用于使聚合物基底的表面改性的方法以及具有由此改性的表面的聚合物基底与流程

本发明涉及用于使聚合物基底的表面改性的方法，特别地，涉及用于使用等离子体、亲水性底漆和包含疏水性氟化合物的涂覆剂使聚合物基底的表面改性的方法。

背景技术：

生物芯片意指通过将生物有机材料(例如来源于生物体的酶、蛋白质、抗体、dna、微生物、或动植物细胞和器官、以及神经细胞和器官)与无机材料(例如半导体或玻璃)结合以现有半导体芯片形式制成的混合装置。生物芯片通过利用生物分子的独特功能并模仿活生物的功能来诊断传染性疾病或分析基因，并用作用于信息处理的新功能装置。生物芯片可以广泛定义，包括可以用于检测和分析各种生化材料的生物传感器，例如芯片实验室，其紧密集成并因此具有自动分析功能，以便对样品进行预处理、生化反应、检测和数据分析。

生物芯片可以应用于各种领域，例如微芯片、医疗装置、医疗材料和spf设施，并且用于使作为生物芯片的构成材料之一的聚合物基底(特别是有机硅聚合物基底)的表面改性的技术是非常重要的基本基础技术。

聚二甲基硅氧烷(pdms)是有机硅聚合物之一，由于具有各种优点，例如材料的透明性、材料的柔性、对细胞无毒、易于制造以及制造成本低，其除现有的微阵列和微/纳米流体系统外，还被广泛用作制造融合生物技术的芯片实验室的基础材料。

然而，虽然pdms具有这些优点，pdms尚未广泛用作最终商业化的芯片的材料，并且样品吸附到pdms芯片上的问题是最大的原因。pdms呈其中-osi(ch3)2-重复的形式，并且由于其中的-ch3基团而具有疏水性表面，但是由于其独特的粘度，疏水性材料的吸附非常强，并且一旦被吸附，难以使材料解吸。为了分析单个纳米颗粒和痕量的物质，非常有必要防止可能成为实验结果的噪声的吸附，尤其是由于诸如蛋白质和细胞的生物样品包含在其表面上的一部分疏水性基团，在某些情况下会出现以下问题：生物样品易于吸附到pdms的表面上并且其独特的3维结构变形。相反，由于其疏水性表面，难以使细胞附着至pdms的表面并培养细胞，并且即使在使用特定化合物、抗体等对其表面赋予选择性时，也需要包括多个步骤的表面处理工序。

为了改进该问题，已经持续进行以下尝试来使聚合物基底的表面改性：对聚合物基底(例如pdms)的表面进行等离子体处理、使非特异性蛋白质吸附至聚合物基底的表面上、或者使用包含teflon或类似于teflon的碳氟化合物基团的材料。

然而，最广泛使用的氧等离子体提供超亲水性表面，但是亲水性表面的维持时间短，使pdms的表面粗糙，或者甚至形成裂纹，导致存在以下问题：氧等离子体不适用于在微芯片中使用相对小的颗粒(例如纳米颗粒)的实验。此外，在相关领域中公知用于玻璃或塑料的基于氟化合物的涂覆剂的情况下，发现的缺点在于，涂覆剂在干燥之后形成硬涂层，使得聚合物基底的柔性降低或者涂层因聚合物基底的运动而被破坏。

完成本发明是为了奠定开辟通过防止这样的非特异性生物分子和异物(例如颗粒)的吸附来观察真正的单分子的可能性的基础，并因此有望增加可以将基于聚合物(例如有机硅)的生物芯片用作平台的生物实验的范围。

技术实现要素：

技术问题

本发明提供用于使聚合物基底的表面改性的方法，特别地，提供了使用等离子体处理、亲水性底漆和包含疏水性氟化合物的涂覆剂来使聚合物基底的表面改性的方法。

技术方案

本发明的一个方面提供了用于使聚合物基底的表面改性的方法，该方法包括：用等离子体处理聚合物基底的表面；将亲水性底漆施加至经等离子体处理的聚合物基底的表面上；以及用包含疏水性氟化合物的涂覆剂涂覆经等离子体处理的聚合物基底。

