一种可食用固定化酵母载体及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于食品领域，具体设及一种可食用固定化酵母载体及其制备方法和应 用。
【背景技术】
[0002] 固定化酵母技术在酿酒产业中有很多游离酵母所不能及的优点，运种技术是利用 物理、化学等因素将细胞约束或限制在一定空间界限内，但细胞仍保留其催化活性，并具有 能反复或连续使用的活力。和游离细胞相比，固定化细胞提供了很多优势：高细胞密度或高 细胞负载量，缩短了反应时间，提高了单位体积的产量从而降低了成本费用，固定化细胞可 W稳定再生从而能够长时间的重复利用，形成连续过程后可提高洗脱率从而降低损失，提 高底物利用率，降低污染微生物的几率，简化过程设计，获得均一的产品W及提高细胞对最 终产物的忍耐力和保护细胞免受外界不受环境的影响。
[0003] 一般天然固定化载体会选用自然界中大量存在，低成本且食品级的载体更加安 全，运种固定化方式比起一些利用化学物质制成的固定化载体是消费者能易于接受的也是 更受欢迎的。现在用于酵母固定化的可食用载体主要有一些W水果本身为材料的如无花 果、红要干、葡萄果皮、水葫芦茎和甘薦渣作为载体，W运些天然材料为载体固定酵母表现 出很高的操作稳定性，发酵速度明显高于游离细胞或其他商业化过程，为此开发出新材料 的、酵母固定化性能更优良的，安全性更高的，并且价格更低的食用级别的固定化载体是酿 酒企业所希望看到的。
【发明内容】
[0004] 本发明提供了一种W面筋蛋白为原料的可食用固定化酵母载体及其制备方法。
[0005] 本发明公开了面筋球作为酵母的固定化载体的应用，作为固定化载体的面筋球经 烘烤、灭菌处理。具体地，是用水和谷航粉调和成面筋团，经发酵之后制成直径为1~2cm 的面筋球，放置烘箱烘烤之后置于干燥环境中灭菌。
[0006] 本发明还公开了W面筋球为载体的固定化酵母，是W经烘烤、灭菌的面筋球为固 定化载体，将固定化载体浸泡于酿酒酵母菌种扩大培养而成的酵母悬浮液中，培养16~ 24h得到面筋球固定化酵母。
[0007] 进一步地，固定化载体通过下述方法制成：向溫度为25~40°C的水中添加安琪活 性干酵母，安琪活性干酵母的添加量为谷航粉质量的0. 25%~0. 35%，然后注入谷航粉并 调和成面筋团，将面筋团于35~40°C发酵1~化，发酵好的面筋团制成直径1. 5~2cm的 面筋球，放置于104~108°C的烘箱中4~6小时后，置于干燥环境中灭菌备用。
[0008] 本发明还公开了一种W面筋蛋白为原料固定化酵母发酵生产酒精的方法，包括如 下步骤：
[0009] (1)制备酿酒酵母种子液，酵母菌种经扩大培养成酵母悬浮液；
[0010] (2)固定化载体的制备及预处理：向一定量溫度为25~40°C的自来水中按添加安 琪活性干酵母，安琪活性干酵母的添加量为谷航粉比例的0. 25%~0. 35%，然后注入谷航 粉并调和成面筋团，将面筋团容器封盖置于溫暖湿润的地方发酵1~化，发酵好的面筋团 从外表可W看到有很多气孔。然后将面筋制成直径1. 5~2cm的小球，放置105°C的烘箱中 4~5小时后，置于干燥环境中灭菌备用。
[0011] (3)固定化酵母的制备：将得到的灭菌后的面筋小球按重量比1:5~7的比例浸 泡于酵母浸出粉腺葡萄糖液体培养基，按比例接种酿酒酵母种子液后于28~30°C18化pm 培养16~2化得到酵母小球的固定化酵母，可用于制备果酒。
[0012] 本发明与现有技术相比，W面筋蛋白为原料通过发酵和烘烤的过程制作出的可食 用的固定化酵母载体，对酵母有着良好的吸附性、相比于传统的游离酵母发酵过程具有发 酵速度快、发酵效率高的特点，同时在反复发酵过程中表现出具有一定的机械强度和操作 稳定性，可W在反复发酵中得W应用，制作运种载体的原材料来源广泛，并且食品级的载体 更加安全。
【附图说明】
[0013] 图1是游离酵母组与面筋球固定化酵母组在发酵过程中还原糖的含量的变化
【具体实施方式】
[0014]W下结合实施例，对本发明进一步说明：
[0015] 实施例1、一种W面筋蛋白为原料的可食用载体固定化酵母生产山植果酒的方法， 包括如下步骤：
[0016] (1)酿酒酵母种子液的制备：将酿酒酵母依次按照斜面、100mL摇瓶，200ml摇瓶进 行扩大培养制备酿酒酵母种子液。
[0017] 似面筋小球的制备：将50血35°C的溫自来水中放入0.7g安琪活性干酵母，慢慢 注入200g谷航粉并调和成面筋团，将面筋团容器封盖置于25°C溫暖湿润的地方发酵1.化， 发酵好的面筋团从外表可W看到有很多气孔。然后将面筋团制成直径为1. 5cm的小球，放 置106°C的烘箱中5小时后，置于干燥无菌环境中备用。
[0018] (3)固定化酿酒酵母与游离酵母的制备：在无菌操作台将20g的面筋球置于一号 瓶250ml酵母浸出粉腺葡萄糖液体培养基中，同时准备二号瓶空白组即酵母浸出粉腺葡萄 糖液体培养基250ml和=号瓶20g面筋球置于250ml无菌水，向一号和二号瓶分别注入 2yL酿酒酵母种子液，S组瓶子28°C18化pm培养1化之后，分别将；组的液体培养基和无 菌水6000g、15min离屯、，称量酵母菌湿重和冲离下来面筋渣的湿重，固定在载体上的酵母 重量=-二号瓶离屯、后湿重-(一号瓶离屯、后湿重-S号瓶离屯、湿重）。
[0019] (4)山植汁的制备：挑选新鲜无病虫害的山植洗净，去巧，与水于80~85°C条件下 进行预煮浸泡lOmin，冷却打浆之后用果胶酶酶解，之后离屯、取上清液，进行成分调整，果 料与水重量比为1:2. 5,添加白砂糖使糖度调整为30g/L。
[0020] (5)接种主发酵：将20g的固定化酵母接种到装有400g澄清山植汁的广口烧瓶 中，另一游离酵母对照组添加与固定在载体上酵母菌同样湿重的游离酵母，在28°C下主发 酵10天，每两天测定发酵液中残留还原糖的含量，发酵结束后测定面筋球组酒精含量为 11.5% (v/v)、发酵液中还原糖的含量为17.83g/l，游离酵母组酒精含量为7.5% (v/v)、发 酵液中还原糖的含量为72. 26g/l，发酵过程中发酵液还原糖含量变化如图1，可W看出面 筋球固定化酵母组的发酵速率快于游离酵母组，发酵效率较高。
[0021] 实施案例2、一种W面筋蛋白为原料的可食用载体固定化酵母重复发酵山植果酒 的方法，包括如下步骤：
[0022] (1)酿酒酵母种子液的制备：将酿酒酵母依次按照斜面、100mL摇瓶，200ml摇瓶进