羊肚菌菌种的培育方法与流程

文档序号:11171719阅读:8324来源:国知局

本发明涉及食用菌技术领域,特别涉及一种羊肚菌菌种的培育方法。



背景技术:

羊肚菌又称羊肚菜、羊肚蘑等,因其菌盖凹凸不平,形态酷似羊肚而得名。羊肚菌可药用,其性平、味甘寒,主治脾胃虚弱、消化不良、痰多气短、精神亏损等,具有补肾、壮阳、补脑、提神等功效。药用价值很高。

然而在羊肚菌的培育过程中,会遇到同一细胞的菌丝细胞表现不同,在同一条件下菌丝生长却有不同的表现,特别是每接种一次都与前次菌丝生长不一样,无论菌丝的长短、粗细、快慢、颜色、长势以及最后的表现都不同,哪怕是原来用过的,或是第一年出过菇的老菌种也是如此,采取同样的原料、配方、操作方法,同等的温湿度和内外界条件,却表现出较大的差距,因此,如何培育出性能稳定的菌种,使得后期产品质量稳定显得尤为重要。



技术实现要素:

本发明要解决的技术问题是提供一种菌种特性稳定、适合于人工培养的羊肚菌菌种的培育方法。

为了解决上述技术问题,本发明的技术方案为:一种羊肚菌菌种的培育方法,包括如下步骤:

1)母种的制作及培养

a.制作母种培养基:以重量份数计:去皮马铃薯100-200份、葡萄糖10-20份、琼脂10-15份、磷酸二氢钾0.3-0.5份、硫酸镁0.2-0.4份、维生素b10.2-0.3份,玉米粉05-17份,将上述组份均放进水中加热,直至琼脂完全煮化,放入离心机中离心,取上清液,即得母种培养基;

b.将制作好的母种培养基趁热导入漏斗中,分装试管,每批要用大小一致的试管,装量要相同,约为试管长度的1/4,待琼脂凝固后塞上棉塞,棉塞部分做好防潮工作,放在高压灭菌锅中灭菌,灭菌后摆放斜面成捆,并在斜面上盖几层纱布保湿,待其完全凝固后,将每个试管中放入无菌接种箱中接入菌丝,置于培养箱中,直至长成母种;

2)原种的制作及培养

a.制作原种培养基:以重量份数计:将杂木屑60-70份、麦麸10-12份、蔗糖10-12份、石膏粉0.5-0.7份、过磷酸钙0.2-0.4份、土壤0.5-0.7份、棉籽皮10-12份、木屑3-5份、土壤1-2份,无菌水20-35份,将ph调整至6-7,将上述组份倒入拌料机中搅拌3-5min,将水分控制在50-55%,装入培养瓶,并将培养瓶放在灭菌锅中灭菌后,取出冷却得到原种培养基;

b.将培养瓶和装有母种的试管放入接种箱中,将试管中的菌丝母种接入到原种培养基的培养瓶中,保持温度在30℃;

3)培养种的制作及培养

a.制作培养种的液体培养基:以重量份数计,尿素5-8份,甘蔗渣9-10份,麦麸30-40份、葡萄糖5-10份、酵母膏10-15份、玉米浆5-10份、氯化钙7-9份、柠檬酸铁2-8份、氯化钙2-6份,石膏粉1-5份,将上述组份混合,滤渣,得到培养液,将培养液倒入500毫升的三角瓶内,每瓶装量100毫升,加入直径在0.8毫米以下的玻璃碎片,用棉塞和牛皮纸封口,在1.5千克/平方厘米压力下灭菌20-30min,取出冷却至20-30℃以下,即得到培养基;

b.将原种培养瓶和液体培养基置于接种箱中密封半小时,再将原种接入到液体培养基中,在15-20环境下可获得培养种。

所述的琼脂在制作母种培养基之前选用冷水浸泡20min,捞起撕碎后慢慢加入。

步骤1)中的培养箱温度保持在25-30℃。

本发明将制种过程中的各个培养基均作了调整,并且各个培养基的制备方法也都作出调整,因羊肚菌菌种的不稳定性,本发明将母种培养基中加入了磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素和玉米粉,使得母种从培养基中吸取的营养物质更多,将试管斜面用纱布保湿,避免其被水汽侵袭,从而影响培养基的性能;将培养基制成液体培养基,并加入更多稳定性和富含养分的物质,如尿素、麦麸等,不容易被杂菌侵入,因此,其能够保持菌种的稳定性,避免菌种在后期的繁育过程中表现形态和母本不一致,影响产量。

