一种与浆液性卵巢癌发生发展机制相关的microRNA分子及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于肿瘤发生机制研宄技术领域，具体涉及一种与浆液性卵巢癌发生发展 机制相关的microRNA分子及其应用。
【背景技术】
[0002] 卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤，其致死率却占各类妇科肿瘤的首位，对妇女生命 健康造成严重威胁，其中以浆液性卵巢癌最为常见，占全部卵巢上皮性癌的60-70%。卵巢 癌发病机制复杂，至今未明。肿瘤的恶性程度取决于肿瘤细胞的增殖、迀移和侵袭能力等。 寻找卵巢癌细胞早期转移的标志物对于卵巢癌的分子分型、靶向治疗和预后预警等至关重 要。
[0003] 近年来microRNA在肿瘤的发生发展机制中的研宄越来越深入。通过microRNA芯 片技术筛选出在浆液性卵巢癌中差异表达的microRNA分子，并用实时荧光定量PCR技术进 行验证，再通过细胞功能实验研宄，有可能选出与浆液性卵巢癌发生发展机制相关的分子。
[0004] 卵巢癌发生机制复杂，至今未明，且缺乏早期诊断手段，致死率居妇科恶性肿瘤首 位，因此明确新的microRNA在卵巢癌发生发展机制中的作用，能够为阐明卵巢癌的发生发 展机制提供新的线索，为临床诊断、临床治疗提供新的生物革E标选择。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种与浆液性卵巢癌发生发展机制相关的microRNA分子 及其应用。
[0006] 本发明是通过以下技术方案来实现：
[0007] -种与衆液性卵巢癌发生发展机制相关的microRNA分子，该microRNA分子为 miR-126-5p，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO. 1所示。
[0008] miR-126-5p作为目标靶点在制备抗浆液性卵巢癌的药物和/或诊断试剂中的应 用。
[0009] miR-126-5p作为卵巢癌发生发展的标志物的应用。
[0010] 增高miR-126-5p在浆液性卵巢癌中表达的载体、分子或组合物抑制卵巢癌细胞 增殖的药物中的应用。
[0011] 增高MiR-126-5p在浆液性卵巢癌中表达的载体、分子或组合物在抑制卵巢癌细 胞迀移的药物中的应用。
[0012] 增高MiR-126_5p在浆液性卵巢癌中表达的载体、分子或组合物在抑制卵巢癌细 胞侵袭的药物中的应用。
[0013] 与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：
[0014] 本发明提供的所涉及的miR-126-5p是一种microRNA分子，其核苷酸序列如SEQ. ID.NO. 1所示。miR-126-5p具有在浆液性卵巢癌中低表达的特性，是一种新的卵巢癌发生 发展的标志物。
[0015] 本发明提供的miR-126-5p在浆液性卵巢癌组织中表达显著降低：且与浆液性卵 巢癌细胞密切相关，过表达miR-126-5p后的浆液性卵巢癌细胞的增殖、迀移、侵袭能力明 显抑制。
[0016] 本发明提供的miR-126-5p为设计卵巢癌分子靶向治疗药物提供了新的靶点，用 以设计和开发靶向治疗卵巢癌的新药，也为卵巢癌的早期临床诊断提供了潜在的新的生物 标志物。
【附图说明】
[0017] 图1为实时定量PCR检测MiR-126_5p在浆液性卵巢癌中的表达水平；
[0018] 图2为miR-126_5pmimics(化学合成的microRNA模拟体）转染卵巢癌细胞系， 荧光标记转染效率结果图；其中，（a)为转染后荧光标记细胞图片，（b)为转染前细胞图片；
[0019] 图3为划痕实验检测过表达miR-126-5p对卵巢癌细胞迀移能力的影响；
[0020] 其中，（a)为miR-126-5pmimic; (b)为NC组；（c)为空白对照组；
[0021] 图4为Transwell实验检测过表达miR-126-5p对卵巢癌细胞迀移、侵袭能力的影 响。其中，A为迀移图像，B为侵袭图像；
[0022] 图5为迀移实验统计结果图；
[0023] 图6为侵袭实验统计结果图。
【具体实施方式】
[0024] 1. 1qRT-PCR明确MiR-126_5p在浆液性卵巢癌中的表达水平
[0025]A. MiR_126_5p的其序列：cauuauuacuuuugguacgcg〇
[0026] 1.1.1引物设计
[0027]hsa_miR_126-5p_PrimerForwardPrimer(20yM)：
[0028]CATTATTTACTTTGGTACGCG
[0029] 下游引物为QIAGEN公司miScriptSYBRGreenPCRKit中自带UniversalPrimer
[0030] ControlPrimer：Hs_RNU6-2_lmiScriptPrimerAssay
[0031] 1. 1. 2100例浆液性卵巢癌组织蜡块和50例正常输卵管伞端组织蜡块总RNA提取， 如表1所示：
[0032] 表1 100例卵巢癌患者临床病理学特征
[0033]
【主权项】
1. 一种与衆液性卵巢癌发生发展机制相关的microRNA分子，其特征在于，该microRNA 分子为miR-126-5p，其核苷酸序列如SEQ. ID. NO. 1所示。
2. 权利要求1所述的miR-126-5p作为目标靶点在制备抗浆液性卵巢癌的药物和/或 诊断试剂中的应用。
3. 权利要求1所述的miR-126-5p作为卵巢癌发生发展的标志物的应用。
4. 增高miR-126-5p在浆液性卵巢癌中表达的载体、分子或组合物抑制卵巢癌细胞增 殖的药物中的应用。
5. 增高MiR-126-5p在浆液性卵巢癌中表达的载体、分子或组合物在抑制卵巢癌细胞 迀移的药物中的应用。
6. 增高MiR-126-5p在浆液性卵巢癌中表达的载体、分子或组合物在抑制卵巢癌细胞 侵袭的药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种与浆液性卵巢癌发生发展机制相关的microRNA分子及其应用，属于肿瘤发生机制研究技术领域。本发明的microRNA分子为miR-126-5p，序列如SEQ.ID.NO.1所示。本发明提供的miR-126-5p在浆液性卵巢癌组织中表达显著降低：且与浆液性卵巢癌细胞密切相关，过表达miR-126-5p后的浆液性卵巢癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力明显抑制。本发明提供的miR-126-5p为设计卵巢癌分子靶向治疗药物提供了新的靶点，用以设计和开发靶向治疗卵巢癌的新药，也为卵巢癌的早期临床诊断提供了潜在的新的生物标志物。
【IPC分类】A61K31-7105, C12Q1-68, A61P35-00, C12N15-113
【公开号】CN104830858
【申请号】CN201510098622
【发明人】李艳红, 姚丽, 刘菲, 洪甲, 陈琳, 张佳瑞
【申请人】中国人民解放军第四军医大学
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年3月5日