一种青贮接种剂及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种青贮接种剂及其应用，属于青贮饲料加工领域。
【背景技术】
[0002] 近年来，随着我国畜牧业的发展，带动了草地禾本科牧草产业的迅速发展。优质 禾本科牧草越来越受到人们的青睐。但是随着家畜头数的不断增加，天然生长的这些牧草 已不能满足家畜全年的营养需要，因此生产者通过人工种植优质高产的牧草来解决这一矛 盾。柳枝稷等禾本科牧草，生产力高，具有优良牧草特性和水土保持能力，且抗逆性极强，可 在干旱和半干旱地区、低洼易涝和盐碱地区、土壤贫瘠的山区和半山区种植，作为引种牧草 的研宄逐步受到关注。
[0003] 目前，国内对柳枝稷的研宄集中在栽培和管理方面，在贮存方面鲜有报道。从世界 范围来看，牧草的保藏主要以晒制干草和制作青贮为主。干草调制主要以自然干燥为主，但 在牧草收获季节通常面临雨季，由于雨淋等原因造成的干物质的损失可达20% -30%。就 目前来来，青贮技术是牧草保藏的理想措施。因为青贮保藏期间生成乙醇、乙酸、乳酸等高 能物质，使总能的损失降低，同时也可以减少营养成分的损失，保持青绿饲料的营养成分。 青贮饲料还具有适口性好，消化率高，调制方便，保藏投入低等优点。微生物添加剂作为青 贮接种剂，具有生态安全，应用方便、价格低廉等优点。目前，市场上已有很多此种微生物产 品，但大多是纯化的单一菌剂和简单混合菌剂，且以简单混合菌剂居多。纯化的单一菌剂是 根据所需的功能要求从自然界中分离，纯化后，在严格无菌条件下经过纯培养发酵，吸附于 特定载体的菌剂，菌株多为植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum)，但存在产酸能力低， 在青贮饲料中难以成为控制发酵的优势菌，接种效果并不理想。
[0004] CN101449752A公开一种含有同型发酵乳酸菌和异型发酵乳酸菌的玉米青贮用 接种剂及其使用方法。该玉米青贮用复合微生物接种剂包括布氏乳杆菌2X109CFU/G? 5X101(ICFU/G、植物乳杆菌5X109CFU/G?1X10nCFU/G。采用该接种剂作为产酸源，可一定 程度上提高玉米青贮饲料保存效果，但添加该接种剂发酵柳枝稷30天，青贮料pH仅能降至 4. 6,效果不佳。
[0005] CN1409986A公开了一种青专用乳酸菌接种剂及其制造方法。所述接种剂含 有：植物乳杆菌原粉：50-500亿CFU/克，戊糖片球菌原粉：500-5000亿CFU/克，纤维素 酶：1000-1500U/克，半纤维素酶：2000-3000U/克，碳水化合物：无水葡萄糖1-2克，硫酸 锰：0. 2克-0. 5克，硅藻土 ：0. 05-0. 15克。该产品在110天内保存在-20 °C下的存活率 100%;大规模牛群饲喂试验证明，使用该产品年增产奶量283kg/头。该接种剂的效果比 CN101449752A好，但同型发酵乳酸菌产大量乳酸，青贮料有氧稳定性差。在柳枝稷青贮中添 加该接种剂，发酵30天后，青贮料pH降至4. 2,但使用纤维素酶，成本较高。
【发明内容】
[0006] 本发明第一目的是提供一种青贮接种剂，将其用于柳枝稷青贮发酵，可快速产生 乳酸，迅速降低pH值，改善青贮饲料的发酵品质，且成本低廉。
[0007] 为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
[0008] -种青贮接种剂，由植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳球菌分别发酵，所得发酵液混 合而得；其中混合发酵液中植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸乳球菌的菌落形成单位数目比 为 90-96 :3. 5-6 :0? 5-4,且菌落形成单位总数目为 0? 8X1012-1. 2X1012CFU/ml。
[0009] 本发明所述的接种剂中，所述植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum)，保藏编号 为JCM1149T;
[0010] 所述枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis)，保藏编号为CGMCCNo. 6733 ;
[0011] 所述乳酸乳球菌（Lactococcuslactis)，保藏编号为ATCC11007。
[0012] 本发明所述青贮接种剂中各菌株具有高度的协同作用，自体形成稳定的生态系 统，能在未经灭菌的天然原料中快速繁殖、定殖而占据优势，迅速产生大量乳酸，降低青贮 饲料的pH值，保持青绿饲料的营养价值。
[0013] 作为本发明优选的实施方式，所述混合发酵液中植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸 乳球菌的菌落形成单位数目比为94 :4. 5 :1. 5,菌落形成单位总数目为1X1012CFU/ml。通 过三种特定菌株以特定比例复配，所得接种剂活性最强，青贮效果最佳。
[0014] 本发明第二目的是提供上述青贮接种剂的制备方法，是将植物乳杆菌、枯草芽孢 杆菌、乳酸乳球菌分别接种于MRS-S培养基中，30-32°C静置培养70-75h，所得发酵液按比 例混合，其中混合发酵液中植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸乳球菌的菌落形成单位数目比 为90-96 :3. 5-6 :0. 5-4,且菌落形成单位总数目为0. 8X1012-1. 2X1012CFU/ml，即得青贮接 种剂。
[0015] 其中，所述MRS-S培养基的配方如下：蔗糖20g/L，蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，酵 母浸粉 5g/L，乙酸钠 5g/L，柠檬酸铵 2g/L，K2HP042g/L，MgS04 ? 7H20 0? 58g/L，MnS04 ? 4H20 〇? 25g/L，吐温 801mL/L。
[0016] 本发明所述青贮接种剂可进一步制成本领域常用剂型作为添加剂应用在禾本科 牧草青贮中，优选用于柳枝稷的青贮中。其中，所述青贮接种剂的添加量为以每千克柳枝稷 中菌落形成单位总数目为〇. 8X10n-l. 2X10nCFU/kg为宜。
[0017] 所述剂型优选液体青贮添加剂或固体青贮添加剂。
[0018] 所述液体青贮添加剂是由青贮接种剂1X103ml，甘油l_5g，EDTAl_2g混合而得。 所得液体青贮添加剂可使活菌数量和活性长期保持稳定，对动物安全。
[0019] 所述固体青贮添加剂是先将青贮接种剂lX103ml，甘油l-5g，EDTAl-2g混合，在 按照lml:500g比例向混合液中加入秸杆粉，在25-30°C条件下厌氧发酵10d而得。其中， 秸杆粉可替换为麦饭石。载体与青贮接种剂具有高度的亲和力，对动物安全，保质期长，运 输和使用方便，将固体剂型干燥、冷冻处理都不会降低活菌数量和活性。
[0020] 本发明所述菌剂中的各种乳酸细菌具有高度的协同作用，自体形成稳定的生态系 统，能在未经灭菌的天然原料中快速繁殖、定殖而占据优势，迅速产生大量乳酸，降低发酵 料的pH值，改善饲料的发酵品质，提高饲料的营养价值和适口性，对饲喂的动物安全，且应 用简易，成本低廉。
【附图说明】
[0021] 图1为本发明青贮接种剂在青贮过程中pH值变化图。
【具体实施方式】
[0022] 以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
[0023] 本发明中所述植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum)JCM1149T购自日本微生 物保存中心，枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis)CGMCCNo. 673购自中国普通微生物菌种 保藏管理中心，乳酸乳球菌（Lactococcuslactis)ATCC11007购自美国模式培养物保藏所。
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