1.金黄色葡萄球菌夹心DNA杂交快速检测用探针,其特征在于:包括SA捕获探针和SA检测探针,其中SA捕获探针的DNA序列为SEQ ID NO.1,SA检测探针的DNA序列为SEQ ID NO.2。
2.一种金黄色葡萄球菌夹心DNA杂交快速检测用试剂盒,其特征在于:包括包被了poly dT的96孔板、前处理液、菌液裂解液、裂解缓冲液、核酸杂交液、探针液、洗涤液、显色液、终止液、阳性对照液和阴性对照液,其中一个微孔反应的用量为:
所述探针液由以下成分组成:
DNA序列为SEQ ID NO.1的6μmol/L的SA捕获探针16μL;
DNA序列为SEQ ID NO.2的6μmol/L的SA检测探针16μL;
合计32μL;
所述前处理液,体积为30μL;
裂解液,体积为30μL,由菌液裂解液和裂解缓冲液混合配制而成;
所述核酸杂交液,体积为96μL;
所述洗涤液,需10倍稀释后使用,体积为750μL;
所述显色液,体积为150μL;
所述终止液,体积为100μL。
3.根据权利要求2所述金黄色葡萄球菌夹心DNA杂交快速检测用试剂盒,其特征在于:所述阳性对照液为SA菌液;所述阴性对照液为非SA菌液。
4.一种金黄色葡萄球菌夹心DNA杂交的非疾病检测目的的快速检测方法,包括如下步骤:
(1)增菌用胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)培养待测菌液48h,获得待检样品液;
(2)菌液裂解反应将待检样品液、前处理液和裂解液按体积比4﹕1:1的比例在玻璃管中混合,放入37℃水浴锅中培养5分钟;
(3)杂交反应吸取150μL步骤(2)裂解后的菌液加到包被了poly dT的微孔中,再按体积比3:1比例混合核酸杂交液和探针液,吸取125μL加到含有菌液的微孔中,在室温下于轨道式摇床上以150rpm速度摇板2分钟后置于培养箱中进行温育;温育后用1×PBST Buffer洗板5次,加150μL显色液到每一个微孔中室温下温育20分钟,最后加入100μL 2M的终止液,放入多功能酶标仪中读取450nm处的吸光度;
(4)结果判定(菌液OD值-空白对照OD值)/(阴性对照OD值-空白对照OD值)≥2.1即可判定为阳性,且显色液加入微孔后变为蓝色,颜色越深待测菌浓度越高。
5.根据权利要求4所述金黄色葡萄球菌夹心DNA杂交快速检测方法,其特征在于:所述探针液中捕获探针和检测探针按以体积比1﹕1的比例混合。