌含量为15.7%。按照杨会成《一种鱼皮胶原蛋白多肽螯合锌的制备工艺》中的制备方法测得的鱼皮胶原蛋白多肽与锌的螯合率为85.4%。采用本专利方法比文献报道的螯合锌得率高。实施例2小肽螯合锌补锌效果研究做小鼠缺锌模型，硫酸锌组、葡萄糖酸锌、小肽螯合锌每天给药量为7.00mgZn/kg.bw，连续灌胃14天。与缺锌组相比，小肽锌组具有显著差异，在补锌剂量相同条件下，小鼠血清锌含量，小肽锌组>葡萄糖酸锌组>硫酸锌组。表1小肽螯合锌补锌效果研究组别缺锌组小肽锌组葡萄糖酸锌组硫酸锌组锌含量（µg/g）28.92±1.3737.09±0.52**34.30±1.2232.51±1.53注：与缺锌组相比，*p<0.05，**p<0.01。实施例3小肽螯合锌抗氧化效果研究做小鼠缺锌模型，硫酸锌组、葡萄糖酸锌、小肽螯合锌每天给药量为7.00mgZn/kg.bw，连续灌胃14天。测定小鼠肝组织中总抗氧化能力。与缺锌组相比，小肽锌组具有显著差异，在补锌剂量相同条件下，小鼠肝脏总抗氧化能力的大小顺序为，小肽锌组>葡萄糖酸锌组>硫酸锌组。说明在补锌剂量相同的条件下，小肽锌优于葡萄糖酸锌和硫酸锌。表2小肽螯合锌抗氧化效果研究总抗氧化能力缺锌组小肽锌组葡萄糖酸锌组硫酸锌组U/mg0.438±0.0450.951±0.042**0.496±0.0520.485±0.054注：与缺锌组相比，*p<0.05，**p<0.01。当前第1页1 2 3