一种从鸭胆汁中提取鸭胆酸和鹅去氧胆酸的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及鹅去氧胆酸的制备方法，具体涉及一种从鸭胆汁中提取鸭胆酸和鹅去氧胆酸的方法。
【背景技术】
[0002]鹳去氧胆酸(Chenodeoxycholic acid，简称⑶CA)，是一种天然的胆酸，是1848年首次从鹅胆汁中提取得到的。鹅去氧胆酸具有溶解胆结石的能力和其他药学功能，是治疗胆结石的天然良药，同时又是合成熊去氧胆酸和其他留体化合物的原料。
[0003]由于鹅去氧胆酸是鸡、鸭与鹅等家禽胆汁的主要成分，其可直接从禽类的胆汁中提取而来。但是受技术限制，目前市场上的鹅去氧胆酸产品基本是从鸡胆汁中提取得到的。鹅的饲养数量较少，难以应用其胆汁作提取鹅去氧胆酸的原料。鸭的饲养量巨大，与鸡胆汁的组成成分相比，鸭胆汁的成分较复杂，不能应用从鸡胆汁中提取鹅去氧胆酸的方法提取鸭胆汁中的鹅去氧胆酸。
[0004]到目前为止，传统的从鸡、鸭与鹅等的胆汁中提取鹅去氧胆酸工艺包括胆汁皂化、酸化、除醇不溶物、除脂、生成钡盐、脱钡等步骤，工艺过程复杂，收率低，产业化应用困难。或者采用钙盐沉淀法，沉淀速度慢，效率低，且双氧水及活性炭脱色效果也不理想。
【发明内容】
[0005][要解决的技术问题]
[0006]本发明的目的是解决上述现有技术的问题，提供一种从鸭胆汁中提取鸭胆酸和鹅去氧胆酸的方法。该方法从鸭胆汁中直接提取鹅去氧胆酸和鸭胆酸。该方法步骤简单、操作可控，并且得到的鹅去氧胆酸和鸭胆酸的纯度较高。
[0007][技术方案]
[0008]为了达到上述的技术效果，本发明采取以下技术方案:
[0009]—种从鸭胆汁中提取鸭胆酸和鹅去氧胆酸的方法，它包括以下步骤:
[0010]A，胆汁酸粗品的提取
[0011 ] 取新鲜鸭胆汁，皂化、盐酸调节pH为2?3酸化沉淀，得到黑色膏状物；然后加入甲醇溶解后，再加入石油醚除脂，在70°C以下真空浓缩甲醇层得到所述胆汁酸粗品；
[0012]B，鸭胆酸、鹅去氧胆酸的制备
[0013]将步骤A得到的胆汁酸粗品经甲酯化反应后，乙腈结晶、过滤，滤液浓缩得到鹅去氧胆酸甲酯化物，然后通过皂化反应、盐酸调节pH为2?3酸化沉淀得到鹅去氧胆酸粗品；最后将得到的鹅去氧胆酸粗品在60°C以下的真空干燥至干燥失重<3%后，再经氯仿结晶精制得到鹅去氧胆酸。
[0014]所述过滤的滤渣为鸭胆酸甲酯化物，其经干燥后，皂化、加入盐酸调节pH为2?3酸化沉淀，然后过滤得鸭胆酸粗品；将所述鸭胆酸粗品在60°C以下真空干燥至干燥失重<3%后;再经甲醇结晶精制得到鸭胆酸。
[0015]本发明更进一步的技术方案，在步骤A中，所述皂化是指向新鲜鸭胆汁加入其质量
0.3?0.4倍的氢氧化钠后，密封升温至110?125°C，搅拌12?13h;在步骤B中，所述鹅去氧胆酸甲酯化物的皂化是指向鹅去氧胆酸甲酯化物加入其质量的0.9?1.1倍量水和0.3?
