本发明属于日化用品
技术领域：
，具体涉及一种含有金莲花干细胞提取物的手工皂及其制备方法。
背景技术：
：随着人们生活水平不断提高，对健康绿色安全的生活追求越来越高，人们对日常清洁护理用品需求的不断增加，市场上也随之产生了不同种类的日化用品，例如：洗面奶、洗手液及各种香皂等等。由于上述产品会使用一些化学物质，会给敏感皮肤带来诸多的问题，如用后皮肤出现干燥、炎症、瘙痒、红肿等过敏现象，大大限制了上述产品的应用。手工皂是使用甘油、动物和植物油脂等原料，通过皂化制作而成，能溶于水，有洗涤去污作用。其对皮肤的滋养作用尤为突出，既可用作杀菌、卸妆，又可用作洁面、沐浴用。由于其成分天然，不含防腐剂、表面活性剂等成分，而且制作方法简单、方便，因此越来越受到广大群众的欢迎。手工皂分为冷制皂、热制皂和再生皂。冷制皂是相对于工业皂所采用的热溶法而言的，油脂、氢氧化钠溶液混合后，发生皂化反应，除了混合前需将固体的油脂加热溶化成液体外，在成皂的过程中是不需要高温加热的，反应完成后，皂液入模使其自然干燥，待三至五周后脱模便可直接使用。热制皂是利用热制法做成的皂，在油脂与氢氧化钠进行皂化反应至稠状阶段时，再以断续加热的方式，使其快速皂化，脱模后放置一周使水分蒸发，即可使用。再生皂即是对冷制皂和热制皂的再次加工、优化。专利文献cn103215152a公开了一种防治皮肤瘙痒功效手工皂及其制备方法，所述手工皂由中药提取液、橄榄油、椰子油、可可脂、蜜蜡、氢氧化钠、纯净水制成，其中中药提取液为：荆芥、防风、苦参、地肤子、蛇床子、当归和黄柏的提取液。该防治皮肤瘙痒手工皂是由天然植物制作成，可用于全身皮肤清洁，对皮肤无刺激，且防治皮肤瘙痒效果好，是一种可长期使用的环保洗护产品。专利文献cn107937176a公开了一种高效抗氧化祛痘手工皂，所述高效抗氧化祛痘手工皂由中药提取物、毛竹叶提取物、火棘果提取物、蓝靛果提取物、山竹壳提取物、意大利牛舌草提取物、荔枝叶提取物、杨梅叶提取物、紫苏叶提取物、艾蒿提取物、烟酰胺、茶皂素、沙棘籽油和天然皂基组成。制得得到的手工皂抗氧化能力强，可以有效防止色素的沉积，防止痘痕和痘疤的形成的问题。虽然植物提取物具有多种治疗瘙痒、美容的功效，越来越多的手工皂选择添加天然植物提取物。但是简单的添加植物提取物容易出现腐败，缩短手工皂保质期的缺陷，若是添加植物精油，往往容易挥发而发挥不出应有的效果。因此，研究和开发出一种稳定性好，止痒、消炎效果好，刺激性低的天然手工皂仍是目前亟需解决的难题。技术实现要素：为了解决现有技术中手工皂存在的不足，本发明的目的在于提供一种含有金莲花干细胞提取物的手工皂及其制备方法。本发明提供的含有金莲花干细胞提取物的手工皂具有杀菌、抑菌，防止皮肤瘙痒，改善皱纹、抗衰老的作用，同时还具有稳定性高、刺激性低和安全性高的优点，是一种较为理想的含有金莲花干细胞提取物的手工皂。本发明提供了一种含有金莲花干细胞提取物的手工皂，包括以下组分及其重量份数：金莲花干细胞提取物4～6份、金莲花精油2～4份、洋甘菊精油3～6份、乳木果油20～40份、亚油酸钠10～12份、可可脂4～6份、橄榄油10～16份、霍霍巴油6～8份、氢氧化钠4～6份和水6～10份。进一步地，包括以下组分及其重量份数：金莲花干细胞提取物5份、金莲花精油3份、洋甘菊精油4份、乳木果油30份、亚油酸钠11份、可可脂5份、橄榄油12份、霍霍巴油7份、氢氧化钠5份和水8份。