3-(2-苯并五元杂环)-4-(3-二甲胺丙氨基)喹啉衍生物及其制备方法和应用与流程

本发明涉及有机化学及药物化学技术领域，具体涉及3-(2-苯并五元杂环)-4-(3-二甲胺丙氨基)喹啉类衍生物及其制备方法和应用。

背景技术：

发现新的抗肿瘤化合物一直是药物化学研究的一个重点领域。4-氨基喹啉类化合物具有广泛生物化学及类药性质，4-氨基喹啉类化合物如氯喹等作为重要的抗疟疾药物已经在临床上得到广泛应用。此外，苯并恶唑、苯并噻唑及苯并咪唑等苯并五元杂环化合物也具有广泛生物活性，是药物化学研究中的重要优势结构之一。我们通过将4-氨基喹啉结构单元与苯并恶唑、苯并噻唑及苯并咪唑等苯并五元杂结构单元组合，设计合成了3-(2-苯并五元杂环)-4-(3-二甲胺丙氨基)喹啉类化合物，并发现这类新化合物具有很好的抗肿瘤活性。目前，该类化合物的合成及活性报道均还没有文献报道。

技术实现要素：

本发明提供一类具有3-(2-苯并五元杂环)-4-(3-二甲胺丙氨基)喹啉结构的衍生物及其制备方法和应用，该类化合物具有很好的抗肿瘤活性，能应用于制备抗肿瘤药物，为抗肿瘤药物的研究提供了更广阔的思路。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

具有通式(ⅰ)的3-(2-苯并五元杂环)-4-(3-二甲胺丙氨基)喹啉衍生物：

其中：y是s,o或nh；r¹分别是f原子、cl原子、br原子、烷基、烷氧基、三氟甲基、硝基或羟基。

本发明提供了具有通式(ⅰ)的3-(2-苯并五元杂环)-4-(3-二甲胺丙氨基)喹啉衍生物的制备方法，包括以下步骤：

s1.向容器中加入化合物1化合物2和二苯醚，在氮气/惰性气体保护下，加热回流反应，反应结束后冷却至室温，析出大量固体，抽滤，洗涤，干燥，得到

s2.将pocl3加入到容器中，加热回流反应，冷却，除去大部分pocl3，将产物倒入冰水中，调节ph到8～9，抽滤，洗涤，烘干，柱层析提纯得淡黄色固体；将所述淡黄色固体、n,n二甲基丙二胺、二甲苯加入到容器中，在氮气/惰性气体保护下，加热回流反应，反应结束后，冷却，除去溶剂，柱层析提纯得

优选的，所述步骤s1中，回流反应的温度为210～230℃，反应时间为1.8～2.5h。

优选的，所述步骤s1中，洗涤时，先用石油醚洗涤，再用二氯甲烷洗涤。

优选的，所述步骤s2中，和pocl3加热回流反应的时间为4.5～6h。

优选的，所述步骤s2中，洗涤时，用水进行洗涤。

本发明进一步提供了具有通式(ⅰ)的3-(2-苯并五元杂环)-4-(3-二甲胺丙氨基)喹啉衍生物和药学上可接受的辅料组成的药物组合物。

本发明进一步提供了具有通式(ⅰ)的3-(2-苯并五元杂环)-4-(3-二甲胺丙氨基)喹啉衍生物制备成药剂学上可接受的剂型。

本发明进一步提供了具有通式(ⅰ)的3-(2-苯并五元杂环)-4-(3-二甲胺丙氨基)喹啉衍生物或其药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

优选的，所述肿瘤包括人肝癌肿瘤、人胃癌肿瘤、人膀胱癌肿瘤、人肺癌肿瘤。

本发明合成了一类具有通式(i)的衍生物，并提供了其制备方法，原料易得，制备方法简单，仅需两个步骤，提供了多样化的3-(2-苯并五元杂环)-4-(3-二甲胺丙氨基)喹啉衍生物，选择性更广，为抗肿瘤药物的开发提供了更多的思路。

经试验证明，通式(i)的化合物对人胃癌细胞mgc-803、人膀胱癌细胞t-24、人肝癌细胞hepg2、人肺癌细胞nci-h460均具有很好的抑制活性。

将通式(i)的化合物与药学上可接受的辅料组成药物组合物，由于该药物组合物添加了对肿瘤细胞具有很好抑制活性的通式(i)化合物，对肿瘤细胞尤其mgc-803(人胃癌细胞)、t-24(人膀胱癌细胞)、hepg-2(人肝癌细胞)、nci-h460(人肺癌肿瘤)具有很好地抑制活性的作用，将在抗肿瘤药物方面具有较好的应用前景。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明进一步说明，但本发明的保护范围不限于以下实施例。

具有通式(ⅰ)的3-(2-苯并五元杂环)-4-(3-二甲胺丙氨基)喹啉衍生物的制备方法，制备路线见scheme1：

s1.在电磁搅拌下，依次向圆底烧瓶中加入化合物1，化合物2邻氨基苯硫酚/邻氨基苯酚/邻氨基苯胺和二苯醚，在氮气保护下，用电热套加热至220℃，回流反应2h。冷却至室温，析出大量固体，抽滤，用石油醚洗涤，再用二氯甲烷洗涤，将固体置于60℃的真空干燥箱中干燥3h，分别对应得到化合物3/4/5。

s2.在电磁搅拌下，依次将化合物3/4/5、pocl3加入到单口烧瓶中，加热回流反应5h(tlc监控反应，展开剂:v石油醚:v乙酸乙酯＝4:1)，冷却，减压除去大部分pocl3，将产物倒入冰水中，用nahco3固体调节ph到8～9，抽滤，用大量水洗涤，烘干，用硅胶柱层析提纯(洗脱剂:v石油醚:v乙酸乙酯＝8:1)得淡黄色固体。

