件下灭菌30min。该方法的具体应用为:先在玉米田中选取一株处于拔节期的玉米，做上标记，为玉米A，用针管向玉米A的茎部注射质量浓度为3mg/L的上述培养得到的玉米疫苗生物菌lmL，待茎部出现淡红色，观察6天，直至消失；待颜色消失后，再向茎部注射质量浓度为6mg/L玉米疫苗生物菌lmL，待茎部出现淡黄色，观察10天，直至消失；待颜色消失后，向茎部注射质量浓度为9mg/L玉米疫苗生物菌lmL，观察15天，无颜色出现，即可。将玉米疫苗生物菌喷洒到花粉中，通过花粉传播，检测发现，防治率达到99 %以上。
实例2
[0013]—种防治玉米煤纹病的方法，其特征在于:培养一种玉米疫苗生物菌PJQN — G6，该生物菌属于鲍氏志贺氏菌，主要特性为革兰氏染色阳性，细胞形状为长杆菌，3 μπι，周生鞭毛，一般无荚膜，形成芽孢，芽胞囊不明显膨大，在平板上产生色素，能液化明胶、胨化牛奶、还原硝酸盐、水解淀粉。选用生物菌PJQN — G6，接种到GB或CPA培养液，进行液体发酵生产，其发酵生产的条件为:ρΗ生长范围6，培养温度的范围为30°C，搅拌速度为350r/min,发酵液含菌量2X1011个/mL。培养GB培养液用30g酵母蛋白胨，20mL无水乙醇，2gZnS04.8H20，3gAl2S04.8H20，蒸馏水 1.5L，pH 7.5，在 130°C条件下灭菌 15min ;培养 CPA用15g酵母蛋白胨，1g葡萄糖，20g明胶，2L蒸馏水，pH 7.5，在115°C条件下灭菌30min。该方法的具体应用为:先在玉米田中选取一株处于拔节期的玉米，做上标记，为玉米A，用针管向玉米A的茎部注射质量浓度为3mg/L的上述培养得到的玉米疫苗生物菌3mL，待茎部出现淡红色，观察6天，直至消失；待颜色消失后，再向茎部注射质量浓度为6mg/L玉米疫苗生物菌3mL，待茎部出现淡黄色，观察10天，直至消失；待颜色消失后，向茎部注射质量浓度为9mg/L玉米疫苗生物菌3mL，观察15天，茎部出现淡紫色，向茎部注射质量浓度为12mg/L玉米疫苗生物菌3mL，观察30天，直至无颜色出现。将玉米疫苗生物菌喷洒到花粉中，通过花粉传播，经检测发现，防治率达到99.1 %以上。
实例3
[0014]—种防治玉米煤纹病的方法，其特征在于:培养一种玉米疫苗生物菌PJQN — G6，该生物菌属于鲍氏志贺氏菌，主要特性为革兰氏染色阳性，细胞形状为长杆菌，0.5 μπι，周生鞭毛，一般无荚膜，形成芽孢，芽胞囊不明显膨大，在平板上产生色素，能液化明胶、胨化牛奶、还原硝酸盐、水解淀粉。选用生物菌PJQN — G6，接种到GB或CPA培养液，进行液体发酵生产，其发酵生产的条件为:ρΗ生长范围6，培养温度的范围为35°C，搅拌速度为250r/min,发酵液含菌3X1011个/mL。培养GB培养液用30g酵母蛋白胨，20mL无水乙醇，2gZnS04.8H20，3gAl2S04.8H20，蒸馏水 1.5L，pH 7.5，在 130°C条件下灭菌 25min ;培养 CPA用15g酵母蛋白胨，1g葡萄糖，20g明胶，2L蒸馏水，pH 7.5，在115°C条件下灭菌30min。该方法的具体应用为:先在玉米田中选取一株处于拔节期的玉米，做上标记，为玉米A，用针管向玉米A的茎部注射质量浓度为3mg/L的上述培养得到的玉米疫苗生物菌2mL，待茎部出现淡红色，观察6天，直至消失；待颜色消失后，再向茎部注射质量浓度为6mg/L玉米疫苗生物菌2mL，待茎部出现淡黄色，观察10天，直至消失；待颜色消失后，向茎部注射质量浓度为9mg/L玉米疫苗生物菌2mL，观察15天，无颜色出现，即可。将玉米疫苗生物菌喷洒到花粉中，通过花粉传播，经检测发现，防治率达到99.6 %以上。
【主权项】
1.一种防治玉米煤纹病的方法，其特征在于:培养一种玉米疫苗生物菌PJQN — G6，该生物菌属于鲍氏志贺氏菌，主要特性为革兰氏染色阳性，细胞形状为长杆菌，0.3?0.8X 1.5?4 μ m，周生鞭毛，一般无荚膜，形成芽孢，芽胞囊不明显膨大，在平板上产生色素，能液化明胶、胨化牛奶、还原硝酸盐、水解淀粉。2.根据权利要求1所述一种防治玉米煤纹病的方法，其特征在于具体步骤为:选用生物菌PJQN — G6，接种到GB或CPA培养液，进行液体发酵生产，其发酵生产的条件为:pH生长范围6?7，培养温度的范围为30?39°C，搅拌速度为200?350r/min，发酵液含菌量彡 I X 111 个 /mLo3.根据权利要求2所述一种防治玉米煤纹病的方法，其特征在于GB或CPA培养液配制方法为:(1)GB:30g 酵母蛋白胨，20mL 无水乙醇，2gZnS04.8H20，3gAl2S04.8H20，蒸馏水 1.5L，pH 7.5，130°C条件下灭菌 15 ?25min ； (2)CPA:15g酵母蛋白胨，1g葡萄糖，20g明胶，2L蒸馏水，pH 7.5,115°C条件下灭菌25 ?30mino4.根据权利要求1所述一种防治玉米煤纹病的方法，其特征在于具体应用方法为: (1)在玉米田中选取一株处于拔节期的玉米，做上标记，为玉米A，用针管向玉米A的茎部注射质量浓度为3mg/L的上述培养得到的玉米疫苗生物菌I?3mL，待茎部出现淡红色，观察4?6天，直至消失； (2)待颜色消失后，再向茎部注射质量浓度为6mg/L玉米疫苗生物菌I?3mL，待茎部出现淡黄色，观察8?10天，直至消失； (3)待颜色消失后，向茎部注射质量浓度为9mg/L玉米疫苗生物菌I?3mL，观察10?15天，若无颜色出现，即可；若茎部还出现淡紫色，即再向茎部注射质量浓度为12mg/L玉米疫苗生物菌I?3mL，观察15?30天，直至无颜色出现。
【专利摘要】本发明涉及一种防治玉米螟的方法，属于农业技术领域。本发明通过选用生物菌PJQN—G6，接种到GB或CPA培养液，进行发酵产生植物疫苗生物菌，该植物疫苗生物菌具由防治玉米螟的性能，接着将植物疫苗生物菌以从小到大的剂量注射到玉米拔节期的茎部，使玉米慢慢适应该生物疫苗，形成具有抗玉米螟的基因。本发明的有益效果：防治玉米螟的效果好，防治率达到99﹪以上；不会污染环境，操作简单，不会影响玉米生长。
【IPC分类】A01G7/06, C12R1/01, A01P3/00, A01N63/00, C12N1/20
【公开号】CN104974961
【申请号】CN201510399147
【发明人】黄勇, 薛红娟
【申请人】常州大学
【公开日】2015年10月14日
【申请日】2015年7月8日