进一步地，所述金莲花干细胞提取物的制备方法为：a取切除根冠的金莲花根尖，清洗，消毒，将金莲花根尖切成5mm*5mm大小，得外植体；b将步骤a得到的外植体放入诱导培养基中培养，培养温度为25±2℃，光照为14h/d的条件下培养3～6天，得静止中心干细胞；c将步骤b得到的静止中心干细胞转移到生长培养基中摇床培养，培养温度为23～25℃，光照强度为2000lx，光照时间为10h/d，得单细胞；d将步骤c得到单细胞进行扩大培养，培养温度为23～25℃，光照强度为2000lx，光照时间为10h/d，得金莲花干细胞，冷冻、粉碎，即得。进一步地，所述步骤b中的诱导培养基为：ms培养基+ba1～3mg/l+naa1～3mg/l，ph值为5.5～6.0。进一步地，所述步骤c中的生长培养基为：ms培养基+ba1～3mg/l+naa2～3mg/l+土豆汁8～12％，ph值5.2～5.6。进一步地，所述步骤d中的扩大培养的培养基为：ms培养基+ba0.5～1.5mg/l+naa1～3mg/l+土豆汁25～35％，ph值5.2～5.6。进一步地，所述金莲花精油的制备方法：精密称取旱金莲花粉末25g，置于500ml圆底烧瓶中，加入300ml蒸馏水，加入沸石，连接于同时蒸馏萃取装置一端，加热，装置的另一端连接装有40ml二氯甲烷的100ml烧瓶，水浴加热至95～100℃，蒸馏萃取6h，以无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，即得。进一步地，所述洋甘菊精油的制备方法：将洋甘菊鲜花加入萃取釜中，用超临界二氧化碳流体进行连续循环萃取，控制萃取釜温度35～38℃，萃取压强20～22mpa，流速为18～20kg/h，萃取时间1～2h，将萃取后的二氧化碳流体进入分离器进行分离，二氧化碳流体的流量为12～15kg/h，分离器压力为8～10mpa，温度为40～45℃，提取1～2h，从分离器底部放出萃取物，静置后，经油水分离得到洋甘菊精油。另外，本发明还提供了所述的含有金莲花干细胞提取物的手工皂的制备方法，包括以下步骤：s1将金莲花干细胞提取物、金莲花精油、洋甘菊精油、乳木果油、亚油酸钠、可可脂和橄榄油合，水浴加热至完全溶解，搅拌，冷却至50～55℃保温，得混合油；s2将氢氧化钠加入水中搅拌至完全溶解，冷却至50～55℃保温，得碱溶液；s3将步骤s2得到的碱溶液加入步骤s1得到的混合油中，边加边搅拌，直到混合油变浓稠，接着加入霍霍巴油搅拌均匀，倒入模具中静置24～48h，脱模，置于通风干燥处4～8周，即得。本发明提供本发明提供的金莲花干细胞提取物的制备方法具有细胞培养周期短，细胞增殖速度快的优点。本发明将自制的金莲花干细胞提取物与自制的金莲花精油和洋甘菊精油联合使用可以防止皮肤受细菌侵扰，缓解皮肤搔痒及皮肤氧化损伤，有效降低皮肤氧化损伤，缓解皮肤褶皱的效果；同时，其还可以增加皮肤内胶原蛋白合成来增加真皮中弹性纤维而改善皱纹的效果，还能消除引起皮肤老化的活性氧簇，从而达到较好的抗衰老效果。进一步地，本发明提供的含有金莲花干细胞提取物的手工皂还含有亚油酸钠和乳母果油，亚油酸钠和乳母果油的联合使用可以有效的防止金莲花精油和洋甘菊精油的挥发，使金莲花精油和洋甘菊精油可以长时间停留在肌肤表面发挥作用，可以进一步提高手工皂的防止瘙痒、改善皱纹，抗衰老的效果。本发明提供的含有金莲花干细胞提取物的手工皂中的亚油酸与可可脂和金莲花干细胞提取物联合使用还可以提高手工皂的稳定性，延长手工皂的保质期。其具体原理为：金莲花干细胞提取物可以对手工皂中的真菌和多种致病菌具有杀灭或抑制作的用，同时，亚油酸与可可脂可以进一步增强金莲花干细胞提取物的杀菌效果。而且，该三者联合使用还可以有效的防止手工皂酸化腐败，防止手工皂出现黄色或茶色的斑点、油斑，同时可以防止手工皂出现酸化臭的味道，提高手工皂的产品质量。