一种双质控检测方法与流程

本发明涉及基因检测领域，尤其涉及一种双质控检测方法。

背景技术：

目前的基因检测方法中，检测设备的校准和维护状况、实验操作中检测方法的可靠性、反应试剂的有效性及核酸反应后波峰之间的干扰都会影响检测结果的可靠性。

技术实现要素：

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种双质控检测方法，以保证检测方法的合格，且能排除检测结果中波形之间的干扰。

本发明的目的采用如下技术方案实现：

一种双质控检测方法，包括：

将多个待测基因位点的野生型碱基剪除；

根据各所述待测基因位点的序列为每个所述待测基因位点配置质控位点引物；

将多个所述待测基因位点和对应的质控点引物分别放置在对应的反应孔位，并实施核酸质谱反应；

根据各反应孔位质控位点引物的表达状态和峰值数量判断所述待测基因位点是否异常。

进一步地，根据各反应孔位质控位点引物的表达状态和峰值数量判断所述待测基因位点是否异常包括：

若每个所述反应孔位均检测到所述质控位点引物，则根据峰值数量判断待测基因位点是否异常，否则，结束当前检测。

进一步地，所述质控位点引物为阳性质控标本，每个所述反应孔位均检测到所述质控位点引物包括：每个所述反应孔位的检测结果均为阳性。

进一步地，根据峰值数量判断待测基因位点是否异常包括：

若检测结果为两个波峰，则对应孔位的待测基因位点异常；

若检测结果为一个波峰，则对应孔位的待测基因位点正常。

进一步地，异常基因位点对应的两个波峰分别为质控峰和突变峰，正常基因位点对应的一个波峰为质控峰。

进一步地，所述质控位点引物的数量为3个。

相比现有技术，本发明的有益效果在于：通过质控位点引物，根据质控位点引物的表达状态判断检测方法是否合格，避免各种不确定因素的干扰导致的结果不准确，同时将多个待测基因位点的野生型碱基剪除，便于检测结果的判定，保证检测结果的可靠性。

附图说明

图1为本发明实施例提供的双质控检测方法流程图；

图2为本发明实施例提供的根据峰值数量判断待测基因位点是否异常流程图。

具体实施方式

下面，结合附图以及具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。

如图1所示，本发明实施例提供的双质控检测方法，包括：

步骤s101：将多个待测基因位点的野生型碱基剪除。

较佳的，去掉基因位点中的野生型，从而在检测结果的波形中不会出现野生峰，防止检测结果中野生峰与突变峰重叠造成的误判，避免假阳性风险。

步骤s102：根据各所述待测基因位点的序列为每个所述待测基因位点配置质控位点引物。

较佳的，根据每个待测基因位点的序列，为每个待测基于位点配置质控位点引物，确保质控位点引物的序列与待测基因位点的序列互不干扰。

较佳的，质控位点引物为阳性质控标本，质控位点引物的数量为3个。

步骤s103：将多个所述待测基因位点和对应的质控点引物分别放置在对应的反应孔位，并实施核酸质谱反应。

具体的，每个反应孔位的待测基因位点与对应的质控点引物一起放入对应的反应孔位，实施核酸质谱反应。

步骤s104：根据各反应孔位质控位点引物的表达状态和峰值数量判断所述待测基因位点是否异常。

较佳的，首先根据每个孔位的质控位点引物是否表达判断检测方法是否合格，若某个孔位没有检测到预设质控位点引物，则说明检测方法不合格，结束当前检测。若每个孔位均检测到预设质控位点引物，即每个孔位的检测结果均为阳性，则说明检测方法合格，核酸质谱反应设备正常且操作方法符合规范标准，避免检测结果出现假阴性风险。若检测方法合格，则进一步根据峰值数量判断待测基因位点是否异常。

根据峰值数量判断待测基因位点是否异常包括：

步骤s201：若检测结果为两个波峰，则对应孔位的待测基因位点异常。

具体的，由于正常的基因位点只会出现野生峰，异常的基因位点会出现野生峰和突变峰，待测的基因位点去掉野生型后不会出现野生峰，若检测结果出现两个波峰，则其中一个波峰为预设质控位点引物出现的质控峰，另一个波峰为突变峰，则说明对应孔位上的基因位点异常。

若每个孔位的待测基因位点均来自同一个基因样本，若检测结果中有至少一个孔位出现两个波峰，则说明被分析的基因样本存在基因位点突变。基因样本可以是血液或组织中提取的循环肿瘤细胞dna，包含脱氧核糖核酸(dna)与单核苷酸多态性(snp)。

步骤s202：若检测结果为一个波峰，则对应孔位的待测基因位点正常。

具体的，若只出现一个波峰，即为质控峰，说明对应孔位上的基因位点为正常基因。

剪除基因位点的野生型碱基后，根据峰值数量判断基因位点是否异常，避免检测结果出现假阳性风险，保证检测结果的准确性和可靠性。

本发明提供的双质控检测方法，通过质控位点引物，根据质控位点引物的表达状态判断检测方法是否合格，避免各种不确定因素的干扰导致的结果不准确，同时将多个待测基因位点的野生型碱基剪除，便于检测结果的判定，保证检测结果的可靠性。

上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种双质控检测方法，用于检测基因位点，方法包括：将多个待测基因位点的野生型碱基剪除；根据各待测基因位点的序列为每个待测基因位点配置质控位点引物；将多个待测基因位点和对应的质控点引物分别放置在对应的反应孔位，并实施核酸质谱反应；根据各反应孔位质控位点引物的表达状态和峰值数量判断待测基因位点是否异常。本发明提供的双质控检测方法，根据质控位点引物的表达状态判断检测方法是否合格，避免各种不确定因素的干扰导致的结果不准确，同时将多个待测基因位点的野生型碱基剪除，便于检测结果的判定，保证检测结果的可靠性。

技术研发人员：周双念
受保护的技术使用者：深圳市双科生物科技有限公司
技术研发日：2019.01.11
技术公布日：2019.04.19