一种膜敷料类产品在潮湿条件下的阻菌性检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及医疗领域，特别是一种膜敷料类产品在潮湿条件下的阻菌性检测方法。
【背景技术】
[0002]目前，医院在胸外科、脑科、眼科、妇科、普外科、骨科及其他外科，以及眼部手术、整形手术、矫形手术及放射疗法等各种类型手术及穿刺均少不了使用膜敷料类产品，然而对膜敷料类产品的阻菌性检测却没有完整的检测设备和检测方法，现有检测方法麻烦，费时费力，开放式、操作复杂、中间环节多容易污染、各种零件不容易配齐、不容易密封。因此，膜敷料类产品阻菌性检测方法的改进和创新是目前亟需解决的问题。
【发明内容】
[0003]针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种膜敷料类产品在潮湿条件下的阻菌性检测方法，可有效解决现有技术检测麻烦、费时费力、开放式、操作复杂、中间环节多容易污染、密封效果差的问题。
[0004]本发明解决的技术方案是，先配制好胰蛋白胨大豆肉汤培养基、粘质沙雷菌的菌悬液，将营养琼脂培养基涂在储液瓶一侧壁备用，然后将医用膜敷料类产品、阻菌性检测装置、装有培养基的瓶子、装有菌悬液的瓶子一同放入万级净化局部百级的超净工作台上；在无菌操作条件下，将膜敷料固定在内瓶的底部密封圈上，再经卡环固定，盖上盖体，利用蠕动泵使菌悬液进入外瓶中，胰蛋白胨大豆肉汤培养基进入内瓶中，外瓶中的菌液高于内瓶中的培养基4cm，用止液卡卡在进液管路，剪掉前端进料针，之后塞在排气阀上，正立放置24h后，将装置翻转，拿掉出液管上的止液卡，内瓶里的培养基流至储液瓶里，盖上瓶塞，将瓶子放入20°C?25°C下培养24h即可。
[0005]本发明方法经反复试验，准确率高，无误差，远高于现有检测方法，本发明装置一次性使用、密封性好、减少中间环节，大大提高了检测结果的准确度，适用于实验室、医疗用品制造商、医院等的膜敷料产品阻菌性检测，是膜敷料类产品阻菌性检测装置和方法上的创新。
【附图说明】
[0006]图1为本发明阻菌性检测装置的结构剖面主视图。
[0007]图2为本发明阻菌性检测装置的结构剖面侧视图。
[0008]图3为本发明阻菌性检测装置的止液卡结构主视图。
【具体实施方式】
[0009]以下结合附图和实施例对本发明的【具体实施方式】作进一步详细说明。
[0010]由图1-3给出，本发明首先安装膜敷料类产品潮湿条件下的阻菌性检测装置，在密封状态下，按以下步骤进行:
1)将45-55mL胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB)装入带硅胶塞的瓶子里，121°C灭菌15分钟，备用；所述的胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB)是由重量百分比计的:胰蛋白胨1.5%(g/100ml)、大豆蛋白胨0.5% (g/100ml)、氯化钠0.5% (g/100ml)和余量为蒸馏水制成，用质量浓度1%的氢氧化钠溶液或氯化氢溶液调节pH为7.2 ± 0.2 ;
2)配制营养琼脂培养基(NutrientAgar Medium),用于药品中细菌总数计数,该培养基是由以下重量计的原料制成:蛋白胨10.(k、牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g和琼脂15.0g，用质量浓度1%的氢氧化钠溶液或氯化氢溶液调节PH值至7.3±0.1 ;然后，取营养琼脂培养基3.3克，加热搅拌溶解于10ml蒸馏水中，121°C灭菌15分钟，均匀涂在储液瓶3的一侧内壁上；
