TCCTCCTCCATGCCAAAACCCAAAAATCCCTTGGTGAAAGTTTTGGGGTAAAATAAAAACTCCTGAACTAATATACC TGGTTGGGTGGTGGGGGCCCTCCCCCCATGGGGAACAAAAAACCCACTAAAGGTCCCTTCCCAAGGTTCCCCACAGA AAAG〇
[0028] 以下培养基根据需要进行使用。后续实验均为说明毕赤酵母YPD-YL2所具有的除 臭效果，以及含有毕赤酵母YPD-YL2的固体除臭剂、复合菌剂的运用范围及其效果进行，实 际保护范围并不限于实验中所列技术方案。
[0029] 本菌株的培养基：
[0030] YH)液体培养基：1000ml中的培养基中，含酵母浸出粉5g，蛋白胨10g，葡萄糖 20g，调节pH值约为5. 4,灭菌后室温保存，得到YH)液体培养基；
[0031] YPD固体培养基：1000ml中的培养基中，含酵母浸出粉5g，蛋白胨10g，葡萄糖 20g，调节pH值约为5. 4后，14g琼脂粉，灭菌后，在超净工作台上倒平板，后封闭保存。
[0032] YPD-YL2 菌株培养：
[0033] 菌株分离培养：用接种环或接种针划线接种于含YH)固体培养基平板内，培养温 度为30°C，培养时间为2-3天，得到单克隆菌落；
[0034] 菌株接种培养：挑取单克隆菌落，接种于含5ml的无菌试管中，30°C，200rpm振荡 培养48~72小时，至培养基浑浊；
[0035] 菌液保存：将上述含菌株的液体培养基和灭菌的甘油按7 : 3的比例在超净工作 台中混合后，保存在-80 °C超低温冰箱中；
[0036] 发酵液生产：菌种经扩培后，按1%接种于50L发酵罐中，好氧发酵，30°C培养3天 左右。
[0037] 本文中所用发酵菌液：用接种环或接种针划线接种于含YPD固体培养基平板内， 培养温度为30°C，培养时间为3天，得到单克隆菌落，挑取单克隆菌落，接种于含5ml的无菌 试管中，30°C，200rpm振荡培养48~72小时，至培养基浑浊。菌种经扩培后，按1 %接种于 50L发酵罐中，好氧发酵，30°C培养3天左右，得到毕赤酵母YPD-YL2发酵液。如果所需发酵 液量较少时可按小量除臭液的生产方法进行：将菌种经斜面培养基活化后，分别接种到装 有500ml液态培养基的三角瓶中，置于恒温摇床培养箱中，在30°C恒温条件下，200r/分钟 培养3-5天既得毕赤酵母YPD-YL2发酵液。菌种增扩培养步骤可以参照CN201210030324. 0 中公开的方法进行扩增培养得到相应和发酵液。
[0038] 本文中氢氧化镉吸收液：称量4. 3g硫酸镉（3CdS04 ? 8H20)、0? 3g氢氧化钠和10g 聚乙烯醇磷酸铵分别溶于水中，临用时，将三种溶液相混合，强烈振摇至完全混溶，再用水 稀释至1L取用。此溶液为白色悬浮液，每次用时要强烈振摇均匀再量取，贮于冰箱中可保 存一周。
[0039] 本文中所用感官评价法为召集100名嗅觉正常的志愿者，分别对不同处理样进行 人体嗅觉辨识。对感受进行评分后统计结果求取平均值。其中评分标准为：5分代表无恶 臭；4分代表轻微恶臭；3分代表存在恶臭；2分代表没有改变的恶臭；1分代表恶臭增强。统 计结果分为三级：+++表示强恶臭味，所得分数为1~2分；++表示恶臭味，所得分数为3~ 4分；+表不轻微恶臭味，所得分数为4~5分。
[0040] 实验1、毕赤酵母YPD-YL2发酵液对氨水和硫化氢降解效果
[0041 ] 取18ml菌液于2L大烧杯中，并加入浓度为1000ml/L的氨水2ml，再往大烧杯中 放入装有20ml浓度为0. 005mol/L的硫酸吸收液的小烧杯（硫酸吸收液：量取2. 8ml密度 为1. 84g/ml的浓硫酸加入水中稀释定容至1L。临用时再稀释10倍），盖上双层塑料薄膜 将大烧杯密封密封，进行降氨实验。