在电磁搅拌下，依次将上步得到的淡黄色固体、n,n二甲基丙二胺、二甲苯加入到单口烧瓶中，在氮气保护下加热回流反应过夜(tlc监控反应，展开剂:v石油醚:v乙酸乙酯＝4:1)，冷却，减压除去溶剂，用硅胶柱层析提纯(洗脱剂:v二氯甲烷:v乙酸乙酯:v甲醇＝9:3:1)，对应得到产物6/7/8。

具体合成步骤见以下实施例1～72：

实施例1：化合物3a的制备。

在电磁搅拌下，依次将化合物1a邻氨基苯硫酚，二苯醚加入到50ml单口烧瓶中，在氮气保护下加热回流反应2h(tlc监控反应，展开剂:v二氯甲烷:v乙酸乙酯:v甲醇＝9:3:1)，反应完成后析出大量固体，抽滤，用石油醚洗涤(10ml×5)，得淡黄色固体(化合物3a)，产率90％。

实施例2：化合物3b的制备。

用化合物1b替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3b，产率：90％。

实施例3：化合物3c的制备。

用化合物1c替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3c，产率：81％。

实施例4：化合物3d的制备。

用化合物1d替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3d，产率：91％。

实施例5：化合物3e的制备。

用化合物1e替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3e，产率：80％。

实施例6：化合物3f的制备。

用化合物1f替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3f，产率：90％。

实施例7：化合物3g的制备。

用化合物1g替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3g，产率：83％。

实施例8：化合物3h的制备。

用化合物1h替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3h，产率：94％。

实施例9：化合物3i的制备。

用化合物1i替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3i，产率：85％。

实施例10：化合物3j的制备。

用化合物1j替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3j，产率：90％。

实施例11：化合物3k的制备。

用化合物1k替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3k，产率：87％。

实施例12：化合物3l的制备。

用化合物1l替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3l，产率：85％。

实施例13：化合物3m的制备。

用化合物1m替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3m，产率：90％。

实施例14：化合物3n的制备。

用化合物1n替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3n，产率：88％。

实施例15：化合物3o的制备。

用化合物1o替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3o，产率：84％。

实施例16：化合物3r的制备。

用化合物1r替换化合物1a，合成方法同实施例1，得化合物3r，产率：80％。

实施例17：化合物4a的制备。

在电磁搅拌下，依次将化合物1a、邻氨基苯酚、二苯醚加入到50ml单口烧瓶中，在氮气保护下加热回流反应2h(tlc监控反应，展开剂:v二氯甲烷:v乙酸乙酯:v甲醇＝9:3:1)，反应完成后析出大量固体，抽滤，用石油醚洗涤(10ml×5)，得淡黄色固体(化合物4a)，产率90％。

实施例18：化合物4b的制备。

用化合物1b替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4b，产率：90％。

实施例19：化合物4c的制备。

用化合物1c替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4c，产率：86％。

实施例20：化合物4d的制备。

用化合物1d替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4d，产率：86％。

实施例21：化合物4e的制备。

用化合物1e替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4e，产率：85％。

实施例22：化合物4f的制备。

用化合物1f替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4f，产率：88％。

实施例23：化合物4g的制备。

用化合物1g替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4g，产率：83％。

实施例24：化合物4h的制备。

用化合物1h替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4h，产率：94％。

实施例25：化合物4i的制备。

用化合物1i替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4i，产率：85％。

实施例26：化合物4j的制备。

用化合物1j替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4j，产率：85％。

实施例27：化合物4k的制备。

用化合物1k替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4k，产率：87％。

实施例28：化合物4l的制备。

用化合物1l替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4l，产率：85％。

实施例29：化合物4m的制备。

用化合物1m替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4m，产率：90％。

实施例30：化合物4n的制备。

用化合物1n替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4n，产率：86％。

实施例31：化合物4o的制备。

用化合物1o替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4o，产率：84％。

实施例32：化合物4p的制备。

用化合物1p替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4p，产率：88％。

实施例33：化合物4q的制备。

用化合物1q替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4q，产率：90％。

实施例34：化合物4r的制备。

用化合物1r替换化合物1a，合成方法同实施例17，得化合物4r，产率：80％。

实施例35：化合物5b的制备。

在电磁搅拌下，依次将1b、邻氨基苯苯胺、二苯醚加入到50ml单口烧瓶中，在氮气保护下加热回流反应2h(tlc监控反应，展开剂:v二氯甲烷:v乙酸乙酯:v甲醇＝9:3:1)，反应完成后析出大量固体，抽滤，用石油醚洗涤(10ml×5)，得淡黄色固体(化合物5b)，产率70％。

实施例36：化合物5n的制备。

用化合物1n替换化合物1a，合成方法同实施例35，得化合物5n，产率：80％。

实施例37：化合物6a的制备。

在电磁搅拌下，依次将化合物3a、pocl3加入到单口烧瓶中，加热回流反应5h(tlc监控反应，展开剂:v石油醚:v乙酸乙酯＝4:1)，冷却，减压除去大部分pocl3，将产物倒入冰水中，用nahco3固体调节ph到8～9，抽滤，用大量水洗涤，烘干，用硅胶柱层析提纯(洗脱剂:v石油醚:v乙酸乙酯＝8:1)得淡黄色固体。

在电磁搅拌下，依次将上步反应产物和n,n-二甲基丙二胺、二甲苯加入到单口烧瓶中，在氮气保护下加热回流反应过夜(tlc监控反应，展开剂:v石油醚:v乙酸乙酯＝4:1)，冷却，减压除去溶剂，用硅胶柱层析提纯(洗脱剂:v二氯甲烷:v乙酸乙酯:v甲醇＝9:3:1)，得化合物6a。

淡黄色固体0.071g,产率59％,m.p.49～51℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.47(s,1h,nh),8.97(s,1h,arh),8.33(d,j＝8.6hz,1h,arh),7.97～7.93(m,2h,arh),7.90～7.87(m,1h,arh),7.66～7.63(m,1h,arh),7.49～7.45(m,1h,arh),7.41～7.35(m,2h,arh),4.00～3.96(m,2h,ch2),2.52(t,j＝7.2hz,2h,ch2),2.25(d,j＝3.1hz,6h,n(ch3)2),2.02(dd,j＝13.9,6.8hz,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.5,152.7,152.1,151.0,149.9,132.8,130.4,129.7,126.3,126.2,125.1,124.2,121.8,121.3,119.7,107.6,57.1,47.4,45.6,29.1.hrms(esi⁺):c21h23n4sfor[m+h]⁺,calculated363.1643,found363.1632.

