一种发酵型人工虫草山楂酒的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及功能果酒发酵的技术领域，具体涉及一种发酵型人工虫草山楂果酒的 制备方法。
【背景技术】
[0002] 山楂（Crataequs pinnatifida Bunges)，又名山里红，属于蔷薇科山楂属植物，是 我国北方地区重要的栽培水果。山楂果实除鲜食外，也可用于加工制作饮料、果酒、果干等 多种产品。研宄表明，山楂中含有丰富的三萜类及黄酮类等活性成分，具有降压作用，降血 月旨、防治动脉粥样硬化等多种生物功能。但由于山楂强烈的酸味，使其鲜食量受到很大的限 制，而山楂的加工制品也主要为果丹皮、山楂片、山楂汁等产品，加工利用率和附加值都较 低。因此，研宄开发山楂的高附加值转化利用新技术是目前山楂加工领域的重要方向。
[0003] 蝙蝠蛾拟青霉（Paecilomyces hepiali)和中华被毛抱（Hirsutella sinensis) 是天然冬虫夏草中两种重要的内生真菌，研宄表明两者共同参与了天然冬虫夏草的生长分 化，其中化学组成分析表明蝙蝠蛾拟青霉的化学指纹图谱与天然冬虫夏草更为接近，也含 有天然冬虫夏草中所具有的虫草素、甘露醇、虫草多糖、生物碱类等多种生物活性物质，具 有抗氧化、抗肿瘤、抗辐射、调节机体免疫能力等多种生物功能。现阶段，采用人工虫草内生 真菌进行液体发酵已成为人工虫草制品的重要来源。因此，本研宄将人工虫草液体发酵与 山楂利用有效结合起来，使得人工虫草液体发酵过程中有效促进山楂中有效成分的释放， 再通过果酒酵母发酵获得人工虫草山楂果酒，为山楂果酒发酵提供新的有效途径。
【发明内容】
[0004] 本发明目的旨在提供一种制备低分子量蝙蝠蛾拟青霉胞外多糖的方法，实现本发 明的具体方案如下：
[0005] 1、一种发酵型人工虫草山楂酒的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：
[0006] (1)将500g新鲜的"豫北红"山楂洗净后去核，加入IL蒸馏水用打浆机打成果浆， 然后在果浆中分别加入蔗糖50g，酵母粉2. 50g，磷酸二氢钾I. 50g，硫酸镁0. 05g，土豆汁 15. OOmL，麦芽汁15. OOmL，分别取200mL分装于5个500mL的三角瓶中，115°C灭菌20分钟 备用。
[0007] (2)从保存于土豆斜面培养基的蝙蝠蛾拟青霉（Paecilomyces hepiali)HNl菌株 的母种中挖取大小约为〇. 5cmX0. 5cm菌丝体块，接种于装有IOOmL种子培养基的容量为 250mL的三角瓶中，于20°C下静止培养12小时后，120rpm下振荡培养培养72小时，即可获 得种子液。种子培养基组成为：葡萄糖30. 00g/L，酵母膏6. 00g/L，磷酸二氢钾I. 50g/L，硫 酸镁(λ 50g/L，麦芽汁 KX 00g/L，土豆汁 KX 00g/L，pH 6. 5 ;
[0008] (3)取步骤⑵中的种子液接种于装有200mL发酵培养基的容量为500mL的三角 瓶中，按发酵培养基体积的1%接入种子液，于17°C下静止培养12小时后，然后在120rpm 下振荡培养培养120小时后，获得人工虫草山楂发酵醪；
[0009] (4)将步骤⑶中收获得到的人工虫草山楂发酵醪打浆后，在无菌条件下按体积 添加6%的蔗糖、4%的麦芽汁并混合均匀，然后按体积比1%接入活化后的果酒酵母，在 28°C下发酵36小时后，将发酵醪用板框压滤机压滤去除酵母菌体和沉淀后，可得到人工虫 草山楂酒原酒液；