与现有技术相比，本发明提供的含有金莲花干细胞提取物的手工皂具有以下优势：(1)本发明提供的含有金莲花干细胞提取物的手工皂具有杀菌、抑菌，防止皮肤瘙痒、改善皱纹，抗衰老的作用，是一种较为理想的手工皂；(2)本发明提供的含有金莲花干细胞提取物的手工皂还具有稳定性高、刺激性低和安全性高的优点，是一种可长期使用的环保型手工皂。具体实施方式：以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。本发明的组分为常规的市售组分，对人体无毒副作用。其中：ms培养基、ba为6-苄氨基腺嘌呤、naa为a-萘乙酸，均购于北京索莱宝科技有限公司，土豆汁是采用新鲜土豆进行榨汁。实施例1、金莲花干细胞提取物的制备方法a取切除根冠的金莲花根尖，清洗，消毒，将金莲花根尖切成5mm*5mm大小，得外植体；b将步骤a得到的外植体放入诱导培养基中培养，所述诱导培养基为：ms培养基+ba2mg/l+naa2mg/l，ph值为5.5～6.0，培养温度为25±2℃，光照为14h/d的条件下培养5天，得静止中心干细胞；c将步骤b得到的静止中心干细胞转移到生长培养基中摇床培养，所述生长培养基为：ms培养基+ba2mg/l+naa2.5mg/l+土豆汁10％，ph值5.2～5.6，培养温度为23～25℃，光照强度为2000lx，光照时间为10h/d，得单细胞；d将步骤c得到单细胞进行扩大培养，所述扩大培养的培养基为：ms培养基+ba1mg/l+naa2mg/l+土豆汁30％，ph值5.2～5.6，培养温度为23～25℃，光照强度为2000lx，光照时间为10h/d，得金莲花干细胞，冷冻、粉碎，即得。实施例2、金莲花干细胞提取物的制备方法a取切除根冠的金莲花根尖，清洗，消毒，将金莲花根尖切成5mm*5mm大小，得外植体；b将步骤a得到的外植体放入诱导培养基中培养，所述诱导培养基为：ms培养基+ba3mg/l+naa3mg/l，ph值为5.5～6.0，培养温度为25±2℃，光照为14h/d的条件下培养5天，得静止中心干细胞；c将步骤b得到的静止中心干细胞转移到生长培养基中摇床培养，所述生长培养基为：ms培养基+ba3mg/l+naa3mg/l+土豆汁12％，ph值5.2～5.6，培养温度为23～25℃，光照强度为2000lx，光照时间为10h/d，得单细胞；d将步骤c得到单细胞进行扩大培养，所述扩大培养的培养基为：ms培养基+ba1.5mg/l+naa3mg/l+土豆汁35％，ph值5.2～5.6，培养温度为23～25℃，光照强度为2000lx，光照时间为10h/d，得金莲花干细胞，冷冻、粉碎，即得。实施例3、金莲花精油的制备方法：精密称取旱金莲花粉末25g，置于500ml圆底烧瓶中，加入300ml蒸馏水，加入沸石，连接于同时蒸馏萃取装置一端，加热，装置的另一端连接装有40ml二氯甲烷的100ml烧瓶，水浴加热至100℃，蒸馏萃取6h，以无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，即得。实施例4、洋甘菊精油的制备方法将洋甘菊鲜花加入萃取釜中，用超临界二氧化碳流体进行连续循环萃取，控制萃取釜温度35～38℃，萃取压强20～22mpa，流速为18～20kg/h，萃取时间1～2h，将萃取后的二氧化碳流体进入分离器进行分离，二氧化碳流体的流量为12～15kg/h，分离器压力为8～10mpa，温度为40～45℃，提取1～2h，从分离器底部放出萃取物，静置后，经油水分离得到洋甘菊精油。