实施例38：化合物6b的制备。

用化合物3b替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6b。

淡黄色固体0.088g,产率73％,m.p.99～101℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.25(s,1h,nh),8.91(s,1h,arh),8.05(s,1h,arh),7.94～7.93(m,1h,arh),7.88～7.84(m,2h,arh),7.48～7.44(m,2h,arh),7.37～7.34(m,1h,arh),3.92(dd,j＝11.5,6.4hz,2h,ch2),2.52～2.49(m,5h,ch2,ch3),2.24(s,6h,n(ch3)2),2.00～1.95(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.6,152.8,151.9,150.3,148.3,133.8,132.9,132.3,129.5,126.3,125.2,125.0,121.8,121.2,119.8,107.9,57.2,47.4,45.7,29.1,22.0.hrms(esi⁺):c22h25n4sfor[m+h]⁺,calculated377.1800,found377.1782.

实施例39：化合物6c的制备。

用化合物3c替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6c。

淡黄色固体0.1g,产率83％,m.p.106～107℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.42(s,1h,nh),8.94(s,1h,arh),8.22(d,j＝8.7hz,1h,arh),7.93(d,j＝8.0hz,1h,arh),7.88(d,j＝8.0hz,1h,arh),7.73(s,1h,arh),7.48～7.45(m,1h,arh),7.39～7.33(m,1h,arh),7.21(dd,j＝8.7,1.6hz,1h,arh),3.98～3.95(m,2h,ch2),2.53～2.50(m,5h,ch2,ch3),2.25(s,6h,n(ch3)2),2.02～1.99(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.7,152.8,152.0,151.1,150.2,140.8,132.7,129.0,126.2,126.2,126.0,125.0,121.7,121.2,117.5,107.3,57.1,47.2,45.6,29.1,21.6.hrms(esi⁺):c22h25n4sfor[m+h]⁺,calculated377.1800,found377.1780.

实施例40：化合物6d的制备。

用化合物3d替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6d。

产率87％,黄色固体,m.p.109～111℃；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.28(t,j＝4.4hz,1h,nh),9.03(s,1h,arh),8.16(d,j＝8.1hz,1h,arh),7.96～7.91(m,1h,arh),7.90～7.84(m,1h,arh),7.53～7.49(m,1h,arh),7.48～7.43(m,1h,arh),7.38～7.33(m,1h,arh),7.30～7.26(m,1h,arh),3.93(td,j＝6.7,5.0hz,2h,ch2),2.75(s,3h,ch3),2.48(t,j＝7.2hz,2h,ch2),2.23(s,6h,ch3),2.01～1.93(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.7,152.9,152.7,149.9,148.9,137.2,133.0,130.9,126.4,125.1,124.2,123.8,122.0,121.3,119.7,108.0,57.2,47.7,45.7,29.3,19.0.hrms(esi)m/z:calcdforc22h25n4s,(m+h)⁺377.1800,found377.1782.

实施例41：化合物6e的制备。

用化合物3e替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6e。

淡黄色固体0.075g,产率63％,m.p.47～50℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.06(s,1h,nh),8.88(s,1h,arh),7.96(d,j＝8.1hz,1h,arh),7.91～7.89(m,2h,arh),7.61(d,j＝2.7hz,1h,arh),7.50～7.46(m,1h,arh),7.39～7.36(m,1h,arh),7.33(dd,j＝9.1,2.7hz,1h,arh),3.93～3.90(m,5h,ch2,och3),2.52～2.49(m,2h,ch2),2.23(s,6h,n(ch3)2),2.00～1.95(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.4,156.1,152.8,151.7,148.9,145.3,133.0,131.0,126.3,125.1,121.9,121.3,120.7,113.9,108.6,105.9,57.1,55.6,47.1,45.6,29.1.hrms(esi⁺):c22h25on4sfor[m+h]⁺,calculated393.1749,found393.1726.

实施例42：化合物6f的制备。

用化合物3f替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6f。

产率39％,淡黄色固体,m.p.195～198℃；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.47(t,j＝4.3hz,1h,nh),8.90(s,1h,arh),8.23(d,j＝9.4hz,1h,arh),7.92(d,j＝8.0hz,1h,arh),7.88(d,j＝7.6hz,1h,arh),7.49～7.44(m,1h,arh),7.39～7.34(m,1h,arh),7.31(d,j＝2.7hz,1h,arh),7.02(dd,j＝9.3,2.7hz,1h,arh),3.98～3.93(m,5h,ch2),2.57～2.53(m,2h,ch2),2.27(s,6h,ch3),2.07～2.00(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.8,161.4,152.8,152.2,152.1,151.2,132.7,127.7,126.4,125.1,121.8,121.4,116.4,114.0,108.4,107.0,57.2,55.6,47.3,45.6,29.0.hrms(esi)m/z:calcdforc22h25n4os,[m+h]⁺393.1749found393.1732.