下文中，将详细地描述聚合物基底。

根据本发明的一个示例性实施方案，在本发明的方法中，首先进行用等离子体处理聚合物基底的表面。

在本步骤中，将聚合物基底在室温下在大气压下放入等离子体反应器中，向其中注入气体，然后通过向存在于等离子体反应器两端的电极施加电力来形成气体的等离子体。

根据本发明的一个示例性实施方案，等离子体可以是氩气、氮气、氧气、或其中混合有这些气体中的两种或更多种的混合气体的等离子体。此外，等离子体可以为低温等离子体或高温等离子体，并且优选为在低温下产生的等离子体。可以通过用等离子体处理聚合物基底的表面来获得亲水性改性的表面，并且随后结合涂覆剂可以更牢固且安全地进行。

根据本发明的一个示例性实施方案，在用等离子体处理聚合物基底的表面时，通过使用大气压(760托)下的氩气和氧气的混合气体，利用rf电源施加700w至800w的功率来形成等离子体，从而用等离子体以15mm/秒的速度往复地处理聚合物基底的表面。

根据本发明的一个示例性实施方案，聚合物基底可以包括通过一种或更多种单体的缩聚或加成聚合制备的天然或人造聚合物，并且可以优选包括基于硅氧烷的聚合物，更优选有机硅橡胶、丙烯酸类树脂、聚苯乙烯树脂、聚氯乙烯树脂、聚乙烯树脂、聚丙烯树脂、尼龙、酚醛树脂、三聚氰胺树脂、脲树脂或环氧树脂，甚至更优选疏水性树脂、氟聚合物、丙烯酸类树脂或聚乙烯树脂，但不限于此。

根据本发明的一个示例性实施方案，在用等离子体处理聚合物基底的表面之后，该方法还可以包括将亲水性底漆施加至聚合物基底的表面上。

根据本发明的一个示例性实施方案，在用等离子体处理聚合物基底的表面之后，进行将亲水性底漆施加至聚合物基底的表面上。

根据本发明的一个示例性实施方案，底漆可以包括基于有机硅的聚合物与官能性有机或无机硅烷化合物的缩聚物。

如本文所用，“底漆”是缓冲涂层，其以纳米厚度施加在基底与功能性涂层之间以改善粘合性，并且可以是基于有机硅的聚合物与官能性有机或无机硅烷化合物的缩聚反应产物。

如本文所用，“基于有机硅的聚合物”可以具体选自具有一个或更多个反应性基团的改性有机硅聚合物，并且可以优选为氨基烷基硅烷的聚合物，所述反应性基团选自氨基、环氧基、羧基、甲醇基、甲基丙烯酰基、巯基和苯基、及其组合。

在本说明书中使用的作为底漆的组分的“官能性有机或无机硅烷化合物”可以是具有与基于有机硅的聚合物进行缩聚反应的一个或更多个反应性基团的有机或无机硅烷化合物，所述反应性基团例如氨基、乙烯基、环氧基、烷氧基、卤素基团、巯基、硫醚基等。具体地，官能性有机或无机硅烷化合物可以选自：氨基丙基三乙氧基硅烷；氨基丙基三甲氧基硅烷；氨基-甲氧基硅烷；苯基氨基丙基三甲氧基硅烷；n-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三甲氧基硅烷；n-(β-氨基乙基)-γ-氨基丙基甲基二甲氧基硅烷；γ-氨基丙基三二甲氧基硅烷；γ-氨基丙基二甲氧基硅烷；γ-氨基丙基三乙氧基硅烷；γ-氨基丙基二乙氧基硅烷；乙烯基三乙氧基硅烷；乙烯基三甲氧基硅烷；乙烯基三(甲氧基乙氧基)硅烷；二烷氧基硅烷、三烷氧基硅烷或四烷氧基硅烷；乙烯基甲氧基硅烷；乙烯基三甲氧基硅烷；乙烯基环氧基硅烷、乙烯基三环氧基硅烷；3-缩水甘油氧基丙基三甲氧基硅烷；3-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷；γ-缩水甘油氧基丙基三乙氧基硅烷；γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷；氯三甲基硅烷；三氯乙基硅烷；三氯甲基硅烷；三氯苯基硅烷；三氯乙烯基硅烷；巯基丙基三乙氧基硅烷；三氟丙基三甲氧基硅烷；双(三甲氧基甲硅烷基丙基)胺；双(3-三乙氧基甲硅烷基丙基)四硫化物；双(三乙氧基甲硅烷基丙基)二硫化物；(甲基丙烯酰氧基)丙基三甲氧基硅烷；2-(3,4-环氧环己基)乙基三甲氧基硅烷；3-缩水甘油氧基丙基甲基二乙氧基硅烷；3-缩水甘油氧基丙基二乙氧基硅烷；3-缩水甘油氧基丙基三乙氧基硅烷；对苯乙烯基三甲氧基硅烷；及其组合，可以优选地选自氨基丙基三乙氧基硅烷和包含其的组合，但不限于此。

