一种酰胺聚合物及其制备与应用的制作方法

栀子苷低含量为棕黄色，高含量为白色，易溶于水，溶于乙醇，不溶于石油醚。具有缓泻、镇痛、利胆、抗炎、治疗软组织损伤以及抑制胃液分泌和降低胰淀粉酶等作用。市面上含有栀子苷的药品有栀子金花丸、黄连双清丸、清开灵等，具有很高的药用价值。

目前国内外对栀子苷的检测方法主要是色谱法。色谱法面临的主要问题是检测价格昂贵，并且栀子苷在自然界植物中存在微量，在分析之前通常需要对样品中的目标物进行分离、富集，检测步骤繁琐且耗时。所以发展新的具有专一性识别能力的吸附材料成为关键性问题。

目前分子印迹技术用于栀子苷的分离和应用并不多。本发明结合了两种目前用的较广泛的方法(沉淀聚合法和载体聚合法)进行分子印迹的合成。将得到的两种分子印迹聚合物在反应物比例方面得到性能最优的比例后，进行紫外、红外、液相、电镜等测试进行性能对比，得到两个聚合物中性能较优的一种栀子苷分子印迹聚合物。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供合成一种酰胺聚合物及其制备方法与应用，能够高效地识别栀子苷，拥有广大的市场前景。

本发明为解决技术问题采用如下技术方案：

本发明提供一种式(ⅰ)所示酰胺聚合物，所述聚合物按如下方法制备：(1)将栀子苷，甲基丙烯酸与乙腈混合，分别加入交联剂和引发剂，通n2鼓泡15min后停止鼓泡，再加入顺磁性fe3o4纳米粒子，在60℃、40hz条件下超声(优选0.5h-4h)至聚合完毕可以观察到有黑色颗粒产生，抽滤，滤饼洗涤后干燥(优选用去离子水洗涤后60℃干燥)，获得聚合物粗品；所述交联剂为二甲基丙烯酸乙二醇酯；所述引发剂为过氧化二苯甲酰；所述甲基丙烯酸和乙腈体积用量以栀子苷重量计分别为0.1-5ml/g和200-300ml/g；所述栀子苷与交联剂物质的量之比为1:10-15；所述栀子苷与引发剂质量比为1:1-6；所述栀子苷与顺磁性fe3o4纳米粒子质量比为1:1-5；(2)将聚合物粗品研磨后用体积比9:1的甲醇和乙酸溶液洗涤，在60℃、40hz条件下超声20min，过滤，滤饼干燥(优选滤饼连同滤纸在60℃烘箱中干燥10h后将滤纸上的物质刮下)，得到所述酰胺聚合物；

进一步，优选步骤(1)所述甲基丙烯酸和乙腈体积用量以栀子苷重量计分别为0.88-4.1ml/g和260-280ml/g；所述栀子苷与交联剂物质的量之比为1:14-15；所述栀子苷与引发剂质量比为1:1.1-5.2；所述栀子苷与顺磁性fe3o4纳米粒子质量比为1:2.2-2.5。

进一步，步骤(1)所述顺磁性fe3o4纳米粒子按如下方法制备：在氮气保护下，将fecl2和fecl3与去离子水混合，加入氨水调ph至7.2-8.0(优选7.2)，加热至80℃搅拌反应25～30min，反应液冷却至室温，抽滤，滤饼用去离子水洗，干燥，获得顺磁性fe3o4纳米粒子；所述fecl2与fecl3的物质的量之比为1:1-3(优选1:2.5)；所述去离子水体积用量以fecl2重量计为2-50ml/g(优选6.2ml/g)。

本发明还提供一种所述酰胺聚合物在富集栀子苷中的应用，所述的应用方法为：将酰胺聚合物加入栀子苷提取液中，在60℃、40hz下超声吸附2h，取样在4000rmp下离心20min，取上清液检测在265nm处的吸光度，根据栀子苷标准曲线，获得上清液中栀子苷含量，进而获得富集率；所述栀子苷提取液体积用量以栀子苷分子印迹聚合物重量计为20-50ml/g。

本发明所述栀子苷标准曲线的绘制方法为：将栀子苷用乙醇溶解配制成不同浓度梯度标准溶液(配制成0、5、10、15、20、25μg/ml的标准溶液)，在265nm处测吸光值，以栀子苷浓度为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘制栀子苷标准曲线。