实施例43：化合物6g的制备。

用化合物3g替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6g。

淡黄色固体0.071g,产率59％,m.p.124～125℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.36(s,1h,nh),8.93(s,1h,arh),7.99～7.89(m,4h,arh),7.49(t,j＝7.6hz,1h,arh),7.43～7.37(m,2h,arh),3.92(dd,j＝11.6,6.3hz,2h,ch2),2.53(t,j＝7.0hz,2h,ch2),2.26(s,6h,n(ch3)2),2.03～1.97(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.1,159.8,157.9,152.7,151.5,150.4,146.8,132.9,131.9,126.4,125.3,122.0,121.3,119.9,110.3,107.9,57.0,47.045.6,28.9.hrms(esi⁺):c21h22fn4sfor[m+h]⁺,calculated381.1549,found381.1532.

实施例44：化合物6h的制备。

用化合物3h替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6h。

淡黄色固体0.059g,产率49％,m.p.61～63℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.58(s,1h,nh),8.93(s,1h,arh),8.32(dd,j＝9.4,5.9hz,1h,arh),7.92(d,j＝8.0hz,1h,arh),7.87(d,j＝7.6hz,1h,arh),7.55(dd,j＝10.1,2.7hz,1h,arh),7.48～7.45(m,1h,arh),7.39～7.35(m,1h,arh),7.15～7.11(m,1h,arh),3.94(dd,j＝11.4,6.6hz,2h,ch2),2.53(t,j＝7.1hz,2h,ch2),2.25(s,6h,n(ch3)2),2.04～1.99(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.3,164.5,162.5,152.6,152.0,151.9,132.6,128.6,126.4,125.2,121.8,116.5,113.9,113.6,113.4,107.3,56.0,47.3,45.6,29.0.hrms(esi⁺):c21h22fn4sfor[m+h]⁺,calculated381.1549,found381.1531.

实施例45：化合物6i的制备。

用化合物3i替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6i。

产率40％,黄色固体,m.p.108～109℃；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ:10.24(t,j＝4.3hz,1h,nh),8.88(s,1h,arh),8.19(d,j＝8.6hz,1h,arh),8.12(d,j＝7.9hz,1h,arh),7.99(d,j＝8.0hz,1h,arh),7.54(dd,j＝16.7,9.2hz,2h,arh),7.47～7.41(m,2h,arh),3.84(dd,j＝11.3,6.2hz,2h,ch2),2.42(t,j＝6.9hz,2h,ch2),2.14(s,6h,ch3),1.92～1.85(m,2h,ch2).¹³cnmr(150mhz,dmso-d6)δ:166.6,158.4,156.7,152.0,150.8,150.5,139.3,132.3,126.7,125.5,124.1,122.9,121.9,120.9,114.9,107.3,56.1,46.4,45.0,27.8.hrms(esi)m/z:calcdforc21h22fn4s,[m+h]⁺381.1550found381.1534.

实施例46：化合物6j的制备。

用化合物3j替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6j。

淡黄色固体0.079g,产率66％,m.p.129～132℃，¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.42(s，1h，nh)，8.93(s,1h,arh),8.28(d,j＝2.2hz,1h,arh),7.95(d,j＝8.0hz，1h，arh),7.88(t,j＝8.8hz,2h,arh),7.56(dd,j＝8.9,2.2hz,1h,arh),7.49～7.47(m,1h,arh),7.40～7.37(m,1h,arh),3.90(dd,j＝11.4,6.5hz,2h,ch2),2.54(t,j＝7.0hz,2h,ch2),2.27(s,6h,n(ch3)2),2.03～1.97(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.0,152.6,151.2,151.1,148.3,132.9,131.3,130.9,129.7,126.4,125.3,125.1,122.0,121.3,120.5,108.1,77.3，77.1,76.8,57.0,47.1,45.6,28.8.hrms(esi⁺):c21h22cln4sfor[m+h]⁺,calculated397.1254,found397.1239.

实施例47：化合物6k的制备。

用化合物3k替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6k。

淡黄色固体0.067g,产率52％,mp.128～130℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.54(s,1h,nh),8.94(s,1h,arh),8.24(d,j＝9.1hz,1h,arh),7.93～7.87(m,3h,arh),7.49～7.46(m,1h,arh),7.39～7.36(m,1h,arh),7.31(dd,j＝9.1,2.2hz，1h,arh),3.93(dd,j＝11.5,6.6hz,2h,ch2),2.52(t,j＝7.1hz,2h,ch2),2.25(s,6h,n(ch3)2),2.01(dd,j＝13.8,6.8hz,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.2,152.6,151.8,150.7,136.2,132.7,128.7,127.5,126.4,125.2,124.7,121.9,121.3,118.0，107.7，57.0，47.2，45.6,29.0.hrms(esi⁺):c21h22cln4sfor[m+h]⁺,calculated397.1254,found397.1233.

实施例48：化合物6l的制备。

用化合物3l替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6l。

淡黄色固体0.097g,产率81％,m.p.100～102℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.51(s,1h,nh),9.10(s,1h,arh),8.24(dd,j＝8.6,1.2hz,1h,arh),7.94(d,j＝8.1hz,1h,arh),7.89(d,j＝7.9hz,1h,arh),7.76(dd,j＝7.5,1.2hz,1h,arh),7.49～7.46(m,1h,arh),7.40～7.37(m,1h,arh),7.29(dd,j＝8.5,7.5hz,1h,arh),3.95～3.92(m,2h,ch2),2.51(t,j＝7.1hz,2h,ch2),2.25(s,6h,n(ch3)2),2.01～1.99(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.0,152.6,152.2,151.3,146.2,133.6,132.9,130.6,126.4,125.3,125.2,123.7,122.0,121.3,121.1,108.2,57.0,47.5,45.6,29.0.hrms(esi⁺):c21h22cln4sfor[m+h]⁺,calculated397.1254,found397.1240.