实施例5、一种含有金莲花干细胞提取物的手工皂所述含有金莲花干细胞提取物的手工皂由以下组分及其重量份数组成：金莲花干细胞提取物4份、金莲花精油2份、洋甘菊精油3份、乳木果油20份、亚油酸钠10份、可可脂4份、橄榄油10份、霍霍巴油6份、氢氧化钠4份和水6份；所述金莲花干细胞提取物为实施例1制得的金莲花干细胞提取物，所述金莲花精油为实施例3制得的金莲花精油，所述洋甘菊精油为实施例4制得的洋甘菊精油。制备方法为：s1将金莲花干细胞提取物、金莲花精油、洋甘菊精油、乳木果油、亚油酸钠、可可脂和橄榄油合，水浴加热至完全溶解，搅拌，冷却至50～55℃保温，得混合油；s2将氢氧化钠加入水中搅拌至完全溶解，冷却至50～55℃保温，得碱溶液；s3将步骤s2得到的碱溶液加入步骤s1得到的混合油中，边加边搅拌，直到混合油变浓稠，接着加入霍霍巴油搅拌均匀，倒入模具中静置24～48h，脱模，置于通风干燥处4～8周，即得。实施例6、一种含有金莲花干细胞提取物的手工皂所述含有金莲花干细胞提取物的手工皂由以下组分及其重量份数组成：金莲花干细胞提取物5份、金莲花精油3份、洋甘菊精油4份、乳木果油30份、亚油酸钠11份、可可脂5份、橄榄油12份、霍霍巴油7份、氢氧化钠5份和水8份；所述金莲花干细胞提取物为实施例1制得的金莲花干细胞提取物，所述金莲花精油为实施例3制得的金莲花精油，所述洋甘菊精油为实施例4制得的洋甘菊精油。制备方法与实施例5类似。实施例7、一种含有金莲花干细胞提取物的手工皂所述含有金莲花干细胞提取物的手工皂包括以下组分及其重量份数：金莲花干细胞提取物6份、金莲花精油4份、洋甘菊精油6份、乳木果油40份、亚油酸钠12份、可可脂6份、橄榄油16份、霍霍巴油8份、氢氧化钠6份和水10份；所述金莲花干细胞提取物为实施例1制得的金莲花干细胞提取物，所述金莲花精油为实施例3制得的金莲花精油，所述洋甘菊精油为实施例4制得的洋甘菊精油。制备方法与实施例5类似。对比例1、一种含有金莲花提取物的手工皂所述含有金莲花干细胞提取物的手工皂由以下组分及其重量份数组成：金莲花提取物5份、金莲花精油3份、洋甘菊精油4份、乳木果油30份、亚油酸钠11份、可可脂5份、橄榄油12份、霍霍巴油7份、氢氧化钠5份和水8份；所述金莲花精油为实施例3制得的金莲花精油，所述洋甘菊精油为实施例4制得的洋甘菊精油。制备方法与实施例5类似。与实施例6的区别在于：将金莲花干细胞提取物替换为金莲花提取物(购于陕西森弗天然制品有限公司)。对比例2、一种含有金莲花干细胞提取物的手工皂所述含有金莲花干细胞提取物的手工皂由以下组分及其重量份数组成：金莲花干细胞提取物5份、玫瑰精油3份、洋甘菊精油4份、乳木果油30份、亚油酸钠11份、可可脂5份、橄榄油12份、霍霍巴油7份、氢氧化钠5份和水8份；所述金莲花干细胞提取物为实施例1制得的金莲花干细胞提取物，所述洋甘菊精油为实施例4制得的洋甘菊精油。制备方法与实施例5类似。与实施例6的区别在于：将金莲花精油替换为玫瑰精油；所述玫瑰精油的制备方法为：精密称取旱玫瑰花粉末25g，置于500ml圆底烧瓶中，加入300ml蒸馏水，加入沸石，连接于同时蒸馏萃取装置一端，加热，装置的另一端连接装有40ml二氯甲烷的100ml烧瓶，水浴加热至100℃，蒸馏萃取6h，以无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，即得。对比例3、一种含有金莲花干细胞提取物的手工皂所述含有金莲花干细胞提取物的手工皂由以下组分及其重量份数组成：金莲花干细胞提取物5份、金莲花精油7份、乳木果油30份、亚油酸钠11份、可可脂5份、橄榄油12份、霍霍巴油7份、氢氧化钠5份和水8份；所述金莲花干细胞提取物为实施例1制得的金莲花干细胞提取物，所述金莲花精油为实施例3制得的金莲花精油。