一种同步反硝化除磷菌培养基及其制备方法
【专利摘要】一种同步反硝化除磷菌培养基及其制备方法，涉及一种适合于培养反硝化聚磷菌的微生物培养基，可显著提高菌体生物量和多聚磷酸盐颗粒产量，该培养基命名为DNJPU。将(NH4)2SO4、Na2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、CaCl2、柠檬酸钠、NaCl、蔗糖、琼脂粉加入蒸馏水中定容至1L，灭菌后即得同步脱氮除磷菌的培养基。其可应用于反硝化聚磷菌的分离鉴定及菌种培养，克服了牛肉膏蛋白胨培养基保质期短、反硝化聚磷菌专性筛选目标性差的缺点。
CGMCC NO.9168
2014.05.16
【专利说明】一种同步反硝化除磷菌培养基及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种同步反硝化除磷菌培养基及其制备方法，属于污水处理技术领 域。
【背景技术】
[0002] 地表水环境污染问题之一是水体富营养化，藻类大量繁殖引发淡水区域"水华"和 海域的"赤潮"现象。生态学中的"利比希（Liebig)最小因子定律"表明，水体中较高浓度 的氮、磷含量是引发地表水体富营养化的主要环境因素，当总磷浓度超过〇. lmg/L(如果磷 是限制因素）或总氮浓度超过〇.3mg/L(如果氮是限制因素）时，藻类会过量生长，引发江 河、湖塘、近海的富营养化。
[0003] 我国地表水体绝大部分氮、磷污染物来源于城镇生活污水和工业废水的排放。据 统计，近5年来我国每年接近有600亿吨的携带有氮、磷污染物的废水排放至自然水体中。 虽然我国《城镇污水处理厂排放标准（GB 18918-2002)》与各行业排放标准均对总氮（TN) 排放浓度有要求，但环保部门对污水处理厂出水指标仍以化学需氧量（COD)、总磷（TP)、氨 氮（NH 4+-N)作为总量控制指标，从而造成出水NH/-N达标、而TN超标成为普遍现象。从技 术上来说，主要是由于NH/-N变成氮气（N 2)的过程是先通过好氧硝化途径将NH4+-N最终转 化为NCV-N，然后再通过缺氧反硝化途径使NCV-N变成N 2去除。所以废水中的NH/-N指标 虽然低了，但氮元素仍然以NCV-N的形式存在于水中，污水中的TN含量依然较高，其中大部 分为NCV-N，致使污水处理厂出水TN达不到排放标准。而藻类生长正好是先需摄取NCV，并 非是NH/-N，水体中高浓度的NCV-N更易促使藻类疯长。因此，对废水中NCV-N的去除已逐 渐引起人们的关注。
[0004] 牛肉膏蛋白胨培养基作为微生物培养基质，因其对菌种培养具有普遍适用性，所 以在菌种培养和筛选被广泛使用。但牛肉膏蛋白胨培养基成分中的牛肉膏和蛋白胨的保 质期短，而且保存条件较为苛刻，一旦没有控制好保存条件致使培养基变质就会造成菌种 的丢失，即使及时的转接菌种至新鲜的牛肉膏蛋白胨培养基上，但会由于菌株传代次数过 多而降低菌株内在性能，这些都限制了反硝化聚磷菌的培养、分离以及应用。《中国环境科 学》2011年第31卷第6期958-964页报道了刘晖等利用活性污泥与生物膜复合系统富 集反硝化聚磷菌并获得具有脱氮聚磷能力的菌种YB(Paracoccus denitrificans)，其聚磷 率与脱氮率均达到90%以上，所用培养液为无水乙酸钠5. 0g，KH2PO4O. 025g，MgSO4 ? 7H20 0? 5g，CaCl2 ? H2O 0? 2g，（NH4)2S042. 0g，微量元素 I. OmL，蒸馏水 lOOOmL，pH 7. 0。《安徽农 业科学》2011年第39卷第18期11040-11046页报道了刘艳萍等采用牛肉膏蛋白胨培养 基进行平板分离技术，从城市河道底泥中筛得3株反硝化聚磷菌DPB-A511 (Dechloromonas aromatic)、DPB-A9(Candidatus accumulibacter phosphatis)和 DPB-A10 (Bacillus pumilus)，其聚磷率与脱氮率均达到50%，所用培养基是牛肉膏蛋白胨培养基，其组成为： 牛肉膏 3g，蛋白胨 10g，NaC15g，琼脂 15g，水 1000ml，pH7. 0。
[0005] 因此，本发明制备的一种适合于培养反硝化聚磷菌的培养基（命名为DNJPU)，利 用该培养基可以快速高效的从污泥中筛选分离出反硝化聚磷菌。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供一种适合于反硝化聚磷菌的培养基（命名为DNJPU)配方， 该培养基可以替代反硝化聚磷菌筛选以及培养用的牛肉膏蛋白胨培养基。
[0007] 本发明的另一目的在于提供DNJPU培养基的制备方法。
[0008] 所述DNJPU培养基组成为，在IL的蒸馏水中含有：
[0009]
【权利要求】
1. 一种同步反硝化除磷菌培养基，该培养基命名为DNJPU，其特征在于所述同步反硝 化除磷菌培养基组成是在1L的蒸馏水中含有： (NH4) 2S04 2.48?3,03 g; Na2HP04 27.54~33.66 g； KH2P〇4 2.7?3.3 g; MgS04?7H20 0,225 ?0,275 g; CaCl2 0.225?0,275 g; 朽't#·钠 3.6?4.4g; NaCl 2.25 ?2.75 g; 蔗糖 0.009?0.01】g; 琼船粉（制平板成斜而时添加） 1卜22g',
2. 如权利要求1所述的一种聚磷菌培养基DNJPU，其特征在于DNJPU培养基最佳组成 为，在1L的蒸馏水中含有： (NH4) 2SO4 2,75 g； Na.HPOj 30.6 g； KH2P〇4 3g； MgS04*7H2〇 0.25 g； CaCI： 0.25 g； 柠樣酸钠 4.0 g; NaCl 2.5 g； 蔗糖 0,01 g; 琼脂粉（.制平板或斜面时添III) 20go
3. 如权利要求1所述的一种同步反硝化除磷菌培养基DNJPU的制备方法，其特征是： 将（NH4)2S0 4、Na2HP04、KH2P04、MgS0 4 · 7H20、CaCl2、柠檬酸钠、NaCl、蔗糖、琼脂粉加入蒸馏水 中定容至1L，灭菌后即得聚磷菌培养基DNJPU。
【文档编号】C12N1/20GK104293698SQ201410476594
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年9月17日 优先权日:2014年9月17日
【发明者】张文艺, 陈晶, 周新程, 冯国勇, 胡林潮, 姚立荣 申请人:常州大学