技术领域：
：：本发明属于生物
技术领域：
：，具体涉及脱氯台勾霉素类化合物及其制备方法和在制备抗菌药物中的应用。
背景技术：
：：：台勾霉素(tiacumicins，又称fidaxomicin，lipiarmycins)属于糖苷键修饰后的大环内酯类抗生素，拥有一个糖苷键修饰的18元环大环内酯，两个脱氧糖基和一个特征的二氯取代苯甲酰基。它可由放线菌指孢囊菌dactylosporangiumaurantiacumsubsp.hamdenensisnrrl18085产生。台勾霉素b对很多革兰氏阳性病原菌有很好的抑菌效果，尤其是针对艰难梭菌有着非常低的最小抑菌浓度，体外对该菌的抑菌活性为万古霉素的8-10倍，ⅲ期临床实验证实，其对急性期患者的作用与万古霉素相当，总复发风险(15％)低于万古霉素(25％)。且对其他肠道菌群无不良影响。台勾霉素具有新颖的作用机理，主要是通过抑制细菌rna聚合酶，从而产生迅速的抗艰难梭菌感染的作用，并且其抑制全酶的活力要优于抑制rna聚合体的核心酶。另外也有报道表明，台勾霉素b也具有很好的抗结核分枝杆菌(mycobacteriumtuberculosis)活性，体外抗癌活性等。技术实现要素：：本发明的目的是提供七种新的具有抗菌活性的脱氯台勾霉素类化合物及其制备方法和在制备抗菌药物中的应用。本发明的第一个目的是提供七种新的脱氯台勾霉素类化合物，其结构式如式(i)所示：其中化合物1：r1为z，r2为oh，r3为me，r4为n-pro；化合物2：r1为z，r2为oh，r3为me，r4为me；化合物3：r1为z，r2为＝o，r3为me，r4为et；化合物4：r1为z，r2为h，r3为h，r4为et；化合物5：r1为y，r2为oh，r3为me，r4为et；化合物6：r1为x，r2为oh，r3为me，r4为et；化合物7：r1为h，r2为h，r3为me，r4为et。本发明的第二个目的是提供上述的脱氯台勾霉素类化合物的制备方法，所述的脱氯台勾霉素类化合物是从对指孢囊菌dactylosporangiumaurantiacumsubsp.hamdenensisnrrl18085的tiam卤化酶基因进行敲除获得的tiam卤化酶基因缺失突变株tcm50的发酵培养物中制备分离得到的。具体步骤如下：将tiam卤化酶基因缺失突变株tcm50接种到含有大孔树脂的液体培养基中，发酵培养后获得发酵培养物，将发酵培养物中的发酵液、菌丝体和大孔树脂分离，菌丝体用丙酮浸提，浸提液经减压回收丙酮后剩余的水混合液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层经减压蒸馏浓缩后得到浸膏a，大孔吸附树脂用丙酮洗脱，洗脱液经回收丙酮后剩余的水混合液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层经蒸馏浓缩后得到浸膏b；将浸膏a和浸膏b合并得到粗提物，粗提物经中压正相硅胶柱层析，以氯仿：甲醇作为洗脱剂从体积比100:0至0:100梯度洗脱，经薄层层析检测合并相同的馏分，收集以氯仿：甲醇体积比10:1为展开剂展开时比移值rf＝0.41的馏分fr.d；馏分fr.d经中压反相硅胶柱层析，以乙腈：水作为洗脱剂从体积比100:0至0:100梯度洗脱，收集乙腈：水体积比65:35洗脱下来的馏分fr.d7，收集乙腈：水体积比70:30洗脱下来的馏分fr.d8，收集乙腈：水体积比80:20洗脱下来的馏分fr.d9；馏分fr.d7经正相硅胶柱层析，以氯仿：甲醇作为洗脱剂从体积比100:0至0:100梯度洗脱，收集氯仿：甲醇体积比80:20洗脱下来的亚馏分fr.d7-8，亚馏分fr.d7-8经hplc制备，色谱柱为innovalc-18色谱柱，以乙腈：水作为洗脱剂从体积比100:0至0:100梯度洗脱，流速20ml·min-1，检测波长270nm，收集保留时间tr＝13.0min的亚馏分fr.d7-8-2，亚馏分fr.d7-8-2经过ptlc制备，以氯仿：甲醇体积比10:1为展开剂展开，收集比移值rf＝0.65的馏分得到化合物5；收集保留时间