在1-或d-PLA的情况中，晶体结构取代无定形结构，其导致较慢的降解 和预期的较慢释放。一般而言，药物从基质控制系统释放不提供零级动力学，除了用于制造 的复杂的制作过程（例如，非均匀的浓度分布、几何结构改变等）。
[0018] 对于碱性/亲核药物（例如，带有叔氨基的化合物），已经观察到意料 不到的早期和/或几乎线性释放曲线形式的PLGA微粒（Η.V.Maulding等人， ''Biodegradablemicrocapsules:accelerationofpolymericexcipienthydrolytic ratebyincorporationofabasicmedicament"，JournalofControlledRelease 3(1986) 103-117 ;Y.ChsnandC.G.Pitt，〃Theaccelerationofdegradation-controlled drugdeliveryformpolyestermicrospheres"，JournalofControlledRelease 8(1989)259-265 ;)D非常快速的药物释放（在体外和体内都观察到）归因于由碱性药物引 起（碱催化的水解）的聚合物基质的水解降解（聚合物链酯键的水解裂解）的加速。引起 PLGA聚合物水解的这样的药物的实例包括但不限于盐酸硫利哒嗪、酮替芬、桂利嗪、茚诺洛 尔（indenorol)、可乐定、纳曲酮、哌替啶（merepidine)、美沙酮、异丙嗪和利培酮。已证明 化合物的未溶剂化的胺氮的空间可及性限定了其催化效率和聚合物断链的加速程度与进 入聚合物基质的碱的初始浓度载药量）成比例。具体地，将盐酸硫利哒嗪掺入PLGA微 球，导致在体外和体内二者发生几乎立即释放，期与聚合物如PLGA的预期结果相反，PLGA 在大约一年内降解并且在数周至数月内释放药物。另外的胺、酮替芬被用于制造微球，并观 察PLGA和类似物的体外释放结果。对于含有哌替啶、美沙酮和异丙嗪的微粒，也观察到与 快速释放相关的加速的降解速率。
[0019] 诱发聚酯主链诸如PLGA聚合物的水解的另一种活性化合物是利培酮。利培酮（也 被称为4-[2-[4-(6-氟苯并[dj异$恶唑-3-基）-1-哌啶基]乙基]-3-甲基-2, 6-二氮杂 双环[4.4.0]癸-1，3-二烯-5-酮，并且以商标名RISPERDAL?销售）是非典型的抗精 神病药物，指示用于精神分裂症的治疗。作为商标名为RISPERDALC0NSTA的缓释肠胃外长 效药物，利培酮产品是市场中可获得的。Risperdalconsta产品由含有长效药物悬浮液的 微球的小瓶和含有悬浮液的适合溶溶剂的预填充的注射器组成。微粒的固体粉末与稀释剂 混合以成为悬浮液，其被每两周肌内给药。Risperdalconsta的体内释放曲线如下：具有 低的爆发效果3. 5% )的典型的三阶段释放模式，没有释放的4周的潜伏期，和在4-6 周之间的主要药物释放。
[0020] 与安慰剂微粒（没有利培酮）相比，含有利培酮的PLGA微粒的降解研究揭示利培 酮的存在加速了PLGA聚合物的降解速率（F.Selmin,P.Blasi和P.P.DeLuca,"Accelerated PolymerBiodegradationofRisperidonePoly(D,L-Lactide-Co-Glycolide) Microspheres,AAPSPharmSciTech,Vol. 13,No. 4 (2012) 1465-1472)。当利培酮和PLGA聚 合物共溶解在有机溶剂中以制备将在水性连续相中乳化的油相时，在微粒的制备期间也观 察到利培酮的水解效应。专利EP1282404提供了通过在制作过程期间调节亲核化合物/聚 合物溶液的保留时间（holdtime)和温度用于控制形成含有亲核化合物的微粒的聚合物的 分子量的方法。通过利培酮物质的存在加速微粒的聚合基质导致快速药物释放和通常不期 望的线性释放曲线。
[0021] 因此，本领域内存在用于控制含有碱性/亲核性化合物诸如利培酮的最终微粒产 品的释放曲线的改进的方法的需要。可选地，本发明还适于具有差的水溶性并且需要大于 20%w/w的高载药量的疏水化合物。专利EP-B-1140029要求保护通过调节在微粒的制备期 间执行的干燥的程度用于制备具有"s"形释放曲线的含有利培酮的PLGA微粒的方法。具 体地，专利公开了颗粒的额外的中间干燥步骤可提供S形释放曲线。然而，该方法增加了处 理步骤的数目并且使制造复杂化并且增加了当微粒产品意在用于人类使用时的风险，并且 生产应当在无菌条件下进行。
【发明内容】