底漆通过湿法进行施加，并且通过将亲水性底漆完全溶解在溶剂(特别地，乙醇)中然后将所得溶液施加至聚合物基底的表面上来进行施加。施加包括涂刷、喷洒、浸渍等，并且可以优选通过喷洒来进行。

此后，进行用包含疏水性氟化合物的涂覆剂涂覆聚合物基底的表面。

如本文所用，术语“氟化合物”广泛指化合物中包含氟(f)原子的化合物，并且包括单一化合物和聚合的化合物。优选地，氟化合物包含基于氟的有机组分，并表现出疏水性。

根据本发明的一个示例性实施方案，氟化合物可以为基于氟的聚合物与官能性有机或无机硅烷化合物的缩聚反应的产物。

如本文所用，“基于氟的聚合物”可以为全氟化聚合物。具体地，基于氟的聚合物可以选自：含氟丙烯酸酯聚合物；全氟聚醚；以及包含以下的聚合物：四氟乙烯、六氟丙烯、氯三氟乙烯、三氟乙烯、偏二氟乙烯、八氟丁烯、五氟苯基三氟乙烯、五氟苯基乙烯、和由所述单体产生的重复单元，并且可以优选为全氟聚醚，但不限于此。

在本说明书中使用的作为氟化合物的组分的“官能性有机或无机硅烷化合物”可以是具有与基于氟的聚合物进行缩聚反应的一个或更多个反应性基团的有机或无机硅烷化合物，所述反应性基团例如氨基、乙烯基、环氧基、烷氧基、卤素基团、巯基、硫醚基等。优选地，官能性有机或无机硅烷化合物可以选自：包含烷氧基的有机硅烷、包含官能性有机基团的硅烷化合物、和有机硅烷组合物的部分水解缩合物。具体地，官能性有机或无机硅烷化合物可以选自：氨基丙基三乙氧基硅烷；氨基丙基三甲氧基硅烷；氨基-甲氧基硅烷；苯基氨基丙基三甲氧基硅烷；n-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三甲氧基硅烷；n-(β-氨基乙基)-γ-氨基丙基甲基二甲氧基硅烷；γ-氨基丙基三二甲氧基硅烷；γ-氨基丙基二甲氧基硅烷；γ-氨基丙基三乙氧基硅烷；γ-氨基丙基二乙氧基硅烷；乙烯基三乙氧基硅烷；乙烯基三甲氧基硅烷；乙烯基三(甲氧基乙氧基)硅烷；二烷氧基硅烷、三烷氧基硅烷或四烷氧基硅烷；乙烯基甲氧基硅烷；乙烯基三甲氧基硅烷；乙烯基环氧基硅烷；乙烯基三环氧基硅烷；3-缩水甘油氧基丙基三甲氧基硅烷；3-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷；γ-缩水甘油氧基丙基三乙氧基硅烷；γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷；氯三甲基硅烷；三氯乙基硅烷；三氯甲基硅烷；三氯苯基硅烷；三氯乙烯基硅烷；巯基丙基三乙氧基硅烷；三氟丙基三甲氧基硅烷；双(三甲氧基甲硅烷基丙基)胺；双(3-三乙氧基甲硅烷基丙基)四硫化物；双(三乙氧基甲硅烷基丙基)二硫化物；(甲基丙烯酰氧基)丙基三甲氧基硅烷；2-(3,4-环氧环己基)乙基三甲氧基硅烷；3-缩水甘油氧基丙基甲基二乙氧基硅烷；3-缩水甘油氧基丙基二乙氧基硅烷；3-缩水甘油氧基丙基三乙氧基硅烷；对苯乙烯基三甲氧基硅烷；及其组合，可以优选为氨基丙基三乙氧基硅烷和包含其的组合，但不限于此。

