l/g ;酸性复合蛋白酶的加入量为鱿鱼扇形骨干粉重量的0. 05% ;超声频率控制40KHZ ；
(4)二次脱钙：将步骤（3)得到洗涤至中性的滤渣用6mol/L盐酸溶液在常温下浸泡2h，至无气泡产生，过滤，收集滤渣洗涤至中性；
(5)成品：将步骤⑷中得到二次脱妈、洗涤至中性的滤渣在60°C条件下干燥2h，即得β -甲壳素。
[0019]本实施例所提供的方法，其制备所需时间短；酶法脱蛋白，反应条件温和，不会对β -甲壳素的结构造成影响，不污染环境，得到产品纯度高，色泽好。
[0020]实施例3
一种利用鱿鱼扇形骨制备甲壳素的方法，其经过下列工艺步骤：
(1)原料预处理：选取新鲜的鱿鱼扇形骨为原料，40°C条件下干燥，干燥后粉碎至粉末状，过3目筛进行筛选，备用；
(2)超声辅助EDTA脱钙：定量称取步骤（1)中得到的筛选后的鱿鱼扇形骨粉末，加入Η)ΤΑ脱钙液，料液比（mg/L)为1 : 12,加入浓盐酸，调节pH值4. 0,在25°C条件下超声水浴反应50min，超声频率控制71KHZ，得脱钙后的反应液；其中，EDTA脱是称取EDTA加入60°C的蒸馏水中，搅拌，溶解，制得；其中，EDTA与蒸馏水的比例为1 : 4(m/v)。
[0021](3)超声辅助酸性复合蛋白酶脱蛋白：将步骤⑵中得到的脱钙后的反应液调节pH值为4. 0,在45°C条件下加入酸性复合蛋白酶，超声辅助酶解时间为8h，所得产物过滤，收集滤渣洗涤至中性；其中，酸性蛋白酶40%，纤维素酶50%，中性蛋白酶10%，酶活力>10000ul/g ;酸性复合蛋白酶的加入量为鱿鱼扇形骨干粉重量的0. 01% ;超声频率控制71KHZ ；
(4)二次脱钙：将步骤（3)得到洗涤至中性的滤渣用4mol/L盐酸溶液在常温下浸泡4h，至无气泡产生，过滤，收集滤渣洗涤至中性；
(5) 成品：将步骤（4)中得到二次脱钙、洗涤至中性的滤渣在50°C条件下干燥12h，即得β -甲壳素。
[0022]本实施例所提供的方法，其在脱钙、脱蛋白过程结合超声波辅助作用，所需时间短；其采用酶法脱蛋白，反应条件温和，不会对β-甲壳素的结构造成影响，不使用强酸强碱，不污染环境，最大限度的去除钙盐和蛋白质，得到产品纯度高，色泽好。
[0023]实施例4
一种利用鱿鱼扇形骨制备甲壳素的方法，其经过下列工艺步骤:
(1)原料预处理:选取新鲜的鱿鱼扇形骨为原料，50°C条件下干燥，干燥后粉碎至粉末状，过5目筛进行筛选，备用；
(2)超声辅助EDTA脱钙:定量称取步骤(1)中得到的筛选后的鱿鱼扇形骨粉末，加入Η)ΤΑ脱钙液，料液比(mg/L)为1: 20，加入浓盐酸，调节pH值5.0，在35°C条件下超声水浴反应50min，超声频率控制24KHZ，得脱钙后的反应液；其中，EDTA脱是称取EDTA加入70°C的蒸馏水中，搅拌，溶解，制得；其中，EDTA与蒸馏水的比例为1: 4(m/v)。
[0024](3)超声辅助酸性复合蛋白酶脱蛋白:将步骤(2)中得到的脱钙后的反应液调节pH值为6.0，在45°C条件下加入酸性复合蛋白酶，超声辅助酶解时间为8h，所得产物过滤，收集滤渣洗涤至中性；其中，酸性蛋白酶30%，纤维素酶50%，中性蛋白酶20%，酶活力>10000ul/g ;酸性复合蛋白酶的加入量为鱿鱼扇形骨干粉重量的0.05% ;超声频率控制24KHZ ；
(4)二次脱钙:将步骤(3)得到洗涤至中性的滤渣用6mol/L盐酸溶液在常温下浸泡4h，至无气泡产生，过滤，收集滤渣洗涤至中性；