实施例49：化合物6m的制备。

用化合物3m替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6m。

产率52％,淡黄色固体,m.p.123～126℃；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.42(t,j＝4.9hz,1h,nh),8.95(s,1h,arh),8.45(d,j＝1.9hz,1h,arh),7.97(d,j＝8.1hz,1h,arh),7.90(d,j＝8.0hz,1h,arh),7.82(d,j＝8.8hz,1h,arh),7.72～7.68(m,1h,arh),7.52～7.47(m,1h,arh),7.42～7.37(m，1h，arh)，3.90(dd,j＝11.4,6.3hz,2h,ch2),2.56(t,j＝7.1hz,2h,ch2),2.28(s,6h，ch3),2.04～1.98(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.1,152.7,151.3，151.1，148.5，133.6，133.0，131.5，128.3，126.6，125.4，122.1,121.4,121.1,117.8,108.2,57.1,47.2,45.5,28.6.hrms(esi)m/z:calcdforc21h22brn4s,[m+h]⁺441.0749found441.0732.

实施例50：化合物6n的制备。

用化合物3n替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6n。

淡黄色固体0.071g,产率61％,m.p.241～244℃,¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ:10.27(s,1h,nh),8.87(s,1h,arh),8.38(d,j＝9.1hz,1h,arh),8.12(dd,j＝12.0,7.9hz,2h,arh),8.02(d,j＝2.1hz,1h,arh),7.60～7.55(m,2h,arh),7.49～7.46(m,1h,arh),3.93(dd,j＝11.3，6.5hz,2h,ch2),2.98(t,j＝7.3hz,2h,ch2),2.59(s,6h,n(ch3)2),2.19～2.13(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,dmso-d6)δ:167.0,152.5,151.9,151.3,150.7,132.7,131.5,128.8,127.8,127.2,126.0,124.5,122.5,122.3,118.4,107.5,60.2,55.3,46.2,26.3.hrms(esi⁺):c21h22brn4sfor[m+h]⁺,calculated441.0747,found441.0730.

实施例51：化合物6o的制备。

用化合物3o替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6o。

产率98％,黄色固体,m.p.186～187℃；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ:10.18(t,j＝4.7hz,1h,nh),8.97(s,1h,arh),8.43(dd,j＝8.5,1.0hz,1h,arh),8.16～8.13(m,1h,arh),8.10～8.06(m,2h,arh),7.58～7.54(m,1h,arh),7.49～7.45(m,1h,arh),7.39～7.35(m,1h,arh),3.87(dd,j＝11.6,6.6hz，2h，ch2)，2.75～2.67(m,2h,ch2),2.38(s,6h,ch3),2.06～2.00(m,2h,ch2).¹³cnmr(151mhz，dmso-d6)δ:166.4,152.0,151.3,151.1,146.0,134.3,132.5,126.8,126.1,125.6,124.9,124.4,122.0,121.9,120.5,107.6,55.3,46.3,43.7,26.6.hrms(esi)m/z:calcdforc21h22brn4s,[m+h]⁺441.0749found441.0735.

实施例52：化合物6r的制备。

用化合物3r替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物6r。

产率64％,黄色固体,m.p.160～162℃；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:10.45(t,j＝4.2hz,1h,nh),8.90(s,1h,arh),8.06(d,j＝11.2hz,1h,arh),7.98(d,j＝7.5hz,1h,arh),7.93(d,j＝8.1hz,1h,arh),7.89～7.87(m,1h,arh),7.50～7.46(m,1h,arh),7.40～7.37(m,1h,arh),3.92～3.86(m,2h,ch2),2.53(t,j＝7.0hz,2h,ch2),2.26(s,6h,ch3),2.03～1.97(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.0,155.2,153.3,152.7,151.4,151.3,147.2,132.9,131.3,126.6,125.5,122.1,121.4,111.7,111.5,108.0,57.0,46.9，45.7，28.9.hrms(esi)m/z:calcdforc21h21clfn4s，[m+h]⁺415.1160found415.1141.

实施例53：化合物7a的制备。

用化合物4a替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7a。

淡棕色固体0.052g,产率42％,m.p.84～85℃，¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.77(s,1h,nh),9.29(s,1h,arh)，8.32(dd，j＝8.6，0.8hz，1h，arh),7.97(dd,j＝8.4,1.1hz,1h,arh),7.68～7.59(m,3h,arh),7.41～7.32(m,3h,arh),4.00(dd,j＝11.6,6.7hz,2h,ch2),2.55(t,j＝7.2hz,2h,ch2),2.28(s,6h,n(ch3)2),2.08～2.01(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:168.8,162.6,156.8,153.1,151.6,150.8,149.2,141.0,131.1,130.6,129.8,126.1,124.9,119.5,110.4,102.6,56.9,56.9,47.2,28.9.hrms(esi⁺):c21h23on4for[m+h]⁺,calculated347.1872,found347.1856.

实施例54：化合物7b的制备。

用化合物4b替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7b。

淡黄色固体0.039g,产率35％,m.p.180～183℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.05(s,1h,nh),8.63(s,1h,arh),8.01(d,j＝8.0hz,1h,arh)，7.77(d,j＝8.5hz,1h,arh),7.64(s,1h,arh)，7.42(d,j＝8.5hz,1h,arh),6.99(d,j＝4.1hz,2h,arh),6.87～6.85(m,1h,arh),3.62(t,j＝6.0hz,2h,ch2),2.57(t,j＝6.0hz,2h,ch2),2.47(s,3h,ch3),2.34(s,6h,n(ch3)2),1.85～1.83(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.0,152.1,147.9,145.4,134.9,132.6,129.7,127.3,125.3,123.2,122.3,120.9,119.8,118.9,116.8,108.9,58.5,58.4,47.7,26.1,21.9.hrms(esi⁺):c22h25on4for[m+h]⁺,calculated361.20284,found361.20105.