涂覆优选通过湿法进行，并且通过将疏水性氟化合物完全溶解在溶剂(特别地，基于氟的溶剂(hfe7200，3m))中，然后将所得溶液施加至聚合物基底的表面来进行。施加包括涂刷、喷洒、浸渍等，并且可以优选通过喷洒来进行。

本发明的一个方面提供了表面通过所述方法被改性的聚合物基底。

本发明的一个方面提供了包括所述聚合物基底的生物芯片。该生物芯片可以具体为微阵列芯片或微流体芯片。该生物芯片可以通过另外将能够检测各种生物分子并来源于生物体的酶、蛋白质、抗体、dna、化合物等附着至根据本发明的聚合物基底上来制备，并且该生物芯片可以通过各种物理和化学方法(例如电化学、荧光、spr、fet和热传感器)检测要检测的目标材料的存在和不存在和/或浓度。

有益效果

通过根据本发明使疏水性聚合物基底的表面改性，可以在不损害材料的透明性、柔性等(这些是包括现有的疏水性聚合物基底的装置、设备等的优点)的情况下，显著提高防止非特异性生物分子和异物(例如颗粒)吸附至装置等的表面上的效果。

此外，在保持材料的透明性和柔性、细胞生存力等(这些是包括现有的疏水性聚合物基底的装置、设备等的优点)的同时，可以提供其中防止非特异性生物分子(例如蛋白质和细胞)和异物(例如颗粒)吸附至装置、设备等上的效果得到显著提高的聚合物基底以及包括其的生物芯片。

附图说明

图1和图2示出了根据本发明和比较例的各pdms生物芯片在其表面改性之前和之后的表现出fitc-bsa蛋白的吸附程度的荧光照片和相对荧光强度。

图3示出了根据本发明和比较例的各pdms生物芯片在其表面改性之前和之后对基于油的墨的吸附程度，左侧和右侧分别示出了吸附bsa蛋白的情况和未吸附bsa蛋白的情况的曲线图。

图4示出了根据本发明和比较例的各pdms生物芯片在其表面改性之前和之后的光透射率，a)和b)分别示出了吸附bsa蛋白的情况和未吸附bsa蛋白的情况的曲线图。

图5示出了在培养皿(对照)、表面未经改性的pdms和根据本发明的pdms生物芯片上培养的mda细胞系的形态观察结果(0小时、48小时和72小时)。

图6和图7示出了在培养皿(对照)、表面未经改性的pdms和根据本发明的pdms生物芯片上培养的mda细胞系中的附着在底部的细胞和漂浮在培养基中的细胞的存活和死亡确定测试结果。绿色和红色分别表示活细胞和死细胞，并且相应细胞的数量与荧光强度成比例。图8示出了通过图6和7中的荧光强度对细胞生存力的数值比较。

图9示出了根据本发明的pdms基底在(a)实验期间和在b)实验完成之后的peel测试结果。

具体实施方式

本发明的一个方面提供了用于使聚合物基底的表面改性的方法，所述方法包括：用等离子体处理聚合物基底的表面；将亲水性底漆施加至经等离子体处理的聚合物基底的表面上；以及用包含疏水性氟化合物的涂覆剂涂覆经等离子体处理的聚合物基底。

发明实施方式

下文中，将通过一个或更多个实施例更详细地描述本发明。然而，提供这些实施例仅用于示例性地解释一个或更多个实施例，并且本发明的范围不受这些实施例限制。

实施例1.pdms硬币状物的表面改性

1.1.pdms硬币状物的表面的等离子处理

首先，制造直径为1.5cm且高度为0.5cm的pdms硬币状物并在室温下在大气压下对其进行等离子体处理，并使用经等离子体处理的pdms硬币状物来进行有机污染物的清洁和表面改性。

对于等离子体处理，在1个大气压(760托)的大气压力下使用25sccm的氩气(ar)和30sccm的氧气(o2)的混合气体，通过利用rf电源施加700w至800w的功率来引发等离子体的形成，从而用等离子体以15mm/秒的速度往复地处理pdms硬币状物。

