种于培养基中，在30°C，光照 强度815~8401x下培养7d，配制成细菌悬液，在660nm波长处测定的吸光度（0D66。）作为 检测菌体生长的标。分别测得实施例1，实施例2,实施例3和普通培养基的生长情况曲线， 如图2所示。
[0091] 实施例5
[0092]Gemini表面活性合成方 法：
[0093] 反应路线如下所示，
[0094]
[0095] 合成步骤：
[0096] 步骤一，称取1份间二苯酚乙烷，加入适量DMF作为溶剂，搅拌溶解后按照间二苯 酚乙烷：氯化苄：无水碳酸钾摩尔比1:2. 1 :4,向溶液中加入氯化苄和无水碳酸钾，升温至 80°C，恒温反应3~4h;
[0097] 步骤二，减压蒸馏将DMF蒸干，加入适量无水二硫化碳作为溶剂，按照间二苯酚乙 烷：三氧化铝摩尔比1:3向溶液中加入无水三氧化铝，升温至45°C，保持恒温，向溶液中按 照间二苯酚乙烷：辛酰氯摩尔比1:2. 1向溶液中缓慢滴加辛酰氯，反应6~8h;
[0098] 步骤三，自然冷却至常温，通过旋转蒸发仪去除溶剂，用浓度为15%的盐酸处理反 应体系，生成白色沉淀；
[0099] 步骤四，过滤，将固体置于40°C烘箱中真空干燥，制得中间I;
[0100] 步骤五，称取1份中间体I，加入适量的一缩二乙二醇作为溶剂搅拌溶解，按照中 间体I冰合肼：氢氧化钾摩尔比1:2:2向溶液中加入水合肼和氢氧化钾，升温至130°C，反 应3h后，升温至210°C，回流反应8h，自然冷却至常温，用石油醚萃取产物，无水氯化钙，制 得中间体II;
[0101] 步骤六，称取一份中间体II，加入适量氯仿作为溶剂，搅拌溶解，将体系置于冰浴 的条件下搅拌l〇min，按照中间体II:发烟硫酸摩尔比1:10,向体系中加入50%发烟硫酸 (含50%S03)，搅拌30min后，自然恢复至常温继续搅拌5h，通过旋转蒸发仪去除掉溶剂， 用乙醚萃取产物，无水硫酸钠干燥，得到中间体IV;
[0102] 步骤七，称取一份中间体IV，加入适量甲醇作为溶剂，搅拌溶解，按照中间体IV: 钯碳：氢气摩尔比1:1. 5:10向体系中加入钯碳和氢气，室温下搅拌12h，过滤后，通过旋转 蒸发仪去掉溶剂，得到中间体V;
[0103] 步骤八，称取一份中体V，用10%的氢氧化钠水溶液中和磺化产物至pH= 7,石油 醚萃取去除未被磺化的有机物，95%的乙醇重结晶，得到产物VI。
[0104] 实施例6
[0105] 螺旋藻蛋白胨的制备方法：
[0106] 步骤一，称取一份螺旋藻干粉，加入适量去离子水调成糊状，研磨至细度为100 目；
[0107] 步骤二，再加入适量去离子水搅拌均匀后，将溶液置于离心机中，在300r/min的 条件下离心30min后再搅拌均勾；
[0108] 步骤三，将离心后的溶液置于_35°C条件下冷冻4h，取出后自然恢复至室温，在将 溶液置于离心机中，在300r/min的条件下离心30min后再搅拌均匀；
[0109] 步骤四，重复步骤二至步骤三4次，取上层清液，调节pH至5.0,置于50°C的水浴 箱中，加入按照质量比螺旋藻干粉：木瓜蛋白酶质量比20:1向溶液中加入木瓜蛋白酶液， 水解40h;
[0110] 步骤五，取水解液，调节pH至4. 0,加热煮沸lOmin，过滤，得到螺旋藻蛋白胨。
[0111] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精 神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种多组分细菌培养基，其特征在于：由3. 0%~7%醋酸钠，0. 7%~4. 7%丙酸钠， 0. 9%~1. 5% 硫酸锰，2. 2%~2. 8% 氯化镁，I. 3%~2. 3% 氯化钙，0. 4%~1. 4% 硝酸铵，2. 6%~4. 6% 谷 氨酸，14. 0%~16. 0% 缓冲液，15. 5%~21. 5% 蛋白胨，3. 4%~9. 4% 酵母膏，13. 0%~14. 8% 牛肉膏， 5. 6%~7. 4%芒果提取物，I. 3%~2. 3%芦荟胶，I. 8%~2. 8%琼脂，0. 