一种脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物及其合成与应用的制作方法

文档序号:22476242发布日期:2020-10-09 22:16阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物,其特征在于,所述叶酸衍生物(fa-2-dg)由脱氧葡萄糖和叶酸经由氨基乙醇连接形成,其中叶酸的羧基和氨基乙醇的氨基相连,形成酰胺键,氨基乙醇的羟基和脱氧葡萄糖的羟基相连,形成糖苷键。

2.一种如权利要求1所述脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物的合成方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

1)制备(4r,5s,6r)-6-(乙酰氧甲基)-四氢-2,4,5-三乙酰氧基-吡喃

将2-脱氧葡萄糖(2-dg)溶解于无水吡啶中形成溶液,冰浴搅拌条件下将乙酸酐滴加入溶液中,滴加完毕后撤掉冰浴,室温下搅拌24小时,然后旋蒸除掉溶剂,加入乙酸乙酯溶解剩余固体,然后用柠檬酸水溶液,碳酸氢钠水溶液,饱和氯化钠水溶液各萃洗三次,之后乙酸乙酯用无水硫酸钠干燥过夜,过滤之后减压除去乙酸乙酯,用柱层析法纯化,得到的产物乙酰基保护羟基的脱氧葡萄糖,即(4r,5s,6r)-6-(乙酰氧甲基)-四氢-2,4,5-三乙酰氧基-吡喃,简称化合物2;

2)制备(2r,3s,4r)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-溴乙基氧基)四氢-3,4-二乙酰氧基-吡喃

将化合物2溶解于二氯甲烷中,加入2-溴乙醇,冰浴下再滴加入三氟化硼乙醚,滴加完毕后撤除冰浴,室温下反应,然后加入冷却过的饱和碳酸氢钠水溶液终止反应,分离出二氯甲烷层,并用二氯甲烷萃取水相两次,合并二氯甲烷,用饱和氯化钠水溶液萃洗三次之后用无水硫酸钠干燥过夜;过滤之后减压除去二氯甲烷,剩余油状物用硅胶柱层析纯化,洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯,从10∶1洗脱至5∶1,得到黄色油状物,即(2r,3s,4r)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-溴乙基氧基)四氢-3,4-二乙酰氧基-吡,简称化合物3;

3)制备(2r,3s,4r)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-叠氮乙氧基)四氢-3,4-二乙酰氧基-吡喃

将化合物3和叠氮化钠溶解于二甲基甲酰胺中,加热条件下搅拌,反应后加入冰水终止反应,然后用乙酸乙酯萃取两次,合并有机相,用饱和氯化钠水溶液萃洗三次之后用无水硫酸钠干燥过夜;过滤之后减压除去乙酸乙酯,得到,为黄色油状物,即(2r,3s,4r)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-叠氮乙氧基)四氢-3,4-二乙酰氧基-吡喃,简称化合物4;

4)制备(2r,3s,4r)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-氨基乙氧基)四氢-3,4-二乙酰氧基-吡喃

林德拉催化剂和对甲基苯磺酸先后加入到溶解有化合物4的乙醇溶液中,然后在氢气氛围下,室温反应,之后过滤,减压除去乙醇之后得到无色泡状固体,即(2r,3s,4r)-2-(乙酰氧甲基)-6-(2-氨基乙氧基)四氢-3,4-二乙酰氧基-吡喃,简称化合物5;

5)制备n2-{4-[(2-氨基-4-羟基蝶啶-6-甲基)氨基]苯甲酰基}-n5-{2-[(2s,4r,5s,6r)-4,5-二乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)四氢吡喃]-氧乙基}-l-谷氨酰胺

叶酸溶解于无水二甲基亚砜中,然后加入dcc,再加入化合物5,最后加入吡啶,避光室温反应,然后减压尽可能除去多余的吡啶,残留物用甲基叔丁基醚磨洗之后得到化合物6,经柱层析纯化后得到橙色固体,即n2-{4-[(2-氨基-4-羟基蝶啶-6-甲基)氨基]苯甲酰基}-n5-{2-[(2s,4r,5s,6r)-4,5-二乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)四氢吡喃]-氧乙基}-l-谷氨酰胺,简称化合物6;

6)制备n2-{4-[(2-氨基-4-羟基蝶啶-6-甲基)氨基]苯甲酰基}-n5-{2-[(2s,4r,5s,6r)-4,5-二羟基-6-(羟甲基)四氢吡喃]-氧乙基}-l-谷氨酰胺

将化合物6溶解于甲醇中,然后在冰浴下滴加入甲醇钠,滴加完毕后撤掉冰浴,室温下反应,然后用酸性树脂调节ph值至6,然后过滤除去树脂,滤液减压除去之后得到粗品,粗品用制备级hplc纯化,得到如权利要求1所述的叶酸衍生物(fa-2-dg)。

3.一种如权利要求1所述脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物的应用,其特征在于,所述叶酸衍生物可应用于制备抗肿瘤药物。

4.根据权利要求3所述的脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物的应用,其特征在于,所述肿瘤为叶酸受体高表达肿瘤。

5.根据权利要求4所述的脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物的应用,其特征在于,所述肿瘤包括乳腺癌、卵巢癌和宫颈癌。

6.一种具有靶向抗肿瘤功能的纳米颗粒,其特征在于,所述纳米颗粒由如权利要求1所述的叶酸衍生物,通过化学键、配位键或氢键与肿瘤药物相互作用而形成。

7.根据权利要求6所述的纳米颗粒,其特征在于,所述纳米颗粒由权利要求1所述的叶酸衍生物与抗肿瘤药物顺铂,通过配位键连接,形成含顺铂的靶向抗肿瘤纳米颗粒。


技术总结
本发明公开了一种脱氧葡萄糖修饰的叶酸衍生物及其合成与应用,所述衍生物是将叶酸和脱氧葡萄糖通过化学键的方式结合在一起,形成的一种新型化合物——FA‑2‑DG。所述衍生物中,叶酸和脱氧葡萄糖之间以氨基乙醇做为连接臂,叶酸的羧基和氨基乙醇的氨基相连,形成酰胺键;氨基乙醇的羟基和脱氧葡萄糖的羟基相连,生成糖苷键。这样的连接方式既不破坏叶酸和脱氧葡萄糖本身的结构和功能,不影响叶酸受体对叶酸的识别,同时引入的两个碳原子的连接臂也能增大叶酸和脱氧葡萄糖两个分子之间的距离,更适宜糖苷酶的水解,释放出具有抗肿瘤活性的脱氧葡萄糖。所述衍生物FA‑2‑DG基于其结构的特征,可以作为药质体用来载药。

技术研发人员:金绍明;葛绍阳;刘治麟;王鹏杰;杜仲尧
受保护的技术使用者:北京和益源生物技术有限公司
技术研发日:2020.03.12
技术公布日:2020.10.09
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