一种鉴定小茶尺蠖的引物、试剂盒及方法与流程

文档序号:18145665发布日期:2019-07-10 11:47

技术特征:

1.一种鉴定小茶尺蠖的引物,其特征在于,所述鉴定小茶尺蠖的引物包含3对引物,分别为引物对Xch1、引物对Xch2、引物对Xch3;所述引物对Xch1序列如SEQ ID NO:1-2所示,所述引物对Xch2序列如SEQ ID NO:3-4所示,所述引物对Xch3序列如SEQ ID NO:5-6所示。

2.一种采用权利要求1所述的鉴定小茶尺蠖的引物构建获得的小茶尺蠖的特异性识别序列,其特征在于,所述引物对Xch1获得的特异性识别序列为S137625,其序列如SEQ ID NO.7所示;所述引物对Xch2获得的特异性识别序列为S336287,其序列如SEQ ID NO.8所示;所述引物对Xch3获得的特异性识别序列为S779467,其序列如SEQ ID NO.9所示。

3.一种鉴定小茶尺蠖的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含权利要求1中所述的鉴定小茶尺蠖的引物,以及权利要求2中所述的特异性识别序列。

4.权利要求1所述的鉴定小茶尺蠖的引物在鉴定小茶尺蠖中的应用。

5.权利要求3所述的鉴定小茶尺蠖的试剂盒在鉴定小茶尺蠖中的应用。

6.一种鉴定小茶尺蠖的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)待测样品进行DNA提取;

(2)使用权利要求1所述的引物对Xch1、引物对Xch2、引物对Xch3,以提取的DNA为模板,进行PCR扩增;

(3)PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳检测是否存在预期大小条带,再对照权利要求2所述的小茶尺蠖的特异性识别序列,鉴定出待测样品的品种。

7.根据权利要求6所述的鉴定小茶尺蠖的方法,其特征在于,所述步骤(2)中PCR扩增的体系为50μL,其中包括2×Premix Ex Taq(Takara)25μL,DNA模板1μL,10μM浓度的上下游引物各2μL,余量为灭菌蒸馏水。

8.根据权利要求6所述的鉴定小茶尺蠖的方法,其特征在于,所述步骤(2)中PCR扩增的程序为:95℃预变性3min;95℃变性20s,58℃退火30s,72℃延伸1min30s,32个循环;72℃延伸8min,4℃保存。

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