实施例55：化合物7c的制备。

用化合物4c替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7c。

淡黄色固体0.052g,产率57％,m.p.105～107℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.08(s,1h,nh),8.64(s,1h,arh),8.01(d,j＝7.9hz,1h,arh),7.78(d,j＝8.5hz,1h，arh),7.64(s,1h,arh),7.43(d,j＝8.5hz,1h,arh),6.99(d,j＝4.0hz,2h,arh),6.88～6.85(m,1h,arh),3.62(t,j＝6.0hz,2h,ch2),2.59～2.57(m,2h,ch2),2.47(s,3h,ch3),2.35(s,6h,n(ch3)2),1.85～1.83(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:167.0,152.0,147.9,147.8,135.0,132.6,127.3,127.1,125.4,122.2,120.9,119.8,116.9,108.9,58.6,47.7,45.4,29.7,22.0.hrms(esi⁺):c22h25on4for[m+h]⁺,calculated361.2028,found361.2017.

实施例56：化合物7d的制备。

用化合物4d替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7d。

产率39％,淡黄色固体,m.p.89～92℃；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ9.61(t,j＝4.2hz,1h,nh),9.35(s,1h,arh),8.17(d,j＝8.5hz,1h,arh),7.70～7.66(m,1h,arh),7.63～7.59(m,1h,arh),7.55～7.51(m,1h,arh),7.37～7.32(m,2h,arh),7.31～7.27(m,1h,arh),4.00～3.93(m,2h,ch2),2.77(s,3h,ch3)，2.51(t，j＝7.2hz，2h，ch2)，2.26(s，6h，ch3)，2.04～1.97(m，2h，ch2).¹³cnmr(125mhz，cdcl3)δ:162.9，153.9，149.4，149.2，148.3，141.2，137.4,131.1,124.9,124.6,124.0,123.8,119.4,119.0,110.6,101.4,57.2,47.7,45.7,29.3,19.1.hrms(esi)m/z:calcdforc22h25n4o,[m+h]⁺361.2028found361.2010.

实施例57：化合物7e的制备。

用化合物4e替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7e。

淡棕色固体,产率32％,m.p.52～54℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.47(s,1h,nh),9.22(s,1h,arh),7.93(d,j＝9.1hz，1h，arh)，7.71～7.69(m，1h，arh)，7.62～7.61(m,2h,arh),7.38～7.34(m,3h,arh),3.98(dd,j＝11.8,6.5hz,2h,ch2),3.94(s,3h,och3),2.57(t,j＝7.3hz,2h,ch2),2.30(s,6h,n(ch3)2),2.08～2.01(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:163.0,161.5,153.1,152.7,149.8,149.1,141.2,127.5,124.9,124.6,118.9,116.3,113.8,110.5,108.6,100.3,60.7,57.0,55.6,47.0,45.53.hrms(esi⁺):c22h25n4o2for[m+h]⁺,calculated377.1978,found377.1959.

实施例58：化合物7f的制备。

用化合物4f替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7f。

产率55％,淡黄色固体,m.p.141～142℃；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.74(t,j＝4.7hz,1h,nh),9.23(s,1h,arh),8.24(d,j＝9.4hz,1h,arh),7.69～7.64(m,1h,arh),7.61～7.57(m,1h,arh),7.37～7.31(m,3h,arh),7.02(dd,j＝9.3,2.7hz,1h,arh),4.01～3.93(m,3h,och3),2.55(t,j＝7.2hz,2h,ch2),2.28(s,6h,ch3),2.08～2.01(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:163.0,161.5,153.1,152.7,149.8,149.1,141.2,127.5,124.9,124.6,118.9,116.3,113.8,110.5,108.6,100.3,57.1,55.6,47.2,45.7,29.0.hrms(esi)m/z:calcdforc22h25n4o2,[m+h]⁺377.1978found377.1960.

实施例59：化合物7g的制备。

用化合物4g替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7g。

白色固体0.068g,产率57％,m.p.124～127℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.70(s,1h,nh),9.26(s,1h,arh),7.99～7.95(m,2h,arh),7.69～7.67(m,1h,arh),7.61～7.60(m,1h,arh),7.44～7.40(m,1h,arh),7.37～7.35(m,2h,arh),3.97～3.95(m,2h,ch2),2.56(t,j＝7.1hz,2h,ch2),2.29(s,6h,n(ch3)2),2.07～2.02(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:162.4,159.8,157.8,152.5,152.5,149.3,148.8,147.3,140.9,132.2,125.1,124.6,120.2,119.0,110.5,101.3,56.9,46.7,45.6,28.8.hrms(esi⁺):c21h22fon4for[m+h]⁺,calculated365.1778,found365.1759.

实施例60：化合物7h的制备。

用化合物4h替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7h。

白色固体0.068g,产率57％,m.p.143～146℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.86(s,1h,nh),9.27(s,1h,arh),8.34(dd,j＝9.4,6.0hz,1h,arh),7.68～7.66(m,1h,arh),7.61～7.57(m,2h,arh),7.37～7.34(m,2h,arh),7.17～7.13(m,1h,arh),3.99～3.96(m,2h,ch2),2.56(t,j＝7.1hz,2h,ch2),2.29(s,6h,n(ch3)2),2.08～2.03(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz，cdcl3)δ:164.6，162.6,162.5,152.9,152.3,150.3,148.9,140.9，128.4，125.0，124.6，118.9，116.2，113.9,110.5,100.7,56.9,47.2,45.6,28.9.hrms(esi⁺):c21h22fon4for[m+h]⁺,calculated365.1778,found365.1763.

实施例61：化合物7i的制备。

用化合物4i替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7i。

淡黄色固体,产率83％,m.p.136～137℃；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.86(t,j＝4.0hz,1h,nh),9.31(s,1h,arh),8.09(d,j＝8.5hz,1h,arh),7.70～7.63(m,1h,arh),7.63～7.54(m,1h,arh),7.37～7.26(m,4h,arh),3.97(dd,j＝11.6,6.6hz,2h,ch2),2.53(t,j＝7.1hz,2h,ch2),2.27(s,6h,ch3),2.06～1.99(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:162.4,159.4,157.4，152.7,149.5,149.1,140.9,125.2,124.7,123.6,121.7,119.0,115.0,114.8,110.6,101.6,57.0,47.2,45.7,29.0.hrms(esi)m/z:calcdforc21h22fn4o,[m+h]⁺365.1778found365.1760.