具体实施方式

下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是,对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明,但并不构成对本发明的限定。此外,下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

实施例1:

:一种羊肚菌菌种的培育方法,包括如下步骤:

1)母种的制作及培养

a.制作母种培养基:以重量份数计:去皮马铃薯100-200份、葡萄糖10-20份、琼脂10-15份、磷酸二氢钾0.3-0.5份、硫酸镁0.2-0.4份、维生素b10.2-0.3份,玉米粉05-17份,将上述组份均放进水中加热,直至琼脂完全煮化,放入离心机中离心,取上清液,即得母种培养基;

b.将制作好的母种培养基趁热导入漏斗中,分装试管,每批要用大小一致的试管,装量要相同,约为试管长度的1/4,待琼脂凝固后塞上棉塞,棉塞部分做好防潮工作,放在高压灭菌锅中灭菌,灭菌后摆放斜面成捆,并在斜面上盖几层纱布保湿,待其完全凝固后,将每个试管中放入无菌接种箱中接入菌丝,置于培养箱中,培养箱温度为25-30摄氏度,直至长成母种;

2)原种的制作及培养

a.制作原种培养基:以重量份数计:将杂木屑60-70份、麦麸10-12份、蔗糖10-12份、石膏粉0.5-0.7份、过磷酸钙0.2-0.4份、土壤0.5-0.7份、棉籽皮10-12份、木屑3-5份、土壤1-2份,无菌水20-35份,其中,所述的琼脂在制作母种培养基之前选用冷水浸泡20min,捞起撕碎后慢慢加入。将ph调整至6-7,将上述组份倒入拌料机中搅拌3-5min,将水分控制在50-55%,装入培养瓶,并将培养瓶放在灭菌锅中灭菌后,取出冷却得到原种培养基;

b.将培养瓶和装有母种的试管放入接种箱中,将试管中的菌丝母种接入到原种培养基的培养瓶中,保持温度在30℃;

3)培养种的制作及培养

a.制作培养种的液体培养基:以重量份数计,尿素5-8份,甘蔗渣9-10份,麦麸30-40份、葡萄糖5-10份、酵母膏10-15份、玉米浆5-10份、氯化钙7-9份、柠檬酸铁2-8份、氯化钙2-6份,石膏粉1-5份,将上述组份混合,滤渣,得到培养液,将培养液倒入500毫升的三角瓶内,每瓶装量100毫升,加入直径在0.8毫米以下的玻璃碎片,用棉塞和牛皮纸封口,在1.5千克/平方厘米压力下灭菌20-30min,取出冷却至20-30℃以下,即得到培养基;

b.将原种培养瓶和液体培养基置于接种箱中密封半小时,再将原种接入到液体培养基中,在15-20环境下可获得培养种。

实施例2:

一种羊肚菌菌种的培育方法,包括如下步骤:

1)母种的制作及培养

a.制作母种培养基:以重量份数计:去皮马铃薯200份、葡萄糖20份、琼脂15份、磷酸二氢钾0.5份、硫酸镁0.4份、维生素b10.3份,玉米粉17份,将上述组份均放进水中加热,直至琼脂完全煮化,放入离心机中离心,取上清液,即得母种培养基;

b.将制作好的母种培养基趁热导入漏斗中,分装试管,每批要用大小一致的试管,装量要相同,约为试管长度的1/4,待琼脂凝固后塞上棉塞,棉塞部分做好防潮工作,放在高压灭菌锅中灭菌,灭菌后摆放斜面成捆,并在斜面上盖几层纱布保湿,待其完全凝固后,将每个试管中放入无菌接种箱中接入菌丝,置于培养箱中,直至长成母种;