tr＝13.7min的亚馏分fr.d7-8-5，亚馏分fr.d7-8-5经过ptlc制备，以氯仿：甲醇体积比10:1为展开剂展开，收集比移值rf＝0.70的馏分得到化合物6，收集比移值rf＝0.75的馏分得到化合物7；收集保留时间tr＝15.5min的亚馏分fr.d7-8-6，馏分fr.d7-8-6经hplc纯化得到化合物2；馏分fr.d8经hplc制备，色谱柱为innovalc-18色谱柱，以乙腈：水作为洗脱剂从体积比100:0至0:100梯度洗脱，流速20ml·min-1，检测波长270nm，收集保留时间tr＝17.2min的亚馏分fr.d8-4，亚馏分fr.d8-4经hplc纯化得到化合物1；收集保留时间tr＝18.0min的亚馏分fr.d8-5，亚馏分fr.d8-5经ptlc制备，以二氯甲烷：异丙醇：水体积比10:1:0.5为展开剂展开，收集比移值rf＝0.70的馏分，经hplc纯化得到化合物3；馏分fr.d9经hplc纯化得到化合物4。所述的液体培养基优选为发酵培养基，所述的发酵培养基的配方为：每升含有酵母抽提物4g，麦芽抽提物10g，可溶性淀粉4g，cocl2·6h2o5mg，余量为水，ph7.2。本发明的第三个目的是提供指孢囊菌dactylosporangiumaurantiacumsubsp.hamdenensisnrrl18085的tiam卤化酶基因缺失突变株在制备上述的脱氯台勾霉素类化合物中的应用。本发明人通过实验发现，脱氯台勾霉素类化合物1-7分别对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantstaphylococcusaureus,mrsa)，金黄色葡萄球菌(staphyloccocusaureusatcc29213)，藤黄微球菌(micrococcusluteus)，苏云金芽孢杆菌(bacillusthuringiensis)，粪肠球菌(enterococcusfaecalisatcc29212)具有抑制作用，其中化合物1对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantstaphylococcusaureus,mrsa)、金黄色葡萄球菌(staphyloccocusaureusatcc29213)、藤黄微球菌(micrococcusluteus)、苏云金芽孢杆菌(bacillusthuringiensis)和粪肠球菌(enterococcusfaecalisatcc29212)的mic值分别是8μg·ml-1、8μg·ml-1、8μg·ml-1、2μg·ml-1和4μg·ml-1。因此，本发明的第四个目的是提供上述的脱氯台勾霉素类化合物或其药用盐在制备抗菌药物中的应用。所述的抗菌药物优选为抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantstaphylococcusaureus,mrsa)，金黄色葡萄球菌(staphyloccocusaureusatcc29213)，藤黄微球菌(micrococcusluteus)，苏云金芽孢杆菌(bacillusthuringiensis)，粪肠球菌(enterococcusfaecalisatcc29212)的药物。本发明的第五个目的是提供一种抗菌药物，包含有效量的作为活性成份的上述的脱氯台勾霉素类化合物或其药用盐，和药学上可以接受的载体。所述的抗菌药物优选为抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantstaphylococcusaureus,mrsa)，金黄色葡萄球菌(staphyloccocusaureusatcc29213)，藤黄微球菌(micrococcusluteus)，苏云金芽孢杆菌(bacillusthuringiensis)，粪肠球菌(enterococcusfaecalisatcc29212)药物。