3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨酸的合成方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及化合物的制备方法，尤其涉及一种3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨 酰-异亮氨酸的制备方法。
【背景技术】
[0002] 上海来益生物药物研究中心有限责任公司（以下简称来益生物药物）从采集 自自然环境中的土壤样品中进行微生物分离，得到了一种可产达托霉素的新型小链霉 菌（Streptomyces parvus),于2010年7月20日在中国微生物菌种保藏管理委员会普 通微生物中心正式保藏，保藏号为CGMCC No. 4027。当时对该小链霉菌CGMCC No. 4027 的次级代谢产物研究仅限于达托霉素类化合物，来益生物药物经过深入研究，在其次 级代谢产物中分离出一种新的化合物3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨 酸（3-amin〇-2-hydroxy-4-pheny butanoyl-valyl-isoleucine)(中国专利申请号 201110076554. 6, 3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨酸及其制备方法和应用），其 具有如下结构：
[0003]
[0004] 经研究该化合物能用于制备抑制革兰氏阳性菌的药物，尤其是抑制藤黄微球菌或 苦草芽孢杆菌的药物。
[0005] 来益生物药物经过进一步广泛而深入的研究发现，在小链霉素CGMCC No. 4027的 次级代谢产物中分离出的新化合物3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨酸具有抑制 氨肽酶的作用（中国专利申请号201110076555. 0, 3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮 氨酸的应用)，可用作氨肽酶抑制剂。含有有效量的该化合物的药物制剂可用于治疗肿瘤、 辅助治疗肿瘤或增强免疫。
[0006] 但是，微生物发酵方法所获得的化合物3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮 氨酸数量有限，难以满足患者用药的需求，因此，采用新的化学合成方法取代微生物发酵方 法是一种非常行之有效的新方法，能够获得更高的产量以满足患者用药的需求。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的在于提供化合物3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨酸的化 学合成方法，该化学合成方法能够替代微生物发酵方法，所获得的3-氨基-2-羟基-4-苯 基-缬氨酰-异亮氨酸收率高，纯度高，并且可以工业化批量生产，能够满足患者的需求。
[0008] 本发明的第一个目的是提供3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨酸的第 一种化学合成方法。
[0009] 本发明的另一个目的是提供3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨酸的第 二种化学合成方法。
[0010] 本发明的3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨酸的立体结构式如化合物 7所示：
[0011]
[0012] 为了实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：
[0013] -种3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨酸的合成方法，包括如下步骤， 采用化合物6经氢化还原反应制得所述3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨酸，即 化合物7,其化学反应式为：
[0015] 其中R为Cbz-或者H-。
[0016] 较佳的，由所述化合物6制得所述化合物7的加氢催化剂为Pd/C，氢化试剂为H2。
[0017] 较佳的，由所述化合物6制得所述化合物7的溶剂为甲醇。
[0018] 进一步的，当R为Cbz-时，所述3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨酸的 合成如合成路线1所示：
[0019]
[0020] 进一步的,上述合成路线1中的化合物6的制备：所述化合物6经化合物4和化合 物5在第一溶剂中反应制备而成：
[0022] 优选的，所述第一反应溶剂为THF。
[0023] 优选的，所述化合物4和化合物5反应时还加入HOBt(1-羟基苯并三唑）和EDC (1-(3-二甲基氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)，并将反应液的pH值调至8-9。
[0024] 进一步的，上述的合成路线1中的化合物4的制备：所述化合物4经化合物3在第 二溶剂中通入干燥的氯化氢反应制备而成 ：
[0025]
[0026] 优选的，所述第二反应溶剂为二氯甲烷。
[0027] 进一步的，上述的合成路线1中的化合物3的制备：所述化合物3经化合物1和化 合物2在第一溶剂中反应制备而成 ：