2)原种的制作及培养

a.制作原种培养基:以重量份数计:将杂木屑60-70份、麦麸10-12份、蔗糖10-12份、石膏粉0.5-0.7份、过磷酸钙0.2-0.4份、土壤0.5-0.7份、棉籽皮10-12份、木屑3-5份、土壤1-2份,无菌水20-35份,将ph调整至6-7,将上述组份倒入拌料机中搅拌3-5min,将水分控制在50-55%,装入培养瓶,并将培养瓶放在灭菌锅中灭菌后,取出冷却得到原种培养基;

b.将培养瓶和装有母种的试管放入接种箱中,将试管中的菌丝母种接入到原种培养基的培养瓶中,保持温度在30℃;

3)培养种的制作及培养

a.制作培养种的液体培养基:以重量份数计,尿素8份,甘蔗渣10份,麦麸40份、葡萄糖10份、酵母膏15份、玉米浆10份、氯化钙9份、柠檬酸铁8份、氯化钙6份,石膏粉1-5份,将上述组份混合,滤渣,得到培养液,将培养液倒入500毫升的三角瓶内,每瓶装量100毫升,加入直径在0.8毫米以下的玻璃碎片,用棉塞和牛皮纸封口,在1.5千克/平方厘米压力下灭菌20-30min,取出冷却至20-30℃以下,即得到培养基;

b.将原种培养瓶和液体培养基置于接种箱中密封半小时,再将原种接入到液体培养基中,在15-20环境下可获得培养种。

实施例3:

一种羊肚菌菌种的培育方法,包括如下步骤:

1)母种的制作及培养

a.制作母种培养基:以重量份数计:去皮马铃薯200份、葡萄糖20份、琼脂15份、磷酸二氢钾0.5份、硫酸镁0.4份、维生素b10.3份,玉米粉17份,将上述组份均放进水中加热,直至琼脂完全煮化,放入离心机中离心,取上清液,即得母种培养基;

b.将制作好的母种培养基趁热导入漏斗中,分装试管,每批要用大小一致的试管,装量要相同,约为试管长度的1/4,待琼脂凝固后塞上棉塞,棉塞部分做好防潮工作,放在高压灭菌锅中灭菌,灭菌后摆放斜面成捆,并在斜面上盖几层纱布保湿,待其完全凝固后,将每个试管中放入无菌接种箱中接入菌丝,置于培养箱中,培养箱温度为25-30摄氏度,直至长成母种;

2)原种的制作及培养

a.制作原种培养基:以重量份数计:将杂木屑70份、麦麸12份、蔗糖12份、石膏粉0.7份、过磷酸钙0.4份、土壤0.7份、棉籽皮12份、木屑5份、土壤2份,无菌水35份,其中,所述的琼脂在制作母种培养基之前选用冷水浸泡20min,捞起撕碎后慢慢加入。将ph调整至6-7,将上述组份倒入拌料机中搅拌3-5min,将水分控制在50-55%,装入培养瓶,并将培养瓶放在灭菌锅中灭菌后,取出冷却得到原种培养基;

b.将培养瓶和装有母种的试管放入接种箱中,将试管中的菌丝母种接入到原种培养基的培养瓶中,保持温度在30℃;

3)培养种的制作及培养

a.制作培养种的液体培养基:以重量份数计,尿素5-8份,甘蔗渣9-10份,麦麸40份、葡萄糖10份、酵母膏15份、玉米浆10份、氯化钙9份、柠檬酸铁8份、氯化钙6份,石膏粉5份,将上述组份混合,滤渣,得到培养液,将培养液倒入500毫升的三角瓶内,每瓶装量100毫升,加入直径在0.8毫米以下的玻璃碎片,用棉塞和牛皮纸封口,在1.5千克/平方厘米压力下灭菌20-30min,取出冷却至20-30℃以下,即得到培养基;

b.将原种培养瓶和液体培养基置于接种箱中密封半小时,再将原种接入到液体培养基中,在15-20环境下可获得培养种。

本发明中实施例1-3所制的菌种,和普通羊肚菌菌种相比,稳定性高,并且亩产量高。

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