制备方法与实施例5类似。与实施例6的区别在于：缺少洋甘菊精油。对比例4、一种含有金莲花干细胞提取物的手工皂所述含有金莲花干细胞提取物的手工皂由以下组分及其重量份数组成：金莲花干细胞提取物5份、金莲花精油3份、洋甘菊精油4份、乳木果油33份、可可脂8份、橄榄油15份、霍霍巴油9份、氢氧化钠5份和水8份；所述金莲花干细胞提取物为实施例1制得的金莲花干细胞提取物，所述金莲花精油为实施例3制得的金莲花精油，所述洋甘菊精油为实施例4制得的洋甘菊精油。制备方法与实施例5类似。与实施例6的区别在于：缺少亚油酸钠。对比例5、一种含有金莲花干细胞提取物的手工皂所述含有金莲花干细胞提取物的手工皂由以下组分及其重量份数组成：金莲花干细胞提取物5份、金莲花精油3份、洋甘菊精油4份、乳木果油33份、亚油酸钠11份、橄榄油12份、霍霍巴油9份、氢氧化钠5份和水8份；所述金莲花干细胞提取物为实施例1制得的金莲花干细胞提取物，所述金莲花精油为实施例3制得的金莲花精油，所述洋甘菊精油为实施例4制得的洋甘菊精油。制备方法与实施例5类似。与实施例6的区别在于：缺少可可脂。试验例一、含有金莲花干细胞提取物的手工皂的纯度测定试验1、试验材料：本发明实施例1和实施例2制备的金莲花干细胞提取物。2、试验方法：采用高效液相色谱法，色谱柱采用c18，以a相：三氟乙酸-水溶液：量取1.0ml三氟乙酸加水至1000ml，充分混匀，b相：三氟乙酸-乙腈溶液：量取1.0ml三氟乙酸加入色谱纯乙腈至1000ml，充分混匀为流动相，在室温条件下，采用0-70％b相溶液进行梯度洗脱，上样量为10ug,在波长280nm处检测，按面积归一化法计算。3、试验结果：试验结果如表1所示。表1金莲花干细胞提取物的纯度测定数据实施例1实施例2金莲花干细胞提取物纯度(％)93.5％98.6％由表1可知，本发明提供的金莲花干细胞提取物的制备方法在培养过程中无细胞变异，分离培养的金莲花干细胞纯度高，可以达到93％以上，将该金莲花干细胞提取物应用于手工皂中可以有效的提高手工皂的效果。试验例二、含有金莲花干细胞提取物的手工皂的抑菌试验1、试验材料：实施例5、实施例6、实施例7、对比例1、对比例2和对比例3制备的含有金莲花干细胞提取物的手工皂。2、试验方法：参考gb19877.3-2005规定的方法测定实施例5、实施例6、实施例7、对比例1、对比例2和对比例3制备的含有金莲花干细胞提取物的手工皂进行对金黄色葡萄球菌(atcc6538)、大肠埃希氏杆菌(atc11229)、奇异变形菌(atcc9921)和鼠伤寒沙门氏菌(atcc13311)的抑菌试验。3、试验结果：试验结果如表2所示。表2含有金莲花干细胞提取物的手工皂的抑菌试验由表2可知，本发明提供的含有金莲花干细胞提取物的手工皂对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏杆菌、奇异变形菌和鼠伤寒沙门氏菌均有较强的抑制作用，说明本发明提供的含有金莲花干细胞提取物的手工皂具有较强的抑菌作用。试验例三、含有金莲花干细胞提取物的手工皂的效果试验1、试验材料：实施例5、实施例6、实施例7、对比例1、对比例2和对比例3制备的含有金莲花干细胞提取物的手工皂；人真皮成纤维细胞，(humandermalfibroblast，hdf，由16周岁人包皮细胞分离而来)。