本发明从指孢囊菌dactylosporangiumaurantiacumsubsp.hamdenensisnrrl18085的tiam卤化酶基因缺失突变株tcm50发酵产物中制备了七种新的具有抗菌活性的脱氯台勾霉素类化合物，能用于制备抗菌药物，通过生物工程或化学修饰可望开发成为抗菌新药。本发明中涉及的tiam卤化酶基因缺失突变株tcm50是通过对指孢囊菌dactylosporangiumaurantiacumsubsp.hamdenensisnrrl18085的tiam卤化酶基因进行敲除后获得(具体方法见专利申请号：201010526416.9，发明名称：四种台勾霉素类化合物及其制备方法和在制备抗菌药物中的应用)。本发明的指孢囊菌dactylosporangiumaurantiacumsubsp.hamdenensisnrrl18085，已在本申请以前公开记载于美国专利，其专利号为us4918174的专利中，根据该文献的记载，指孢囊菌dactylosporangiumaurantiacumsubsp.hamdenensisnrrl18085保藏于美国农业研究菌种保藏中心(nrrl)，其登录号为nrrl18085。台勾霉素类化合物生物合成基因簇已申请专利，申请名称为：台勾霉素的生物合成基因簇及其应用。附图说明：图1是菌丝体提取物-浸膏a和大孔树脂提取物-浸膏b的高效液相色谱图；高效液相色谱(hplc)条件：色谱柱为phenomex250×4.6mm(sphereclonesax)，流动相包括a相和b相，流动相a相：10％(体积分数)的乙腈+0.08％(体积分数)的甲酸，溶剂为水，流动b相：90％(体积分数)的乙腈，溶剂为水；进样程序：0-20min，流动相比例为a相/b相(体积比)：95:5-0:100，20-21min，流动相比例为a相/b相(体积比)：0:100，21-22min，流动相比例为a相/b相(体积比)：0:100-95:5，22-30min，流动相比例为a相/b相(体积比)：95:5，检测波长270nm，流速1ml/min，其中1代表化合物1，2代表化合物2，3代表化合物3，4代表化合物4，5代表化合物5，6代表化合物6，7代表化合物7。图2是化合物1和2的关键1h–1hcosy，hmbc相关信号示意图。图3是化合物3和4的关键1h–1hcosy，hmbc相关信号示意图。图4是化合物5、6和7的关键1h–1hcosy，hmbc相关信号示意图。具体实施方式：以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。实施例1：脱氯台勾霉素类化合物1-7的分离和制备1、配制培养基：(1)种子培养基：每升含有酵母抽提物4g，麦芽抽提物10g，可溶性淀粉4g，cocl2·6h2o5mg，余量为水，ph7.2。121℃，灭菌30min；(2)发酵培养基：每升含有酵母抽提物4g，麦芽抽提物10g，可溶性淀粉4g，cocl2·6h2o5mg，余量为水，ph7.2。向发酵培养基中加入发酵培养基总体积5％的大孔树脂xad-16，得到含有大孔树脂的发酵培养基。121℃，灭菌20min。2、发酵2.1、种子培养：将种子培养基中活化的tiam卤化酶基因缺失突变株tcm50分别接入20瓶，每瓶含有50ml种子培养基的250ml的锥形培养瓶中，28℃，200r·min-1，培养48h，制得种子液1000ml。2.2、发酵培养：将种子液以体积分数10％的接种量接入到10.8l发酵培养基(置于2000ml的锥形培养瓶，每瓶含有200ml发酵培养基，共54瓶)中，28℃，200r·min-1，振荡培养7天，得到10.8l发酵培养物。3、萃取将10.8l发酵培养物先进行离心分离(3500r·min-1，8min)，弃去上清液，收集菌丝体和大孔树脂xad-16。菌丝体用2l丙酮在室温下浸提3次，每次3小时，合并浸提液，浸提液经减压回收丙酮后剩余的水混合液用6l乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层减压蒸馏浓缩后得菌丝体提取物—浸膏a(0.7g)。