1.2.使用包含氟化合物的涂覆剂wnp/waf的pdms硬币状物的表面涂覆

在将在实施例1.1.中经等离子体处理的pdms硬币状物从等离子体反应器中取出，并通过在湿法下以40ml/m²喷洒nano-primer(np，产品名称：ck-wnp，由ceko,inc.制造，作为附着增强剂被购买)来涂覆至具有约10nm至20nm的厚度之后，在湿法下以35ml/m²用wetanti-fingerprint(waf，产品名称：ck-waf，由ceko,inc.制造，其是疏水性化合物，作为氟化合物被购买)对所得产物进行喷涂，然后通过热风将经涂覆的pdms硬币状物干燥约1小时(wnp/waf法，在这种情况下，np和af之前的w表示涂覆在湿法下进行)。在本实施例1.2.中，nano-primer(np)用作用于增强附着的缓冲层。

比较例1.使用af的pdms硬币状物的表面改性1

将在实施例1.1.中经等离子体处理的pdms硬币状物从等离子体反应器中取出，使用sio2涂覆至具有12nm的厚度，然后在干法(af1法)下通过利用电子束的蒸镀沉积来用0.3g作为疏水性化合物的af涂覆。在这种情况下，所形成的疏水性涂覆箔的厚度为约20nm至30nm。在本比较例1中，sio2用作用于增强附着的缓冲层。

比较例2.使用af的pdms硬币状物的表面改性2

将在实施例1.1.中经等离子体处理的pdms硬币状物从等离子体反应器中取出，使用sio2涂覆至具有5nm的厚度，然后在干法(af2法)下通过电阻加热元件用0.3g作为疏水性氟化合物的af涂覆。在本比较例2中，sio2用作用于增强附着的缓冲层。

比较例3.使用wnp的pdms硬币状物的表面改性

将在实施例1.1.中经等离子体处理的pdms硬币状物从等离子反应器中取出，并用通过将0.5g作为包含氟化合物的亲水性化合物的np完全溶解在100g作为溶剂的乙醇中而获得的所得产物来充分喷涂，使得其表面在湿法下得以均匀涂覆，然后通过热风将经涂覆的pdms硬币状物干燥10分钟(wnp法)。

实验例1.在表面改性之后对蛋白质的吸附的评估

通过将fitc-bsa粉末溶解在dpbs中来制备0.01％(0.1mg/ml)fitc-bsa储备液，并将600μl的0.01％fitc-bsa溶液或600μl的dpbs溶液置于在实施例1中经表面改性的pdms硬币状物的涂层表面上，然后放置3分钟。将pdms硬币状物用dpbs洗涤1分钟，然后用挤压瓶中容纳的蒸馏水强烈洗涤1分钟，并通过风机除去其残留水分。此后，拍摄pdms硬币状物表面的光学图像和荧光图像，并使用imagej程序进行荧光定量。

结果，可以确定，当pdms硬币状物的表面用表现出疏水性的af涂覆时(实施例1以及比较例1和2)，蛋白质几乎不被吸附(＜1％)，而当pdms硬币状物的表面用表现出亲水性的np涂覆时(比较例3)，蛋白质以高比例(>400％)被吸附。此外，当pdms硬币状物的表面用np涂覆时(比较例3)，在吸附实验中会发现裂纹(见图1和2)。

实验例2.在表面改性之后对基于油的墨的吸附的评估

在实验例1中制备的其上吸附有蛋白质的pdms硬币状物(放置在0.01％fitc-bsa溶液中的pdms硬币状物)的表面和其上未吸附蛋白质的pdms硬币状物(放置在dpbs溶液中的pdms硬币状物)的表面上，用黑色的基于油的墨笔以预定速度画标记，并观察基于油的墨被吸附到pdms硬币状物上的程度。

结果，可以确定，当pdms硬币状物的表面用表现出疏水性的af涂覆时(实施例1以及比较例1和2)，墨呈水滴的形式，而当pdms硬币状物的表面用表现出亲水性的np涂覆时(比较例3)，墨以用基于油的墨笔画出的标记的形式被吸附。特别地，即使在疏水性涂层中，也可以确定在湿法下涂覆pdms硬币状物的wnp/waf法具有最强的疏水性，并且同时，基于油的墨以最相似于完美的圆的形式聚集(见图3)。