[0010] (5)将步骤（4)制得的人工虫草山楂酒原酒液放入储酒罐中陈酿3个月至1年后， 用硅藻土过滤后即可获得人工虫草山楂果酒；
[0011] (6)将步骤（5)所得到的人工虫草山楂果酒采用福林-酚法测定多酚含量，苯 酚-硫酸法测定多糖含量。
[0012] 2、根据专利要求1所述的一种人工虫草山楂果酒的制备方法，其特征在于：
[0013] (1)所述步骤（1)中所述的人工虫草山楂液体发酵的培养基配方：蔗糖50g/L，酵 母粉2. 50g/L，磷酸二氢钾I. 50g/L，硫酸镁0· 05g/L，土豆汁15. 00g/L，麦芽汁15. 00g/L，豫 北红山楂果500g/L ;
[0014] (2)所述步骤（4)中所述的人工虫草山楂果酒原酒发酵中所使用的果酒酵母，以 及6%的蔗糖和4%的麦芽汁浓度。
[0015] 制备的发酵型人工虫草山楂酒色泽红亮、馥郁清香、口感清新，其中多糖含量 5. 47g/L，多酚含量 895mg/L。
【附图说明】
[0016] 图1人工虫草在果泥加富培养基和基础培养基上的生长曲线
[0017] 图2不同初始蔗糖浓度对山楂果酒发酵的影响
[0018] 图3人工虫草山楂果酒发酵进程的动力学曲线
【具体实施方式】
[0019] 下面通过实施例，对本发明作进一步描述。
[0020] 实施例1 :
[0021] (1)将500g新鲜的"豫北红"山楂洗净后去核，加入IL蒸馏水用打浆机打成果浆， 然后在果浆中分别加入蔗糖50g，酵母粉2. 50g，磷酸二氢钾I. 50g，硫酸镁0. 05g，土豆汁 15. OOmL，麦芽汁15. OOmL，分别取200mL分装于5个500mL的三角瓶中，115°C灭菌20分钟 备用。
[0022] (2)从保存于土豆斜面培养基的蝙蝠蛾拟青霉（Paecilomyces hepiali)HNl菌株 的母种中挖取大小约为〇. 5cmX0. 5cm菌丝体块，接种于装有IOOmL种子培养基的容量为 250mL的三角瓶中，于20°C下静止培养12小时后，120rpm下振荡培养培养72小时，即可获 得种子液。种子培养基组成为：葡萄糖30. 00g/L，酵母膏6. 00g/L，磷酸二氢钾I. 50g/L，硫 酸镁(λ 50g/L，麦芽汁 KX 00g/L，土豆汁 KX 00g/L，pH 6. 5 ;
[0023] (3)取步骤⑵中的种子液接种于装有200mL发酵培养基的容量为500mL的三角 瓶中，按发酵培养基体积的1%接入种子液，于17°C下静止培养12小时后，然后在120rpm 下振荡培养培养120小时后，获得人工虫草山楂发酵醪；
[0024] (4)将步骤⑶中收获得到的人工虫草山楂发酵醪打浆后，在无菌条件下按体积 添加6%的蔗糖、4%的麦芽汁并混合均匀，然后按体积比1%接入活化后的果酒酵母，在 28°C下发酵36小时后，将发酵醪用板框压滤机压滤去除酵母菌体和沉淀后，可得到人工虫 草山楂酒原酒液；
[0025] (5)将步骤（4)制得的人工虫草山楂酒原酒液放入储酒罐中陈酿3个月至1年后， 用硅藻土过滤后即可获得人工虫草山楂果酒；
[0026] (6)将步骤（5)所得到的发酵型人工虫草山楂果酒采用福林-酚法测定多酚含量， 苯酚一硫酸法测定多糖含量。
[0027] 实施例2 :
[0028] 发酵型人工虫草山楂酒的发酵制备
[0029] (1)虫草菌丝体在山楂加富培养基中的生长曲线
[0030] 分别比较了虫草菌丝体在基础培养基和山楂果泥加富培养基中的生长曲线，结果 见图1。
[0031] 由图1可以看出，与基础培养基相比，人工虫草在山楂果泥加富培养基中菌丝体 的生物量有显著提高，且当发酵至第5天时，菌丝体生物量达到最大值I. 268g/L。