大孔树脂xad-16用丙酮洗脱3次，洗脱液经回收丙酮后剩余的水混合液用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯层经蒸馏浓缩后得到大孔树脂提取物-浸膏b(2.8g)；4、活性化合物的提取分离和鉴定4.1化合物1-7的提取分离和鉴定：分别取少量浸膏a和浸膏b的样品溶于100μl甲醇中，离心取上清10μl，经hplc进样检测(色谱柱为phenomex250×4.6mm(sphereclonesax)，流动相包括a相和b相，流动相a相：10％(体积分数)的乙腈+0.08％(体积分数)的甲酸，溶剂为水，流动b相：90％(体积分数)的乙腈，溶剂为水；进样程序：0-20min，流动相比例为a相/b相(体积比)：95:5-0:100；20-21min，流动相比例为a相/b相(体积比)：0:100；21-22min，流动相比例为a相/b相(体积比)：0:100-95:5；22-30min，流动相比例为a相/b相(体积比)：95:5，检测波长270nm，流速1ml/min)，检测结果表明两者成分基本一致(见图1)，将浸膏a和浸膏b合并得到粗提物(3.75g)，粗提物经中压正相硅胶柱(100-200目，90g)分离，用氯仿/甲醇作为洗脱剂从体积比100:0至0:100梯度洗脱(900ml)得到15个样品，经过薄层层析检测，以氯仿：甲醇体积比10:1为展开剂展开，根据检测结果将样品1-2合并(fr.a)，3-4合并(fr.b)，5-8合并(fr.c)，9-10合并(fr.d，比移值rf＝0.41)，11-12合并(fr.e)，13-15合并(fr.f)，合并后共得到6个馏分(fr.a到fr.f)。馏分fr.d进行中压反相硅胶柱分离(250×21.2mm，12nms-50μm；ymccompanyltd；以乙腈/水作为洗脱剂从体积比100:0至0:100梯度洗脱，流速20ml·min-1)得9个馏分fr.d1到fr.d9，其中fr.d7为乙腈：水体积比65:35洗脱下来的馏分，fr.d8为乙腈：水体积比70:30洗脱下来的馏分，fr.d9为乙腈：水体积比80:20洗脱下来的馏分，将9个组分都经hplc检测分析，根据检测结果将主成分fr.d7进行正相硅胶柱分离，用氯仿：甲醇作为洗脱剂从体积比100:0至0:100梯度洗脱，收集氯仿：甲醇体积比80:20洗脱下来的亚馏分fr.d7-8，亚馏分fr.d7-8采用c18柱进行hplc制备(innovalc-18色谱柱，agelatechnology，250mm×21.2mm，5μm；以乙腈/水作为洗脱剂从体积比100:0至0:100梯度洗脱，流速20ml·min-1，检测波长270nm)，得到fr.d7-8-1至fr.d7-8-7共7个亚馏分(其中，亚馏分fr.d7-8-2的保留时间tr＝13.0min，亚馏分fr.d7-8-5的保留时间tr＝13.7min，亚馏分fr.d7-8-6的保留时间tr＝15.5min，亚馏分fr.d7-8-7的保留时间tr＝16.5min)，其中fr.d7-8-7为已知化合物50-1d(化合物50-1d的结构式如式(ii)所示，其中r1＝h，r2＝ch3，r3＝oh，r4如式(x)所示；具体结构见专利申请号：201010526416.9，发明名称：四种台勾霉素类化合物及其制备方法和在制备抗菌药物，这个专利中的化合物1)(730mg)，是发酵产物主成分，占发酵产物总重20.8％。fr.d8进行hplc制备(innovalc-18色谱柱，agelatechnology，250mm×10mm，5μm；以乙腈：水作为洗脱剂从体积比100:0至0:100梯度洗脱，检测波长270nm，流速20ml·min-1)得到亚馏分fr.d8-1至fr.d8-5(其中，亚馏分fr.d8-4的保留时间tr＝17.2min，亚馏分fr.d8-5的保留时间tr＝18.0min)，亚馏分fr.d8-4经半制备hplc(lunac-18色谱柱，phenomenex，250mm×10mm，5μm；以50％乙腈/水(v/v)作为洗脱剂等梯度洗脱，检测波长270nm，流速2.5ml·min-1)纯化得到化合物1(9.3mg，保留时间tr＝17.2min)。