0.4倍的氢氧化钠后，密封升温至110?125°C，搅拌12?13h。
[0016]本发明更进一步的技术方案，在步骤A中，所述甲醇溶解是指加入所述黑色膏状物质量3?4倍的甲醇后，加热到50°C并搅拌至完全溶解。
[0017]本发明更进一步的技术方案，在步骤A中，所述加入石油醚除脂的过程重复2?3次。
[0018]本发明更进一步的技术方案，在步骤B中，所述甲酯化反应是指向胆汁酸粗品加入其质量的2?3倍的无水甲醇溶解后，再加入胆汁酸粗品质量0.11?0.13倍的质量分数为98%的硫酸，常温搅拌3.8?4.2h，然后加入固体氢氧化钠调节pH值为6?8，终止甲酯化反应，过滤并浓缩滤液。
[0019]本发明更进一步的技术方案，在步骤B中，所述乙腈结晶是指向所述浓缩产物中加入其质量1.5?2倍的乙腈，加热至回流，溶解完全后缓慢降温至0?5°C结晶5?6h。
[0020]本发明更进一步的技术方案，在步骤B中，所述过滤的过滤物为鸭胆酸甲酯化物，其经干燥后，皂化、加入盐酸调节pH为2?3酸化沉淀，然后过滤得鸭胆酸粗品；所述鸭胆酸粗品在60°C以下真空干燥至干燥失重< 3% ;最后经甲醇结晶精制得到鸭胆酸。
[0021]本发明更进一步的技术方案，所述鸭胆酸甲酯化物的皂化是指向鸭胆酸甲酯化物加入其质量0.9?1.1倍量水和0.3?0.4倍的氢氧化钠后，密封升温至110?125°C，搅拌12?13h0
[0022]本发明更进一步的技术方案，所述甲醇结晶是将干燥产物经甲醇回流溶解后，缓慢降至0?5°C，结晶精制得到鸭胆酸。
[0023]下面将详细地说明本发明。
[0024]本发明使用新鲜鸭胆汁直接提取鹅去氧胆酸，同时还可以提取鸭胆酸。在制备过程中，加入石油醚除脂的过程重复2?3次，可以有效的去除反应物中的油脂，减少杂质进一步保证得到的鹅去氧胆酸和鸭胆酸的纯度。在步骤B的酯化反应时，无水甲醇的加入量为胆汁酸粗品质量的2?3倍，并且常温反应3.8?4.2h，是因为反应时间不能过长也不能过短，保证甲酯化反应充分的同时避免反应时间过长产生过多的杂质。由于鹅去氧胆酸在氯仿中的溶解度与温度有关，因此通过升温溶解鹅去氧胆酸后并缓慢降温可以有效地结晶出鹅去氧胆酸，并且得到的鹅去氧胆酸纯度较高。利用甲醇结晶鸭胆酸的原理与其相同。
[0025][有益效果]
[0026]本发明与现有技术相比，具有以下的有益效果:
[0027]本发明的制备方法简单、易操作，适于产业化应用。本发明的制备方法可以同时制备出鹅去氧胆酸和鸭胆酸，并且制备出的鹅去氧胆酸和鸭胆酸的纯度较高，其分别为95%和90%以上。
【具体实施方式】
[0028]下面结合本发明的实施例对本发明作进一步的阐述和说明。
[0029]下述实施例中的N倍量是指N倍质量，其中N表示>0的自然数。
[0030]实施例1:
[0031]—种从鸭胆汁中提取鸭胆酸和鹅去氧胆酸的方法，它包括以下步骤:
[0032]A，胆汁酸粗品的提取
[0033]取1000g新鲜鸭胆汁投入反应釜，0.35倍量氢氧化钠继续投入，密封保持压力升温至120°C，搅拌反应12小时，静置降至室温，加入稀盐酸调至pH值为3得黑色膏状物200g。向黑色膏状物中加入3倍量甲醇，加热至50°C，搅拌至溶解完全;继续加入3倍量石油醚搅拌30分钟，静置，虹吸分去石油醚层;继续加入3倍量石油醚，再重复2次;浓缩石油醚层回收石油醚，浓缩物为油脂，丢弃。70°C以下真空浓缩甲醇层得胆汁酸粗品70g。
[0034]B，鸭胆酸、鹅去氧胆酸的制备
[0035]向步骤A得到的胆汁酸粗品中加入胆汁酸粗品2倍量无水甲醇，常温搅拌至溶解完全，缓慢加入0.12倍量98 %浓硫酸，常温搅拌反应4小时后，加入适量固体氢氧化钠中和硫酸，使pH值为6?8，过滤去除中和产物硫酸钠。浓缩上述甲醇溶液得固体65g，加入浓缩产物1.5倍量乙腈，加热至回流，溶解完全后缓慢降温至0?5°C结晶5小时，过滤，滤渣90°C以下热风干燥得鸭胆酸甲酯化物30g，滤液90°C以下真空浓缩得鹅去氧胆酸甲酯化物35g。
[0036]向鹅去氧胆酸甲酯化物加入1倍量水，0.35倍量氢氧化钠，密封保持压力升温至120°C，搅拌反应12小时，静置降至室温，加入稀盐酸调至pH值为3，过滤得鹅去氧胆酸粗品，粗品在60°C下真空干燥至干燥失重3%以下；用氯仿结晶精制得含量为95.8%鹅去氧胆酸22.3g0
[0037]向鸭胆酸甲酯化物加入1倍量水，0.35倍量氢氧化钠，密封保持压力升温至120°C，搅拌反应12小时，静置将至室温，加入稀盐酸调节pH值为3，过滤得鸭胆酸粗品，粗品在60°C下真空干燥至干燥失重3%以下;得干燥产物29.3g，干燥产物用0.5倍量甲醇回流溶解完全后，缓慢降温至0?