新地钱素a的人工合成方法
【技术领域】
[0001]本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种天然药物化合物的制备方法，尤其涉及新地钱素A的人工合成方法。
[0002]
【背景技术】
[0003]苔类植物在全球有6000余种，其中我国特有种类约100多种。对苔类植物活性成分的研宄表明，苔类植物是生物活性天然产物的重要来源。近年来从苔类植物中分离获得了大量结构新颖并且活性显著的化合物，其中许多可作为新药研宄的先导化合物。新地钱素A (Neomarchantin A)是一种新型双联节类化合物，由山东大学天然药物化学课题组在对采自四川乐山的粗裂地钱的化学成分进行分析时首次获得。研宄发现，新地钱素A对人肺腺癌细胞株A-549作用突出，对P-388白血病细胞株毒也具有中等的细胞毒作用。但因其天然产物的生长周期相对较长，含量相对偏低，分离技术复杂，这些因素增加了对其生物学和药理学活性方面的研宄难度，阻碍了对该物质的进一步研宄和应用。
[0004]
【发明内容】
[0005]解决的技术问题:针对现有的天然产物新地钱素A获取量少，阻碍了对该物质的进一步研宄和应用方面存在的不足，本发明提供一种新地钱素A的人工合成方法，该方法能够持续、大量地合成新地钱素A，为后续实现该药物的规模化生产提供良好的技术支持。
[0006]技术方案:本发明提供一种新的制备新地钱素A的方法，该方法以4-羟基-3-甲氧基苯甲醛、对溴苯甲酸甲酯为起始原料，通过化学反应最终制备得到新地钱素A，具体包括以下步骤:
(1)化合物I的合成:
1)将3.9mL N, N-二甲基甲酰胺和4.7mL硫酸二甲酯的混合溶液在50_60°C加热3_5h，形成DMF-DMS加合物；
2)将5g4-羟基-3-甲氧基苯甲醛用30mL 二氯甲烷溶解，然后加入7.2mL的丙二醇，再加入上述制备得到的DMF-DMS加合物，20-30°C反应20_26h，反应结束后，将体系置于冰浴下，向反应体系中加入6-8mL三乙胺，用20-25mL乙醚萃取三次，合并有机层，用含有5%亚硫酸氢钠和饱和乙酸钠的溶液洗涤三次，再用饱和氯化钠和饱和乙酸钠等比例混合液洗三次，所得有机相用无水硫酸钠干燥，旋蒸，重结晶得到棕色晶体，即为化合物I ;
(2)化合物2的合成:
将化合物I和间溴苯甲醛用吡啶搅拌溶解后，再依次加入碳酸钙粉末、碳酸钾粉末，氧化铜粉末，加热至沸腾后回流，TLC检测至反应完全，减压蒸馏除去溶剂，然后加二氯甲烷浸取，过滤，浓缩滤液，经柱层析分离，得粗产品，最后乙醇重结晶得白色粉末，即为化合物2，其中化合物I与间溴苯甲醛物质的量之比为1: (0.95-1.05)，优选为1:1.05，碳酸钙与碳酸钾物质的量之比为1: (1-5)，回流时间为15-20h，优选18h ；
(3)化合物3的合成:
将3.72g对溴苯甲酸甲酯、2.5g异香兰素溶于10mL吡啶中，用机械搅拌器搅拌后，再依次加入3.58g碳酸钾粉末、0.68g碳酸钙粉末、0.65g氧化铜粉末，加热回流15_20h，TLC检测至反应完全，减压蒸馏除去溶剂吡啶，然后加30ml 二氯甲烷浸取，过滤，浓缩滤液，经柱层析得到粗产品，最后乙醇重结晶得淡黄色固体，即为化合物3 ;
(4)化合物4的合成:
将3.14g化合物3溶于60mL无水乙醇中，在0-5°C下加入0.17g硼氢化钠粉末，搅拌10-20min，然后室温下搅拌反应约3h，TLC检测至反应完全，加水至无气泡产生为止，搅拌30min，旋蒸浓缩，用二氯甲烷萃取，再用饱和乙酸钠和饱和氯化钠的等比例混合溶液洗三次，有机相用无水硫酸钠干燥，蒸干溶剂得白色固体，即为化合物4 ;
(5)化合物5的合成:
将2.53g化合物4、3.16 g三苯基膦氢溴酸盐依次投入到100 mL圆底烧瓶中，加入50mL乙腈溶解，磁子搅拌，加热至沸腾回流2h，停止加热，降至室温，减压浓缩，经柱层析分离，得白色固体，即为化合物5 ；
(6)化合物6的合成:
将3.6g化合物3、1.7446g化合物5溶于50ml 二氯甲烷中，然后加入1.54g碳酸钾，用18-冠-6催化，加热至沸腾回流20-24h，滤液浓缩，剩余物经柱层析分离得到油状固体，即为化合物6;
(7)化合物7的合成:
将2.0448g化合物6溶解于40mL乙酸乙酯中，加入0.2Ig Pd/C和4.5mL三乙胺，通入氢气，常温搅拌20-24h，TLC检测至反应完全，过滤，减压浓缩，剩余物经柱层析分离，得淡黄色油状物即为化合物7 ;
(8)化合物8的合成:
依次将1.7834g化合物7、0.18g四氢锂铝加入到25mL无水四氢呋喃中，在0_5°C下搅拌l_2h，反应结束后，慢慢滴加水10ml，减压浓缩，用30ml 二氯甲烷萃取，有机相再用饱和氯化钠溶液洗三次，再用无水硫酸钠干燥，蒸干溶剂得无色油状物，即为化合物8 ;
(9)化合物9的合成:
将1.3804g化合物8溶于60mL乙醇中，然后加2.5ml浓盐酸和25mL的水，室温搅拌14h，反应完毕后，滴加6ml饱和碳酸氢钠溶液至无气泡，减压浓缩，加乙酸乙酯溶解，用碳酸氢钠和氯化钠饱和混合溶液洗三次，合并有机相，用无水硫酸钠干澡，减压浓缩，经柱层析分离，得无色油状物，即为化合物9 ;
(10)化合物10的合成:
将0.986g化合物9、0.74g三苯基膦氢溴酸盐投入到30mL乙腈中，搅拌加热至沸腾回流2h，TLC检测至反应完全，降至室温，减压浓缩，经柱层析分离，得白色固体，即为化合物10 ；
(11)化合物11的合成:
将0.86g甲醇钠加入到200mL 二氯甲烷中，将1.58g化合物10用300 mL二氯甲烷溶解后缓滴加至上述的甲醇钠的二氯甲烷溶液中，反应12 h，TLC检测至反应完全，减压浓缩，经柱层析分离，得白色粉末，即为化合物11;
(12)化合物12的合成:
将0.768g化合物11溶解于20mL乙酸乙酯中，加入0.07g Pd/C，通入氢气，室温搅拌24h，TLC检测至反应完毕后过滤，滤液减压浓缩，剩余物经柱层析分离得白色粉末，即为化合物12 ；
(13)化合物13的合成:
将0.7430g化合物12溶解到30mL 二氯甲烷中，然后在-40°C下滴入1.5mL三溴化硼的20ml 二氯甲烷溶液，在-10°C时反应12h，TLC检测至反应完毕，在0_5°C下滴加水1ml水，用二氯甲烷萃取三次，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，蒸干得白色粉末，即为化合物13，所述化合物13即为新地钱素A。
[0007]所述步骤(2)中的TLC检测至反应完全的具体步骤为:用电吹风机将反应体系的溶剂蒸发，再用二氯甲烷溶解，用化合物1、间溴苯甲醛的二氯甲烷溶液点板，用二氯甲烷作流动相进行色谱分离，至在紫外线作用下观察反应体系中的无化合物I的斑点，即反应完全。
[0008]所述步骤(3)中的TLC检测至反应完全的具体步骤为:用电吹风机将反应体系的溶剂蒸发，再用二氯甲烷溶解，用对溴苯甲酸甲酯、异香兰素的二氯甲烷溶液点板，用二氯甲烷作流动相进行色谱分离，至在紫外线作用下观察反应体系中的无异香兰素斑点，即反应完全。
[0009]所述步骤(4)中的TLC检测至反应完全的具体步骤为:用化合物3的二氯甲烷溶液以及反应体系点板，用二氯甲烷作流动相进行色谱分离，至在紫外线作用下观察反应体系中的无化合物3的斑点，即反应完全。
[0010]所述步骤(7)中的TLC检测至反应完全的具体步骤为:用化合物6的乙酸乙酯溶液以及反应体系点板，用乙酸乙酯和二氯甲烷混合液作流动相进行色谱分离，至在紫外线作用下观察反应体系中的无化合物6的斑点，即反应完全；其中乙酸乙酯与二氯甲烷体积比为 1: (0.5-2)，优选 1:1。
[0011]所述步骤(10)中的TLC检测至反应完全的具体步骤为:用化合物9的二氯甲烷溶液以及反应体系点板，用乙酸乙酯作流动相进行色谱分离，至在紫外线作用下观察反应体系中的无化合物9的斑点，即反应完全。
[0012]所述步骤(11)中的TLC检测至反应完全的具体步骤为:用化合物10的二氯甲烷溶液以及反应体系