实验例3.在表面改性之后的光透射率的评估

使用uv-vis分光光度计(hitachiu-4100，240nm至1300nm)观察实验例1中制备的其上吸附有蛋白质的pdms硬币状物(放置在0.01％fitc-bsa溶液中的pdms硬币状物)和其上未吸附蛋白质的pdms硬币状物(放置在dpbs溶液中的pdms)各自的光透射率的变化。

结果，当未吸附蛋白质时，未经处理的pdms硬币状物的透射率最佳，其中pdms硬币状物通过wnp/waf法被涂覆的实施例1的透射率(经受表面改性涂覆的pdms的透射率与裸露的pdms相比为：98.27％至99.89％)次优，其中pdms硬币状物通过wnp方法被涂覆的比较例3的透射率(经受表面改性涂覆的pdms的透射率与裸露的pdms相比为：97.94％至99.14％)排第三(见图4a)。

相比之下，确定当吸附有蛋白质时，蛋白质的吸附影响基底的光透射率(见图4b)。

实验例4.在表面改性之后的细胞生存力的评估

以与实施例1中描述的方法相同的方式对pdms片材的表面进行改性，不同之处在于使用盘尺寸为100-π且高度约1mm的pdms片材代替直径为1.5cm且高度为0.5cm的pdms硬币状物。

将经表面改性的pdms片材用酒精消毒，然后用培养基洗涤以除去残留的酒精。在将经表面改性的pdms片材放在培养皿的底部上并向其中放入12ml培养基后，向其中接种约4×10⁶个mda细胞，并将所得的pdms片材培养3天。3天后，进行细胞附着形态以及存活和死亡确定测试。

作为观察细胞附着形态的结果，在通过本发明的方法进行了表面改性的pdms硬币状物片材上培养的mda细胞聚集而不附着于pdms的表面上，从而形成多个球状体，并且在同一时间段期间，观察到的细胞与培养皿中培养的细胞之间的数量和形态形状未表现出显著差异(见图5)。

作为细胞存活和死亡确定测试的结果，在通过本发明的方法进行了表面改性的pdms硬币状物片材中培养3天的附着细胞与培养皿中培养的细胞之间的存活和死亡未表现出显著差异(与对照组相比为88.4％)。可以确定，在漂浮于培养基中的细胞的存活和死亡中，在通过本发明的方法进行了表面改性的pdms硬币状物片材中培养的细胞与在培养皿中培养的细胞相比具有更高的生存力(见图6至8)。

此外，通过本实验，可以确定本发明的涂覆剂对mda细胞系没有表现出严重的毒性。

实验例5.在表面改性之后的弹性的评估

使用利用20:1pdms制备的基底进行通过将拉伸度固定10分钟来测量弹性的peel测试。

确定当基底的两侧被拉出时，其表面变模糊，但是未被拉伸的部分保持了其原本的透明性(见图9a)。在持续10分钟的拉伸实验完成之后，确定当pdms基底返回到其原始状态时，透明性恢复到几乎等于实验之前的透明性(见图9b)。

实验例6.具有改性表面的生物相容性生物芯片的制备

首先，通过将介电材料施加至由pdms形成的基底上来形成子材料层(subspotmateriallayer)，将光致抗蚀剂施加至子材料层上，然后通过光刻法形成特定的图案。通过对被图案暴露的子材料层进行蚀刻来制造具有期望结构的生物芯片基底。

将生物芯片基底在室温下在大气压下放入等离子体反应器中，然后如

实施例1.1.中所述用等离子体进行处理。接着，用通过将1g作为氟化合物的af完全溶解在100g基于氟的溶剂(hfe7200，3m)中而获得的所得产物喷涂经等离子体处理的生物芯片，并将所得生物芯片干燥，从而完成生物芯片基底。

根据上述内容，本发明已主要基于其优选实施例进行了概述。本发明所属领域的普通技术人员将能够理解，在不背离本发明的本质特征的情况下，本发明可以以修改的形式实现。因此，所公开的实施例不应从限制性角度而应从说明性角度考虑。本发明的范围由上述权利要求而不是前述详细描述来表示，并且应当理解，权利要求的含义和范围以及源自其等同概念的所有变化或修改形式均落入本发明的范围内。