一种用嗜热细菌处理含油脂废水生产耐高温脂肪酶的培养基的制作方法
【技术领域】
[0001] 在生活或者工业生产中会产生大量高温、含油脂的废水，本发明的培养基，适合于 处理含油脂废水的嗜热细菌的生长，且可促进耐高温脂肪酶生产。
【背景技术】
[0002] 生活、工业生产中会产生大量的高温、含油脂废水。微生物技术治理含油脂废水， 是利用微生物的分解作用来减少水中油的浓度，消除或降低其危害程度。传统的工艺中，当 含油脂污水温度较高时，需要等待冷却才能使用常温嗜油菌处理，这就造成了效率的低下 与时间的浪费，而使用人工降温散热时，产生能源浪费。嗜热微生物俗称高温菌或嗜热菌， 通常是最低生长温度45右，最适生长温度在50~60°C最高生长温度在70°C以上的一类微 生物的总称，采用嗜热微生物直接处理含油废水并生产工业用霉，可以缩短处理时间，提高 处理效益。而筛选合适的培养基是该处理技术的重要环节。
[0003] 传统的处理培养基为无机盐或HB培养基，在这些培养基中细菌处理效率和产酶 效率较低，这对该技术的实际应用造成了一定的阻碍。因此，优化培养基是首要任务。
[0004] 本发明结合传统培养基中的成分，同时加入生长因子和微量元素促进细胞生长速 度和代谢活性，可以大幅度提高油脂处理效率和产酶效率。
[0005] 处理含油脂废水的嗜热细菌来源于环境中的含油脂土壤，最适生长温度在55°C。 在应用方面，处理含油脂废水的嗜热细菌能够产生耐高温的脂肪酶。该种脂肪酶的活性和 热稳定性有待进一步探索。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供用于处理含油脂废水的嗜热细菌生产耐高温脂肪酶的培 养基，其制备方法及应用。
[0007] 本发明的第一方面，提供一种处理含油脂废水的嗜热细菌的培养基，所述培养基 包括以下组分：
【主权项】
1.两种适合于处理含油脂废水的嗜热细菌生长的培养基，其特征在于，所述包括以下 组分： 无机盐培养基 磷酸氢二钾 2g/L; 磷酸二氢钾 〇.5g/L; 氯化钠 〇.5g/L; 氯化铵 〇.5g/L; 硫酸镁 〇.2g/L; 氯化钙 10mg/L和 维生素母液 ImLZL 生长因子胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素 硫酸钙 0.2g/L; 七水合硫酸亚铁 〇.2g/L; 硫酸猛 0,02g/L; 钼酸钠 0.0 lg/L· 硫酸铜 0.02g/L; 七水硫酸钴 O.Olg/L和 硼酸 0.005g/L。 在无机盐培养基中加入1 %生长因子和1 %微量元素，组成培养基A。 在另一优选案例中，所述培养基包括以下组分： HB培养基 硫酸镁 0.2g/L; 氯化钙 0.02g/L; 磷酸二氢钾 l.〇g/L; 磷酸氢二钾 1.0g/L; 磷酸氢二钠 1.0431g/'L; 氯化铵 0.6688g/L; 硝酸钠 1.0625g/L和 氯化铁： 0.05g/L。 生长因子胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素 硫酸0.2g/L； 七水合硫酸亚铁 〇.2g/L; 硫酸锰 0.02g/L; 钼酸钠 O.Olg/L; 硫酸铜 0.02g/L; 七水硫酸钴 0.01g/L和 硼酸 0.005g/L。 在HB培养基中加入1 %生长因子和1 %微量兀素，组成培养基B。