fr.d7-8-6经hplc半制备(lunac-18色谱柱，phenomenex，250mm×10mm，5μm；以50％乙腈/水(v/v)作为洗脱剂等梯度洗脱，检测波长270nm，流速2.5ml·min-1)，纯化得到化合物2(19.0mg，保留时间tr＝15.5min)。fr.d8-5经ptlc制备(硅胶gf254，20×20cm)，以二氯甲烷：异丙醇：水体积比10:1:0.5为展开剂展开，收集比移值rf＝0.70的馏分，经过hplc半制备(lunac-18色谱柱，phenomenex，250mm×10mm，5μm；以50％乙腈/水(v/v)作为洗脱剂等梯度洗脱，检测波长270nm，流速2.5ml·min-1)纯化得到化合物3(10.2mg，保留时间tr＝17.8min)。fr.d9经过hplc半制备(lunac-18色谱柱，phenomenex，250mm×10mm，5μm；以50％乙腈/水(v/v)作为洗脱剂等梯度洗脱，检测波长270nm，流速2.5ml·min-1)纯化得到化合物4(3.3mg，保留时间tr＝19.4min)。亚馏分fr.d7-8-2经过ptlc制备(硅胶gf254，20×20cm)，以氯仿：甲醇体积比10:1为展开剂展开，收集比移值rf＝0.65的馏分得到化合物5(32.9mg)，亚馏分fr.d7-8-5经过ptlc制备(硅胶gf254，20×20cm)，以氯仿：甲醇体积比10:1为展开剂展开，收集比移值rf＝0.70的馏分得到化合物6(15.2mg)，收集比移值rf＝0.75的馏分得到化合物7(5.0mg)。化合物1：淡白色无定形粉末，hr-esims确定其分子式为c53h78o18(实验值m/z1001.5136[m-h]-，计算值1001.5115)，不饱和度为15。红外光谱表明其结构中含有多个羟基(3392cm-1)、甲基(2976cm-1)、亚甲基(2933cm-1)、共轭不饱和羧酸酯基(1697，1259，1065，1024cm-1)、共轭双键(1635cm-1)等官能团。1h-nmr和13c-nmr谱表明该化合物与已知化合物50-1d结构很相似，分子量比化合物50-1d多14，提示化合物2结构中比化合物50-1d多一个亚甲基。比较二者1h谱发现，化合物1与化合物50-1d不同之处是：化合物50-1d在δh1.23(h3-9″′)出现的裂分为三重峰的甲基峰在化合物1的氢谱中消失了，取而代之的是化合物1在δh1.01(h3-10″′)出现了一个裂分为三重峰的甲基峰。在1h-1h-cosy谱中，h3-10″′(δh1.01)和h2-9″′(δh1.63，m)、h2-9″′(δh1.63，m)与h2-8″′(δh2.80，m)的相关峰可以被清楚地观察到，说明h3-10″′/h2-9″′/h2-8″′组成丙基自旋偶合系统。结合hsqc谱中c-h相关信号的归属，hmbc谱中从h2-8″′(δh2.80，m)信号(见图2，表1)出发到c-6″′(δc111.9)，c-7″′(δc148.8)和c-9″′(δc26.4)的相关峰表明丙基的取代位置位于苯环的c-7″′位。化合物2，淡黄色无定形粉末，hr-esims确定其分子式为c51h74o18(实验值m/z973.4838[m-h]-，计算值973.4802)，不饱和度为15。1h-nmr和13c-nmr谱表明化合物2与已知化合物50-1d结构也很相似，分子量比化合物50-1d少14，提示化合物2结构中比化合物50-1d少了一个亚甲基。比较二者1h谱发现，化合物2与化合物50-1d不同之处是：化合物50-1d的甲基峰h3-9″′(δh1.23)和亚甲基峰h2-8″′(δh2.85)在化合物2中消失了，取而代之的是化合物2在δh2.51(h3-8″′)处出现了一个单峰的甲基峰。结合hsqc谱中c-h相关信号的归属，hmbc谱中从h3-8″′(δh2.51,s)信号(见图2，表1)出发到c-2″′(δc106.0)，c-6″′(δc112.7)和c-7″′(δc144.7)的相关峰表明甲基的取代位置位于苯环的c-7″′位。