一种花生芽中白藜芦醇的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及植物成分提取领域，特别是一种花生芽中白藜芦醇的提取方法。
【背景技术】
[0002]白藜芦醇是多酚类化合物，白藜芦醇(Res)化学名3,4,5-三羟基-二苯乙烯，分子式C14H1203，熔点256?257°C。在植物体内主要以白藜芦醇苷(PDT)形式存在，主要来源于葡萄(红葡萄酒)、虎杖、花生、桑椹等植物。
[0003]白藜芦醇是一种生物性很强的天然多酚类物质，又称为芪三酚，是肿瘤的化学预防剂，也是对降低血小板聚集，预防和治疗动脉粥样硬化、心脑血管疾病的化学预防剂。白藜芦醇的实验研究已经证实具有对心血管疾病和癌症的有益作用。同时能降低血脂及冠心病的发病率，对心血管系统起特殊保护作用；调节低密度脂蛋白(LDL)的比例；减少血小板凝集等作用；延缓衰老；
由于白藜芦醇具有多种生物和药理活性，使其广泛应用于食品、医药、保健品、化妆品等领域。白藜芦醇具有优良药理活性和保健功能其市场需求很大且与日剧增，已有大部分国家和地区都开发了白藜芦醇及其制品。美国已把白藜芦醇作为膳食补充剂，日本已将从植物提取的白藜芦醇作为食品添加剂，中国已将含白藜芦醇的植物提取物制成降脂美容的天然保健食品。
[0004]如何大量的提取和规模化生产白藜芦醇一直是科研工作者不断追求的目标，传统的方法多是从虎杖中提取白藜芦醇，然而虎杖生长周期长，一般要生长三年白藜芦醇的含量才会达到采收量，且含量高的虎杖多为野生虎杖，随着野生虎杖的大量采挖，虎杖资源大量减少，成为虎杖白藜芦醇的大量提取提出了难题。
[0005]大家已公认葡萄、葡萄籽、葡萄酒(红葡萄)中含白藜芦醇，使传统习惯喝白酒的国人处于对养生理念的接受，也开始喝葡萄酒了 ；研究证明:喝人体健康接受量的葡萄酒起不到作用；用葡萄皮、葡萄籽提取白藜芦醇也行不成规模生产。
[0006]研究表明花生红衣也含有大量的白藜芦醇，但是花生红衣收集困难，理论上研究可行但是在实际大规模生产中往往因为原料的匮乏导致实际生产无法实施。
[0007]美国宾夕法尼亚州立大学教授佩妮和台湾嘉义大学教授邱义源等的研究，花生中含有白藜芦醇，其含量是葡萄的三十倍。葡萄中的白藜芦醇含量通常只有百万分之一，而花生中的白藜芦醇含量却高达百万分之三十。邱义源指出，一般红酒约含一到二 ppm的白藜芦醇，但花生芽却含有三十ppm，经过特殊方式培育后，更可以提升到三百至五百ppm，花生发芽后，其白藜芦醇含量迅速增加，化验分析表明，花生芽里的白藜芦醇含量是花生仁的100倍，也是高出葡萄中白藜芦醇含量的100倍；花生催芽提取白藜芦醇，可真正实现白藜芦醇的规模化生产。
【发明内容】
[0008]基于以上原因，本发明的目的是提供一种原料来源丰富，且白藜芦醇含量高，提取简便，方便可行，便于大规模生产的白藜芦醇的提取方法:实现上述目的的技术方案是:
一种花生芽中白藜芦醇的提取方法，由以下步骤组成:
步骤一、花生种子处理:
选择粒大、籽粒饱满、色泽新鲜、表皮光滑、形状一致优质的花生种子，将选好的新鲜花生放入容器中加水，水量为花生重量40%?50%，在20?25°C的温水中，浸泡花生种12小时，浸种完毕后装入25°C恒温催芽箱，4小时淋一次25°C的温水，在第一次泡芽3d后出芽，将催好芽的种子进行一次挑选，去除未发芽的种子，将已发芽的种子进行二次催芽，在25°C恒温催芽箱中，8d花生芽长到7厘米，花生芽将红衣顶掉，叶芽露出芽瓣时催芽完成；此时花生芽中白藜芦醇含量达到最高值；
步骤二、花生芽白藜芦醇提取前处理:
将步骤一所得的花生芽沥干，沥干后将花生芽快速急冻，冻结温度为_30°C冻4小时，取出放到20?25°C的温水中解冻，解冻完用离心机甩干水；再重复操作速冻一次；预冻后的花生芽放入真空容器由借助真空系统将窗口内压力降到三相点以下，由加热系统供热给物料，使物料水分逐渐蒸发到半干呈疲软状；步骤三、速冻后的疲软花生芽挤压:
将呈疲软状花生芽用手工或机械方法挤压呈纤维状备用；
步骤四、花生芽纤维的水提:
将花生芽纤维放入100°C热水中，煎煮35分钟，过滤得水溶液，重复上述操作3次；将所得的滤液合并真空浓缩至30%备用；
步骤五:酸催化水解，
将步骤四所得的30%浓缩液按体积配比为8%的稀盐酸以8倍的量在60°C下水解6小时，反应后冷却，备用步骤六:纯化:
将反应后冷却液用预先处理好的大孔吸附树脂柱进行层析分离:大孔吸附树脂层析过程包括:1、大孔吸附树脂预处理:按产品使用说明方法进行的处理；2、上扬吸附:将步骤五所得的冷却液抽滤后，上预先处理好的大孔吸附树脂柱进行上样吸附3、层析洗脱:提取液上样后，乙醇95的乙醇洗脱，用波层色谱法跟踪和检测，收集白藜芦醇段洗脱液
步骤七:将收集到的白藜芦醇洗脱液，采用活性炭吸附脱色，然后用喷雾干燥法制得白藜芦醇结晶。
[0009]步骤一中、花生种子处理温度过高，生长虽快，但芽体细弱，易老化；温度过低，则生长慢，时间长易烂芽或子叶开张离瓣，品质差，经对比试验研究，用本发明的方法获得的花生芽此时花生芽中白藜芦醇含量最高，后续操作对白黎芦醇提取影响小。
[0010]步骤二中、采用冷冻法使花生芽中的水分基本除去，且不影响花生芽中的白藜芦醇等成分；对后续的操作不会造成影响。
[0011]本发明用水提取后再用酸水水解，再进一步经过用醇洗脱，不仅可以使原料中白藜芦醇得到充分的提取，同时还可以使花生芽中的白藜芦醇苷类水解为游离态的苷元，进一步增大白藜芦醇的含量，同时还可以通过本发明除去提取物中的杂质，是白藜芦醇纯度更高，品质更稳定。
[0012]由本方法提取白藜芦醇原料来源丰富，生产成本地，可操作性强，适合大规模生产，同时提取所得白藜芦醇纯度高，
具体实施方法
一下结合实施例对发明的内容作出详细的说明一种花生芽中白藜芦醇的提取方法，由以下步骤组成:
步骤一、花生种子处理:
选择粒大、籽粒饱满、色泽新鲜、表皮光滑、形状一致优质的花生种子，将选好的新鲜花生放入容器中加水，水量为花生重量40%?50%，在20?25°C的温水中，浸泡花生种12小时，浸种完毕后装入25°C恒温催芽箱，4小时淋一次25°C的温水，在第一次泡芽3d后出芽，将催好芽的种子进行一次挑选，去除未发芽的种子，将已发芽的种子进行二次催芽，在25°C恒温催芽箱中，8d花生芽长到7厘米，花生芽将红衣顶掉，叶芽露出芽瓣时催芽完成；此时花生芽中白藜芦醇含量达到最高值；
步骤二、花生芽白藜芦醇提取前处理:
将步骤一所得的花生芽沥干，沥干后将花生芽快速急冻，冻结温度为_30°C冻4小时，取出放到20?25°C的温水中解冻，解冻完用离心机甩干水；再重复操作速冻一次；预冻后的花生芽放入真空容器由借助真空系统将窗口内压力降到三相点以下，由加热系统供热给物料，使物料水分逐渐蒸发到半干呈疲软状，使花生芽中的水分基本除去，且不影响花生芽中的白藜芦醇等成分；
步骤三、速冻后的疲软花生芽挤压:
将呈疲软状花生芽用手工或机械方法挤压呈纤维状备用；
步骤四、花生芽纤维的水提:
将花生芽纤维放入100°C热水中，煎煮35分钟，过滤得水溶液，重复上述操作3次；将所得的滤液合并真空浓缩至30%备用；
步骤五:酸催化水解，
将步骤四所得的30%浓缩液按体积配比为8%的稀盐酸以8倍的量在60°C下水解6小时，反应后冷却，备用步骤六:纯化:
将反应后冷却液用预先处理好的大孔吸附树脂柱进行层析分离:大孔吸附树脂层析过程包括:1、大孔吸附树脂预处理:按产品使用说明方法进行的处理；2、上扬吸附:将步骤五所得的冷却液抽滤后，上预先处理好的大孔吸附树脂柱进行上样吸附3、层析洗脱:提取液上样后，乙醇95的乙醇洗脱，用波层色谱法跟踪和检测，收集白藜芦醇段洗脱液
步骤七:将收集到的白藜芦醇洗脱液，采用活性炭吸附脱色，然后用喷雾干燥法制得白藜芦醇结晶。
【主权项】
1.一种花生芽中白藜芦醇的提取方法，其特征在于由以下步骤组成: 步骤一、花生种子处理: 选择粒大、籽粒饱满、色泽新鲜、表皮光滑、形状一致优质的花生种子，将选好的新鲜花生放入容器中加水，水量为花生重量40%?50%，在20?25°C的温水中，浸泡花生种12小时，浸种完毕后装入25°C恒温催芽箱，4小时淋一次25°C的温水，在第一次泡芽3d后出芽，将催好芽的种子进行一次挑选，去除未发芽的种子，将已发芽的种子进行二次催芽，在25°C恒温催芽箱中，8d花生芽长到7厘米，花生芽将红衣顶掉，叶芽露出芽瓣时催芽完成；此时花生芽中白藜芦醇含量达到最高值； 步骤二、花生芽白藜芦醇提取前处理: 将步骤一所得的花生芽沥干，沥干后将花生芽快速急冻，冻结温度为_30°C冻4小时，取出放到20?25°C的温水中解冻，解冻完用离心机甩干水；再重复操作速冻一次；预冻后的花生芽放入真空容器由借助真空系统将窗口内压力降到三相点以下，由加热系统供热给物料，使物料水分逐渐蒸发到半干呈疲软状，使花生芽中的水分基本除去，且不影响花生芽中的白藜芦醇等成分； 步骤三、速冻后的疲软花生芽挤压: 将呈疲软状花生芽用手工或机械方法挤压呈纤维状备用； 步骤四、花生芽纤维的水提: 将花生芽纤维放入100°C热水中，煎煮35分钟，过滤得水溶液，重复上述操作3次；将所得的滤液合并真空浓缩至30%备用； 步骤五、酸催化水解: 将步骤四所得的30%浓缩液按体积配比为8%的稀盐酸以8倍的量在60°C下水解6小时，反应后冷却，备用； 步骤六、纯化: 将反应后冷却液用预先处理好的大孔吸附树脂柱进行层析分离:大孔吸附树脂层析过程包括:1、大孔吸附树脂预处理:按产品使用说明方法进行的处理；2、上扬吸附:将步骤五所得的冷却液抽滤后，上预先处理好的大孔吸附树脂柱进行上样吸附3、层析洗脱:提取液上样后，乙醇95的乙醇洗脱，用波层色谱法跟踪和检测，收集白藜芦醇段洗脱液； 步骤七、将收集到的白藜芦醇洗脱液，采用活性炭吸附脱色，然后用喷雾干燥法制得白藜芦醇结晶。
【专利摘要】本发明涉及植物成分提取领域，特别是一种花生芽中白藜芦醇的提取方法，针对现有的白藜芦醇提取现状，本发明的目的是提供一种原料来源丰富,且白藜芦醇含量高,提取简便,方便可行,便于大规模生产的白藜芦醇的提取方法：实现上述目的的技术方案是：一种花生芽中白藜芦醇的提取方法，由以下步骤组成：步骤一、花生种子处理：步骤二、花生芽白藜芦醇提取前处理：步骤三、速冻后的疲软花生芽挤压：步骤四、花生芽纤维的水提：步骤五：酸催化水解；步骤六：纯化：步骤七：结晶：由本方法提取白藜芦醇原料来源丰富，生产成本地，可操作性强，适合大规模生产，同时提取所得白藜芦醇纯度高。
【IPC分类】C07C37/00, C07C39/21, C07C37/68
【公开号】CN105016981
【申请号】CN201510393064
【发明人】李胜, 赵芮停
【申请人】李胜
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2015年7月7日