1.一种透明质酸酶突变体,其特征在于,所述透明质酸酶突变的氨基酸序列,是在SEQ ID NO.1所示氨基酸序列基础上,将第121位甘氨酸G突变为亮氨酸L,同时将299位的苏氨酸T突变为异亮氨酸I,同时将321位的丙氨酸突变为脯氨酸P。
2.编码权利要求1所述透明质酸酶突变体的基因。
3.携带权利要求2所述基因的载体或细胞。
4.一种表达权利要求1所述透明质酸酶突变体的重组菌,其特征在于,是以枯草芽孢杆菌168为宿主,以pMA5载体为表达载体,以wapA信号肽引导酶的分泌表达。
5.根据权利要求4所述的重组菌,其特征在于,将信号肽wapA通过NdeI和EcoRI限制性酶切位点重组至pMA5,再通过PCR获得编码N端有6个组氨酸的透明质酸酶突变体基因H,将基因H片段和携带信号肽wapA的pMA5载体均采用EcoRI、BamHI限制性酶切位点双切,然后连接,转化枯草芽孢杆菌168,得到重组菌。
6.应用权利要求4所述重组菌发酵生产透明质酸酶突变体的方法,其特征在于,是按10%的接种量将种子培养液转接种于发酵培养基中,发酵培养基的组成为酵母粉18g/L、蔗糖20g/L、磷酸二氢钠15g/L,硫酸钾4g/L,30℃220rpm培养,发酵培养60h。
7.权利要求1所述透明质酸酶突变体在制备透明质酸中的应用。
8.权利要求1所述透明质酸酶突变体在制备用于治疗心肌梗塞的药物中的应用。
9.权利要求1所述透明质酸酶突变体在制备用于抗肿瘤的药物中的应用。