一种模块化多功能实验室厌氧微生物培养装置的制作方法

本实用新型涉及实验装置技术领域，具体地说是一种模块化多功能实验室厌氧微生物培养装置。

背景技术：

厌氧微生物在自然界分布广泛，种类繁多，作用也日益引起重视。厌氧微生物培养的关键是要使该类微生物培养时处于无氧的环境中。

目前，厌氧微生物培养一般采用厌氧管、厌氧瓶、厌氧罐培养法或者厌氧手套箱。厌氧管体积较小(不超过30mL)，一般只适合少量微生物培养(不超过10mL)。厌氧罐与厌氧培养箱虽可用于厌氧微生物培养，但也存在许多不足，如价格昂贵、体积较大、不能恒温及不适合极端厌氧微生物(如海底菌种、深层土壤菌种)培养，且一般本科实验室配置较少或不配置，因而无法满足本科厌氧微生物实验教学需求。

在实验室，厌氧瓶的应用较广泛。厌氧瓶体积可变(50mL-1000mL)，既可适用少量厌氧微生物的培养，也可适用大量厌氧微生物培养。实验室使用的厌氧瓶分进口和国产两种，进口厌氧瓶耐高温、高压且不易爆炸，但价格昂贵，不宜在本科实验教学中大量使用。国产厌氧瓶虽然价格较低，但高温下耐高压性能差、易爆炸，厌氧瓶的爆炸除对灭菌设备造成损坏外，更危及实验人员的生命安全。此外，常规厌氧瓶在使用过程中，瓶口最容易造成损坏，一旦厌氧瓶的瓶口损坏，则整个厌氧瓶无法再使用，需购置新的厌氧瓶，而购置新的厌氧瓶成本又高。

因此，如何设计一种耐高温、高压、不易爆炸、成本较低且使用寿命长的厌氧微生物培养装置，对厌氧微生物培养、厌氧微生物的实验教学及研究都具有十分重要的意义。

技术实现要素：

针对现有技术存在的问题，本实用新型设计了一种模块化多功能实验室厌氧微生物培养装置，该装置具有体积可变、成本低、使用寿命长及操作简单的优点，适用各种气氛的厌氧微生物培养。

本实用新型模块化多功能实验室厌氧微生物培养装置，包括高硼硅螺纹口玻璃瓶1和喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2，高硼硅螺纹口玻璃瓶1和喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2之间通过T型胶塞3实现密封连接，高硼硅螺纹口玻璃瓶1瓶口设有中心开孔的玻璃瓶盖5；喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2的螺纹端设置有管塞6和中心开孔的管盖7。

所述喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2的喇叭形端设置在T型胶塞3下部外端。

所述T型胶塞3的内孔直径比喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2管身外径小 0.5mm-1.5mm。

所述T型胶塞3为耐高温弹性材质，包括但不限于丁基橡胶、丁腈橡胶、丙烯酸酯橡胶、硅胶及硅橡胶中的一种。

所述T型胶塞3和玻璃瓶盖5之间还设置有不锈钢垫片4。

所述不锈钢垫片4包括但不限于316L不锈钢垫片。

不锈钢垫片4中心开孔直径不超过30mm，且比喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2管身外径大2mm-4mm。

所述玻璃瓶盖5为GL45螺纹口玻璃瓶盖，耐高温范围为140℃-180℃。

所述玻璃瓶盖5中心孔直径不超过30mm，且比喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2管身外径大3mm-5mm。