与现有技术相比，本发明的有益效果主要体现在：

(1)本发明制备的酰胺聚合物具有良好亲水性，在水介质中具有更好的吸附性能。

(2)本发明制备酰胺聚合物的方法操作简便、再生方法简单、重复利用率高，可高达85％。

(3)本发明制备的酰胺聚合物对亲水性小分子药物具有良好的吸附性，吸附率80％以上。

附图说明

图1是栀子苷的标准曲线。

图2是酰胺聚合物的合成示意图；1为模板分子栀子苷，2为交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯和致孔剂乙腈，3为功能单体甲基丙烯酸；a为聚合的过程，b为交联的过程，c为洗脱模板的过程；α为预聚复合物，β为mip(酰胺聚合物)。

图3为酰胺聚合物电镜下的形态(放大50000倍)。

图4为酰胺聚合物红外色谱图。

图5为不同功能单体制备的酰胺聚合物的吸附效果柱形图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步说明。

本发明所述室温是指25-30℃。

实施例1

1、酰胺聚合物的制备

(1)顺磁性fe3o4纳米粒子的制备：分别称取2.923g(23.1mmol)fecl2和9.518g(58.7mmol)fecl3于250ml三颈瓶中，加入18ml去离子水溶解，再加入质量浓度25％的氨水使溶液ph值为7.2，在氮气保护下用800rpm进行机械搅拌，加热至80℃反应30min，冷却至室温、抽滤，滤饼用去离子水洗三次，除去未反应完的化学试剂，最后在60℃真空干燥10h，获得顺磁性fe3o4纳米粒子5.62g。

(2)用超声辅助聚合沉淀法制备酰胺聚合物：在具塞的三颈瓶中加入0.109g(0.28mmol)栀子苷(c17h24o10)、0.197ml甲基丙烯酸和30ml乙腈，再加入交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯4mmol和引发剂过氧化二苯甲酰0.118g，通n2鼓泡15min后停止鼓泡，再加入0.25g磁性fe3o4。将烧杯在60℃、40hz条件下超声2h至聚合完毕，可以观察到有黑色颗粒产生，抽滤，滤饼用去离子洗涤后60℃干燥，获得聚合物粗品。将聚合物粗品研磨成粉末后用体积比9:1的甲醇和乙酸溶液洗涤，在60℃、40hz条件下超声20min后，过滤，将得到的滤饼连同滤纸在60℃的烘箱中干燥10h后，将滤纸上的物质刮下，得到所述式(ⅰ)所示酰胺聚合物1.75g，电镜照片见图3所示，红外谱图见图4所示。

2、酰胺聚合物的应用

称取酰胺聚合物0.2g在容量瓶中，加入500μg/ml栀子苷的乙醇溶液10ml，在60℃、40hz下超声2h，取样在4000rmp下离心20min，紫外下检测上清液在265nm处的吸光值不再发生变化则吸附完毕，测三遍此时的吸光度a，取平均值a＝0.886，根据栀子苷标准曲线，获得吸附后上清液中液栀子苷的浓度c＝82.04μg/ml，吸附效率为83.6％，由此可知该酰胺聚合物的吸附效用优良。

栀子苷标准曲线的绘制：将栀子苷用去离子水溶解配制成0、5、10、15、20μg/ml的标准溶液，在265nm处测吸光值，以栀子苷浓度为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘制栀子苷标准曲线，见图1所示，标准曲线公式为：y＝0.010x。

实施例2

1、酰胺聚合物的制备

(1)顺磁性fe3o4纳米粒子的制备同实施例1。

(2)用超声辅助聚合沉淀法制备酰胺聚合物：在具塞的三颈瓶中加入0.113g(0.28mmol)栀子苷(c17h24o10)、0.100ml甲基丙烯酸和30ml乙腈，再加入交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯4mmol和引发剂过氧化二苯甲酰0.280g，通n2鼓泡15min后停止鼓泡，再加入0.25g顺磁性fe3o4纳米粒子。将烧杯在60℃、40hz条件下超声2.5h至聚合完毕可以观察到有黑色颗粒产生，抽滤，滤饼用去离子水洗涤后60℃干燥，获得聚合物粗品。将聚合物粗品研磨至成粉末后用体积比9:1的甲醇和乙酸溶液洗涤，在60℃、40hz条件下超声20min后过滤，将得到的滤饼连同滤纸在60℃的烘箱中干燥10h后，将滤纸上的物质刮下，得到所述式(ⅰ)所示酰胺聚合物2.4g。