表1.化合物1和2的nmr数据table1.nmrspectroscopicdataforcompounds1and2arecordedat500mhz,brecordedat125mhz,incd3od化合物3，淡黄色无定形粉末，hr-esims确定其分子式为c52h74o18(实验值m/z985.4811[m-h]-，计算值985.4802，不饱和度为16。1h-nmr和13c-nmr谱表明该化合物与已知化合物50-1d结构也很相似，分子量比化合物50-1d少2，提示化合物3结构可能为化合物50-1d中羟基氧化成羰基。化合物3与化合物50-1d不同之处是：化合物3在它的碳谱中多了一个羰基碳信号c-18(δc206.3)。与之相对应的是化合物50-1d在c-18位次甲基峰(δh4.04，h2-18，m)在化合物3的氢谱中消失了，同时化合物3在δh2.22(h3-19)出现了一个单峰的甲基峰，而化合物50-1d的c-19位(δh1.21，h3-19)为二重峰。在1h-1h-cosy谱中，h1-15(δh5.31，t)和h2-16(δh2.71，m，2.83，m)与h1-17(δh5.16，d)的相关峰可以被清楚地观察到(见图3，表2)。结合hsqc谱中c-h相关信号的归属，hmbc谱中从h3-19(δh2.22，s)信号出发到c-18(δc206.3)，c-17(δc78.9)，h1-17(δh5.16，d)信号到c-15(δc124.7)，c-16(δc30.0)，c-18(δc206.3)的相关峰信号表明c-18位被氧化成羰基。化合物4，淡黄色无定形粉末，hr-esims确定其分子式为c51h74o17(实验值m/z981.4809[m+na]+，计算值981.4818)，不饱和度为15。1h-nmr和13c-nmr谱表明化合物4与化合物50-1d结构极其相似，分子量比化合物50-1d少30。比较二者1h谱发现，化合物4与化合物50-1d不同之处是：化合物50-1d的甲氧基峰h3-7'(δh3.58)在化合物4中消失了。在1h-1h-cosy谱中，h1-1'(δh4.61s)到h1-2'(δh3.90d)到h1-3'(δh3.76dd)到h1-4'(δh5.23t)都能被清楚的观察到(见图3，表2)。结合hsqc谱中c-h相关信号的归属，hmbc谱中从h-2'(δh3.90，d)信号出发到c-1'(δc101.1)，c-3'(δc73.1)的相关峰表明c-2'上仅有羟基取代。且化合物50-1d在δh4.04(h1-18)出现的裂分为多重峰的次甲基峰在化合物7的氢谱中消失，取而代之的是化合物4在ha-18(δh1.73m)、ha-18(1.85m)处出现了一个多重峰的亚甲基峰，化合物4在它的碳谱和dept-135谱中多了一个亚甲基碳信号c-18(δc27.3)。表明化合物4碳18位无羟基取代。表2.化合物3和4的nmr数据table2.nmrspectroscopicdataforcompounds3and4化合物5，淡黄色无定形粉末，hr-esims确定其分子式为c51h74o18(实验值m/z973.4819[m-h]-，计算值973.4802)，不饱和度为15。1h-nmr和13c-nmr谱表明化合物5与已知化合物50-1d结构也很相似，分子量比化合物50-1d少14，提示化合物5结构中比化合物50-1d少了一个亚甲基。比较二者1h谱发现，化合物5与化合物50-1d不同之处是：化合物50-1d的甲基峰h3-4″″(δh1.18)和次甲基峰h1-2″″(δh2.85)在化合物5中消失了，取而代之的是化合物5在δh2.40(h2-2″″)处出现了一个多重峰的亚甲基峰。结合hsqc谱中c-h相关信号的归属，hmbc谱中从h3-3″″(δh1.15t)信号(见图4，表3)出发到c-2″″(δc28.6)，c-1″″(δc172.1)和h1-4″到c-1″″(δc172.1)的相关峰表明丙酰基的取代位置位于5-甲基-d-鼠李糖c-4″位。