3)用20°C?25°C的营养肉汤培养粘质沙雷菌24h，获得菌含量108-109cfu/mL的粘质沙雷菌的菌悬液，取250-270mL粘质沙雷菌的菌悬液装入无菌带胶塞的瓶子里；
4)将医用膜敷料类产品、阻菌性检测装置、装有培养基的瓶子、装有菌悬液的瓶子一同放入万级净化局部百级的超净工作台上；所述的医用膜敷料类产品为一次性使用薄膜手术巾或手术膜；
5)在超净工作台上，以无菌操作的方式将阻菌性检测装置拆开包装，取出装置中的内瓶2，将裁剪好的医用膜敷料类产品贴在内瓶2底部的密封圈11上，用卡环12将其固定，保证膜被卡紧不漏液，将内瓶2上连为一体的盖体旋装在外瓶I上，拧紧防止漏液，将一侧内壁涂有营养琼脂培养基的储液瓶3旋装在连接盖8上，拧紧防止漏液，用止液卡将出液管5卡紧，构成密封系统；
6)在第一进液管7、第二进液管6上装上蠕动泵，利用蠕动泵，在蠕动下，使胰蛋白胨大豆肉汤培养基经第二进液管6进入内瓶中，然后用止液卡将内瓶的进样管卡紧，剪掉止液卡以上的管子，将余下管子的管口插进内瓶第二排气管1a的第二排气阀1b上，再利用蠕动泵，在蠕动下，使粘质沙雷菌的菌悬液经第一进液管7进入外瓶中，然后用止液卡将外瓶的进样管卡紧，剪掉止液卡以上的管子，将余下管子的管口插进外瓶第一排气管9a的第一排气阀9b上，静置24h ；
7)将内瓶上的管子从内瓶的第二排气阀1b上拔下，将出液管5上的止液卡取下，再将整套阻菌性检测装置倒置，出液管5上装上蠕动泵，使内瓶中的胰蛋白胨大豆肉汤培养基在蠕动下，进入涂有营养琼脂培养基的储液瓶3中，取下储液瓶3，用无菌瓶塞塞好，平置，使储液瓶内的胰蛋白胨大豆肉汤培养基与营养琼脂培养基充分接触，接触后将储液瓶直立，20?25°C下培养24h后观察结果:a.液体培养基变浑浊，固体培养基上有红色菌落，表明膜的阻菌性检测不合格；b.液体培养基变浑浊，固体培养基上没有红色菌落，将浑浊的培养基转接种至营养琼脂平板，当有红色典型性菌落，表明检测结果不合格，当没有红色典型性菌落生长，表明检测结果合格；c.液体培养基澄清透明，表明检测结果合格。
[0011]所述的膜敷料类产品在潮湿条件下的阻菌性检测装置包括外瓶、内瓶和储液瓶，内瓶2上口部设有连为一体的盖体4，盖体4上部有下端连通内瓶2内部的向上的垂直出液管5，出液管5上端的连接盖8与储液瓶3相连通，连接盖8与储液瓶3的瓶嘴密封旋装在一起，连接盖8上设有与出液管和储液瓶相连通为一体的第三排气管16a,外瓶I为向上开口结构，盖体4密封装在外瓶I上口部，盖体4上分别有连通外瓶1、内瓶2的第一进液管7、第二进液管6，外瓶I部位的盖体上边部装有垂直向上的第一排气管9a，内瓶2部位的盖体上装有伸入内瓶2的垂直向上的第二排气管10a，内瓶2为向下开口结构，下口与外瓶相连通，内瓶下口外部周边上经密封圈11装有卡环12，第一进液管7、第二进液管6上均连接有进料针13。
[0012]为了保证使用效果，所述的第一进液管7、第二进液管6、出液管5、第一排气管9a和第二排气管1a上均装有止液卡15,止液卡15是由弹性对称的第—^片15a、第二卡片15b构成的一体结构,第—^片15a、第二卡片15b相对侧之间有卡槽15c。
[0013]所述的外瓶I底部有连为一体的小于外瓶半径的底座18。