[0042] 取18ml菌液放入2L大烧杯中，并加入2ml浓度为100mg/L的硫化氢溶液，之后再 往大烧杯中放入装有20ml氢氧化锦吸收液的50ml小烧杯，盖上双层塑料薄膜密封，开展降 硫化氢试验。
[0043] 进行上面两个实验时，均以等量的无菌水分别替代氢氧化镉吸收液和硫酸吸收液 作为空白对照组，在相同条件下进行实验。实验条件为：置于30°C的培养箱中培养，每个处 理重复3次。24小时后，分别取出大烧杯中的小烧杯，采用纳氏试剂比色法测定氨的去除 率，采用亚甲基蓝比色法测定硫化氢的去除率，所得结果列于表1中。
[0044] 表1除臭液氨气和硫化氢去除率结果表
[0045]
[0046] 由上可见，使用本发明提供的毕赤酵母YPD-YL2可以有效分解气体中的氨气和硫 化氢气体，平均对于氨气的去除率可达95. 6%，对硫化氢气体的去除率可以达到72. 6%。 相对未使用发酵液的空白对照样两种气体的去除效果明显。这可能与发酵液中所含菌体对 氨气和硫化氢气体的利用率较高，从而提高了对空气中氨气和硫化氢气体的去除效率。实 验过程中所用烧杯均处于密封状态，这有利于防止氨气和硫化氢气体的流失，有利于防止 其他气体对发酵液分解结果的干扰。所得实验结果可靠。
[0047] 实验2、毕赤酵母YPD-YL2对生活垃圾的除臭效果
[0048] 生活垃圾的除臭效果检测：生活垃圾来源于学校食堂的厨房垃圾，主要成分为剩 饭菜、果蔬皮肩、塑料袋和木质纤维等物质。按毕赤酵母YPD-YL2发酵液和水体积比为1 : 3 混合得到除臭稀释液，取新鲜生活垃圾总质量10 %的除臭稀释液，将其均匀喷洒于生活垃 圾上，实现接种。同时以相同条件，以稀释除臭液所用水作为对照，在相同实验条件下进行 空白实验。分别于接种后4、8、24小时，采用感官评价法测定臭气等级。结果列于表2中。
[0049] 表2毕赤酵母YPD-YL2发酵液对生活垃圾除臭结果表
[0050]
[0051] 注：+++表示强恶臭味；++表示恶臭味；+表示轻微恶臭味道
[0052] 由表2可见，处理前，生活垃圾恶臭强烈，使用了本发明提供的毕赤酵母YPD-YL2 发酵液处理后的生活垃圾，随着处理时长的增加，垃圾产生的臭味强度逐渐降低，当接种24 小时后，垃圾的臭味降至轻微，基本达到人体可接受范围。由此可知，本发明提供的毕赤酵 母YPD-YL2的发酵液中所含菌体本身一方面可以充分利用垃圾中的各类有机物作为自身 所需碳源和氮源，对垃圾进行分解利用，另一方面菌体在生长过程中所产生的各类酶还可 以对菌体不能直接利用的物质进行分解，以利于后续的菌体利用，从而在无需添加任何额 外的碳、氮源的情况下，提高毕赤酵母YPD-YL2发酵液对垃圾的分解能力。实现对垃圾中产 生恶臭气体的物质的分解。另一方面，毕赤酵母YPD-YL2菌体所产各类酶，还可以对已经产 生的恶臭气体中的主要成分进行分解，从而降低已经产生的恶臭气体的浓度。两种作用协 同作用，提高了经过处理后垃圾臭味降低的效果的可持续性，无需反复添加发酵液，还能抑 制新的恶臭形成。
[0053] 实验3、毕赤酵母YPD-YL2发酵液制得固体除臭剂的脱硫实验
[0054] 毕赤酵母YPD-YL2发酵液制得固体除臭剂的制作：取毕赤酵母YPD-YL2发酵液 100ml与200g木肩均匀混合后，在35°C下对所得木肩进行干燥，至其含水率为60%时，得到 固体除臭剂，用于后续脱硫实验中。同时以灭菌水按照如上方法干燥得到空白木肩，作为空 白对照实验所用空白除臭菌剂。