5%~1. l%Gemini表面活性剂 组成和16. 8%~17. 4%去离子水组成。2. 如权利要求1所述的一种多组分细菌培养基，其特征在于：由5. 0%醋酸钠，2. 7%丙 酸钠，1. 2%硫酸锰，2. 5%氯化镁，1. 8%氯化钙，0. 9%硝酸铵，3. 6%谷氨酸，15. 0%缓冲液， 18. 5%蛋白胨，6. 4%酵母膏，13. 9%牛肉膏，6. 5%芒果提取物，1. 8%芦荟胶，2. 3%琼脂， 0. 8%Gemini表面活性剂组成和17. 1%去离子水组成。3. 如权利要求1或2所述的一种多组分细菌培养基，其特征在于：所述蛋白胨为螺旋 藻蛋白胨。4. 如权利要求3所述的一种多组分细菌培养基，其特征在于：所述Gemini表面活性剂 的结构式如下，5. 如权利要求4所述的一种多组分细菌培养基，其特征在于：所述芒果提取物通过以 下步骤制备， 步骤一:取用新鲜芒果，按芒果：淀粉的质量比12:1，将淀粉溶解在温度为25~38°C的 水中清洗芒果； 步骤二:将步骤一中清洗好的芒果浸泡在浓度为4. 82mol/L的盐水中，在微波功率为 550W，温度为27°C的条件下预处理20min ; 步骤三:将步骤二中经过处理的芒果取出，用常温清水清洗； 步骤四:将步骤三中晾干的芒果浸泡在无水乙醇中，芒果：无水乙醇的质量比为 1:1. 5,在微波功率为400W，温度为30°C的条件下预处理20min ; 步骤五:对经过步骤四处理的芒果在无水乙醇中进行破碎，加水将无水乙醇稀释为 73%的乙醇溶液，在压力0. 62kPa，温度78°C的条件下回流5h ; 步骤六：将步骤五中的反应体系趁热过滤，得滤液一与滤渣一，取滤渣一溶于乙酸乙酯 中，滤渣：乙酸乙酯的质量比为1:1. 5,在温度78°C的条件下回流5h ; 步骤七:将步骤六中的反应体系趁热过滤，得滤液二与滤渣二； 步骤八：取步骤六中制得的滤液一，将体系中的乙醇除去，冷却至常温，置于360nm， 2kW的高压汞灯下，在光强为96mW/cm2,辐照距离为8cm的条件下辐照2h，体系表面形成一 层膜状物，弃去膜状物，得悬浊液； 步骤九：将步骤八中的悬浊液与步骤七中滤液二混合，去除溶剂水和乙酸乙酯，得到芒 果提取物。6. 如权利要求4或5所述的一种多组分细菌培养基，其特征在于：所述缓冲液为磷酸 氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液，所述缓冲液由9mL的Na2HPO4溶液和ImL的KH2PO 4溶液组成， 所述Na2HPO4溶液的浓度为0· 067mol/L，所述KH 2P04溶液的浓度为0· 66mol/L〇7. 如权利要求6所述的一种多组分细菌培养基，其特征在于：所述培养基的pH为 7. 73。8. 如权利要求7所述的一种多组分细菌培养基，其特征在于：所述培养基在提高假单 胞杆菌诘抗能力的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种多组分细菌培养基，属于培养基领域。本发明的一种多组分细菌培养基，由3.0%~7%醋酸钠，0.7%~4.7%丙酸钠，0.9%~1.5%硫酸锰，2.2%~2.8%氯化镁，1.3%~2.3%氯化钙，0.4%~1.4%硝酸铵，2.6%~4.6%谷氨酸，14.0%~16.0%缓冲液，15.5%~21.5%蛋白胨，3.4%~9.4%酵母膏，13.0%~14.8%牛肉膏，5.6%~7.4%芒果提取物，1.3%~2.3%芦荟胶，？1.8%~2.8%琼脂，0.5%~1.1%Gemini表面活性剂组成和16.8%~17.4%去离子水组成。本发明的具有促进假单胞杆菌药物在生物防治农作物病害中的应用具有重要的意义，提高假单胞杆菌拮抗能力的特点。
【IPC分类】C12N1/20, C12R1/38
【公开号】CN105349472
【申请号】CN201510932583
【发明人】彭思瑶
【申请人】德阳九鼎智远知识产权运营有限公司
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年12月15日