当装置不需要高温高压灭菌时，高硼硅螺纹口玻璃瓶可由普通玻璃材质的螺纹口试剂瓶替代，而玻璃瓶盖也可由普通材质的GL45盖子替代。

本实用新型模块化多功能实验室厌氧微生物培养装置具有如下优点：

1、利用耐高温、高压的高硼硅螺纹口玻璃瓶为容器，避免了密封灭菌时爆炸，克服了国产厌氧瓶高温不耐压的缺陷。

2、将普通厌氧管的底端改为喇叭口形，既可固定玻璃管，又能在高压灭菌时将T型胶塞紧紧挤压在高硼硅螺纹口玻璃瓶瓶口内壁，从而起到密封的作用。

3、通过更换高硼硅螺纹口玻璃瓶的大小可实现不同体积(30mL-10000 mL)微生物的培养。

4、通过更换喇叭形螺纹口玻璃管便可实现装置的再利用，避免了普通厌氧瓶因瓶口破损后整个厌氧瓶无法再使用。

5、垫片的使用避免了玻璃瓶盖与T型胶塞之间的摩擦，既保护了T型胶塞，又使T型胶塞与高硼硅螺纹口玻璃瓶之间密封更紧密。

附图说明

图1为本实用新型的整体结构示意图；

图中，1为高硼硅螺纹口玻璃瓶，2为喇叭形螺纹口或钳口玻璃管，3为 T型胶塞，4为不锈钢垫片，5为玻璃瓶盖，6为管塞，7为管盖。

具体实施方式

下面通过实施例，并结合附图，对本实用新型的技术方案作进一步具体的说明。如图1所示，一种模块化多功能实验室厌氧微生物培养装置，包括高硼硅螺纹口玻璃瓶1和喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2，高硼硅螺纹口玻璃瓶1和喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2之间通过T型胶塞3实现密封连接，高硼硅螺纹口玻璃瓶1瓶口设有中心开孔的玻璃瓶盖5；喇叭形螺纹口或钳口玻璃管 2的螺纹端设置有管塞6和中心开孔的管盖7。

所述喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2的喇叭形端设置在T型胶塞3下部外端。

所述T型胶塞3的内孔直径比喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2管身外径小 0.5mm-1.5mm。

所述T型胶塞3为耐高温弹性材质，包括但不限于丁基橡胶、丁腈橡胶、丙烯酸酯橡胶、硅胶及硅橡胶中的一种。

所述T型胶塞3和玻璃瓶盖5之间还设置有不锈钢垫片4。

所述不锈钢垫片4包括但不限于316L不锈钢垫片。

不锈钢垫片4中心开孔直径不超过30mm，且比喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2管身外径大2mm-4mm。

所述玻璃瓶盖5为GL45螺纹口玻璃瓶盖，耐高温范围为140℃-180℃。

所述玻璃瓶盖5中心孔直径不超过30mm，且比喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2管身外径大3mm-5mm。

当装置不需要高温高压灭菌时，高硼硅螺纹口玻璃瓶可由普通玻璃材质的螺纹口试剂瓶替代，而玻璃瓶盖也可由普通材质的GL45盖子替代。

本实用新型是这样实现的：将喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2穿过T型胶塞3至喇叭口端与T型胶塞的小端紧密接触；将固定有喇叭形螺纹口或钳口玻璃管2的T型胶塞3塞进高硼硅螺纹口玻璃瓶1；将316L不锈钢垫片4穿过喇叭形螺纹口玻璃管2的螺纹口端至T型胶塞3的表面，然后利用GL45耐高温玻璃瓶盖5将T型胶塞3及316L不锈钢垫片4紧紧固定在高硼硅螺纹口玻璃瓶1上；将喇叭形螺纹口玻璃管的螺纹口端用管塞6塞紧，并拧上配套的管盖7。

Geobacter sulfurreducensΔhyb(ATCC 51573)培养

采用Ferric citrate(III)(FC)培养基培养Geobacter sulfurreducens Δhyb。柠檬酸铁溶液的配制过程为：500mL烧杯中加入300mL去离子水后置于磁力加热搅拌器上至冒蒸汽，称取柠檬酸铁13.7g，在搅拌的条件下少量多次不断加入柠檬酸铁，另取2L烧杯加入600mL去离子水置于磁力加热搅拌器上加热至冒气，待加入的柠檬酸铁完全溶解后将柠檬酸铁溶液倒入到 2L的烧杯中。溶液冷却至室温后先用10mol/L的NaOH调节pH至6.0～6.5 (当pH接近5.0时，用5mol/L或2mol/L的低浓度NaOH调节)，之后用NaOH (0.5mol/L或1mol/L)调节pH至7.0左右(6.8～7.2)，然后分别加入 NaH2PO4·H2O 0.60g、NH4Cl 0.25g、KCl 0.10g、NaHCO3 2.50g、1mM Na2SeO4溶液1mL、微量元素溶液10mL(参见表1)，维生素溶液10mL(参见表2)，定容至1000mL，配好的柠檬酸铁溶液呈棕红色透明状态。从喇叭形螺纹口玻璃管2的螺纹口端加入95mlFC培养基，厌氧微生物培养装置插入曝气针后塞上丁基橡胶塞，N2/CO2(80/20，V/V)曝气30min后密封，121℃灭菌30 min后冷却到室温待用。制备好的培养基用2.5mL注射器加入1mL乙酸钠溶液(2mol/L)，厌氧环境接种5mL Geobacter sulfurreducensΔhyb(5％接种量，V/V)后置于30℃下培养。

未接种G.suifurreducensΔhyb的FC培养基颜色没有发生变化，而接种G.sulifurreducensΔhyb并培养12天后的FC培养基颜色明显变淡且溶液浊度增加，菌种生长良好，说明该厌氧微生物培养装置满足G.sulifurreducensΔhyb的生长需求，该装置可用于严格厌氧微生物的接种与培养。

表1微量元素溶液组成(1L)

表2维生素溶液组成(1L)