[0014]所述的连接盖8经内螺纹与储液瓶3的瓶嘴外螺纹旋装在一起。
[0015]所述的储液瓶3的瓶嘴上有相配应的瓶塞。
[0016]所述的外瓶I为向上开口的带有外螺纹的圆形，盖体4上有内螺纹，盖体经内螺纹和外瓶I的外螺纹旋装在一起，所述的内瓶2为高度、半径均小于外瓶I的圆形。
[0017]所述的储液瓶3为方形，一侧内壁上涂有营养琼脂培养基层17。
[0018]所述的第一排气管9a、第二排气管10a、第三排气管16a、进料针13上分别装有第一排气阀％、第二排气阀10b、第三排气阀16b、进料针排气阀14，第一排气阀％、第二排气阀10b、第三排气阀16b和进料针排气阀14内均装有孔径为0.45微米的过滤膜。
[0019]实施例1
1)将50mL胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB)装入带硅胶塞的瓶子里，在121°C下，用压力蒸汽灭菌器灭菌15分钟，备用；所述的胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB)是由重量百分比计的:胰蛋白胨1.5% (g/100ml)、大豆蛋白胨0.5% (g/100ml)、氯化钠0.5% (g/100ml)用蒸馏水配制而成，用质量浓度1%的氢氧化钠溶液调节PH为7.2±0.2 ；
2)配制营养琼脂培养基(NutrientAgar Medium),用于药品中细菌总数计数,该培养基是由以下重量计的原料制成:蛋白胨10.(k、牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g和琼脂15.0g，用质量浓度1%的氯化氢溶液调节PH值至7.3±0.1 ;称取营养琼脂培养基3.3克，加热搅拌溶解于10ml蒸馏水中，在121°C下，用压力蒸汽灭菌器灭菌15分钟，均匀涂在储液瓶3的一侧内壁上，备用；
3)用20°C?25°C的营养肉汤培养粘质沙雷菌ATCC8100 24h，获得菌含量18-1O9Cfu/mL的粘质沙雷菌的菌悬液，取260mL粘质沙雷菌ATCC 8100的菌悬液装入无菌带胶塞的瓶子里；
4)将一次性使用薄膜手术巾、阻菌性检测装置、装有培养基的瓶子、装有菌悬液的瓶子一同放入万级净化局部百级的超净工作台上，备用；
5)在超净工作台上，以无菌操作的方式将阻菌性检测装置拆开包装，取出装置中的内瓶2，将裁剪好的一次性使用薄膜手术巾贴在内瓶2底部的密封圈11上，用卡环12将其固定，保证膜被卡紧不漏液，将内瓶2上连为一体的盖体旋装在外瓶I上，拧紧防止漏液，将一侧内壁涂有营养琼脂培养基的储液瓶3旋装在连接盖8上，拧紧防止漏液，用止液卡将出液管5卡紧；
6)在第一进液管7、第二进液管6上装上蠕动泵，利用蠕动泵，在蠕动下，使胰蛋白胨大豆肉汤培养基经第二进液管6进入内瓶中，然后用止液卡将内瓶的进样管卡紧，剪掉止液卡以上的管子，将余下管子的管口插进内瓶第二排气管1a的第二排气阀1b上，再利用蠕动泵，在蠕动下，使粘质沙雷菌的菌悬液经第一进液管7进入外瓶中，然后用止液卡将外瓶的进样管卡紧，剪掉止液卡以上的管子，将余下管子的管口插进外瓶第一排气管9a的第一排气阀9b上,夕卜瓶菌悬液液面高于内瓶胰蛋白胨大豆肉汤培养基液面4cm,静置24h ；
7)将内瓶上的管子从内瓶的第二排气阀1b上拔下，将出液管5上的止液卡取下，再将整套阻菌性检测装置倒置，出液管5上装上蠕动泵，使内瓶中的胰蛋白胨大豆肉汤培养基在蠕动下，进入涂有营养琼脂培养基的储液瓶3中，取下储