(5)成品:将步骤(4)中得到二次脱钙、洗涤至中性的滤渣在60°C条件下干燥10h，即得甲壳素。
[0025]本实施例所提供的技术方案，其在脱钙、脱蛋白过程结合超声波辅助作用，所需时间短；其采用酶法脱蛋白，反应条件温和，不会对甲壳素的结构造成影响，不使用强酸强碱，不污染环境，得到产品纯度高，色泽好。
【主权项】
1.一种利用鱿鱼扇形骨制备β -甲壳素的方法，其特征在于:其经过下列工艺步骤: (1)原料预处理:选取新鲜的鱿鱼扇形骨为原料，40?60°C条件下干燥，干燥后粉碎至粉末状，筛选后备用； (2)超声辅助EDTA脱钙:定量称取步骤(I)中得到的筛选后的鱿鱼扇形骨粉末，加入EDTA脱钙液，料液比(mg/L)为1: 12?28，加入浓盐酸，调节pH值4.0?5.0，在25?35°C条件下超声水浴反应20?50min，得脱钙后的反应液； (3)超声辅助酸性复合蛋白酶脱蛋白:将步骤(2)中得到的脱钙后的反应液调节pH值为4.0?6.0，在45?55°C条件下加入酸性复合蛋白酶，超声辅助酶解时间为6?8h，所得产物过滤，收集滤渣洗涤至中性；其中，酸性复合蛋白酶的加入量为鱿鱼扇形骨干粉重量的0.01 ?0.05% ； (4)二次脱钙:将步骤(3)得到洗涤至中性的滤渣用4?6mol/L盐酸溶液在常温下浸泡2?4h，至无气泡产生，过滤，收集滤渣洗涤至中性； (5)成品:将步骤(4)中得到二次脱钙、洗涤至中性的滤渣在50?60°C条件下干燥2?12h，即得β -甲壳素。2.根据权利要求1所述的一种利用鱿鱼扇形骨制备β-甲壳素的方法，其特征在于:所述的步骤(I)中鱿鱼扇形骨粉碎的粒度为3?10目。3.根据权利要求1所述的一种利用鱿鱼扇形骨制备β-甲壳素的方法，其特征在于:所述的步骤(2)中EDTA脱钙液是定量称取EDTA加入60?70°C的蒸馏水，搅拌，溶解，制得；其中，EDTA与蒸馏水的比例为1: 2?4(m/v)。4.根据权利要求1所述的一种利用鱿鱼扇形骨制备β-甲壳素的方法，其特征在于:所述的步骤⑵中的超声辅助EDTA脱钙的超声频率控制24?71ΚΗΖ。5.根据权利要求1所述的一种利用鱿鱼扇形骨制备β-甲壳素的方法，其特征在于:所述的步骤(3)中酸性复合蛋白酶是由下列重量百分的组分组成:酸性蛋白酶30?60%，纤维素酶20?50%，中性蛋白酶10?20%，酶活力>10000ul/g。6.根据权利要求1所述的一种利用鱿鱼扇形骨制备β-甲壳素的方法，其特征在于:所述的步骤(3)中超声辅助酶解的超声频率控制24?71ΚΗΖ。
【专利摘要】本发明公开了一种利用鱿鱼扇形骨制备β-甲壳素的方法。其主要解决酸碱法提取甲壳素存在环境污染严重、易造成甲壳素降解的问题。其是将鱿鱼扇形骨干燥，粉碎，筛分后加入EDTA脱钙液及浓盐酸，调节pH值，超声水浴，得脱钙后的反应液；反应液加入酸性复合蛋白酶，超声辅助酶解，过滤，滤渣洗涤至中性；滤渣用盐酸溶液浸泡二次脱钙后干燥，得β-甲壳素产品。本发明采用超声波辅助EDTA法及酶法制备β-甲壳素所需时间短，操作简单，条件温和，污染环境少，不会对β-甲壳素的结构造成影响，产品纯度高，色泽好。
【IPC分类】C08B37/08
【公开号】CN105348411
【申请号】CN201510824633
【发明人】杨劲峰, 吴文惠, 高凯莉, 包斌
【申请人】荣成广润水产食品有限公司
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年11月24日