实施例62：化合物7j的制备。

用化合物4j替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7j。

淡黄色固体0.043g,产率36％,m.p.124～126℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.79(s,1h),9.26(s,1h,nh),8.30(d,j＝2.2hz,1h,arh),7.90(d,j＝8.9hz,1h,arh),7.70～7.67(m,j＝6.8,1h,arh),7.62～7.57(m,2h,arh),7.38～7.34(m,2h,arh),3.96(dd,j＝11.5,6.5hz,2h,ch2),2.58(t,j＝7.2hz,2h,ch2),2.30(s,6h,n(ch3)2),2.08～2.02(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:168.5,162.2,152.2,149.4,149.0,148.6,140.9,131.5,129.7,125.2,124.9,124.7,120.1,119.0,110.5,101.5,60.8，56.9,47.1,28.7.hrms(esi⁺):c21h22clon4for[m+h]⁺,calculated381.1482,found381.1465.

实施例63：化合物7k的制备。

用化合物4k替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7k。

淡黄色固体0.079g,产率62％,m.p.139～141℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.85(s,1h,nh),9.28(s,1h,arh),8.26(d,j＝9.1hz,1h,arh),7.94(d,j＝2.2hz,1h,arh),7.67(dd,j＝6.1,3.0hz,1h,arh),7.61～7.59(m,1h,arh),7.37～7.31(m,3h,arh),3.97(dd,j＝11.6,6.7hz,2h,ch2),2.56(t,j＝7.1hz,2h,ch2),2.29(s,6h,n(ch3)2),2.05(dd,j＝9.5,4.5hz,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:162.3,152.8,151.2,150.2,149.0,140.9,136.5,128.9,127.4,125.1,124.8,124.6,118.9,117.7,110.5,101.1,56.8,47.1,45.6,28.8.hrms(esi⁺):c21h22clon4for[m+h]⁺,calculated381.1482,found381.1471.

实施例64：化合物7l的制备。

用化合物4l替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7l。

淡棕色固体0.052g,产率43％,m.p.81～83℃,¹hnmr(500mhz，cdcl3)δ:9.84(s，1h，nh),9.41(s,1h,arh),8.25(dd,j＝8.6，1.1hz,1h,arh),7.79(dd,j＝7.5,1.2hz,1h，arh)，7.70～7.68(m，1h，arh),7.63～7.61(m,1h,arh),7.39～7.35(m,2h,arh)，7.32～7.29(m,1h,arh),3.98(dd,j＝11.6,6.6hz,2h,ch2),2.57(t,j＝7.1hz,2h,ch2),2.30(s,6h,n(ch3)2),2.08～2.03(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:162.1,153.3,152.2,149.7,149.0,146.6,140.8,133.7,131.3,125.2,124.7,123.7,120.7,119.0,110.6,101.8,60.9,56.8,47.4,28.8.hrms(esi⁺):c21h22clon4for[m+h]⁺,calculated381.1482,found381.1465.

实施例65：化合物7m的制备。

用化合物4m替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7m。

产率65％,淡黄色固体,m.p.143～146℃；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.75(t,j＝3.9hz,1h,nh),9.26(s,1h,arh),8.45(d,j＝2.0hz,1h,arh),7.82(d,j＝8.9hz,1h,arh),7.73～7.65(m,2h,arh),7.62～7.57(m,1h,arh),7.39～7.32(m,2h,arh),3.96～3.90(m,2h,ch2),2.55(t,j＝7.1hz,2h,ch2),2.29(s,6h,ch3),2.06～1.98(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:162.4,152.2,149.8,149.2,149.1,141.0,133.7,131.8,128.2,125.2,124.8,120.8,119.1,117.7,110.6,101.7,57.0,47.1,45.7,28.9.hrms(esi)m/z:calcdforc21h22brn4o,[m+h]⁺425.0977found425.0967.

实施例66：化合物7n的制备。

用化合物4n替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7n。

淡黄色固体0.084g,产率71％,m.p.129～131℃,¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.82(s,1h,nh),9.25(s,1h,arh),8.16(d,j＝9.1hz,1h,arh),8.12(d,j＝2.1hz,1h,arh),7.67～7.65(m,1h,arh),7.59～7.58(m,1h,arh),7.44(dd,j＝9.1,2.1hz,1h,arh),7.35～7.33(m,2h,arh),3.95(dd,j＝11.6,6.7hz,2h,ch2),2.56(t,j＝7.2hz,2h,ch2),2.29(s,6h,n(ch3)2),2.04(dd,j＝13.5,6.5hz,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:162.3,152.8,151.2,150.1,149.0,140.8,132.1,127.4,127.3,125.1,124.9,124.6,118.9,118.0,110.5,101.1,56.8,47.0,45.5,28.8.hrms(esi⁺):c21h22bron4for[m+h]⁺,calculated425.0977,found425.0953.

实施例67：化合物7o的制备。

用化合物4o替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7o。

淡黄色固体,产率45％,m.p.179～181℃；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ:10.18(t,j＝4.3hz,1h,nh),8.96(s,1h,arh),8.43(d,j＝8.5hz,1h,arh),8.14(d,j＝7.9hz,1h,arh),8.10～8.05(m,1h,arh),7.56(t,j＝7.6hz,1h,arh),7.47(t,j＝7.6hz,1h),7.37(t,j＝8.0hz,1h,arh),3.87(dd,j＝11.4,6.3hz,2h,ch2),2.74～2.66(m,2h,ch2),2.36(s,6h,ch3),2.05～1.99(m,2h,ch2).¹³cnmr(150mhz,dmso-d6)δ:166.4,152.0,151.3,151.1,145.9,134.3,132.5,126.7,126.1,125.6,124.9,124.4,122.0,121.9,120.5,107.6,55.4,46.3,43.8,26.7.hrms(esi)m/z:calcdforc21h22brn4o,[m+h]⁺425.0977found425.0960.