[0028]
[0029] 优选的，所述第一反应溶剂为THF。
[0030] 优选的，所述化合物1和化合物2反应时还加入HOBt (1-羟基苯并三唑）和EDC (1-(3-二甲基氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)，并将反应液的pH值调至8-9。
[0031] 进一步的，当R为H-时，所述化合物6的制备：所述化合物6经化合物5'在第三 溶剂中通入干燥的氯化氢反应制备而成：
[0032]
[0033] 优选的，所述第三反应溶剂为乙酸乙酯。
[0034] 进一步的，所述化合物5'的制备：所述化合物5'经化合物4和化合物2'在第二 溶剂中通入干燥的氯化氢反应制备而成：
[0036] 优选的，所述第二反应溶剂为二氯甲烷。
[0037] 进一步的，所述化合物4的制备：所述化合物4经化合物3在第二溶剂中通入干燥 的氯化氢反应制备而成：
[0039] 优选的，所述第二反应溶剂为二氯甲烷。
[0040] 进一步的，所述化合物3的制备：所述化合物3经化合物1和化合物2在第一溶剂 中反应制备而成：
[0041]
[0042] 优选的，所述第一反应溶剂为THF。
[0043] 进一步的，所述化合物2'的制备：所述化合物2'经化合物1'和BOC酸酐在第四 溶剂中反应制备而成：
[0044]
[0045] 优选的，所述第四反应溶剂为水和四氢呋喃的混合溶剂。
[0046] 本发明的化学合成方法所制得的化合物7经检测与中国专利申请号 201110076554. 6和中国专利申请号201110076555. 0中的微生物发酵方法所获得的新化 合物为同一种化合物，都为3-氨基_2_羟基_4_苯基-纟颜氨醜-异壳氨酸，并且该3-氨 基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨酸能用于制备抑制革兰氏阳性菌的药物，尤其是抑 制藤黄微球菌或苦草芽孢杆菌的药物；也具有抑制氨肽酶的作用，可用作氨肽酶抑制剂。含 有有效量的该化合物7的药物制剂可用于治疗肿瘤、辅助治疗肿瘤或增强免疫。
[0047] 本发明可以经过上述两条化学合成路线制备最终化合物3-氨基-2-羟基-4-苯 基-缬氨酰-异亮氨酸，这两种化学合成方法都能够替代上述现有技术中的微生物发酵方 法，所获得的3-氨基_2_羟基_4_苯基-纟颜氨醜-异壳氨酸收率1?，纯度1?，并且可以工业 化批量生产，能够满足用药需求。
【附图说明】
[0048] 图1为第一条合成路线中化合物3的ESI-MS质谱图。
[0049] 图2为第一条合成路线中化合物4的ESI-MS质谱图。
[0050] 图3为第一条合成路线中化合物6的ESI-MS质谱图。
[0051] 图4为第一条合成路线中化合物7的ESI-MS质谱图。
[0052] 图5为第一条合成路线中化合物7的核磁共振氢谱图。
[0053] 图6为第一条合成路线中化合物7的自动标尺色谱图。
[0054] 图7为第二条合成路线中化合物2'的LC-MS谱图。
[0055] 图8为第二条合成路线中化合物7的LC-MS谱图。
[0056] 图9为第二条合成路线中化合物7的核磁共振氢谱图。
【具体实施方式】
[0057] 以下结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本 发明而非用于限定本发明的保护范围。
[0058] 实施例1
[0059] 化合物3-氨基-2-羟基-4-苯基-缬氨酰-异亮氨酸（即化合物7)的第一种合 成方法：
[0064] 3. 77g (0? 0173mol)化合物2于250ml茄形瓶中，加200ml THF溶解，冰水浴下加入 2. 34g(0. 0173mol)H0Bt (1-羟基苯并三唑)和 3. 64g(0. 019mol)EDC (1-(3-二甲基氨基丙 基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)，NMM (N-甲基玛琳）调pH值至8-9,加入6.2g(0.0158mol) 化合物1，再次调pH值到8-9, r. t.搅拌反应。4h点板已反应完全。将反应液倾入300ml 饱和 NaHCO3 中，EA250ml*3 萃取，合并 EA 相依次用饱和 NaHC03200ml*2, 5%KHS04200ml*3,饱 和NaC1200ml*l洗，无水硫酸钠干燥，旋干，过柱（EA:PE=1:20-1:6)得淡黄色油状物4. 4g。 ESI-MS: 443 [M + 23]+。化合物3的ESI-MS质谱图如图1所示。
[0065] 2、化合物4的制备
[0067] 4. 4g化合物3于250ml三口瓶，100mlDCM溶解，冰水浴搅拌冷却，通入干燥 的氯化氢气体，Ih即反应完全。将反应液转入250ml茄形瓶中旋干得白色固体2. 9g。 ESI-MS: 321 [M + 1]+。化合物4的ESI-MS质谱图如图2所示。
[0068] 3、化合物6的制备
[0069]
[0070] 3. 29g(0.0 lmol)化合物 5 和 I. 49g(0.0 llmoDHOBt 于 250ml 茄形瓶中，加 150ml THF 溶解，加入 2.3g(0.012mol)EDC，NMM 调 pH 值至 8-9,加入 3.57g(0.01mol)化合物 4,再次调pH值到8-9, r. t.搅拌反应。4h点板已反应完全。将反应液倾入300ml饱和 NaHCO3 中，EA300ml*3 萃取，合并 EA 相依次用饱和 NaHC03200ml*2,