一种利用狭旋毛壳菌发酵生产可皆霉素的方法与流程

文档序号:12644893阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种利用狭旋毛壳菌发酵生产可皆霉素的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)菌种活化:将狭旋毛壳菌种接种平板培养基上,培养,获得活化菌种;

(2)发酵培养:将步骤(1)制备的活化菌种接种于培养基B中,温度为24~26℃条件下静置培养38~42天,获得发酵物;培养基B的配方为:50~70 g大米,100 ml水;

(3)乙酸乙酯提取物的制备:将步骤(2)制备的发酵物用乙酸乙酯浸取,得提取液,减压回收乙酸乙酯后得到乙酸乙酯提取物;

(4)可皆霉素的制备:将步骤(3)制备的乙酸乙酯提取物上柱分离,得可皆霉素。

2.如权利要求1所述利用狭旋毛壳菌发酵生产可皆霉素的方法,其特征在于,步骤(1)所用的狭旋毛壳菌种保藏的分类学名称为狭旋毛壳CLC001,保藏号为CCTCC NO:M 2016231,保藏于中国典型培养物保藏中心。

3.如权利要求1所述利用狭旋毛壳菌发酵生产可皆霉素的方法,其特征在于,所述步骤(2)中培养基B的制备方法如下:将大米和水按比例混合,121℃下高压灭菌40分钟。

4.如权利要求1所述利用狭旋毛壳菌发酵生产可皆霉素的方法,其特征在于,所述步骤(4)中上柱分离的具体步骤如下:用80~100目硅胶拌样后装柱,固定相为200~300目硅胶,以二氯甲烷-甲醇梯度洗脱,硅胶薄层层析检测,合并二氯甲烷-甲醇的体积比为100:(2~4)的流份,30~40℃下减压回收二氯甲烷和甲醇,再用二氯甲烷-甲醇体积比为1:1混合溶剂溶解,经Sephadex LH-20层析,得可皆霉素。

5.如权利要求1所述利用狭旋毛壳菌发酵生产可皆霉素的方法,其特征在于,所述步骤(1)中平板培养基配方为:酵母膏10g/L,葡萄糖40g/L,蛋白胨10g/L,琼脂粉20g/L,pH6.0±0.1。

6.如权利要求1所述利用狭旋毛壳菌发酵生产可皆霉素的方法,其特征在于,所述步骤(3)中将发酵物用乙酸乙酯浸取时的工艺条件如下:加入乙酸乙酯,20~25℃下冷浸12h,用纱布过滤,得到乙酸乙酯提取液,反复提取3次,合并提取液。

7.如权利要求1所述利用狭旋毛壳菌发酵生产可皆霉素的方法,其特征在于,所述步骤(4)中将乙酸乙酯提取物与80~100目硅胶拌样时,乙酸乙酯提取物与80~100目硅胶的重量比为1︰2。

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