实施例68：化合物7p的制备。

用化合物4p替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7p。

黄色固体,产率31％,m.p.128～131℃；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.61(t,j＝4.1hz,1h,nh),9.21(s,1h,arh),8.03(s,1h,arh),7.72(s,1h,arh),7.68～7.63(m,1h,arh),7.61～7.55(m,1h,arh),7.36～7.29(m,2h,arh),4.01～3.92(m,2h,ch2),2.53(t,j＝7.2hz,2h,ch2),2.41(s,6h,ch3),2.28(s,6h,ch3),2.05～1.97(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:163.0,152.9,149.4,149.1,148.7,141.2,140.9,133.7,129.6,125.5,124.8,124.5,118.9,117.8,110.4,100.8,57.2,47.2,45.8,29.1,20.5,20.3.hrms(esi)m/z:calcdforc23h27n4o,[m+h]⁺375.2185found375.2167.

实施例69：化合物7q的制备。

用化合物4q替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7q。

产率48％,灰白色固体,m.p.113～117℃；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.39(t,j＝4.8hz,1h,nh),9.18(s,1h,arh),7.69～7.64(m,1h,arh),7.62～7.58(m,1h,arh),7.55(s,1h,arh),7.39(s,1h,arh),7.37～7.31(m,2h,arh),4.03(s,3h,och3),4.01(s,3h,och3),3.98～3.93(m,2h,ch2),2.65～2.59(m,2h,ch2),2.31(s,6h,ch3),2.09～2.03(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:162.8,153.1,152.7,149.1,147.7,147.5,147.3,141.2,125.0,124.7,118.9,113.8,110.6,108.8,104.9,101.6,56.7,56.3,56.2,46.9,45.1,28.7.hrms(esi)m/z:calcdforc23h27n4o3,[m+h]⁺407.2083found407.2064.

实施例70：化合物7r的制备。

用化合物4r替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物7r。

淡黄色固体,产率51％,m.p.160～162℃；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ:9.83～9.70(m,1h,nh),9.22(s,1h,arh),8.08(d,j＝11.2hz,1h,arh),8.01(d,j＝7.3hz,1h,arh),7.68～7.55(m,2h,arh),7.40～7.30(m,2h,arh),3.98～3.87(m,2h,ch2),2.55(t,j＝6.6hz,2h,ch2),2.29(s,6h,ch3),2.07～2.00(m,2h,ch2).¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ:162.2,155.2,153.2,152.3,149.7,149.1,147.6,140.9,131.4,125.3,124.8,119.1,111.6,111.4,110.6,101.4,56.9,46.8,45.7,28.9.hrms(esi)m/z:calcdforc21h21clfn4o,[m+h]⁺399.1388found399.1372.

实施例71：化合物8b的制备。

用化合物5b替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物8b。

白色固体0.060g.产率50％,m.p.249～252℃,¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ:10.22(s,1h,nh),9.12(s,1h,arh),8.15(s,1h,arh),7.80(d,j＝8.5hz,1h,arh),7.66(s,2h,arh),7.55(dd,j＝8.5,1.6hz,1h,arh),7.31～7.21(m,2h,arh),3.87(t,j＝6.6hz,2h,ch2),2.98～2.91(m,2h,ch2),2.54(s,9h,ch3,n(ch3)2),2.13～2.03(m,2h,ch2).hrms(esi⁺):c22h26n5for[m+h]⁺,calculated360.21882,found360.21715.

实施例72：化合物8n的制备。

用化合物5n替换化合物3a，合成方法同实施例37，得化合物8n。

淡黄色固体0.043g,产率35％.¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ:13.35(d,j＝73.9hz,1h,nh),10.57(s,1h,nh),9.21(s,1h,arh),8.36(d,j＝9.1hz,1h,arh),8.06(s,1h,arh),7.66(s,2h,arh),7.58(d,j＝9.0hz,1h,arh),7.31～7.23(m,2h,arh),3.90(s,2h,ch2),2.97(d,j＝6.7hz,2h,ch2),2.56(s,6h,n(ch3)2),2.17～2.08(m,2h,ch2).hrms(esi⁺):c21h23n5brfor[m+h]⁺,calculated424.11368,found424.11159.

实施例73：测试细胞及步骤。

(1)培养受试细胞hepg2(肝癌细胞)、t-24(膀胱癌细胞)、mgc-803(胃癌细胞)、a549(肺癌细胞)、nci-h460(肺癌细胞)、hl-7702(肝细胞)至对数生长期后用胰蛋白酶进行消化，然后用含10％胎牛血清的培养液配成单细胞悬液接种到96孔板，置于5％co2，37℃细胞培养箱中培养。

(2)加入浓度梯度(1.25,2.5,5,10,20μm)的化合物，设5个复孔确保反映真实情况。

(3)继续置于5％co2、37℃细胞培养箱内培养48h。

(4)每孔加入10μlmtt溶液(5mg/ml)，继续培养4～6h。

(5)终止培养，小心吸去孔内液体。

(6)每孔加入100μl二甲基亚砜，置微型震荡器低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪测量各孔的吸光值，设置测试波长为570nm，参比波长为630nm。

(7)抑制率和ic50值的计算

抑制率/％＝(1–样品组平均od值/对照组平均od值)×100％，ic50值由spss软件计算所得。

实验结果均由3次独立重复实验所得，实验数据由统计软件spss17.0统计分析所得，数据以平均值±标准差表示。

测试结果见表1：

表1目标化合物对不同细胞株的ic50(μm)

由上表可见，具有通式i的3-(2-苯并五元杂环)-4-(3-二甲胺丙氨基)喹啉衍生物,具有很好的体外抗重量活性在抗肿瘤新药研发上具有较好的应用前景。