本发明涉及一种透明质酸的制备方法，具体涉及一种从海蜇中提取透明质酸的方法。
背景技术：
海蜇是一种大型的食用水母，在我国有着广泛的分布，具有很高的经济价值和营养价值。据测定，每百克海蜇含蛋白质12.3克，碳水化合物4克，钙182毫克，碘132微克以及多种维生素及胶原蛋白。胶原蛋白含亲水性的天然保湿因子，且三螺旋结构能强劲锁住水分，对皮肤的渗透性强，可透过角质层与皮肤上皮细胞结合，参与和改善皮肤细胞的代谢，使皮肤中的胶原蛋白活性加强，它能保持角质层水分及纤维结构的完整性，改善皮肤细胞生存环境和促进皮肤组织的新陈代谢，增强血液循环，达到滋润皮肤的目的。皮肤的光泽取决于含水量，胶原蛋白良好的保水能力使皮肤水润亮泽，散发健康的光彩。当胶原蛋白被皮肤吸收后，填充在皮肤真皮之间，增加皮肤紧密度，产生皮肤张力，缩小毛孔，使皮肤紧绷而富有弹性。真皮中丰满的胶原蛋白层将皮肤细胞撑起，结合保湿和抑制皱纹的作用，共同达到舒展粗纹、淡化细纹的功效。活性胶原蛋白本身具有消炎和更新肌肤的作用，能直接渗入肌肤用于填充深的皱纹、皮肤损伤造成的缺损（如青春痘疤）和修补脸形的缺陷等。
海蜇体内含有保湿因子，保湿因子的典型代表物透明质酸（HA），HA是目前世界公认的性能优越的保湿因子，其分子中的羧基和其他极性基因可与水形成氢键而结合大量的水，当含量低于0.1%时，HA可结合其质量1000倍的水，这种天然保湿因子可使皮肤含水量增加，表皮角质层柔软，改善皮肤表面的血液循环，增强皮肤弹性，阻止表皮细胞纤维化，从而起到护肤作用。但是HA与蛋白质是以结合状态存在，不易提取和纯化。随着人们生活水平的日益提高，越来越多的人更注重健康与美容，而纯天然提取制成的美容化妆品将更受青睐，市场前景潜力很大。
技术实现要素：
本发明提供了一种工艺简单、效率高的以海蜇为原料提取透明质酸的方法。
本发明是通过如下技术方案实现的:
一种以海蜇为原料提取透明质酸的方法，包括下述步骤:
a.原料处理：取新鲜的海蜇，剪碎，阴凉处晾干；
b.浸泡：取晾干后的海蜇，加入2重量份的丙酮浸泡24小时，直至海蜇变硬；
c.提取：取出上步骤的海蜇，加3-5重量份0.5M醋酸加热回流提取6-8h，过滤，收集滤液，向滤液中加入等体积的Seavg试剂（氯仿、正丁醇混合液（氯仿：正丁醇＝4：1）），搅拌均匀，静置；
d.醇沉：待静置分层后取上清液加入2重量份95%（v/v）乙醇搅拌均匀，静置使分层，过滤；
e.取滤液，重复d步骤一次；
f.干燥：将上步骤两次醇沉后得到的滤液，进行真空干燥，真空度维持在0.1MPa，分两个阶段干燥，第一阶段保持温度85℃，时间维持1小时，然后升温，第二阶段温度115℃，时间维持3小时，即得成品。
采用本发明的方法得到的透明质酸，具有如下性状：白色无定形粉末,无臭无味，易吸湿，含量在94%以上。
采用本发明的方法以海蜇为原料提取透明质酸，与现有技术相比，本发明的优点：
1、用丙酮浸泡海蜇可以使海蜇脱水；
2、采用加热回流的方式进行提取纯化，相比直接加热提取，效果很好；
3、在滤液中加入Seavg试剂（氯仿：正丁醇＝4：1）可有效去除蛋白质，再静置分层后除去蛋白杂质和其他胶质；
4、真空干燥真空度保持在0.1MPa，分两个阶段，不同的温度、时间来干燥，所得产品性状比同一个温度维持一段时间干燥，效果要好。
具体实施方式
下面以实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
实施例1：
一种以海蜇为原料提取透明质酸的方法，包括下述步骤:
a.原料处理：取新鲜的海蜇，剪碎，阴凉处晾干；
b.浸泡：取晾干后的海蜇，加入2重量份的丙酮浸泡24小时，直至海蜇变硬；
c.提取：取出上步骤的海蜇，加3重量份0.5M醋酸加热回流提取8h，过滤，收集滤液，向滤液中加入等体积的Seavg试剂（氯仿、正丁醇混合液（氯仿：正丁醇＝4：1）），搅拌均匀，静置；
d.醇沉：待静置分层后取上清液加入2重量份95%（v/v）乙醇搅拌均匀，静置使分层，过滤；
e.取滤液，重复d步骤一次；
f.干燥：将上步骤两次醇沉后得到的滤液，进行真空干燥，真空度维持在0.1MPa，分两个阶段干燥，第一阶段保持温度85℃，时间维持1小时，然后升温，第二阶段温度115℃，时间维持3小时，即得成品，含量94.5%。
实施例2：
一种以海蜇为原料提取透明质酸的方法，包括下述步骤:
a.原料处理：取新鲜的海蜇，剪碎，阴凉处晾干；
b.浸泡：取晾干后的海蜇，加入2重量份的丙酮浸泡24小时，直至海蜇变硬；
c.提取：取出上步骤的海蜇，加5重量份0.5M醋酸加热回流提取6h，过滤，收集滤液，向滤液中加入等体积的Seavg试剂（氯仿、正丁醇混合液（氯仿：正丁醇＝4：1）），搅拌均匀，静置；
d.醇沉：待静置分层后取上清液加入2重量份95%（v/v）乙醇搅拌均匀，静置使分层，过滤；
e.取滤液，重复d步骤一次；
f.干燥：将上步骤两次醇沉后得到的滤液，进行真空干燥，真空度维持在0.1MPa，分两个阶段干燥，第一阶段保持温度85℃，时间维持1小时，然后升温，第二阶段温度115℃，时间维持3小时，即得成品，含量95.5%。
实施例3：
一种以海蜇为原料提取透明质酸的方法，包括下述步骤:
a.原料处理：取新鲜的海蜇，剪碎，阴凉处晾干；
b.浸泡：取晾干后的海蜇，加入2重量份的丙酮浸泡24小时，直至海蜇变硬；
c.提取：取出上步骤的海蜇，加4重量份0.5M醋酸加热回流提取8h，过滤，收集滤液，向滤液中加入等体积的Seavg试剂（氯仿、正丁醇混合液（氯仿：正丁醇＝4：1）），搅拌均匀，静置；
d.醇沉：待静置分层后取上清液加入2重量份95%（v/v）乙醇搅拌均匀，静置使分层，过滤；
e.取滤液，重复d步骤一次；
f.干燥：将上步骤两次醇沉后得到的滤液，进行真空干燥，真空度维持在0.1MPa，分两个阶段干燥，第一阶段保持温度85℃，时间维持1小时，然后升温，第二阶段温度115℃，时间维持3小时，即得成品，含量96.3%。
实施例4：
将实施例1所得到的产品，用红外分光光度计法进行鉴定。
检测仪器：红外光谱仪；
波长范围：4000～400cm-1,扫描速度64次/s，样品制备采用溴化钾压片法。
按红外分光光谱法操作方法进行操作，扫描出的图谱与标准HA的图谱对比，保留时间一致即可。