2、试验方法：待hdf达到80～90％融合，消化，以5×104/ml的细胞密度铺96孔板，每孔100μl，将实施例5、实施例6、实施例7、对比例1、对比例2和对比例3制备的含有金莲花干细胞提取物的手工皂分别用分度值不低于0.1g的天平称量每块质量，测得其平均实际净含量，然后通过每块的中间互相垂直切三刀分成八份，取斜对角的两份切成薄片后捣碎，12h后分别加入上述0.001g手工皂，以不加手工皂的孔设为对照组，每组设4复孔。37℃，5％co2，饱和湿度培养箱孵育48h加mtt，继续孵育4h后加dmso，570nm波长下测吸光度值，试验重复三次试验结果：3、试验结果：试验结果如表3所示。表3含有金莲花干细胞提取物的手工皂的效果试验od570nm吸光度值对照组0.37实施例50.51实施例60.55实施例70.50对比例10.38对比例20.46对比例30.43由表3可知，本发明提供的含有金莲花干细胞提取物的手工皂与对照组相比，吸光度值明显增加，对人真皮成纤维细胞有促增殖能力，可以有效的有效降低皮肤氧化损伤，缓解皮肤褶皱，从而使皮肤健康更加富有弹性。试验例四、含有金莲花干细胞提取物的手工皂的评价试验1、试验材料：实施例5、实施例6、实施例7、对比例1、对比例2和对比例3制备的含有金莲花干细胞提取物的手工皂。2、受试人群：选取50例女性自愿者，年龄在20～40岁之间，自愿者选择标准：敏感性肌肤、脸部有痘痘或受损的女性自愿者。3、试验方法：将自愿者随机分为6组，分别为实施例5组、实施例6组、实施例7组、对比例1组、对比例2组和对比例3组，每组10人。各组自愿者清洁脸部后，使用含有金莲花干细胞提取物的手工皂于脸部，每天2～3次，连续使用4周。使用4周后对含有金莲花干细胞提取物的手工皂的补水效果、止痒、抗过敏性、消炎效果和整体效果进行评分，评分方法为：(1)补水效果：3效果很好，2效果好，1效果一般，0没有效果；(2)止痒：3效果很好，2效果好，1效果一般，0没有效果；(3)抗过敏性：3无过敏现象，2有点红、痒，1有点刺痛感，红，痒，0有点刺痛感，红，痒；(4)消炎效果：3效果很好，痘痘或红斑的肿痛消退，2效果好，痘痘或红斑没有痛感，1效果一般，痘痘或红斑的肿痛还在，0没有效果，痘痘或红斑肿痛严重；(5)整体效果：3效果很好，2效果好，1效果一般，0没有效果。4、试验结果：试验结果如表4所示。表4含有金莲花干细胞提取物的手工皂的试用(4周)反馈总结表实施例5组实施例6组实施例7组对比例1组对比例2组对比例3组补水效果293028152520止痒303030102018抗过敏性293030102422消炎效果303029102523整体效果303030102320由表4可知，本发明制备的含有金莲花干细胞提取物的手工皂在补水、止痒、抗过敏性和消炎等方面具有显著的作用，而且总体评价效果很好，是一种符合现代人要求的手工皂护肤品。试验例五、含有金莲花干细胞提取物的手工皂的稳定性试验1、试验材料：实施例6、对比例1、对比例2、对比例3、对比例4和对比例5制备的含有金莲花干细胞提取物的手工皂。2、试验方法：将实施例6、对比例1、对比例2、对比例3、对比例4和对比例5制备的含有金莲花干细胞提取物的手工皂分别置于42℃30天，观察手工皂的感官指标和气味的变化情况，分别于第0、5、10、15、20、25、30天取样测定。3、试验结果：试验结果如表5所示。表5含有金莲花干细胞提取物的手工皂的长期试验由表5可知，本发明制备的含有金莲花干细胞提取物的手工皂在42℃的条件下放置30天，其皂形端正，色泽均匀，光滑细腻、无明显杂质和污迹，并且有淡淡清香味，而对比例1～5制备的含有金莲花干细胞提取物的手工皂在42℃的条件下放置30天，其外观和气味效果均比本发明的效果差，说明本发明制备的含有金莲花干细胞提取物的手工皂具有较高的稳定性。当前第1页12