[0032] (2)不同种酵母菌株对人工虫草山楂酒发酵的影响
[0033] 试验了不同种类酵母对人工虫草山楂酒发酵的影响，结果见表1。
[0034] 表1不同酵母菌株对人工虫草山楂果酒发酵的影响
[0035]
【主权项】
1. 一种发酵型人工虫草山楂酒的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤： (1) 将500g新鲜的"豫北红"山楂洗净后去核，加入IL蒸馏水用打浆机打成果浆， 然后在果浆中分别加入蔗糖50g，酵母粉2. 50g，磷酸二氢钾I. 50g，硫酸镁0. 05g，土豆汁 15. OOmL，麦芽汁15. OOmL，分别取200mL分装于5个500mL的三角瓶中，115°C灭菌20分钟 备用。 (2) 从保存于土豆斜面培养基的蝙蝠蛾拟青霉（Paecilomyces hepiali)HNl菌株的母 种中挖取大小约为0. 5cmX0. 5cm菌丝体块，接种于装有IOOmL种子培养基的容量为250mL 的三角瓶中，于20°C下静止培养12小时后，120rpm下振荡培养培养72小时，即可获得种 子液。种子培养基组成为：葡萄糖30. 00g/L，酵母膏6. 00g/L，磷酸二氢钾I. 50g/L，硫酸镁 〇? 50g/L，麦芽汁 10. 00g/L，土豆汁 10. 00g/L，pH 6. 5 ; (3) 取步骤⑵中的种子液接种于装有200mL发酵培养基的容量为500mL的三角瓶中， 按发酵培养基体积的1%接入种子液，于17°C下静止培养12小时后，然后在120rpm下振荡 培养培养120小时后，获得人工虫草山楂发酵醪； (4) 将步骤（3)中收获得到的人工虫草山楂发酵醪打浆后，在无菌条件下按体积添加 6%的蔗糖、4%的麦芽汁并混合均匀，然后按体积比1%接入活化后的果酒酵母，在28°C下 发酵36小时后，将发酵醪用板框压滤机压滤去除酵母菌体和沉淀后，可得到人工虫草山楂 酒原酒液； (5) 将步骤（4)制得的人工虫草山楂酒原酒液放入储酒罐中陈酿3个月至1年后，用硅 藻土过滤后即可获得人工虫草山楂果酒； (6) 将步骤（5)所得到的人工虫草山楂果酒采用福林-酚法测定多酚含量，苯酚-硫酸 法测定多糖含量。
2. 根据专利要求1所述的一种人工虫草山楂果酒的制备方法，其特征在于： (1) 所述步骤（1)中所述的人工虫草山楂液体发酵的培养基配方：蔗糖 50g/L，酵 母粉 2. 50g/L，磷酸二氢钾 1.50g/L，硫酸镁 0.05g/L，土豆汁 15.00g/L，麦芽汁 15. 00g/L，豫北红山楂果 500g/L ; (2) 所述步骤（4)中所述的人工虫草山楂果酒原酒发酵中所使用的果酒酵母，以及6% 的蔗糖和4%的麦芽汁浓度。
【专利摘要】本发明涉及一种发酵型人工虫草山楂酒的制备方法。该制备方法包括以下步骤：(1)将新鲜山楂清洗去核后打浆用于配制人工虫草液体培养基；(2)加入人工虫草液体菌种进行深层发酵；(3)将发酵产物打浆后加入蔗糖和麦芽汁进行调配；(4)加入果酒酵母进行厌氧发酵；(5)将发酵醪过滤后获得原酒液；(6)对所获得的原酒进行陈酿；(7)对陈酿后的酒液过滤去除沉淀后制成发酵型人工虫草酒。本发明所制得的人工虫草山楂酒馥郁清香、色泽红亮、口感清新、营养丰富。
【IPC分类】C12G3-02, C12R1-865
【公开号】CN104862181
【申请号】CN201510293389
【发明人】武忠伟, 张明霞, 王刘豪, 王艳婕, 张朝辉, 王桂玲
【申请人】河南科技学院
【公开日】2015年8月26日
【申请日】2015年5月27日