[0022] 本发明涉及显示碱性/亲核性活性药物化合物的期望的释放曲线的生物可降解 的聚合微粒的制备，该活性药物化合物趋于加速聚合物基质的降解速率，引起非受控的早 期和/或线性药物释放。可选地，本发明还适用于具有差的水溶性并且需要大于20%w/ w的高载药量的疏水化合物。更具体地，本发明涉及含有碱性/亲核性化合物诸如利培酮 的PLGA微粒的制备，其按照S形释放曲线，其特征在于初始的延滞期、陡峭的中间释放期和 平坦的最终释放期。在进一步的方面，本发明涉及负载碱性/亲核性化合物一一诸如利培 酮一一的微粒的制备，当在37°C(正常条件）下进行溶解时，其在20天内释放小于10%的 药物，在第30天和第35天内释放50 %，并且在至多第40天内释放超过80 %。
[0023] 在一个方面中，本发明涉及用于制造微粒的简单方法，包括水包油（o/w)乳化溶 剂萃取和/或溶剂蒸发，随后单一干燥步骤。在进一步的方面，发明人提出了用于PLGA聚 合物的生物可降解的微粒的制备方法，其具有包含在微粒中的碱性化合物或具有差的水溶 性的疏水化合物的S形释放曲线，该方法包括制备水包油乳液，其中油相包括PLGA、化合物 和有机溶剂，并且水相包括水、表面活性剂、任选地缓冲液和与油相相同的有机溶剂，然后 进行乳液的溶剂萃取/蒸发步骤，随后是硬化的微粒的单一干燥步骤。
[0024] 优选地，缓冲液选自：磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐和Tris缓冲液。理想地，缓冲液的 pH被调节至化合物具有较低溶解度的值。通过控制pH，在猝灭步骤期间的乳化和/溶剂萃 取与蒸发过程期间，化合物至外部相的任何渗漏被最小化。
[0025] 利用术语"单一干燥步骤"，表示仅需要一个干燥步骤，以实现发明的益处，并且不 需要额外的清洗和干燥步骤。
[0026] 更具体地，用于含有至少一种碱性/亲核性化合物诸如利培酮或具有差的水溶性 的疏水化合物的PLGA微粒的制备方法包括：
[0027] i.通过将PLGA聚合物和化合物溶解在有机溶剂中制备内部油相；有机溶剂中的 聚合物浓度高达5-40%wt.，并且聚合物溶液呈现IO-1000 cP，优选地10-200cP的粘度，
[0028] ii.制备由聚乙烯醇（PVA)水溶液，任选地水性缓冲溶液和用于油相的有机溶剂 组成的外部水相，并且该水性缓冲溶液的pH被调节至药物呈现较低溶解性的值，
[0029] iii.通过机械搅拌或使用高剪切均化器将内部相乳化进入外部相，
[0030] iv.将乳液转移进入温度设定和恒温控制的猝灭介质中，并优选地使猝灭介质的 体积控制为溶解乳液油质微液之外的所有有机溶剂所需的体积的〇. 7至3倍（优选地1 倍），
[0031] V.分离得到的硬化的微粒并任选地清洗微粒，和，
[0032] vi.在单一干燥步骤中干燥微粒，优选地通过真空干燥，而没有进一步清洗和/或 干燥步骤。
[0033] 通过调节制造方法的过程参数，可以控制释放曲线。在一个方面中，实现期望的释 放曲线的关键过程参数包括：
[0034] -使用内部/油相中使用的有机溶剂使外部/水相饱和的程度
[0035] -内部/油相的聚合物浓度
[0036] -猝灭步骤的温度
[0037] 更具体地，通过下述步骤实现利培酮的初始延滞期和基本上S形的释放曲线：
[0038] -在乳化步骤使用以内部/油相中使用的有机溶剂过饱和的外部相，并在低温（优 选地，温度为5°C至15°C之间）下进行猝灭步骤，或
[0039] -在乳化步骤使用以内部/油相中使用的有机溶剂过饱和的外部相，并在高温下 进行猝灭步骤，或
[0040] -在乳化步骤使用具有低聚合物浓度的内部/油相和以内部/油相中使用的有机 溶剂过饱和的外部相，并在低温下进行猝灭步骤
[0041] 因此，本发明涉及通过以下步骤制备具有利培酮的S形释放的微粒：
[0042] -使用含有在饱和点以上2至10倍的有机溶剂的外部相，并在低至5°C或更低的 温度下进行猝灭，或
[0043] -使用含有在饱和点以上2至10倍的有机溶剂的外部相，并在30°C至40°C之间的 较高温度下进行猝灭。
[0044] -使用具有低聚合物浓度（优选地10%wt.以下）的内部/油相和以有机溶剂饱 和的外部相，并在低至5°C或更低的温度下进行猝灭。
[0045] 优选地，外部水相的有机溶剂与内部油相所使用的一样。额外地，在乳化之前将溶 剂加入外部相。待用于内部水相的优选的溶剂选自下述中的一种或多种：乙酸乙酯、四氢呋 喃、乙腈、二氯甲烷、六氟异丙醇、氯仿和丙酮。更优选地，在本发明中使用二氯甲烷。
[0046] 本发明的一个特征是其提供了以受控的方式释放利培酮活性物质的微粒。具体 地，本发明有利地提供含有利培酮的微粒，其按照S形释放模式释放利培酮。本发明的一个 优点是需要有限数目的处理步骤。对于无菌制备诸如用于人类使用的缓释肠胃外长效药 物，限制处理步骤是必要的。
【附图说明】
[0047] 图1图解了制