化合物50-1d的5-甲基-d-鼠李糖c-4″位异丁酰基在化合物5变为丙酰基。化合物6，淡黄色无定形粉末，hr-esims确定其分子式为c50h72o18(实验值m/z959.4649[m-h]-，计算值959.4846)，不饱和度为15。1h-nmr和13c-nmr谱表明化合物6与化合物5结构相似，分子量比化合物5少14，提示化合物6结构中比化合物5少了一个亚甲基。比较二者1h谱发现，化合物6与化合物5不同之处是：化合物5的甲基峰h3-3″″(δh1.15)和亚甲基峰h2-2″″(δh2.40)在化合物6中消失了，取而代之的是化合物6在δh2.07(h3-2″″)处出现了一个单峰的乙酰基甲基峰。结合hsqc谱中c-h相关信号的归属，hmbc谱中从h3-2″″(δh2.07s)信号(见图4，表3)出发到c-1″″(δc172.7)和h1-4″到c-1″″(δc172.7)的相关峰表明乙酰基的取代位置位于5-甲基-d-鼠李糖c-4″位。化合物7，淡黄色无定形粉末，hr-esims确定其分子式为c48h70o16(实验值m/z901.4608[m-h]-，计算值901.4591，不饱和度为14。1h-nmr和13c-nmr谱表明化合物7与化合物6结构相似，分子量比化合物6少58，提示化合物7结构中比化合物6可能少了乙酰基和一个羟基。比较二者1h谱发现，化合物7与化合物6不同之处是：化合物6的δh2.07(h3-2″″)处单峰的乙酰基的甲基峰在化合物7中消失了。表明化合物6的5-甲基-d-鼠李糖c-4″位的酯键水解。且在δh4.02(h1-18)出现的裂分为多重峰的次甲基峰在化合物7的氢谱中消失，取而代之的是化合物7在ha-18(δh1.73m)、ha-18(1.85m)处出现了一个多重峰的亚甲基峰，化合物7在它的碳谱和dept-135谱中多了一个亚甲基碳信号c-18(δc27.3)。结合1h-1h-cosy谱和hsqc谱中c-h相关信号的归属，hmbc谱中从h3-19(δh0.99t)信号(见图4，表3)出发到c-17(δc76.4)、c-18(δc27.3)的相关峰，表明5-甲基-d-鼠李糖c-4位羟基脂键水解和c-18位羟基还原。表3.化合物5、6和7的nmr数据table3.nmrspectroscopicdataforcompounds5、6and7arecordedat500mhz.brecordedat125mhz.incd3od实施例2：七种脱氯台勾霉素化合物的抑菌活性的测定以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantstaphylococcusaureus,mrsa)，金黄色葡萄球菌(staphyloccocusaureusatcc29213)，藤黄微球菌(micrococcusluteus)，苏云金芽孢杆菌(bacillusthuringiensis)，粪肠球菌(enterococcusfaecalisatcc29212)等五种细菌作为指示菌，脱氯台勾霉素类化合物1-7进行了抑菌活性测定，实验方法参考文献[zhangw,liuz,ls,cheny,zhangh,zhangg,zhuy,zhangg,zhangw,liuj和zhangc,fluostatinsi-kfromthesouthchinasea-derivedmicromonosporarosariascsion160.j.nat.prod,2012,75,1937-1943]。以台勾霉素b作阳性对照。结果表明化合物1对所测的五种致病菌表现有生长抑制活性(表4)，作用与台勾霉素b相当，对粪肠球菌(enterococcusfaecalisatcc29212)的抑制活性显著优于台勾霉素b。其余六种脱氯类台勾霉素分别对五种指示菌有不同的抑制活性。以上结果表明本发明的七种脱氯类台勾霉素通过生物工程或化学修饰可望开发成为抗菌新药。表4.化合物1-7mic测定结果table4.micvaluesofdehalogenatedtiacumicinscompounds当前第1页12当前第1页12