2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述培养基组分如下所示： 无机盐培养基 磷酸氢二钾 2g/L; 磷酸二氢钾 0.5g/L; 氯化钠 0.5g/L; 氯化铵 〇.5g/L; 硫酸镁 0.2g/L; 氯化钙 10mg/Lfll 维生素母液 lmL/L 生长因子胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素 硫酸齊 〇.2g/L； 七水合硫酸亚铁 〇.2g/L; 硫酸锰 0.02g/L; 钼酸钠 O.Olg/L; 硫酸铜 0.02g/L; 七水硫酸钴 0.01 g/L和 硼酸 0.005g/L。 在无机盐培养基中加入1 %生长因子和1 %微量元素，组成培养基A。 在另一优选案例中，所述培养基包括以下组分： HB培养基 硫酸镁 0.2g/L; 氯化钙 0.02g/L; 磷酸二氢钾 l.Og/L; 磷酸氢二钾 l.Og/L: 磷酸氢二钠 丨.043lg/L: 氯化铵 0.6688g/L; 硝酸钠 1.0625g/L和 氯化铁： 0.05g/L。 生长因子胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素 硫酸興 0.2g/L； 七水合硫酸亚铁 0.2g/L; 硫酸锰 0.02g/L; 钼酸钠 0.01g/L; 硫酸铜 0.02g/L; 七水硫酸钴 0.0 IgZL和 硼酸 0.005g/U 在HB培养基中加入1 %生长因子和1 %微量兀素，组成培养基B。
3. 如权利要求1-2所述的培养基，其特征在于，所述培养基中，还含有有效量的生长因 素和微量元素：较佳的， 生长因子含量为：胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素含量为：硫酸钙 〇.2g/L; 七水合硫酸亚铁 〇.2g/L; 硫酸锰 0.02gZL; 钼酸钠 0.01 g/L; 硫酸铜 0.02g/L; 七水硫酸钴 0.01 g/L和 硼酸 0.005g/L。
4. 如权利要求1-3任一所述培养基，其特征在于，所述培养基中，各组分配置于水中； 和/或所述培养基的pH值7. 0±0. 5。
5. 权利要求1-3任一所述培养基的用途，用于培养处理含油脂废水的嗜热细菌，生产 耐高温的脂肪酶。
6. -种制备权利要求1-3任一所述的处理含油脂废水的嗜热细菌的培养基的方法，其 特征在于，所述方法包括： a) 将所述胰蛋白胨、酵母提取物、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、氯化钠、氯化铵、硫酸镁、氯 化钙、维生素母液、硫酸钙、七水合硫酸亚铁、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜、七水硫酸钴和硼酸用 去离子水溶解混合。 b) 将所述胰蛋白胨、酵母提取物、硫酸镁、氯化钙、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、硝酸铵、氯 化铵、硝酸钠、氯化铁、硫酸钙、七水合硫酸亚铁、硫酸锰、钼酸钠、硫酸铜、七水硫酸钴和硼 酸用去离子水溶解混合。
7. -种利用处理含油脂废水的嗜热细菌，生产耐高温的脂肪酶的方法，其特征在于，所 述方法包括：利用权利要求1-3任一所述的培养基培养处理含油脂废水的嗜热细菌，从而 生产耐高温的脂肪酶。
8. 如权利要求6所述的方法，其特征在于，将处理含油脂废水的嗜热细菌按体积比3% 的接种量接种入权利要求1-3任一所述的培养基，55°C，置于摇床中160rpm/min，发酵培养 24h后，离心分离发酵上清液，其中含有脂肪酶。
【专利摘要】本实验涉及一种用于处理含油脂废水的嗜热细菌生产耐高温脂肪酶的培养基。在生活或者工业生产中会产生大量的含油脂的废水，本发明的培养基，适合于处理含油脂废水的嗜热细菌的生长并生产耐高温的脂肪酶。
【IPC分类】C12N9-20, C12N1-20
【公开号】CN104745508
【申请号】CN201510126483
【发明人】李琳, 肖雅, 周远群, 张强, 闫筱, 罗明志, 董进, 周欢, 邱国华, 邓林红
【申请人】常州大学
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2015年3月20日