2、酰胺聚合物的应用

称取酰胺聚合物0.2g在容量瓶中，加入500μg/ml栀子苷的乙醇溶液10ml，在60℃、40hz下超声2h，取样在4000rmp下离心20min，紫外下检测上清液在265nm处的吸光值不再发生变化则吸附完毕，测三遍此时的吸光度a，取平均值a＝0.750，根据栀子苷标准曲线(同实施例1)，获得吸附后溶液的浓度c＝39.44μg/ml，吸附效率为86.1％，由此可知该酰胺聚合物的吸附效用优良。

实施例3

1、酰胺聚合物的制备

(1)顺磁性fe3o4纳米粒子的制备同实施例1。

(2)用超声辅助聚合沉淀法制备酰胺聚合物：在具塞的三颈瓶中加入0.109g(0.28mmol)栀子苷(c17h24o10)、0.448ml甲基丙烯酸和30ml乙腈，再加入交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯4mmol和引发剂过氧化二苯甲酰0.569g，通n2鼓泡15min后停止鼓泡，加入0.25g顺磁性fe3o4纳米粒子。将烧杯在60℃、40hz条件下超声2h至聚合完毕可以观察到有黑色颗粒产生，抽滤，滤饼用去离子水洗涤后60℃干燥，获得聚合物粗品。将聚合物粗品研磨成粉末后用体积比9:1的甲醇和乙酸溶液洗涤，在60℃、40hz条件下超声20min后，过滤，将得到的滤饼连同滤纸在60℃的烘箱中干燥10h后，将滤纸上的物质刮下，得到所述式(ⅰ)所示酰胺聚合物2.9g。

2、酰胺聚合物的应用

称取酰胺聚合物0.2g在容量瓶中，加入500μg/ml栀子苷的乙醇溶液10ml，在60℃、40hz下超声2h，取样在4000rmp下离心20min，紫外下检测上清液在265nm处的吸光值不再发生变化则吸附完毕，测三遍此时的吸光度a，取平均值a＝0.234，根据栀子苷标准曲线(同实施例1)，获得吸附后溶液的浓度c＝21.67μg/ml，吸附效率为95.7％，由此可知该酰胺聚合物的吸附效用优良。

实施例4

1、酰胺聚合物ⅰ的制备

(1)顺磁性fe3o4纳米粒子的制备同实施例1。

(2)用超声辅助聚合沉淀法制备酰胺聚合物ⅰ：在具塞的三颈瓶中加入0.113g(0.28mmol)栀子苷(c17h24o10)、0.100ml(1.12mmol)甲基丙烯酸和30ml乙腈，再加入交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯4mmol和引发剂过氧化二苯甲酰0.280g，通n2鼓泡15min后停止鼓泡，再加入0.25g顺磁性fe3o4纳米粒子。将烧杯在60℃、40hz条件下超声2.5h至聚合完毕可以观察到有黑色颗粒产生，抽滤，滤饼用去离子水洗涤后60℃干燥，获得聚合物粗品。将聚合物粗品研磨至成粉末后用体积比9:1的甲醇和乙酸溶液洗涤，在60℃、40hz条件下超声20min后过滤，将得到的滤饼连同滤纸在60℃的烘箱中干燥10h后，将滤纸上的物质刮下，得到所述式(ⅰ)所示酰胺聚合物。

同样条件下，将栀子苷、甲基丙烯酸和交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯物质量之比改为1:6:18、1:8:14、1:4:20、1:6:30、1:8:24，记为聚合物ⅰ。

2、聚合物ⅱ的制备

将步骤1中的甲基丙烯酸改为丙烯酰胺，分别在栀子苷(模板分子)、丙烯酰胺(功能单体)和交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯物质量之比为1:4:12、1:6:18、1:8:14、1:4:20、1:6:30、1:8:24的条件下，制备酰胺聚合物，记为聚合物ⅱ。

采用实施例2所述方法，分别用不同比例制备的聚合物ⅰ和聚合物ⅱ对500μg/ml栀子苷的乙醇溶液进行吸附，吸附率见图5所示。

结果表明，使用甲基丙烯酸的聚合物ⅰ吸附效率更高、更稳定。