1.一种快速检测大肠杆菌的方法,其特征在于,该方法是采用比率荧光法检测大肠杆菌。
2.根据权利要求1所述的快速检测大肠杆菌的方法,其特征在于,该方法是利用320nm激发时,本底4-甲基伞形酮-β-d-葡萄糖醛酸苷(mug)的吸收峰在380nm,产物4-甲基伞形酮(4-mu)的吸收峰在450nm,根据两处发射峰峰值的比率与大肠杆菌浓度进行线性拟合,绘制标准曲线;对待测样品测量荧光强度,320nm激发,分别读取380nm处和450nm处的发射峰峰值,将两处的发射峰峰值的比率代入标准曲线,计算得出待测样品中大肠杆菌的浓度。
3.根据权利要求1所述的快速检测大肠杆菌的方法,其特征在于,其一种具体实施方式为:
步骤1、配制含mug成分的培养液;
步骤2、纯培养大肠杆菌,并将纯培养的大肠杆菌离心清洗后,稀释制备一系列浓度梯度作为样品制作标准曲线;
步骤3、将步骤2的菌液样品用标准平板计数法(cfu)定量,得到纯培养大肠杆菌的真实浓度;
步骤4、接种步骤2的稀释为系列浓度的各菌液于步骤1配制的含mug成分的培养液中,由步骤3的cfu定量结果计算各菌液中含有大肠杆菌数量;
步骤5、接种实际待测样品于步骤1配制的含mug成分的培养液中;
步骤6、将步骤4和步骤5的培养基分别进行温育后,调节ph值至酸性,测量荧光强度,320nm激发,分别读取380nm处和450nm处的发射峰峰值;
步骤7、根据步骤4计算的大肠杆菌浓度、及步骤6测得的步骤4的培养基在380nm处和450nm处的发射峰峰值的比率,绘制标准曲线;
步骤8、将步骤6测得的步骤5的培养基在380nm处和450nm处的发射峰峰值的比率代入标准曲线,计算得出待测样品中大肠杆菌的浓度。
4.根据权利要求3所述的快速检测大肠杆菌的方法,其特征在于,步骤6中使用hcl或h2so4调节ph值至酸性。